МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Г л а в а 8. ПРОИЗВОДНЫЕ КАРБАМИНОВОЙ, ТИО-И ДИТИОКАРБАМИНОВОЙ КИСЛОТ

Утверждено 27.04.84 N? 2991 - 84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ АЛЬДИКАРБА И ЕГО ОСНОВНЫХ МЕТАБОЛИТОВ (СУЛЬФОКСИДА И СУЛЬФОНА)

В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ МЕТОДАМИ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ •

Краткая характеристика препарата. Альдикарб - О-СЯ-мстилкар-бомоил)-2-мстил-2-метилтиопропиональдсгидоксим. Брутто формула C7II14N2O2S. Молекулярная масса 190,3. Синонимы тсмик, амбич. Белое кристаллическое вещество со слабым запахом сернистого меркаптана, т. пл. 98-100 °С. Разлагается при температуре выше 100 °С. Давление паров 13,33 х 10*³ Па при 25 °С. Растворимость в воде при 20 °С 6 г/л. При 30 °С (вес. %): в ацетоне - 43, бензоле - 24, четыреххлористом углероде - 5, хлороформе - 44, метилизобутилкстонс - 24, толуоле - 12. Практически нерастворим в /i-гсксанс и других алкановых углеводородах, стабилен при хранении в нормальных условиях в течение двух лет. Подвержен гидролизу в кислой и щелочной средах, при действии сильных окислителей разлагается.

Водные растворы альдикарба нельзя хранить в сосудах, содержащих цинк, медь или полиэтилен. В почве и растениях альдикарб окисляется в сульфоксид и в меньшей степени - в сульфон. Препарат выпускают в виде гранул, содержащих 5 или 10% д.в. Применяют его в качестве инсектицида, акарицида и нсматоцида.

Принцип метода. Метод основан на извлечении альдикарба и его метаболитов из растительного материала органическим растворителем или 0,25 М водным раствором хлороводородной кислоты, из воды - хлороформом, очистке растительных и почвенных экстрактов резкетракцией хлороформом и количественном определении методом ТСХ по размеру площади пятен.

Суммарно альдикарб и его метаболиты определяют в виде сульфона после обработки пробы 0,2%-ным водным раствором перманганата калия методом ГЖХ. Количественно сульфон определяют методом абсолютной калибровки. Для пересчета найденного количества альдикарба сульфона в альдикарб используют коэффициент, равный 0,85.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 86. Линейный динамический диапазон детектирования ГЖХ - нс менее 60 нг. При определении больших концентраций берут аликвотную часть экстракта.

Избирательность метода. Метод специфичен. Другие пестициды в данных условиях хроматографирования определению не мешают.

♦ Разработаны В.Д. Чмилсм, С.В. Чуйковой (ВНИИГИНТОКС); Л.И. Бублик, Л-Л. Чеховской (УкрНИИЗР).

86. Метрологическая характеристика метода определения альдикарба

и его основных метаболитов с помощью тонкослойной и газожидкостной хроматографии

Анализируемая проба Предел определения, мг/л или мг/кг Среднее значение определения. % Стандартное отклонение, % Доверительный интервал при р - 0.95. л - 5. % 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1

Тонкослойная хроматография

Вода 0.002 0.002 0.002 97.2 95.4 93.2 12.2 12.4 12.6 12.7 12.9 13.2 Почва 0.01 0.01 0.01 83.5 84.7 80.1 14.7 14.5 14.8 15.8 15.6 16.3 Растительный ма 0.02 0.02 0.02 82.5 80.2 79.6 15.6 *6.6 16.0 ♦7.0 17.8 17.4 териал (карто фель, сахарная свекла) Газожидкостная V 1 j: к Вода 0.0005 91.7 11.5 И.9 Почва 0.002 84.8 13.8 14.7 Растительный ма- 0.005 85.6 13.5 14.8

тсриал (картофель. сахарная свекла)

Примечание. 1- альдикарб. 2 - альдикарб сульфоксид; 3 - альдикарб сульфон.

