государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

институт эапртти растений, г. Ленинград*

2.    Лещинская Л.И., Новикова К.Ф., Косачева Е.И., Всесоюзный научно-исследовательский институт химических ородетв эащлты растений, Москва.

3,    Швец Д.А, , Всероссийский иаучно-исслодопптельскиЯ институт оациты растений, пос. Ромомь, Воронежской обл.

Требования безопасности Общепринятые требовании безопасности при .аботе с горючими растворителями и фосфорорганичоскичи пестицидами. Осторожно o6j»a-щатьоя о ацетонитрилом, т.к. он дцовит.

60

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

•утшаэддю"

ЗАМЕСТИТЕЛЬ ГЛАВНОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО САНИТАРНОГО ВРАЧА CCQ

А.И. ЗАЙЧЕНКО 19 октября    1979г.

»    -093-79

КЕТ0Д1ЧЫЖЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ВАЛЕКСОНА В РАС ТИТР ТЬНСЫ МАТЕРИАЛЕ, ПОЧВЕ И ВОДЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГА302ИДС0СТН0Й ХРШАТ0ГРАЙ1ЕЯ

I. Краткая характеристика препарата

I. I. Валексон

I. 2. 0,0-диэтилтиофосфорил-0-(«><.-ци&нобензальдокскм)

!. 3.    $    _сц

^CI^I5°3^

Мол. масса 298,3 1.4. Фоксим, байтной, волатон, Bay-77468, EN Т-27448 I. 0. В чистом виде жидкость светло-желтого цвета с Т. кип. Ю2°С

при 0,01 мм рт. ст., Т. пл. 3-4°С. Хорошо растворяется в большинстве органических раствори толей; растворимость в поде при 20°С - 7 _мг/л.

Разрушается в сильных кислотах и щелочных средах.

Препарат малотоксичен для теплокровных» При оральном введе-

2.1.3. Избирательность метода

Метафос, фталофос, фозалон, карбофос, диазинон, фосфамид, гардона, трихлорметафос-3 огтроделению не мешают,

2.2. Реактивы м. растворы

Ацетон, ч. ГОСТ 2603-63 -СН3СОСН3 Гексан, х.ч,, МРТУ 6-09-2937-66 - CH₃(CHj>)₄CH₃ Хлороформ, х.ч., ГОСТ 3160-51 -СНС1₃ Бензол ч.д.а., ГОСТ 5955-66 -

Ацетонитрил, ч., МР1У 6-09-G446 - CHjC}f Диметилформакид, ч., VPVf 6-09-20Б8-65 - НСО (CH₃)£

Хлористый натрий, х.ч. ГОСТ 4233-66 -^аС1 Хлористый кальций, х.ч., ГОСТ 4161-67 - CaC^ISHgO Сульфат натрия, безводный, ч.д.а. ГОСТ 4166-66 -А/а₃/^ 0₄

Уголь активированный марки КАД-молотый или СУ-А

Силикагель КСК с флюоресцирующей добавкой или пластинки "Силуфол-

uv-г54"

Окись алюминия, для хроматографии МРТУ 6-09-5296-66-4 - AI^O^ Проявляющие реактивы:

1. 0,55*-кьгй раствор 2,6-дибром--хлор хин он ими на в гексане

2.    1#-ный раствор 4-Ср-нитробензил)пиридина в ацетоне; Ю#-ный раствор тетраэтиленпентамина в ацетоне

3.    Смесь броыфенолового синего и азотнокислого серебра в ацето

не:

A.    0,5#-ный водно-ацетоновый раствор азотнокислого се-бра (I ч. воды : 3 ч. ацетона)

Б. 0,03 г. бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона, а затем разбавляют раствором А до 100 мл

B.    5#-кый раствор уксусной кислоты Азот особой чистота

Водород

54

Стандартные растворы валексона в ацетоне с содержанием 5 мкг/мл (для ТСХ) и в гексане с содержанием 0,5; 1*2; 5; 7; 10 мкг/мл (для Ш ),

59б,^Е-30 и 3% ХЕ-СО на хромаеорбо //(80-100 меш), силаниэирован-ный

256 полиэтиленгликольсукцинат на хроматонеУ-А^-Д*1С$ (0,16-0,20мм)

2.3.    Приборы и посуда

Хроматорраф Цпет-Юо или аналогична прибор с ТИД Аппарат для встряхивания

Ротационнып вакуумный испаритель или другой прибор для отгонки растворителей под вакуумом Хроматоскоп (хемоскоп) с излучением 250-280 н>*

Колбы конические со шлифами на 500 мл

Колбы круглодонные на 500 мл

/длительные воронки на 2л, 1 л и 0,5 л

Колбы мерные на 200 мл и 100 мл

Колонки для адсорбционной хроматограмм длиной 30 см, внутренний диаметром 15 мм Хроматографическая камера Камера для опрыскивания хроматограмм Пульверизаторы

Пипетки на 0,1 мл, I мл, 5 мл, 10 мл Почвенное сито Пикрошприц на 10 мкл

2.4.    Отбор и подготовка проб

Растительную пробу (овои^, фрукты, зеленую массу растений) измельчают ножом на кусочки 0,5x0,5x0,5 см и отбирают среднюю пробу 25 г.

Почву в естественно-влажном состоянии или воздушно-сухую просеивают через почренное сито и для анализа отбирают среднею пробу 10 г.

55

Проба воды - 100 ил.

2.5 Проведение определения

Анализируемые навески помещают в конические колбы емкостью 250 мл, пробы воды - в долительные воронки, куда добавляют по 10 г хлористого натрия.

