МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 06.08.81 N? 2431-81 21.11.85 № 4039-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КАРТОЦИДА (ФИТОНА) В КАРТОФЕЛЕ, СВЕКЛЕ, ОГУРЦАХ, ТОМАТАХ,

ЯБЛОКАХ, ЦИТРУСОВЫХ, ЛУКЕ, ЖОМЕ, МЕЛАССЕ, САХАРЕ,

ВОДЕ И БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ *

Краткая характеристика препарата. Картоцид - новый отечественный фунгицид, рекомендуемый для борьбы с грибковыми заболеваниями картофеля, томатов и других сельскохозяйственных культур. Действующее начало препарата - трикапролактамо медь (II) дихлоридмоно-гидрат. Брутто формула С₁₈Н_мС1₂Ыз0₄Си. Молекулярная масса 482,0. В чистом виде кристаллы желтого цвета, т. пл. 83-85 °С. Хорошо растворимы в воде. Растворимость в органических растворителях при 20 °С, %: в ксилоле-1,8, хлороформе - 4,4, ацетоне - 12,7, этиловом спирте - 21,5. Давление паров при 20 °С 0,04 Па. В лимонах МДУ 0,1 мг/кг. В сахарной свекле, цитрусовых (мякоть) содержание карто-цида нс допускается.

Принцип метода. Метод основан на извлечении хартоцида из сельскохозяйственной продукции ацетоном, очистке экстракта перераспределением из ацетоновой среды в хлороформ, а затем на колонке с окисью алюминия с последующим определением образовавшегося капролактама методом ТСХ на пластинках «Силуфол». Из воды картоцид извлекают хлороформом и без очистки экстракта определяют методом ТСХ. В биологических объектах картоцид гидролизуют 0.1 н. НС1 до капролактама с последующим распределением его в хлороформ, очистке экстракта на колонке с оксидом алюминия и определении методом ТСХ.

Метрологическая характеристика метода. Предел обнаружения в хроматографируемой пробе 3 мкг. Предел определения в сельскохозяйственной продукции 0,15 мг/кг, в воде 0,001 мг/л, в жоме 0,3 мг/кг и в мелассе 0.6 мг/кг. Среднее значение определения стан-

♦ Разработаны Т.В. Алдошиной, К.Ф. Новиковой, Ф.Г. Мсльцср, Г.А. Лстуновской, Э.В. Сазоновой (ВНИИХСЗР).

501

дартных количеств картоцида с 80% при п - 15. Стандартное отклонение ±8,0%. Доверительный интервал среднего при р » 0,95, п * 5 для всех объектов 80,0 ± 10,3%. Размах варьирования для всех объектов 72,0-85,0%. Метрологическая характеристика метода дана в таблице 127.

127. Метрологическая характеристика метода определения картоцида в биообъектах

Анализируемый объект Нижний предел определения, мкг/г или мкг/мл Среднее значение определения с при п = 15, % Стандартное отклонение при л =» 15, % Моча 5 87,3 ±8.0 Кровь 5 76,7 ±8,2 Почки 1,5 56,0 ±5,5 Печень 0,7 56,0 ±5,6 Продолжение Анализируемый Доверительный интср- Размах варьирования, объект вал определения при % п - 5, р - 0,95 % Моча 87,3 ± 9,9 80-100 Кровь 76.7 ± 10,2 70-90 Почки 55,0 ± 6,8 50-60 Печень 55,0 ± 7,0 50-60

Избирательность метода. Прочие пестициды определению нс мешают, так как проявление на пластинке селективно лишь для картоцида.

Реактивы и материалы. Ацетон х.ч. Гексан х.ч. Хлороформ х.ч. Бензол х.ч. Метиловый спирт х.ч. Этиловый спирт х.ч. Сульфат натрия безводный, х.ч. Хлороводородная кислота, х.ч. 2 н. и 0,1 н. Гидроксид натрия 1 н. и 4 н. Хлорид железа чд.а. Гидроксиламин солянокислый чдл. Проявляющие реагенты: N° 1 (растворяют 21 г гидро-ксиламина солянокислого в 100 мл воды. Перед обработкой хроматограммы смешивают 20 мл полученного раствора с 5 мл 1 н. NaOII); № 2 (к 85 мл воды добавляют 15 мл 2 н. НС1 и растворяют 10 г хлорида железа). Пластинка «Силуфол*. Оксид алюминия нейтральный, II степени активности или отечественный для хроматографии. Стандартные растворы картоцида в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл (раствор 1) и 10 мкг/мл (раствор 2). Растворы 1 и 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение 3 мсс.

