МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 21.11.84 № 3161-84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 4-ХЛОР-2 МЕТИЛФЕНОКСИУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ (2М-4Х) В ВОДЕ, ПОЧВЕ, РАСТИТЕЛЬНОМ МАСЛЕ И ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ *

Краткая характеристика препарата. 2М-4Х (дикотскс, МЦПА) - 2-мстил-4-хлорфсноксиуксусная кислота. Брутто формула C9II9O3CI. Молекулярная масса 200,6. Белое кристаллическое вещество со слабым запахом крезола, т. пл. 120—120,2 °С. Хорошо растворимо в этаноле, толуоле, четыреххлористом углероде, диэтиловом эфире, дихлорэтане, хлорбензоле и плохо - в воде (0,15 г в 100 г Н_аО при 25 °С). Выпускается в виде 80%-ного водорастворимого порошка и 40%-ного водного раствора. Применяется в качестве гербицида в посевах льна, зерновых и злаковых культур чаще всего в виде натриевых и калиевых солей. В зерне, рисе, картофеле,    подсолнечном масле    МДУ 0,05    мг/кг;

горохе - 0,05 мг/кг.    В воде    рыбохозяйственных    водоемов    ПДК

0,02 мг/л; в водоемах санитарно-бытового водопользования -0,25 мг/л.

Принцип метода. Метод основан на экстракции 2М-4Х из гидролизованной пробы (растительный материал, молоко, масло) органическим растворителем, из проб воды и почвы - органическим растворителем с последующим определением методом ТСХ. С помощью предлагаемого метода можно определить 2М-4Х, находящуюся в анализируемой пробе как в свободном, так и в связанном состоянии в виде конъюгатов с эндогенными веществами пробы.

Метрологическая характеристика метода. Предел определения, мг/л или мг/кг:    вода - 0,05; почва-0,10; сено - 0,40; зерно - 0,03;

молоко - 0,40; масло    сливочное    - 0,70; мясо - 0,50.    Среднее    значение определения при    лб, %: 85; 75; 65; 65; 65;    85; 65; 75 соот

ветственно.

Реактивы и растворы. Аммиак водный чд.а. Нитрат серебра чд.а. Ацетон х.ч. Гидрокарбонат натрия чдд. 0,4 М водный раствор. Бром-крезоловый зеленый чд.а. н-Гсксан х.ч. Гидроксид натрия х.ч., 0,1 М водный раствор. Пластинки для метода ТСХ типа «Силуфал». Проявляющие реагенты: № 1 (в мерную колбу на 100 мл помещают 0,5 г нитрата серебра, 5 мл дистиллированной воды, 7 мл аммиака, 25%-ный водный раствор, и доводят до метки ацетоном). При хранении в плотно закрытой склянке без доступа света годен для применения в течение месяца; № 2 (в мерную колбу на 100 мл помещают 0,04 г бром к резол ового зеленого, растворяют в 96%-ном этаноле, добавляют 0,1 М раствор гидроксида натрия до явно выраженного синего окрашивания и доводят до метки этанолом). Срок применения не ограничен. Силикагель Л С 5/40 М для тонкослойной хроматографии с 13% гипса. Силикагель КСК. Хлороводородная кислота ч., 2 М водный раствор. Бензол х.ч. Стандартный раствор 2М-4Х в ацетоне концентрацией 100 мкг/мл. Уксусная кислота х.ч., ледяная.

* Разработаны В.Д. Чмилем, С.В. Чулковой (ВНИИГИНТОКС).

349

Фосфорно-вольфрамовая кислота х.ч., 40%-ный в.р. Хлороформ х.ч. Эфир. Этиловый спирт.

Приборы и посула. Делительная воронка на 1 л. Колба Бунзена на 500 мл. Воронка Бюхнера, диаметр 13 см. Ротационный испаритель. Источник УФ-света. Водяная баня. Колбы: мерные на 10 и 100 мл; конические на 500 мл; двухгорлая круглодонная на 500 мл. Вакуумный водоструйный стеклянный насос. Лабораторный холодильник стеклянный. Камера хроматографирования. Микропипстки. Пластинки стеклянные размером 90 х 120 мм. Сито капроновое 100/120 меш. Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок. Электроплитка. Аппарат для встряхивания. Сушильный шкаф.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды 250-750 мл помещают в делительную воронку, подкисляют хлороводородной кислотой до pH 1, тщательно перемешивают и экстрагируют тремя порциями диэтилового эфира (100; 50 и 50 мл). Объединенный эфирный экстракт переносят в делительную воронку, промывают небольшими порциями дистиллированной воды (15-20 мл) до нейтральной реакции промывных вод и затем трижды экстрагируют 0,5 М водным раствором гидрокарбоната натрия порциями по 50 мл. Объединенный водный экстракт 2 раза промывают хлороформом порциями 20 мл и 20 мл н-гексана, отбрасывая эти растворители, подкисляют хлороводородной кислотой до pH 1 и трижды экстрагируют диотиловым эфиром порциями по 50; 30 и 30 мл. Объединенный эфирный экстракт промывают дистиллированной водой порциями по 15-20 мл до нейтральной реакции промывных вод, упаривают растворитель на ротационном испарителе до объема 2 мл и затем досуха током сухого воздуха.