Из растений валексон экстрагируют 100 мл смеси ацетона с водой (1:1), из почв - 50 мл смеси ацетона с 0,05 н водным раствором хлористого кальция (1:1). Из воды экстракцию валексона проводят хло-роформоы порциями по 120, 100 и 75 мл.₍ экстракта и(Ь>единнмт.

"Экстракцию инсектицида из образцов производят с помощью механического встряхивания в течение 30 мин. Растительные экстракты охлаждают в холодильнике или в смеси соли со льдом. Пробы отфильтровывают от растительных и почвенных остатков в делительные воронки через бумажный фильтр. Экстракцию повторяют еще два раза тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт подвергается очистке. Для ©того в делительную воронку прилипают гексан четыре раза по 20 мл. После встряхивания 3-5 мин и расслоения жидкостей собирают гексановую фракцию в круглодонную колбу, высушивают путем фильтрования через безводный сернокислый натрий. Объединенный гексановый экстракт концентрируют под вакуумом при температуре не выше 40° до объема 0,5 - 1,0 мл.

Пр:. определении методом ТСХ или в случав, если методом ПР( получаются "грязные" хроматограммы_f проводит дополнительную очистку. Это относится в основном к образцам из растительных объектов. Для этого в пробы добавляют 5 мл ацетонитрила (ацетонитрил можно заменить диметклфО]*'Ямидом, однако с первым растворителем очистка проходит значительно лучше) и доводит общий обьем до 50 мл водой. Пробы встряхивают 1-2 мин, далее производят переэкстракцию валёксока в гексан. С этой цель»? пр^бы гер-.нсслт я делительную воронку, ири/.и-%

вают 20 ил гексана, встряхиваю» 1-2 мин и после разделении слоев гексановый сливают в круглодонную колбу дли отгонки, фильтруя через безводный сернокислый натрий, а водно-ацетонитрильный еще два раза промывают гексаном. Объединенные гексановые окстракты концентрируют под вакуумом при 40° до 5 мл и проводят количественное определение.

В случае если проба нуждается еще в очистке, то следует применить колоночную хроматографию, а именно, пробу вносят в колонку (30 см х 1,5 см), заполненную слоем сернокислого натрия (2-3 см), окиси алюминия для хроматографии (3 см), активированного угля КАД-молотыЯ или СУ-А (Зсм) и безводного сернокислого натрия (X си). Предварительно через колонку пропускают 30-40 цл хлороформа для уменьшении сорбционной емкости. Из колонки валексон элюируют 100 мл хлороформа при отсасывании с помощью водоструйного насоса. Хлороформ удаляют под вакуумом, остаток растворяют в гексане «* определяют количество иалексона хроматографическими методами.

Пробы воды, проэкстрагированные хлороформом, если необходимо, то чистят подобным способом.

(1,3)

Условия определения тонкослойной хроматографией

Проба с помощью капилляра или микропипетки наносится на хроматограф ческую пластинку. Парралельно на пластинку наносят серию стандартных растворов с содержанием I, 2 и 5 мкг валексона. Хроматограмму развивают в системе гексан-ацетон (4:1), подсушивают на воздухе и обрабатывают одним из трех проявляюиртх реагентов.

1.    Хроматограмму опрыскивают 0,5%-ным раствором 2,6-дибром-^ -хлорхиконимина в гексане, а затем нагревают в течение 5-7 мин в термостате при П0°С. Валексон проявляется в виде оранжевых пятен на белом фоне. Нижний предел обнаружения 0,5 мкг.

2.    Хроматограмму опрыскивают 1%-кым раствором 4-(р-нитробензил)-пиркдина, нагревают в сушильном шкафу 3-5 мин при 110°С, затем снова

57

опрыскивают 10%-ным раствором тетраэтилонпентамина в ацетоне. Ва-лексон проявляется в виде сине-фиолетовых пятен на светлом фоне. Нижний предел обнаружения 0,0 мкг.

3. Хроматограмму опрыскивают бромфеноловым реагентом с последующим снятием фона в реьультате обработки пластинки 0%-ным раствором уксусной кислоты. Валексон проявляется в виде сине-фиолетоьых пятен на светло-жьлтом фоне. Нижний предел обнаружении 3 мкг.

Пластинка со слоем силикагеля, в который внесен флуоресцирующий краситель или пластинки "Силуфол- 1/г254" можно, не проявляя их, просматривать в хроматоскопе. Инсектицид определяют по тушению флуоресценции. Нижний предел обнаружения I мкг.

валексона в системе гексан-ацетон (4:1) на пластинках "Си-луфол" составляет 0,5 - 0,02.

Содержание валексона в исследуемой пробе вычисляют по формуле:

мкг/кг (мг/л), где

С - количество препарата, найденное по хроматограмме при сравнении со стандартами, мкг;

А - навеска исследуемой пробы в мг или объем волы в мл.

Условия определения газожидкостной хроматографией

Хро^тограф Цвет 100 или другой модели с ТНД.

Скорость протяжки ленты самописца^1 см/мин.

Рабочая шкала элокгрометра 20x10 д

CTeKJiHHHaH колонка длиной 100 см и внутренним диаметром 3 мм, заполненная хроматином //-А^-ДЮо    (0,10-0,20    *<)    с    5#^1С-30.

Температура колонки и испарителя I30°C. С; рость азота 26 а-./мин, водорода 15 мл/мин, воздухи 150 м.ч/мин. Время удерживания пнлвк-сона 3 мин 22 сек. Прочие ФОЛ выходят по же.

В хроматограф вводят 2 мкг. рабочего раствора, *imtUHOiTb де-

S5