Приборы, аппаратура, посуда. Ротационный вакуумный испаритель. Аппарат для встряхивания. Камера для хроматографирования. Делительные воронки на 25; 100 и 1500 мл. Колбы: плоскодонные на 50 и 250 мл; круглодонные на 250 мл; мерные на 100 мл; конические на 25; 50 и 100 мл. Хроматографические колонки длиной 10 см, внутренним

диаметром 2,5 см (колонка N? 1) и 0,8 см (колонка N? 2) с краном, стеклянная. Пробирки конические, градуированные на 10 мл. Пипетки на 1; 5 и 10 мл с делениями. Пульверизаторы стеклянные. Цилиндры мерные на 100 и 250 мл. Пористый фильтр. Пипетки на 1 и 10 мл с делениями. Сушильный шкаф.

Подготовка к определению хроматографических камер. Хроматографические камеры за 1 ч до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей хлороформ - метиловый спирт (25:2) и бензол - этиловый спирт (30:5) для насыщения камер парами подвижных растворителей. Объем подвижного растворителя должен по высоте находиться нс ниже 0,7-1,0 см от уровня дна камеры. Хроматографическую колонку N? 1 заполняют 3,5 г оксида алюминия в 20 мл хлороформа. Избыток хлороформа сливают с подсоединением слабого вакуума, оставляя слой растворителя на уровне 1-2 мм над поверхностью сорбента. Хроматографическую колонку № 2 заполняют 2 г оксида алюминия в 15 мл хлороформа при анализе мочи и крови и 9 г оксида алюминия в 40 мл при анализе печени и почек. Избыток хлороформа сливают с подсоединением слабого вакуума, оставляя слой растворителя на уровне 1-2 мм над поверхностью сорбента.

Подготовка проб к анализу. Для анализа картофеля, огурцов, яблок, цитрусовых, лука, свеклы из средней пробы подготавливают три параллельные навески массой 20 г. Картофель, огурцы, свеклу, цитрусовые, яблоки измельчают ножом на кубики с размером граней около 0,5 см. Томаты и лук измельчают на маленькие дольки. Сахар анализируют в виде песка или молотого сахара и отбирают три параллельные навески массой 20 г, жом анализируют в естественном виде, отбирая навески массой 10 г. Каждую отобранную пробу крови (2 мл) или мочи (2 мл) помещают в отдельную пробирку и анализируют всю отобранную пробу. Навеску почек берут 5-10 г, печени 10-15 г.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Навеску анализируемой пробы картофеля, огурцов, томатов, яблок, цитрусовых, свеклы, лука, жома, сахара помещают в плоскодонную колбу на 500 мл, заливают 40 мл ацетона и экстрагируют картоцид с помощью механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт пропускают через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 250 мл, содержащую 0,5 мл воды. Экстракцию овощей и фруктов проводят еще 2 раза тем же количеством растворителя. Из объединенного экстракта с помощью ротационного вакуумного испарителя отгоняют ацетон. Водный остаток переносят в делительную воронку на 100 мл. Колбы ополаскивают 2 раза водой общим объемом 5 мл, в случае жома и сахара - 20-25 мл. Водный раствор дважды промывают 10 мл гексана. Гексановый стой отбрасывают. Из водной фазы картоцид трижды экстрагируют хлороформом порциями по 10 мл. После разделения слоев хлороформный стой переносят в коническую колбу на 100 мл, сушат над безводным сульфатом натрия (7-10 г), фильтруют в круглодонную колбу на 50 мл. Из круглодонной колбы с помощью ротационного вакуумного испарителя отгоняют растворитель до объема 1 мл. Остаток переносят на хроматографическую колонку I, заполненную оксидом алюминия II степени активности в хлороформе, при закрытом кране колонки, открывают кран колонки и дают раствору впитаться в сорбент. Колбу дважды обмывают хлороформом порциями по 2 мл и полученный

503

раствор каждый раз переносят на колонку и элюируют картоцид с колонки 30 мл хлороформа со скоростью 30 кап/мин. Элюат стирают в коническую пробирку. Общий объем злюата 25-30 мл. В пробирку помещают стеклянный капилляр с заплавленным верхним концом и удаляют растворитель на горячей водяной бане до объема -0,05 мл. Остаток с помощью того же капилляра, но с отломленным заплавленным концом переносят на хроматографическую пластинку. Параллельно на пластинку наносят серию стандартов с содержанием каргоцида 3...15 мкг. Хроматограмму развивают в системе хлороформ - метанол (25:2) или бензол - этанол (30:5). После развития хроматограммы пластинку сушат, а затем обрабатывают из пульверизатора проявляющим раствором N? 1. Влажную хроматограмму выдерживают в сушильном шкафу при 120 °С в течение 15-20 мин, а затем обрабатывают раствором Ns 2. Картоцид в виде капролактама проявляется на пластинках в виде темно-коричневых пятен на желтом фоне с R_f 0,40 ± 0,05 в первой системе и 0,28 ± 0,03 во второй. Пятна стабильны в течение 5-7 мин.

