МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 12.05.83 N? 2797-83

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СУМИЛЕКСА В ВОДЕ,

ПОЧВЕ, СЕМЕНАХ ПОДСОЛНЕЧНИКА И БИОСРЕДАХ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ *

Краткая характеристика препарата. Сумилскс - М-(3.5-дихлор-фснил)-1,2-диметилциклопропан-1,2-дикарбоксимид. Брутто формула QjHjiOjC^N. Молекулярная масса 284,1. Общепринятое название -процимидон. Химически чистый препарат - белое кристаллическое вещество, т.пл. 166 °С. Устойчив к действию температуры и влаги. Трудно растворим в воде, растворим в большинстве органических растворителей: ацетоне, ксилоле, диэтиловом эфире, гексане и др. Нс разлагается под действием разбавленных кислот и щелочей, летучесть технического продукта 0,005 мг/м³ при 20 °С. Применяется в качестве фунгицида в борьбе с ботритисом и склеротинией на яблонях, землянике, виноградной лозе, подсолнечнике. ДСД 0,006 мг/кг.

Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из проб воды, почвы, семян подсолнечника и биосрсд (кровь, моча) органическим растворителем, очистке экстрактов и последующем хроматографировании в тонком слое силикагеля в подвижной фазе на основе гексана. Обнаружение сумилскса проводят с помощью раствора аммиаката серебра и последующего облучения УФ-с в стом или по реакции азосо-четания.

Метрологическая характеристика метода представлена в таблице 136.

Избирательность метода. Определению сумилскса нс мешают фосфор-и хлорорганичсскис пестициды.

Реактивы и растворы. Сумилскс х.ч. или 50%-ный с.п. Ацетон х.ч. Аммиак водный, ч.д.а. Гексан ч. Диэтиловый эфир х.ч., или медицинский для наркоза. Азотная кислота х.ч. Серная кислота х.ч., 25%-ная. Хлороводородная кислота х.ч., 0,1 н. и 1 н. Гидроксид калия чл.а., 30%-ный раствор в 50%-ном этаноле. Йодид калия х.ч. Йодид кадмия х.ч. Нитрит натрия х.ч. Сульфат натрия безводный, х.ч. 1-Нафтол чл.а. 1-Нафтиламин чдд. N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорид ч. о-Толидин ч. о-Толуидин ч. Метанол х.ч. Нитрат серебра х.ч. Этанол х.ч., 50%-ный раствор. Подвижная фаза: при анализе почвы, воды и семян гексан - ацетон в соотношении 5:1 («Силу-

^ф Разработаны В. Н. Кавецким, Г. Г. Андриенко (УкрИИИЗР); Л.Г. Александровой (КНИИГТиПЗ).

531

Анализируемый объект	Предел обнаружения, мкг		Предел определения, мг/кг или мкг/мл
	♦Силуфол»	КСК	«Силуфол»	КСК
Вода	2	10	0.02	0.08
Почва	2	10	0.2	0.4
Семена подсолнечника	2	10	0.2	0.4
Кровь	0.2	1	0.02	-
Моча	0.2	1	0,02	-

Продолжение

Анализируемый объект Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, % Доверительный интервал среднего определения при п - 5, р * 0,95, % Вода 86 ±10,8 86 ± 13.8 Почва 82 ±7.2 82 ± 9.2 Семена подсолнечника 84 ±6.2 84 ± 7,8 Кровь 79.6 ±3,1 79,6 ± 4.0 Моча 79,4 ±4.8 79,4 ± 6.1

фол») или 2:1 (силикагель КСК); при анализе крови и мочи гексан -ацетон 3:1 («Силуфол») или гексан - хлороформ 1:2 (силикагель КСК) или 1:3. Водно-мстанольный раствор (2:1).

Проявляющие реагенты:    N? 1- раствор нитрата

серебра в аммиаке и ацетоне (0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 5 мл аммиака и доводят объем до 100 мл ацетоном). Раствор хранят на холоде до 5 дней; N? 2 - о-толидиновый (к 50 мг о-толидина приливают 8 мл ледяной уксусной кислоты, 125 мл воды и 250 мг йодистого калия). Хранят на холоде; № 3 - о-толуидиновый (100 мг о-толу идина растворяют в 5 мл ледяной уксусной кислоты, прибавляют 0,5 г йодистого калия или йодистого кадмия и доводят объем смеси до 250 мл водой). Хранят на холоде; № 4 - раствор нитрита натрия (к 45 мл воды приливают 5 мл концентрированной хлороводородной кислоты и растворяют 1 г нитрита натрия). Применяют свежеприготовленным; № 5 - раствор 1-нафтола (2,8 г едкого кали растворяют в 50 мл воды и прибавляют 0,1 г 1-нафтола). Применяют раствор свежеприготовленным; № 6 - раствор 1-нафтиламина (1 г 1-нафтиламина растворяют в 50 мл ацетона. Перед опрыскиванием смешивают с 1 н. раствором хлороводородной кислоты в соотношении 1:1); N? 7 - раствор N-( 1-нафтил)-зтилендиамин дигидрохлорида, 2%-ный в 0,1 н. хлороводородной кислоте.

