ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ПРЕДАТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕН® МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ 3 ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1981

Гооударотвенная комиссия по химичеоким средотваы борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чноть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экопертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Ст р*

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в риса и вода газожидкостной

хроматографией .................. 93

7# Методические указания по определению матилнитрофооа, фенитр.ооксона и п-нитрокрезола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

олое.......... 103

8. Энзимно-хроматографический метод определения фоо-фороргэнических пестицидов л рэотительных продуктах и биооубстратах.................. 109

Азотсодержащие пестициды

1. Производные мочевины* гуанидина, дитио-карбаминовой кислоты, анилиды карбоновых кислот, нитропроизводные, дитиокарбаыаты

I. Методические указания по определению дуада в растительном материале, почве и воде хроматографией в

тонком слое ...... .............. 118

2♦ Методические указания по определению остаточных количеств гербицида ыалорана в почвах с различным содержанием гуыуоа методом ТОК........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств НЕ-166 в огурцах хроматографией в тонком

слое и фотометрическим методом....... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств твиде к са в воде и почве.......... 136

5.    Методические указания по определению ФДН t/^/'-ди-

метил-//-(3-хлорфенил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной хроматографии ........ 139

6.    Методические указания по определению дитэна М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ...... 149

П. Гетероциклические соединения -

7.    Методические указания по определению базаграна в

воде, почве, зерне и растительном материале ....    152

ЗГ5

Стр,

8.    Методичеокие указания по определению фунгицида бай-

летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях, плодах томатов и огурцов . *........*.    .    .    159

9.    Методические указания по газожидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10. Методические указания по определению диквэта в семенах подсолнечника и масле из семян подсолнечника

опектрофотоыетричеоким методом .......... 174

II* Методические указания по определению ыетазина в воде, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком олое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств оимм-триазиновых гербицидов (симазина, зт-рэзина, пропазина, прометрина, оемвронз, мезорани-ла, метазина, метопротрина) в почве газожидкоотной

хрома тогрзфией.................. 188

13.    Методические указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слое..................... .    198

14.    Методические указания по определению ронстарч (ок-

сидиазона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии......... 205

15.    Методические указания по определению тачпгьрена в

воде методом тонкослойной хроматографии ...... 209

16.    Методические указания по определению тероацилэ в

эфирных маслах и эфиромэсличноы    сырье    методом    газожидкостной хроматографии........... .    214

I?. Методические указания по определению трифоринэ в

воде....................... 220

18.    Методические указания по определению остаточных ко

личеств текто(тиэбэидазолэ) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографией ............ 227

19.    Методические указания по определению остаточных ко

личеств фонаэоне в почве, воде, свекле и растительных объектах газожидкостной    хроматографией    ....    234

Прочие леотиииды

I* Методические указания по определению остаточных

количеств хлората магция полярографическим молодой ••• 243

2.    Методические указания по определению нортрода в

ьодз, черноземной почве и сахарной свекле............    2v8

3.    Методические указания по определению содержания

общей ртути в гное, яйцах, рыбе, молочных продуктах, почве ..... *    Zxj

Бактериальные пестициды

1.    Методические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореопентныи методом .............................................. 268

2.    Методические указания пи определению вктаницина А

в воздухе методом тонкослойной хроматографии ......... 2?6

3.    Методические указания по определению полиэдров* ви

руса ядерного полиэдроаа капустной совки на растительных объектах иммунофлюоресдентньш методом . *..... 260

тов в воде, почве и растительном материале    289

2. Методические указания по определению актеллика

растительной продукции, почве и воде ........ 296

Настоящие методичеокие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР* (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко)*

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.ИЛарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

^J' 'iv ■' ■■ i' " Ух в e ряда* ю ■; !•:' У^-:: ’; * ^::; -v ¹ Заместитель Главного^ санитарного врача СССР д.и.Зайченко " 28"января I960 г, # ?[27-80._;    '

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

^;^:,'-ПО'отРРЛЙБШШ.ТЕРБАЦИЛА- В^: ВФИРШХ КАСЛАГЙ- ЭфИГО-: tp МАСЛИЧНОМ СЫРЬЕ МЕТОДОМ ГАЗО-ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТО-. / ГРАФИН_________„1,.. 1'..1. —: -

Характеристика анализируемого •

г--;,. Ч '    ,Ч/.    .    ч    гербицида;,    ч.