Навеску мелассы 5 г растворяют в 100 мл дистиллированной воды и трижды экстрагируют в делительной воронке на 500 мл хлороформом порциями по 100 мл. Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (25 г), затем фильтруют в круглодонную колбу, содержащую 0,5 мл 0,1 н. НС1, и полностью отгоняют растворитель с помощью ротационного вакуумного испарителя. Влажный остаток количественно переносят из колбы в делительную воронку на 100 мл 25 мл 0,1 н. НС1 и трижды экстрагируют хлороформом порциями по 10 мл. Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (5 г). Далее поступают, как описано для другой сельскохозяйственной продукции.

Из 1 л воды картоцид извлекают 4-кратной экстракцией хлороформом порциями по 100 мл, в делительной воронке - по 1,5 л. В воду предварительно добавляют около 15 г NaCl. Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия и порциями фильтруют в грушевидную колбу на 50 мл. Из колбы с помощью ротационного вакуумного испарителя отгоняют растворитель до объема 1-2 мл. Последнюю порцию хлороформа отгоняют до объема 0,1 мл. Остаток количественно с помощью стеклянного капилляра переносят на хроматографическую пластинку, далее поступают так, как описано для анализа растительных проб.

Образец крови или мочи переносят в делительную воронку вместимостью 25 мл, пробирку обмывают 1-2 мл 0,1 н. соляной кислоты и полученный раствор также переносят в делительную воронку. Содержимое делительной воронки доводят до 10 мл 0,1 н. хлороводородной кислотой, смесь перемешивают несколько секунд и трижды экстрагируют полученный капролактам хлороформом порциями по 10 мл. Хлороформный экстракт в плоскодонной колбе на 50 мл сушат над безводным сульфатом натрия (5 г). Хлороформный раствор порциями декантируют в круглодонную колбу на 25 мл, а затем с помощью ротационного вакуумного испарителя концентрируют до объема -1 мл. Сульфат натрия в колбе 3 раза промывают свежими порциями хлороформа по 2-3 мл, полученный раствор также переносят в круглодонную колбу и каждую порцию концентрируют до объема -1 мл. Остаток в колбе переносят на хроматографическую колонку II с А1₂0₃ при закрытом кране. Открывают кран

504

колонки и дают раствору впитаться в сорбент. Колбу несколько раз обмывают хлороформом и полученный раствор каждый раз переносят на колонку. Элюируют капролактам с колонки хлороформом со скоростью 2 кап/с с подсоединением слабого вакуума. Общий объем элюата 15 мл. Собирают алюат в грушевидную колбу на 25 мл с оттянутым концом. Полученный раствор концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 0,05 мл и проводят определение методом ТСХ.

Навеску почек (5-10 г) гомогенизируют с помощью ножа до состояния кашицы, добавляют 20 мл 0,1 н. MCI. Гомогенизат перемешивают с кислотой в течение нескольких минут. Полученную массу фильтруют через пористый фильтр пор 160 с подсоединением слабого вакуума. Остаток на фильтре промывают 0,1 и. соляной кислотой порциями по 5 мл 4 раза. Фильтрат переносят в делительную воронку на 100 мл и трижды экстрагируют капролактам хлороформом порциями по 10 мл. Хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (5 г), а затем декантируют раствор в грушевидную колбу на 50 мл. Остаток в колбе промывают несколько раз хлороформом общим объемом 10 мл. Хлороформный экстракт концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема -1 мл. Остаток в колбе переносят на хроматографическую колонку II с оксидом алюминия при закрытом кране. Открывают кран колонки и дают раствору впитаться в сорбент. Колбу несколько раз обмывают хлороформом порциями по 1 мл и полученный раствор каждый раз переносят на колонку, элюируют капролактам с колонки хлороформом со скоростью 2 кап/с с подсоединением слабого вакуума. Общий объем элюата 40 мл. Элюат собирают в грушевидную колбу на 50 мл с втянутым концом. Полученный раствор концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема -0,05 мл и проводят определение методом ТСХ.

Навеску печени (10-15 г) гомогенизируют с помощью ножа до состояния кашицы, добавляют 35 мл 0,1 н. НО. Гомогенизат перемешивают с кислотой в течение нескольких минут. Полученную массу фильтруют через пористый фильтр (пор 160) с подсоединением слабого вакуума. Остаток на фильтре промывают 0,1 н. хлороводородной кислотой порциями по 5 мл 4 раза. Фильтрат переносят в делительную воронку на 100 мл и экстрагируют капролактам трижды хлороформом порциями по 15 мл. Хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (5-7 г), а затем декантируют раствор в грушевидную колбу на 50 мл. Содержимое колбы концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 2-3 мл. Оставшийся в колбе сульфат натрия промывают несколько раз хлороформом общим объемом 10 мл. Хлороформный раствор переносят в грушевидную колбу и се содержимое концентрируют до объема 1 мл. Остаток переносят на хроматографическую колонку II и далее поступают так, как описано выше при анализе почек.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности пятен рабочей пробы и серии стандартов. При большом содержании картоцида на пластинку наносят аликвотную часть раствора. Содержание картоцида в анализируемой пробе (X, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле

ЛУ₂ X - - .

V_XP

731-33

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9