ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗУЧЕНИЮ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОМ НОРМИРОВАНИИ В ВОДЕ ВОДОЕМОВ.

Москва, 1981 г.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ

«УТВЕРЖДАЮ» Начальник Главного санитарно-эпидемиологического управления Минздрава СССР

В. Е. Ковшило 5 ноября 1981 г.

№ 2492-81

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗУЧЕНИЮ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОМ НОРМИРОВАНИИ В ВОДЕ ВОДОЕМОВ.

Методические указания предназначены для научно-исследовательских институтов гигиенического профиля, гигиенических кафедр медицинских ВУЗов, отделов и лабораторий по охране окружающей среды различных министерств и ведомств. Они могут быть использованы работниками санитарно-эпидемической службы при оценке возможного влияния загрязнений водоемов на здоровье населения.

Методические указания определяют область применения и использования методов оценки гопадогоксического действия химических веществ для целей повышения надежности исследований по обоснованию ПДК в воде водных объектов этих веществ.

Методические указания разработаны под руководством д. м. н., профессора Г. Н. Красовского коллективом авторов: д. м. н. проф. Г. Н. Красовским, к. м. н. 3. И. Жолдаковой, к. м-. и. С. П. Варшавской, (Ин-т общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР); к. м. и. А. А- Королевым, д. м. и. В. Т. Мазаевым, к. м. н. Т. Г. Шлепниной (I Московский медицинский ии-т им. И. М. Сеченова); к. м.н. Р. А. Рязановой (Московский научно-исследовательский ин-т гигиены им. Ф. Ф. Эрнсмана); к. м. и. В. Н. Фоменко, к. м. н. В. И. Глущенко (Ин-т гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР) с использованием материалов следующих авторов:    к. м. н. М. М. Авхимснко, к. м. и. В. И. Антоновой,

к. м. н. Е. Г. Берлинер, д. м н. Т. И. Бонашевской, к. м. н. А. И. Борисова, м. н. с. А. В. Вотякова, к. б. н. Т. Г. Ламеи-товой, к. м. и. В. Г. Надеенко, м. и. с. Л. Н. Тишовой, ст. лаб. Л. Б. Троенкиной, д. м. н. Б. М. Штабского, д. м. н., проф. П. В. Штанникова.

Методические указания подготовлены для публикации инспектором — врачом ГСЭУ М3 СССР Б. М. Кудрявцевой.

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время в СССР разработана научно обоснованная система методических приемов установления ПДК, в которой изучению отдаленных последствий действия химических веществ уделяется особое внимание. Экспериментальное изучение отдаленных последствий воздействия на организм химических веществ стало необходимым элементом их токсиколого-гигиенической оценки.

Поражения половых желез могут приводить к нарушению оплодотворяющей способности, способности к зачатию, к изменениям нормального внутриутробного развития плода н развития последующего поколения, а также к появлению мутаций как в соматических, так и в зародышевых клетках, что и является критерием безусловного вредного действия хйми-ческих веществ па теплокровный организм.

В литературе в настоящее время имеется достаточно данных, свидетельствующих о возможности вредного влияния химических веществ на гонады (И. В. Саноцкий, В. Н. Фоменко; Г. Н. Красовский с савт.; Е. М. Чиркова и др.). Это может быть следствием как общетоксического действия химических веществ, так и проявлением специфического гоиа-дотоксического эффекта. Поэтому для выявления потенциальной и реальной опасности гоиадотоксического действия химических веществ при их гигиеническом нормировании требуется проведение соответствующих исследований.

Однако при выполнении этих исследований нередко возникают трудности методического характера (выбор тест-объ-екта, доз, продолжительности эксперимента, количественная оценка возникающих изменений и т. д.), успешному преодолению которых и призваны способствовать «Методические указания».

Подготовка настоящих указаний была обусловлена также специфическими особенностями гигиенического нормирования в области гигиены воды. Поэтому, несмотря на то, что за последние годы вышел ряд документов по данной проблеме

3

(«Методические указания по гигиенической оценке новых пестицидов, Киев, 1969»; «Методы экспериментального исследования по установлению порогов действия промышленных ядов на генеративную функцию с целью гигиенического нормирования» № 1744-77, М., 1978), требовалось создание самостоятельного документа, поскольку принцип этапности, используемый при гигиеническом изучении нормируемых веществ (по органолептическому, общесанитарному и токсикологическому признакам вредности), позволяет в ряде случаев существенно сократить или вообще отказаться от проведения длительных токсикологических исследований, в том числе и изучения гопадотоксического действия.

В соответствии с этим же принципом предусмотрено деление рекомендуемых методов на обязательные, дополнительные и специальные. Кроме того, специально выделен раздел изучения влияния химического фактора воды на состояние репродуктивной функции у людей.

Настоящие методические указания, составленные на основе накопленного опыта последних лет, должны способствовать внедрению в практику гигиенического нормирования химических веществ в воде водных объектов современных методов выявления гонадотоксического эффекта изучаемых соединений и унификации схемы исследований, что обеспечит получение сравнимых результатов.

I. ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ К ПРОВЕДЕНИЮ ИССЛЕДОВАНИИ ПО ОЦЕНКЕ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ.

Мри экспериментальном обосновании ПДК химических веществ в воде водных объектов наряду с изучением общетоксического действия обязательным элементом исследований является оценка гонадотоксического действия веществ. Исследования по оценке общетоксического действия химических веществ осуществляются в соответствии с «Методическими указаниями по разработке и научному обоснованию ПДК вредных веществ в воде водоемов» (М., 1976).

1.1. Принципы изучения гонадотоксического действия химических веществ.