. ! Химическое название: Б-хлор-З-трёт-гёутил-б-метил у.рацил

:> .; С тру ктурная_о формула:

^/ \-а

ш

^:    9 мпири чаек а я формула:    ^    М ол • мао 6 а - 216 *67,

у’•^г .Физик о-хи ми чеб ки о с во йства : ’’белый кри о т а л ли чоски й порошок, боа цвета и запаха! температура плавления 184°С, рас твори моогь в воде .

7 иг/л при 25°С, хорошо растворим в диметилсулвфоксиде! ацетонитриле , ксилоле, циклогексаноне, хлороформе, этиладетате. Малолетучи давление насыщенного пара при 29,5°С -4,8 х 10~⁷ .мы рт.от. Способен к таутомерии, оо целЬчами образует соли, Производные еяольной

У^Смачмв^юадей порошок тербацила о с одержание и 80$.д.в. под торго-■ - вии названном сикбар (<^ириз Дюпон и Кемур, США) применяется для борьбы с сорпякзьш на' плантациях мяты перечной до появления всходов ы по вегетируедим, растениям*.'    лу !у.;- ■■■-; ■■■■vv’vy ■■■.' ■ •'

2. Методика определении тербацила в эфирных маслах ■':г-и эфиронасличяом сырье мотодом гаэо-жидкоотноИ •    ■    у ..хроматогрофли : > .у;.у ууу

Методика ^ ';ОСПоваиа.^: на ;ИЗвлечоН|й!^    раст-

PU о) * Рг'у Ц а с д р    ■ JiTaG Н ! ^;    . и э ■;    с "i* и тр л ь н о гр^.р    \ х л б р о ф q    р--' •

Г или'^ацетоном,уо.чиdтйe;?-^vne'j^eр спрёдёлейй'.аймёжjciy■ ацетоннтри;*6и .и ген-- -У -^;йё'адУ- г'в к о аа ои *1% /аОН, дополнительной бчиотке на к о- . Уу-УУУлбнкё о онисью алюминия. йдёнтийикоф^я и .количественная ЬцейИаУ;у уУ'У ." " прозодится^: на газовом хроматографе с детектором постояннбй скоро^ у •>

Уу сти рекомбинации. у'УУУ^;Уу^;'^    у.    у.УУ^;;    ‘у-’";"Уу^:У -У y..fy

уУуу._ч, 2.Т.2. Метрологическая характе’^    У    ;.у.уУ--^

; Предел обнаружвиия - I нгу-у-у " . УУ 'у- V :    • 'y'V- .УуууУУУ

у Предел обнаружения в эфирном.маоле - 0,1 мг/кг, в эфиромаолич- у у ‘ ном сырье 0,05 ыг/кг.У‘: уУУлУ^ у-УУ.-.У '^vy У^; '■ * . У. -.''У- -■ \;ууУ>уу Процент определения. тербацила в мятном масле- — 74.,2# у.фг;уу уу •; у ;Уу -. Стандартное отклонение при п =9 - 2,5% У- Уу-Уу ... У;\.у^:У УУ уУуУ-Процент определения тербацила Ь эфиромаоличном онрье^у-у-У^;>_:, :У<у ^ч‘ У'уУ'Уу ■; / в'ajpйан£.У•*ay*-V'^:V--'85у2^у^    ууУУУ ■ у. уУ_:уУФу; уУ^УуУу^У^

..;.--у-У-У '■ У у. .■^: .вариант.Цv-y^:A;.^;f

^УУ уу^; Стандартное Ьтклонекие нрИ п » 9 ^у- У. уу -у*-у ;уУ ;^::УУУу^:УУ'^УууУУ;Уу^ У у    ^■■.У::уУ:у^;/у-, :.^;У^;У^УУу^;У"Ууул^ЬуУ^

у: У.' у: У'\.Уу У'й.ари'^    уууУ-'уу^.    уу:У'У: У'_;.у-уУУ'У^:у

■у ■    *' _;2*1.3УЗЛвбврательно^

•    Прочие рекомендованные на мяте перечной пестициды: хлорофос; У У у

прометрин и трефлан опрёделению не мешают. _чуУууууУуу у/ у;УуУ^уУу^;УУ'^:'УУ "-У

У 'У У'    ' 2,2. Реактивы и раотвсфы у, Ууу/у уууУ У У УуууУу :У у • у

У .' Стандартный раствор тербацила -в этилацетате -1-10 мкг/млу хранить на ход оде . не более 30. дней. /у'У'УУ ^:?';:'У У.^; ’ ■ у*- у >;    у У у^:У -У'