Пробу сухой почвы 100 г, растертой и просеянной через сито с размером отверстий 1 мм, помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой на 500 мл, приливают 25-35 мл дистиллированной воды, 5 мл концентрированной хлороводородной кислоты, тщательно перемешивают, добавляют 150 мл ацетона и помещают на аппарат для встряхивания на 1 ч. Затем растворитель отфильтровывают под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр и почву на фильтре, трижды промывают ацетоном порциями по 20 мл. Затем ацетон удаляют на ротационном испарителе, остаток из колбы переносят 100 мл дистиллированной воды, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 1, в делительную воронку, трижды экстрагируют д и этиловым эфиром порциями по 50 мл и далее поступают так, как это описано при определении в воде.

Тщательно измельченную навеску из травы, сена, соломы, зерна 25 г (навеска зерна 50 г) помещают в круглодонную колбу на 1 л, приливают 100 мл 85%-ного водного раствора этилового спирта, тщательно перемешивают, присоединяют к колбе обратный холодильник и помещают на кипящую водяную баню на 1 ч, периодически перемешивая содержимое колбы. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр «черная лента» под вакуумом на воронке Бюхнера н промывают осадок на фильтре двумя порциями по 50 мл 85%-ного водного раствора этилового спирта. Затем этиловый спирт упаривают из фильтрата на ротационном испарителе, к остатку добавляют 12 мл концентрированной хлороводородной кислоты, 5 мл дистиллированной воды и нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в те-

350

чсние 1 ч для разрушения конъюгатов 2М-4Х. Посте охлаждения гидролизат фильтруют через бумажный фильтр «черная лента» на воронке Бюхнера под вакуумом и промывают остаток на фильтре тремя порциями по 20 мл 2 М водного раствора хлороводородной кислоты. Объединенный фильтрат переносят в делительную воронку, трижды экстрагируют диотиловым эфиром порциями по 100; 50 и 50 мл и далее поступают так, как это описано при определении в воде.

Пробу молока 25-50 мл помещают в круглодонную колбу на 250 мл, прибавляют концентрированную хлороводородную кислоту (4,4-8,8 мл), тщательно перемешивают, присоединяют обратный холодильник и помещают на кипящую водяную баню для гидролиза на 1 ч. После охлаждения в колбу приливают 7,5-15,0 мл 40%-ного водного раствора фосфорновольфрамовой кислоты, энергично встряхивают, приливают 100-200 мл дистиллированной воды и содержимое колбы фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера. Остаток на фильтре промывают 3 раза 2 М водным раствором хлороводородной кислоты порциями по 50 мл и далее поступают так, как это описано при определении в растительном материале.

Пробу сливочного масла (25 г) растворяют в 100 мл «-гексана, помещают в двугорлую круглодонную колбу на 500 мл, приливают 100 мл 2 М водного раствора хлороводородной кислоты, присоединяют к колбе обратный холодильник и помещают на кипящую водяную баню на 1 ч. Содержимое колбы перемешивают с помощью электро мешалки. После охлаждения содержимого колбы слои разделяют в делительной воронке и гексановый слой дважды экстрагируют 2 М водным раствором хлороводородной кислоты порциями по 50 мл. Объединенный хлороводородный экстракт промывают дважды «-гексаном порциями по 25 мл, отбрасывая этот растворитель, и затем экстрагируют д и этиловым эфиром 3 раза по 50 мл. Эфирный экстракт промывают небольшими количествами (10-15 мл) дистиллированной воды до нейтральной реакции промывных вод, трижды экстрагируют 2М-4Х 0,5 М водным раствором гидрокарбоната натрия порциями по 50 мл и далее поступают так, как это описано выше.