532

Силикагель марки КСК или КСС, размер частиц 100 меш для приготовления сорбционной массы. Перед использованием силикагель испытывают на присутствие мешающих определению примесей. Силикагель (3-5 г) промывают 5-10 мл эфира, эфир упаривают до 0,2 мл и наносят на хроматографическую пластинку «Силуфол». Далее поступают так, как описано для анализа пестицида. Если силикагель содержит примеси, мешающие определению сумилскса, его подвергают очистке. Для этого его кипятят в разведенной хлороводородной кислоте (1:1) в течение 2-3 ч. Промывают горячей водопроводной, а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод и до удаления в промывных водах следов хлоридов (проба с азотнокислым ссреб^юм). После промывки сушат, периодически помешивая, в шкафу при 130 С в течение 6 ч, дробят и просеивают через сито 100 меш. Хранят в склянке с притертой пробкой. Ледяная уксусная кислота х.ч. Сульфат кальция безводный, х.ч. или гипс.

Приготовление стандартного раствора. Для анализа воды, почвы, семян готовят стандартный раствор сумилскса в ацетоне - 100 мкг/мл. Рисгворяют 10 мг сумилскса х.ч. в 100 мл ацетона. Для анализа биосред готовят стандартный раствор пестицида в д и этиловом эфире - 100 мкг/мл. Если в наличии нет х.ч. препарата, то готовят раствор из 50%-ного с.п. Для этого 20 мг порошка растворяют в 100 мл эфира, фильтруют через 30 мин. Растворы устойчивы в течение 1 мсс при хранении на холоде.

Приборы, аппаратура, посуда. Для экстракции. Аппарат для встряхивания. Баня водяная. Баня со льдом. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб. Колбы: грушевидные для отгонки растворителя; мерные на шлифах, цилиндры; конические плоскодонные с пробками на 150 и 250 мл. Пипетки и микропипстки на 0,1; 0,2; 1; 2 и 5 мл. Воронки делительные на 150-250 мл. Мерные пробирки на шлифах на 10 мл.

Для аналитического определения. Пластинки «С ил у фол» размером 150 х 150 мм. Пластинки стеклянные размером 90 х 120 или 150 х 150 мм. Камера хроматографическая размером 145 х 200 мм для стеклянных пластинок и 170 х 240 мм для пластинок «Силуфол». Пульверизатор стеклянный. Камера для обработки хроматограмм. Микропипстки (см. выше) для нанесения проб или капилляры. Источник УФ-свста. Термостат.

Приготовление хроматографических пластинок. Для приготовления 10-12 пластинок со слоем силикагеля берут 35 г силикагеля, смешивают с 2-3,5 г гипса (или сернокислого кальция), растирают в ступке и небольшими порциями приливают 90 мл воды. Перемешивают до получения массы однородной консистенции. Тонким слоем наливают на пластинки. Сушат при комнатной температуре в горизонтальном положении в течение 16—18 ч. Хранят в эксикаторе.

Ход анализа. Экстракция. Анализируемую воду (250 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют сумилскс хлороформом трижды порциями по 50; 30 и 30 мл. Экстракт сушат безводным сульфатом натрия (2-3 г) и сливают в круглодонную колбу. Объединенный экстракт помещают на водяную баню и хпороформ отгоняют до объема 0,5 мл.

Пробу почвы (50 г) помещают в коническую колбу, заливают 100 мл

533

хлороформа так, чтобы почва была полностью покрыта растворителем, и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 1 ч. Экстракцию повторяют дважды порциями по 30 мл, объединенный экстракт фильтруют через воронку с бумажным фильтром в круглодонную колбу. Растворитель отгоняют на водяной бане до объема 0,5 мл.

Навеску семян подсолнечника (50 г) заливают 100 мл хлороформа и экстрагируют в течение 1 ч на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют, остаток в колбе и на фильтре трижды промывают хлороформом порциями по 30 мл. Растворитель отгоняют на водяной бане, остаток упаривают досуха. Сухой остаток заливают 30 мл смеси вода - метанол (2:1) и оставляют на 1 ч. Смесь переносят в делительную воронку, при этом фильтруют через воронку с бумажным фильтром. Колбу смывают трижды 10 мл водно-мстанольного раствора. Сумилскс экстрагируют из смеси вода - метанол хлороформом тремя порциями по 50; 30 и 30 мл. встряхивая делительную воронку по 3 мин. Полученный экстракт сливают в круглодонную колбу, пропуская через стой сернокислого безводного натрия (2-3 г). Хлороформ отгоняют на водяной бане до объема 0,5 мл.

Пробу цельной крови (0,5 мл) вносят в пробирки с притертыми пробками, смоченные предварительно раствором лимоннокислого натрия. Приливают по 5 мл эфира, экстрагируют на холоду, встряхивая в течение 30 мин. После отстаивания эфир сливают, экстракцию повторяют 5 мл эфира. Экстракты объединяют, растворитель отгоняют в ротационном испарителе до объема раствора 0,2-0,5 мл и количественно наносят на хроматографическую пластинку.