АцетОН — Х.Ч.    ■    У'-.-* •    ^:'-.;,У    ";*Уу    ."    *• у Уу ■ Уу;.- У.'у - У у • •

, н ^ ген сан, х.ч. ; уу^:'УУ У/У У .'.у у-у-'у .'г'УУУу -у-У? У. :-у--л .,У ;уу . 1;-;У;УуУ У;:УуУ Хлороформ, х.ч. У ^:у v у У У 'у 'У- :'У.У'Уу;у ,уУ7^;-уУ’-'^л'У. у;У.уУУ. * Этилацетат, х.ч. ^: : ■ у'у у^; ‘у- . ■ УУ. \у-' уу^: ^ у УуУ'Уу..' -’у \Уу:.^:,’ У _:уУу'У 1% водный раствор едкого натра у ’ У '"У; ;УУ '“У .УУУУ-:У\^;у.у -у^'у'. Кмолота соляная конц. х.ч. .    У    у"    у    '    .У- :-'УУ>Уу‘У' ^    \

■ Сульфат натрия безводный,.х.ч.    у    ;Уу    У    у.. •' У> У'уУуу^УУУууу

Таз -носитель, .'азот. особой чистоты . уу'-УУ 'У; У Уу" уу УГ;' У ^; У У;. "-у^; • У У У Вата - ’гигроонопн ческаяуу У; • ;У'Уу ^;/ УУу.У. У' У//\Ууу-_:уУуу^    У

У Окись алюминия: про и а л и ть о к и о ь ал кши ни я (0,14) |2^:uw) уприу13й⁰Су^уУ^лу УЙУ^.т в'ч о i-i й>э у 5" у.ч ei'c. p-аз ,У оно чи тьу:5.' ыл' 0₁1 у н "с ол ян ой' кисло ты'' с те яки У« рлби_; У :Уу ;§ ^:Що^ноо^ъю_:1000: ылУ-гудобаУиУ^

У^Уу1^и.я;:.цртря;сиУ.ат.ь\Зр^»0у..аии^

Кислота соляная О Д H-v. •    .., • '    "•••    ^-v4-^v'^:

\. 5% силикона ЗЕ-ЗО«;■ нанесенного. на Хроматон - м г АЧсиланизиро-. . ванного ДЫС У (0., 16-0,20 мм) _Уу1г    -С.    -;у.Ч,Й-    у

5% .51 ар, нанесенного на Хрома гон г N.; т AV V о и лани а ир ова иного • •¹

;;дис$- (o_fi6-0';2o им)*-    ;    V-

• Ч. -    ' ,2.3* Приборы, аппаратура и посуда у;■■/■ луЧу-уу^-у/-

Гавовий хроматограф "Цзет-ХОб^'с детектором постоянной скорости рекомбинации.    ■.    V,-    ■_ч:,л;.-'::.-Л...;

V.IРотационный вакуумный испари толь - Р V О ~ б4 _г ИР-IM или ■ зкви-у . у у В 0Л6 НТНЫЙ■ . \ уу;у' ,    Ч/^.УуЧ?^

Вотряхиватель АВУ-1 или эквивалентный Г иикрбишриц.йш-10 ■ ’** Ч/ Ч^у-у' ■    '    *

.у.Уу Колонка хроматографическая: стеклянную колонку 300 х 20 мм про-. Омывают последовательно содой, хромовой омеоью, дистиллированной :у, в одой, и^: высушивают. Нижний конец колонки 'вакр^ают-т|а^онои--из,>гиг. Vy/rpboKOiiHческой ваты, обезжи    гексаном.    Колонка заполняется

Ч пригбтовленннй окисью алюминия при непрерывном л.оотукивании по .

¹ отекло резиновой трубкой. Высота олоя окиси алюминия - 50 мм, над, окисью алюминия помечают слой безводного* сульфата натрия'- 20 мм.

Ислольэуехоя стандартная химическая посуда из отекла' (колбы Бунзена м Эрленмейера, воронки - Бюхнера, химические и .'делительные ■■ пипетки и др.)* выпускаемая отечеот^ишой промышленностью.

Подготовка- к определению .