При изучении гонадотоксического действия химических веществ при их гигиеническом нормировании необходимо руководствоваться следующими принципами:

4

—    возможность моделирования гонадотоксического эффекта на лабораторных животных;

—- зависимость в проявлении гонадотоксического эффекта от дозы и времени воздействия вещества;

—    гюроговость гонадотоксического действия химических веществ;

—    этаппость исследований при сочетании функциональных, биохимических и морфометрических методов оценки го-иадотоксического действия химических веществ;

—    приоритетность выбора методов оценки гонадотоксического действия химических веществ на основе следующей классификации: обязательные, дополнительные и специальные для углубленных исследований.

Допустимо в качестве критерия вредности - гонадотоксического действия химических веществ использовать косвенные показатели морфо-функциопальиого состояния гонад.

1.2. Выбор адекватной модели для изучения гонадотоксического действия химических веществ.

Несмотря на известную ограниченность данных относительно правомерности межвидовых экстраполяций, вопрос о возможности и допустимости переноса результатов экспериментальных исследований на животных но оценке гонадотоксического действия химических веществ на человека следует считать решенным положительно. Основанием для такого вывода является:

—    сходный механизм действия химических веществ на гонады животных и человека;

—    однотипный характер функциональных, биохимических и морфометрических изменений в гонадах животных и человека.

В качестве адекватной модели могут быть использованы спонтанно овулирующие животные, такие как мыШи (SHK. гибридные мыши) и крысы (Wislan, беспородные).

N. ЭТЛПНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ И ВЫБОР МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ.

Поскольку в комплексе исследований по гигиеническому нормированию раздел изучения гонадотоксического действия химических веществ требует значительной затраты сил и средств, необходимо определить в каких случаях и в каком объеме следует проводить такие исследования.

5

Эти исследования необходимы:

—    для химических веществ, способных в повышенных количествах накапливаться в ткани половых желез;

—    для групп соединений, среди которых неоднократно обнаруживались вещества, оказывающие влияние на функцию гонад (тяжелые металлы, органические окиси и перекиси, галлоидопроизводные, фталаты, нитро-аминосоединения, органические растворители и т. д.);

—    для мутагенов или близких к ним по химическому строению соединений;

—    для новых или малоизученных классов химических соединений.

2.1. Этапы изучения гонадотоксического действия химических веществ.

При проведении исследований следует помнить, что в большинстве случаев гонадотоксическое действие химических веществ есть одна из форм проявления из общетоксического действия. И лишь небольшое число соединений избирательно влияет на функцию гонад. Поэтому изучение гонадотоксического действия рекомендуется проводить в три этапа, из которых первый является обязательным, а два других — дополняющими и уточняющими (таблица 1).

Если при проведении обязательных исследовании с веществом в условиях подострого опыта (1 этап) с использованием рекомендованных методов оценки (таблица 2) не обнаружено влияние изучаемого вещества на гонады в дозах более чем на порядок превышающих дозу по общстокснчсскому эффекту, этот раздел исследования из дальнейших экспериментов исключается.

Если в подостром эксперименте действие на гонады выявлено па уровне порога общетоксического дейс'ьвия или в пределах одного порядка выше, осуществляется переход ко 2-му этапу.

Если МИД, установленная в хроническом опыте по гонадотоксическому действию, на порядок или более превышает МИД, установленную по общетокснческому действию, дополнительных исследований по оценке гонад не проводят.

О

Схема этапности исследований гонадотоксического действия химических веществ при гигиеническом нормировании.

I -	обязательный	Подострый опыт, 1—1.5* мес.	Функциональные, морфометрические.	Определение степени выраженности обшегоксического и гоиадо-токсичсского эффекта на основе соотношения пороговых доз подострого эксперимента.
II —	дополняющий	Хронический опит, 5—6 мес.	Функциональные, морфометрические. биохимические.	Установление порогов общелексического и гонадотоксического действия.
III -	■ уточняющий	Специальный эксперимент не менее 6 мес.	Наряду с физиологическими, морфометрическими используются специальные методы.	Уточнение порогов обшетоксичс-ского и гонадотоксического действия.

• Примечание. Однако есть обоснованное мнение о необходимости проведения исследований после полного цикла сперматогенеза (2—2.5 мес. для крыс; 1—1,5 мес. для мышей).

В случае совпадения этих эффектов по уровню МНД необходимо провести специальные исследования с использованием методов (IIi этап) и доз, на 1—2 порядка ниже МНД, установленной в хроническом опыте по общетоксическому действию.

Животные, на которых ставят опыты по изучению гонадотоксического действия, должны содержаться па полноценной диете, поскольку проявления авитаминоза (особенно авитаминоза Е) могут привести к искажению результатов эксперимента. Использование проросшего овса, выращенного гидропонным методом, не рекомендуется из-за возможности грибковых заболеваний.

Все функциональные и морфометрические исследования гонад должны проводиться не менее чем на б животных (желательно 8—10) из каждой опытной ft контрольной группы. Забой животных должен осуществляться последовательно, по одному животному из каждой группы.

2.2. Методы оценки гонадотоксического действия химических веществ.

В зависимости от этана изучения влияния химических веществ па гонады следует применять различные методы исследования: функциональные, морфометрические, биохимические, специальные.

Рекомендуемые методы оценки гонад приведены в таблице 2.

Таблица 2

Дополнительные методы

Специальные методы

Исследование состояния потомства 1-го поколения животных.

1

В большинстве случаев в эксперименте оказываются более чувствительными, чем функциональные показатели.

2

Наиболее чувствительные (Е. М. Чиркова, 1970).

9