ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ПРЕДАТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕН® МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ 3 ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1981

Гооударотвенная комиссия по химичеоким средотваы борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чноть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экопертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Ст р*

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в риса и вода газожидкостной

хроматографией .................. 93

7# Методические указания по определению матилнитрофооа, фенитр.ооксона и п-нитрокрезола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

олое.......... 103

8. Энзимно-хроматографический метод определения фоо-фороргэнических пестицидов л рэотительных продуктах и биооубстратах.................. 109

Азотсодержащие пестициды

1. Производные мочевины* гуанидина, дитио-карбаминовой кислоты, анилиды карбоновых кислот, нитропроизводные, дитиокарбаыаты

I. Методические указания по определению дуада в растительном материале, почве и воде хроматографией в

тонком слое ...... .............. 118

2♦ Методические указания по определению остаточных количеств гербицида ыалорана в почвах с различным содержанием гуыуоа методом ТОК........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств НЕ-166 в огурцах хроматографией в тонком

слое и фотометрическим методом....... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств твиде к са в воде и почве.......... 136

5.    Методические указания по определению ФДН t/^/'-ди-

метил-//-(3-хлорфенил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной хроматографии ........ 139

6.    Методические указания по определению дитэна М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ...... 149

П. Гетероциклические соединения -

7.    Методические указания по определению базаграна в

воде, почве, зерне и растительном материале ....    152

ЗГ5

Стр,

8.    Методичеокие указания по определению фунгицида бай-

летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях, плодах томатов и огурцов . *........*.    .    .    159

9.    Методические указания по газожидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10. Методические указания по определению диквэта в семенах подсолнечника и масле из семян подсолнечника

опектрофотоыетричеоким методом .......... 174

II* Методические указания по определению ыетазина в воде, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком олое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств оимм-триазиновых гербицидов (симазина, зт-рэзина, пропазина, прометрина, оемвронз, мезорани-ла, метазина, метопротрина) в почве газожидкоотной

хрома тогрзфией.................. 188

13.    Методические указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слое..................... .    198

14.    Методические указания по определению ронстарч (ок-

сидиазона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии......... 205

15.    Методические указания по определению тачпгьрена в

воде методом тонкослойной хроматографии ...... 209

16.    Методические указания по определению тероацилэ в

эфирных маслах и эфиромэсличноы    сырье    методом    газожидкостной хроматографии........... .    214

I?. Методические указания по определению трифоринэ в

воде....................... 220

18.    Методические указания по определению остаточных ко

личеств текто(тиэбэидазолэ) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографией ............ 227

19.    Методические указания по определению остаточных ко

личеств фонаэоне в почве, воде, свекле и растительных объектах газожидкостной    хроматографией    ....    234

Прочие леотиииды

I* Методические указания по определению остаточных

количеств хлората магция полярографическим молодой ••• 243

2.    Методические указания по определению нортрода в

ьодз, черноземной почве и сахарной свекле............    2v8

3.    Методические указания по определению содержания

общей ртути в гное, яйцах, рыбе, молочных продуктах, почве ..... *    Zxj

Бактериальные пестициды

1.    Методические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореопентныи методом .............................................. 268

2.    Методические указания пи определению вктаницина А

в воздухе методом тонкослойной хроматографии ......... 2?6

3.    Методические указания по определению полиэдров* ви

руса ядерного полиэдроаа капустной совки на растительных объектах иммунофлюоресдентньш методом . *..... 260

тов в воде, почве и растительном материале    289

2. Методические указания по определению актеллика

растительной продукции, почве и воде ........ 296

Настоящие методичеокие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР* (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко)*

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.ИЛарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

УТВЕРЖДАЮ Заместитель Главного Государственного врачи СССР

_{_}______А.И,Зайченко

19 октября 1С?9г № 2С89-79-

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИНСЕКТИЦИДОВ НЕПРЯМЫМ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНТНШ МЕТОДОМ

Известный в настоящее время микробиологические препараты для защиты растений могут быть вирусной, бактериальной и грибной природы* Все вирусные препараты, получаемые в промышленных иди лабораторных условиях, содержат в качестве действующего начала випусные включения типа полиэдров и Ли гранул размером от 0,2 до 5 и более микрон.