Реактивы и растворы. Азот особой чистоты. Аммиак водный чл.а. Ацетон х.ч. «-Гексан ч. Диэтиловый эфир х.ч. Сульфат натрия безводный чл.а. Хлорид натрия чл.а. Нитрит натрия чл.а. Гидроссрнисто-кислый натрий ч., 20%-ный в.р. Гидрокарбонат натрия чл.а, 10% -ный в.р. Нитропруссид натрия чл.а. Перманганат калия ч.д.а, 0,2%-ный в.р. Метиловый спирт ч.д.а. Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота х.ч. Уксусная кислота ледяная, х.ч. Этиловый спирт рсктиф. 96% -ный. Нингидрин ч. Вода дистиллированная. Сернокислый кальций чл.а. Хлорид кальция ч. Силикагель КСК, N? 2. Силикагель Л С 5/40ц для тонкослойной хроматографии с 13% гипса. Проявляющие реагенты: N? 1 (0,1 г нингидрина растворяют в 40 мл этанола и 10 мл уксусной кислоты. Хранят в темной склянке 1 мес): N? 2 -1% -ный водный раствор перманганата калия (в мерную колбу на 100 мл помещают 1,0 г перманганата калия и доводят до метки дистиллированной водой). Годен для употребления 6 мсс; N? 3 (хроматографическую пластинку последовательно обрабатывают 0,5% -ным водным раствором нитропруссида натрия, 10%-ным водным раствором нитрита натрия, ледяной уксусной кислотой и затем парами 25% -ного водного раствора аммиака в эксикаторе в течение 5-10 мин). Необходимо использовать свежеприготовленные реактивы. Хроматок N-cyncp (0,16-0,20 мм) с 5 %SE-30. Хроматон N-cyncp (0,16-0,20 мм) с 5% OV-17. Стандартные растворы:    альдикарба    в    ацетоне концентрацией

100 мкг/мл; альдикарба сульфоксида в ацетоне концентрацией 100 мкг/мл; альдикарба сульфона в ацетоне концентрацией 100 мкг/мл.

Приборы и посуда. Газовый хроматограф с ДЭЗ. Ротационный испаритель. Вакуумный водоструйный стеклянный насос. Колбы: мерные на 100 мл; Бунзена на 500 мл; круглодонные на 250 мл; плоскодонные со шлифом на 500 мл; конические на 500 мл. Водяная баня. Микропипетки. Электроплитка. Воронки: Бюхнера, диаметр 13 см; делительная на 500 мл. Сушильный шкаф. Аппарат для встряхивания. Стеклянные пластинки размером 150 х 150 мм. Пластинки для тонкослойной хроматографии «Силуфол*. Сито капроновое 100/120 мсш. Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок. Камера для обработки пластинок. Камера хроматографическая. Эксикатор. Приготовление хроматографических пластинок:    14    г    силика

геля и 1 г сульфата кальция смешивают с 50 мл дистиллированной воды 10 мин; 5-7 г сорбционной массы равномерно наносят на одну пластинку и сушат при комнатной температуре 12 ч. Затем пластинки помещают в сушильный шкаф для активации при температуре 120 °С на 1 ч и затем хранят в эксикаторе над слоем хлористого кальция.

Ход анализа. Экстракция альдикарба и очистка экстрактов. Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку на 1 л и промывают 25 мл «-гексана, отбрасывая этот растворитель. Затем альдикарб и его метаболиты экстрагируют хлороформом (3 х 50 мл). Объединенный хлороформный экстракт промывают 25 мл 10% -ного водного раствора гидрокарбоната натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и сливают растворитель в колбу для концентрирования. Безводный сульфат натрия дважды промывают хлороформом порциями по 15 мл, сливая этот растворитель в ту же колбу. Растворитель упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °С до небольшого объема (-1 мл).

Навеску воздушно-сухой почвы (50 г) растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 60 мл раствора 0,25 М хлороводородной кислоты. Экстракцию проводят путем встряхивания в течение 20 мин. Экстракт отфильтровывают через складчатый фильтр. Экстракцию препарата повторяют сшс 2 раза, приливая каждый раз при этом по 40 мл 0,25 М хлороводородной кислоты. Объединенный экстракт (-140 мл) переносят в делительную воронку. Затем проводят реэкстракцию хлороформом 2 раза по 40 мл и далее поступают так, как это описано при экстракции из воды.

Навеску 25 г растительного материма (картофель, сахарная свекла) измельченного образца помещают в коническую колбу с притертой пробкой на 500 мл, заливают 75 мл смеси хлороформа с ацетоном (1:1) и помещают на аппарат для встряхивания на 30 мин. Затем растворитель отфильтровывают через бумажный фильтр. Экстракцию повторяют еще один раз. Остаток в колбе промывают 25 мл смеси растворителей. Упаривают растворители на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °С до небольшого объема (-1 мл) и затем досуха потоком сухого воздуха. Сухой остаток переносят тремя порциями дистиллированной воды до 20 мл в делительную воронку и дальнейшее определение проводят так, как это описано при экстракции из воды.