Пробу из мяса (25-50 г) измельчают на мясорубке, помещают в двугорлую круглодонную колбу на 500 мл, приливают 2 М хлороводородную кислоту (100-200 мл), присоединяют обратный холодильник и помещают на кипящую водяную баню на 1 ч для гидролиза, перемешивая содержимое колбы с помощью элсктромешалки. После охлаждения в колбу приливают 15 мл 40%-ного водного раствора фосфорно-вольфрамовой кислоты, 100 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают и содержимое колбы фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера. Остаток на фильтре промывают 2 М водным раствором хлороводородной кислоты, объединенный фильтрат трижды экстрагируют диотиловым эфиром порциями по 50 мл и далее поступают так, как это описано выше.

Перед проведением серийных анализов необходимо установить процент определения, т.е. процент возврата препарата из проб, к которым были добавлены различные количества препарата.

Тонкослойная хроматография. Сухой остаток после упаривания эфирного экстракта растворяют в 1 мл ацетона и количественно наносят на хроматографическую пластинку с тонким слоем силикагеля или на пластинку «С ил у фол». На эту же пластинку наносят 2,5 и 10 мкг 2М-4Х в виде раствора в ацетоне и проводят

351

хроматографирование в системе растворителей н-гексан - диэт иловый эфир - уксусная кислота (50:50:2). Для хроматографирования используют насыщенную камеру. Для насыщения стенки камеры обкладывают фильтровальной бумагой, которая касается смеси растворителей и пропитывается. Через 2 ч быстро открывают крышку камеры и помещают пластинку для развития хроматограмм. После окончания хроматографирования пластинку извлекают из камеры и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Для обнаружения 2М-4Х пластинку обрабатывают проявляющим реагентом N? 1, сушат и облучают УФ-свстом в течение 10-15 мин. При наличии в пробе 2М-4Х на пластинке появляется серо-черное пятно на белом фоне с величиной R_r 0,30 ± 0,01. В качестве второго проявляющего реагента может быть использован бромкрезоловый зеленый. После развития хроматограммы пластинку сушат на воздухе и помешают в сушильный шкаф при 110 ®С на 20 мин для удаления следов уксусной кислоты и затем обрабатывают проявляющим реагентом N? 2. Препарат 2М-4Х проявляется в виде желтого пятна на голубом фоне. Минимально детектируемое количество на хроматограммах 1 мкг.

Для повышения надежности индентификации может быть использована вторая система подвижных растворителей: бензол - уксусная кислота (5:1). Величина 2М-4Х в этой системе 0,54 ± 0,01.

А

PR

где А - количество 2М-4Х в пробе, найденное сравнением со стандартом, мкг; Р - объем или масса пробы, мл или г; R - процент определения, найденный предварительно.

Требования безопасности. Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами.

352

Сокращения ................ 3

Предисловие     4

Единые требования к методикам определения содержания остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах и объектах окружающей среды (методические указания) ............ 5

Глава I. Галогенсодержащие углеводороды ....... 11

ЛДЭ, ДДД. ДДТ) при совместном присутствии в воде хроматографическими методами................ 11

Методические указания по избирательному газохроматографическому определению хлорорганических пестицидов в биологических средах (моче, крови, жировой ткани и грудном женском молоке) ....    19

Методические указания по определению хлорорганических инсектицидов в гуза-пае и хлопковой шелухе хроматографическими методами    25

Методика определения ГХЦГ, ДДТ    и метаболитов в гуза-пае    25

Методика определения у-ГХЦГ и ДДТ в хлопковой шелухе методом тонкослойной хроматографии............ 28

/3- и б-ГХЦГ) и метаболитов (полихлорированных фенолов) в биологических жидкостях (крови), органах, тканях и субклеточных фракциях печени теплокровных животных методом тонкослойной хроматографии ................... 30

Методические указания по определению ГХЦГ и ДДТ в илово-сульфидных

лечебных грязях газожидкостной хроматографией....... 38

Методические указания по определению ДД в воде методом газожидкостной хроматографии............... 42

Методические указания по определению ДД и ДДБ в почве методом газовой хроматографии ............... 44

Методические указания по определению дилора в меде методом тонкослойной хроматографии............... 46

Методические указания по определению ко.мманда в бобовых хроматографическими методами............... 49

Методические указания по определению метоксихлора в воде, ботве и клубнях картофеля методом газожидкостной    хроматографии ....    53

Методические указания по определению митрана в воде, яблоках и капусте газохроматографическим методом    ......... 55

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9