Бактериальные препараты, такие как энтобактерин, дендро-бациллин, инсектин, гоыелин и некоторые другие, имеют В своем составе опоры и кристаллический токсин, размеры которых лежат в пределах разрешения обычного светового микроскопа. Грибные препараты боверия и внтомофгории также имеют корпускулярную природу, так включают прежде всего споры, а также конидии, ги-фальные и мицедиадькые тела грибов.

Все биологические препараты в большинстве случаев выпускаются в виде порошка светло-оерогс цвета, состоящего из соответствующих компонентов действующего начала и наполнителя (каолин кли тальк).

Принцип уетода

Метод йммунофдуорбсцекцид, разработанный в 1940 году Куксом с сотрудниками ( Coonе. ас al. 19-11,    )    заключается

в том, что в моле куду антитела вводится ^сь Ор о'хро/*!, Ростворзд

Для яыодунязации используют молодых кроликов весом 2,5 -3 кг. В случае работы о вирусными препаратами в количестве антигенов служат высоко очищенные дифференциальным центрифугированием вирусные включения: полиэдры или гранулы. Способ иммунизации - внутривенный. Схемы иммунизации кроликов приведены в таблицах I и 2,

Через десять дней пооле последней инъекции проводят тотальное обескровливание кроликов. Кровь собирают в стерильные пробирки. Для лучшего отслаивания сыворотки пробирки о кровью помещают на 30 минут в термостат при температуре 37°. Пооле этого сгусток крови отслаивают и оставляют на сутки при 4° для ретракции сгустка. Затем сыворотку отсасывают от сгустка, переносят в стерильные флаконы и центрифугируют в течение 10-15 минут при 800-1000 об/мин. для отделения клеточных компонентов. Пооле этого сыворотку разливают в стерильные ампулы, добавляют консервант (мертиодят, борная кислота) в концентрации 1:10000 и хранят до употребления в холодильнике при 4° или в замороженном виде при температуре -20°. В случае централизованного производства проводят лиофилизацию сывороток.

Для получения иммунных сывороток к действующим компонентам бактериальных препаратов (дендробацилдин, октобактерин) целесообразно использовать методику, предложенную В.И.Полтевым (1969).

Сыворотки готовят к вегетативным формам бактерий. Для зтого бактерии выращивают при температуре 28-30° в течение 8 часов, консервируют 5^ным формалином и хранят в холодильнике.

Перед иммунизацией кроликов взвесь микробов разбавляют раствором 9,555-ного хлористого натрия до оптического стандарта,

271

Тебя»ца 1

Схема вцыушззация хро тазов ддерньшн шявадраыи иэ непарного шедводрдда х ходусткой совах

ДО инъекнй	12 3 4 5	6
Количество вводимого материале в мд/тнто взввол 250 м ян.полиэдров в мд)	1 2 3 5 5	5
Интервалы в даяк	3 3 3 7	7
Таблица 2 Схема иммунизации кроликов гранулами as овимой совки
ДО инъекций	х а а 4 5	6
Количество вводимого бед~ ка в кг (воздушно сухие гранулы).	10,0 10,0 20,0 CQ,G 30,0	30,0
Интервалы в днях	3 3 3 7	7

соответствующего 2 млрд* мдкробншс тел* Антиген вводят внутри-вешю кролику через кэздае 5 дней цо схеме: 1-е введение - 0,5 мл, 2-е I, 3-е - I, 4-а — 1*5 и 5-е 1,5 ыа. Через 5-7 дней у кроликов берут кровь и подучают сыворотку.

Ход аналдз§

На иоле, обработанном биопрепаратом, берется 10 листьев или стеблей растений* В лаборатории на поверхность растительного субстрата, о поменцью грозной пипетки, наносят 2Й-нпп раствор органического стекла В ацетоне, который при комнатной температу* 272