Экстракцию из зеленой массы проводят следующим образом. Пробу (25 г) измельченного образца заливают 75 мл 0,25 М раствора хлороводородной кислоты. Экстракцию проводят дважды в течение 20 мин. Дальнейшее определение осуществляют так, как это описано при экстракции из почвы.

Окисление а л ь д и к а р б а и альдикарба сульфоксида в альдикарб сульфон. Газохрома-тографичсскос определение альдикарба проводят в виде альдикарба сульфона. Для превращения альдикарба и его сульфоксида в сульфон к сухому остатку, полученному после упаривания очищенного экстракта, приливают 10 мл свежеприготовленного 0,2%-ного раствора перманганата калия и энергично встряхивают 15 мин. Затем обесцвечивают полученный раствор 2 мл 20% -ного водного раствора гидросерн истокислого натрия. Прибавляют 1—1,5 г хлорида натрия, переносят раствор в делительную воронку и 3 раза экстрагируют альдикарб сульфон хлороформом порциями по 10 мл. Продолжительность одной экстракции 3 мин. Хлороформенный экстракт упаривают на ротационном испарителе (температура водяной бани 40 °С) до небольшого объема (-1 мл) и затем досуха током сухого воздуха.

Идентификация и количественное определение альдикарба и его метаболитов. Метод тонкослойной хроматографии. Упаренный хлороформенный экстракт количественно наносят на хроматографическую пластинку. Па эту же пластинку наносят стандарты альдикарба и альдикарба сульфоксида (1-5 мкг) и проводят хроматографирование в системе растворителей н-гексан - ацетон (3:2) в хроматографической камере, насыщенной в течение 2 ч парами подвижных растворителей. Для насыщения стенки камеры обкладывают фильтровальной бумагой, которая пропитывается смесью подвижных растворителей. По окончании хроматографирования пластинку извлекают из хроматографической камеры и сушат на воздухе под вытяжным шкафом.

365

Для обнаружения определяемых соединений пластинку обрабатывают проявляющим реагентом N? 1 и помещают в сушильный шкаф при 170 ⁰ на 10-15 мин. Определяемые соединения обнаруживаются в виде оранжевых пятен на белом фоне. Величины R_f в этой системе растворителей следующие:    альдикарб 0,58 ± 0,01; альдикарб сульфоксид 0,05 ± 0,01;

альдикарб сульфон 0,22 ± 0,01.

В качестве второй системы растворителей может быть использована смесь диэтилового эфира, гексана и ацетона (10:5:3). Величины R_f в этой системе:    альдикарб 0,45 ± 0,01, альдикарб сульфоксид

0,06 ± 0,01, альдикарб сульфон 0,40 ± 0,01.

Обнаружение соединений на хроматограммах можно проводить и обработкой пластинок 1% -ным водным раствором перманганата калия (желтые пятна на розовом фоне, проявляющий реагент N9 2). Минимально детектируемые количества альдикарба и его метаболитов приведены в таблице 87.

87. Минимально детектируемые количества альдикарба и его

основных метаболитов методом тонкослойной хроматографии, мкг

ф и и. Сухой остаток, полученный после окисления альдикарба и альдикарба сульфоксида в альдикарб сульфон, растворяют в 1 мл ацетона и вводят 3-5 мкл в хроматограф. Условия хроматографирования (хроматограф «Цвет-106* с ДЭЗ): стеклянная спиральная колонка (длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм), заполненная хроматоном N-cyncp (0,16-0,20 мм), с 5% SE-30; температура термостата колонок, детектора и испарителя соответственно 100, 250 и 280 °С; шкала хлсктромстрз 20-10"^,2А, скорость диаграммной ленты потенциометра 240 мм/ч. Время удерживания альдикарба сульфона в этих условиях 2 мин 30 с. Минимально детектируемое количество 0,5 нг. Хроматографирование одной пробы проводят дважды. На хроматограммах измеряют высоту пиков, соответствующих альдикарбу сульфону, вычисляют среднее значение из двух параллельных определений и находят содержание альдикарба сульфона по методу абсолютной калибровки. В качестве второй неподвижной фазы может быть использована колонка с 5% OV-17 на том же носителе.

Для повышения надежности идентификации после хроматографирования аликвоты экстракта оставшуюся часть можно нанести на пластинку, чтобы определить с помощью тонкослойной хроматографии в одной из указанных выше систем подвижные растворители. Для обнаружения аль-

366

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9