Пробу мочи (10 мл) вносят в колбу и приливают 10 мл эфира, помещают колбу в баню со льдом и экстрагируют встряхиванием в течение 30 мин. Переносят в делительную воронку и после отстаивания отделяют эфир, пропуская его через безводный сернокислый натрий (2 г), в колбу для отгонки растворителей. Экстракцию повторяют еще дважды по 10 мл эфира. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель до объема раствора 0,2 мл, количественно наносят на хроматографическую пластинку.

Хроматографирование. Исследуемые экстракты с помощью микропипетки или капилляра наносят на хроматографические пластинки «Силу-фол» или со слоем силикагеля. Справа и слева от пробы на расстоянии 15 мм наносят стандартные растворы сумилскса, содержащие от 0,2 до 10 мкг или от 2 до 30 мкг - на «Силуфолс» и от 10 до 50 мкг - на силикагеле. Пластинки помещают в хроматографическую камеру, куда предварительно за 15-20 мин наливают подвижную фазу. После достижения фронтом растворителя высоты 10 см пластинки извлекают из камеры, дают улетучиться парам растворителей, сушат на воздухе. Затем обрабатывают одним из проявляющих реагентов.

При анализе воды, почвы, семян подсом1ечника после удаления следов растворителей пластинку опрыскивают реагентом N? 1 и помещают под УФ-свст на 10 мин. Сумилскс проявляется в виде пятен черно-серого цвета на светлом фоне. Величина R_r 0,45 ± 0,05.

Если используют пластинки «Силуфол», то при анализе проб крови, мочи проявление сумилскса проводят реактивами N? 1, 2 или 3. Для этого пластинку помещают на расстоянии 10-12 см от источника УФ-свста и облучают хроматограммы 5-10 мин (ОКН-11). Опрыскивают

534

реактивом N? 1 и после полного улетучивания ыедов аммиака пластинку снова помещают перед источником УФ-с в ста на 30-40 с. Сумилскс проявляется в виде пятен черно-коричневого цвета на светлом фоне. Минимально определяемое количество 0,2 мкг. Облученную пластинку можно опрыскать реагентом N? 2 или N? 3, при этом сумилскс проявляется в виде пятна коричневого (N? 2) или фиолетового (N? 3) цвета. Минимально определяемое количество 0,5 мкг. Через 2-3 дня фиолетовый цвет пятен переходит в коричневый. Коричневый цвет устойчив до 2 мсс.

В случае необходимости дополнительной идентификации на «Силуфо-лс* проводят реакцию азосочетания. Для этого после хроматографирования и улетучивания следов растворителей пластинку осторожно обрабатывают 30%-ным раствором гидроксида калия в 50%-ном этаноле до легкого увлажнения поверхности и помещают в сушильный шкаф на 20 мин при температуре 150 С. Охлажденные пластинки опрыскивают сначала реагентом 4 и через 1-2 мин - одним из реагентов N? 5, 6, 7. Тотчас в зоне локализации сумилскса проявляется пятно, окрашенное в оранжево-желтый (N? 5), темно-розовый (N? 6) или сиреневый (N? 7) цвет. Минимально определяемое количество 0,5 мкг (N? 7) и I мкг (N? 5, 6).

Если используют пластинку со слоем силикагеля, то для проявления сумилскса применяют реагент N? 1 (порядок такой же, как и для пластинок «Силуфол*) или реакцию азосочетания после кислотного гидратиза. Для этого пластинки осторожно обрабатывают 25%-ным раствором серной кислоты (примерно 1-2 мл) и помещают в сушильный шкаф на 20 мин при 150 °С. Охлажденные пластинки опрыскивают реагентом iN? 4 и через 1-2 мин - N? 5, 6 или 7. Тотчас на хроматограмме сумилскс проявляется в виде пятна, окрашенного в желто-оранжевый (N? 5), темно-розовый (N? 6) или сиреневый (№ 7) цвет. Цвет пятен устойчив 2 дня. Минимально определяемое катичество 1 мкг. Величина R_f 0,4 * 0,6. Экстрактивные вещества крови и мочи определению сумилскса нс мешают. Они имеют либо другую величину R_f% либо другую окраску.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения площади пятен проб и стандартных растворов. Их измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией наблюдается до 10 мкг (кровь, моча) и до 50 мкг (вода, почва, семена). Если в пробе содержится большое количество сумилскса, то следует анализировать аликвотную часть раствора.

Содержание сумилскса в пробе (X, мг/кг, мг/л, мкг/мл) рассчитывают по формуле

И5₂ X - - ,

PSi

где А - количество стандартного раствора, пятно которого по площади наиба!се близко к пятну на хроматограмме пробы, мкг; S_lt S₂ - площади пятен соответственно на хроматограмме стандарта (концентрация А) и пробы, мм²; Р - масса или объем пробы, взятый для анализа, г или мл.

535

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9