• органические. растворители -перед началом работы необходимо очистить ^:и перегнать, оульфат натрия прокалить при температуре 300-400°

■ и употреблять нагретым до 45°С. (хранить при этой температура в тер-'

' мошКафу). Хроматографичоокая колонка и детектор кондиционируются в‘рвхймных условиях в течение 1-2 чаоов.    -

2.5. Ход анализа

у'' ••Л.ЗЛ* Отбор Образцов/ , . Ч * ‘ У У.-' ;_vV: /    ,    :yy,^V

_УЫ. •' • ..Отбор проб на анаДиа. производится в о о ответствии с ^иДравилами ^отбора проб на анализ пестицидов*** Отбирают .50 г 'свекесобравиой /зацепом мабси и 10 г эДш(риого масла ..(мятного, лавандового, пф1ф^1Шбго)

^Р^;>'€^    ^:-S-^V'-:: -Й^:'-^--Л ЗИх

£,'^    эфирного масла растворяют' В ЬО мл н~гексана * Г окошко-. 4:: ■

о.вый раствор пероноРят на ^дёлигольд^ю воройку емкостью 250 мл» при-; л-\_:

;^; Равляют 50 ^ мл 1^ едкого ;натра/ и встряхивают'43^    отделяют у    :

■ . нижыии слЬй. Опора дню повторяют о’до два раза# Доло'шыо, экстракты.; ;, -; объединяют^ подкисг лют.1,5-2 мл коид*» оолнной кислоты до pH «3-4.;,;    : ^: ■■

поре лосят в делительную воронку емкостью 250 ыл и . э кс т par и ру ют - у< - ^v.;^;т ерб ацил ■', а ти л а це т а тоы^;й'■• 3■^х;30:ыл»^:экстрак^

до'; 5 'мл: но; ротационном’'

..’ к спарите л е' при ;•• т е ми ера туре бани; не Быта 55 °С.^:- Ос та ток в колб в. не ••:•.; > ^; ■ рёнооят на;, колонку с окиоью алюминия промытую этйлац0татом*: По-, еле того как остаток .полностью впитывается в слой адсорбента,. кол- yfe бу^:: Сноза^; смыва    '    этилацета.та    и    переносят    нр    "колонку _v Операцию.

, повторяют 3-5 раз. Тербацкл элюируют 60 . мл ■ этнлац0татр;₍:Элюат. ри во ют. на ротационном'ионарителр при. температуре о'ани $5°С добуха* | (_{' Колбу' смывают Г мл этилацетата и' 2-5 мкл вводят в* йс.поритель;хро-.. ыатЪграфа,;.Лл^^

'    2,5i2.2.    Эфиромасдичныо    растения

'.Вариант Навеску измельчают в гомогенизаторе са 150 - мл хло~ Д^;:у; рофорыа (6000^000 'об/мин), встряхивают в течение 30^ .миЯ й. филь^. .• •• труют под вакуумом; Стакан гомогенизатора промывают''.хлороформом _; ; Д*. и присоединяют смыв к основному фильтрату,. ЛркбавляютДв'фильтрат.Д;;Д'Д. , 10 мл. воды и: упаривают..хлороформна."ротацйбнномуиспарителеОстаток; 5# (около 5 мл) ко,личеств0нно- 50 мд ацетоннтрила;^:переносят;

(сальную воронку, прибавляют 25. мл н-гексана «' вс т р яхи ва ют I ми к ♦ •,    .

Отбрасывают гексановую фазу, операцию проделывают еще два раза. *:;• • -Ацетонитрил количретвенно переносят в отгонную колбу емкостью

и упаривают досуха*' Остатбк.растворяют; в. 50^,1'н едкого ;натраАи количественно переносят в делительную воронку емкостью 250: мл, при-- i б.авляют 50 мл этилацетата и встраивают 2 мин^, органический слой ;Ч'^ отделяют. U пропускают чероэ воронку с нагретым. дб^: 45°с с'езво^ сульфатом натрия .. Операцию повторяют три раза*. Экс тракты .‘о.бве^диня- г:Ч^;Ч; ' - юг и упаривают до 3 мл на ротационном Испарителе.,, Оотатоцпаредос^ на предварительно, подготовленную колонку с ■ окисью,- елтйн';^

;. шип ход анализа шшлой'понЧвше^    нссел.    Ч-Ч-; v-_:;: ЧЧЧЧ^;Ч.:.^;

^l,d^,4 Навесну ^;оввжего сырья крупно иэшльчают. и гоиогшш- j .•^зируют оо/150 ил ацетонавстряхивают в,течение ЗО^Ю ШП1*. и* оо^ав- :_: ляют на но^ь. Затеи; содеряшмое колбы фильтруют по. закууиом;^: колбу,

.; • проиивают.30'ил ацетона и присоединяют, смыв к ооиовному фильтрату, ⁴ ,; _: ацетоновый 'экстракт количеохвенно переносят в отгонную колбу еико-⁴ ■ отью 250 ыл и упаривают ацетон не ротационной; испарителе* Остаток -• в колбоГростворяют в 50 ил а-гексана, количественно переносят на-.^: .

_;: ’ .доли тельную воронку oukoo хью 250; ил прибавляют 50 ил IJ6 одного натра в потряхивают в течение двух винуr_t•отделяют щелочной слой,

0    ti a pi^uM ю-\"п ов ^чг оря jot еще даа раза* Щелочные экстракты объединяют ^ от**' V’v фильтровывиют* Фильтрат количественно переносят на делительную ^ ^ ^: / ворону еикостьй 250 ил _к подкиоляют 1,5-2 ил конц, соляной, кислоты

до pH⁴ .    прибавляют    50 ид етилацетата и встряхивают в тече-

. . пве' о^^    Отделяют    органический. слой,..операцию повторяют

Э feo ,^'piaK- есгй;-' Ьб>©'да нявза у ■ пропер ка ю®'-_:л1ере'з-= Ъв i3 во дкый-V оул'ьфа 'йг .V натрия и'переносят в отгонную колбу емкостью 250 ил, упаривают до . ил и' переносят остаток на предвари только, подготовленную колонку ■ V \ о ^    ход.    анализа аналогичен вышеописанной

. му для uaceji* -^V-.- ■

''v2i$*2v5/ Условия хроматографического разделения

^г-¹';'''Vf^. ■ "^vVss-зо ■■■ i ^b>■■■ {^iav 'Щ

; раэкоры колонки    ;    . ” ICOO x 3 mm .    1000 x 3 ка

1    a юра ад колонка v . • • -    оюклянная сюклпнйаи

(■ojiua колонки    спиральная    спиральная

Гасход гоаа-йосахйли» мн/мин    /-777    ?

чарар колонку ..    • •    ^%    60 ^v ' ^; '77v:' / 60 ' '

аа поддул доюкюра 150    150 -

a dKuopoi'i'pa: испарнюдя . '    230    .    -250’.

••'■'77.'. ■ Tupiiocrata колонок 190    '    V    ;    '    190

.    ropuootasa    дегонго- '^v 7

7 :    ,77_; V . 7 ро« 77777: •: 220 , л- 7,7'; 22 и '.77

. X• ^иагографаруеыый ооъеи, мкч 2    .. ^''2'77^:'^:-7-2-7-v^,:'^; "

Jpjua удерживания, инн. .    4,1. 7-_;.'--.\..7.771^57:^л    •

Число теоретических тарелок .    356    '    '    '’    77    812

,7Щ7;7§^, .7^;:1у277:.7:.

' /:йн-.','.ниЙ динамический диинаьоп,' ■    7777; ; ■.

Ш^:■ 7_;.'2^:^    77-;7i;77:76'7    ,77

...    ; . . 2 «6t Обработка/--^    А:Й^

_д Количественной расчет препарага^^^^^^^^    прово-_;^;

' дяг по следующей фориуле': .

.; X - количество препарата в проЗо, мг/кг ,    .    ;    ;    /    :    '    ;

Н - выоота пике препарата в анализируемой пробе, ии '

; V, - объем анализируемой, пробы, мл •;    ;    '' ^ ••',

•••; Л ~ ’обвом инъектвруемой пробы, мкд v    "    "•    •    1

■ К - калибровочный коэффициент-^^    ^;,Лл    •:    V    _:

. .    . Для раочета калибровочного коэффициента проводят хроматографа- _;;

рование ряда стандартных растворов. К рассчитывают по формуле:V, _;i:?

;йй^:jrчмоло вводеннш: отакдартнкх. проб • ..    -.Ш‘^,;

• Н - высота^ пика стандартного раствора, мм ':•'    :    ¹    *

С -концентрации стандартного, раствора, мкг/мл • ,’•••' V

У,-я объем, вводимый в хроматограф,'ыкл    Ш^:-\'

Содержание микрокодичоотв тербацила в пробах вычволяют кан орвд-нов ив трох параллельных ояредолоний; ./

._;^v.^_ri'.\r:^:.V--.;.^';:■^■2'»;■^:7•vi■;■vA.:..i; ;*''p-..'p' ы":'^v^^::■ .' ’

!«    '    Методика    разработана    во    ВНИИ эфиромооличных культур

. о таршим научным, оотрудником лаборатории гербицидов Барановым Ю*С*

' под рукоЬодотвом доктора биологичооких наук Клиоенко М.А. в хан-.;^;v дидата сельскохозяйственных цаун Хилик Д.А. ■>