МУ 2068-79
Методические указания по определению фунгицида байлетона методом ТСХ в почве, корнях, зеленых листьях, плодах томатов и огурцов

государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

■■ ■ . '■ •

■"УТВХВДЛЮ"

Заместитель Главного Государственного

санитарного врача СССР S; ‘ И

А.И.Зайченко —........-    тт

₍ . « т«’л ' л    1979г    #    2068-79

- I⁽J. октября ---

’ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКА.ЗЛНИЯ ПО • ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФУНГИЦИДА БАЛ ДЕТОН А МЕТОДОМ- ТСХ В ПОЧВЕ, КОРНЯХ ЗЕЛЕНЫХ ЛИСТЬЯХ. ПЛОДАХ ТОМАТОВ И ОГУРЦОВ

I. Краткая характеристика препарата

' V    ‘    ■    ■    \

Байлетон (синоним: триадимефон) - бесцветный.поросок, не имеющий запаха, эффективен против большого спектра грибов, особенно^ мучнисторосяных. ,.    .

Активное вещество байлетона: 1~(¹4хлор-фенокси)3,3 диметил -I-(IH-I.2₍4-триа.золил-1)-2-бутанок.

~%о-сн-со~с(сн^

А/    '

Молекулярная if 293.7.' Температура плавления: 82,О^С. Растворим в воде (0,026г. действующего вещества на 100г.'раствориаеля при 20°С). Хорошо растворяется в большинстве органических растворителей. Стабильность: не разлагается в течение: 2¹4 часов при 20° в.0,1н ,Н250^ и /VaOH.

Байлетон, применяемый в рекомендуемых кормах расхода,нетоксичен. . ЛД50 для крыо при'оральном введении равно 25С0 мг д.в./кг ' 'iVV сизого веса., Действующее начало фунгицида безвредно для пчел. Еай-

детон рекомендуется в форме 5 и 25? смачивающегося порошка. В отих нормах раохода препарат, кефитотохсичен.

-    1^п :    \    . .-.V3.4V л:    Г    '

2. Методика определения остаточных;количеств байлетона в. почве, корнях, зеленых листьях, плодах томатов и огурцов с помощью тонкослойной хроматографии.    .....    . •    •

2.1.    Основные полокения.

2.1.1. Принцип метода.    у.’.

Метод основан на экстракции препарата, из анализируемой пробы ацетоном, очистке окрашенных.растворов порошкообразным углем, упаривании очищенных экстрактов и хроматографировании в тонком слез.

. силикагеля иди ка пластинках "силуфол².

Рекомендуются'три равнозначных подвижных фазы: гексан и ацетон ;²• (72:28); изооктан и ацетон (70:30); бензол и этилацетат (90:10). Пялт байлетона проявляются на пластинке после опрыскивания смесью бромфенолбво-синего с азотнокислые серебром и затем лимонной кислотой.    -

2.1.2. Метрологическая.характеристика метода:

Диапазон определяемых концентраций - 0,05-20 мкг. .•

Предел обнаоужения для томатов - 0,С5мг/кг, для огурцов -0,08. мг/:сг. .    . • • i

Размах варьирования: почва - 10?, листья, корни - 20?, пло-. ДЫ - 20?i    '-у.²'    '■

Среднее значение определения: почва - 90?, листья, корни -79?, плоды - 75?.    .    •    '

Число параллельных определений - 6.    ²    ■ ,_v.•

Стандартное отклонение: почва - 1,8?, листья, корни -3,5?,

. плоды - 3.7?.    \    V>    v-    .    ²■'•.    ’•    -

Относительное стандартное отклонение: почва- 2,0, листья, корни - ^,³3, плоды - 4,93.²

V,/ \ Определению могут мешать фосфороргсшические соединения (рогор, например), имеющие близкое значение величины R| .

Н-гексан. х.ч. ТУ 6-09-3375-78 Иэооктак. ГОСТ 4374-48

Кальция сернокислый CaSO^HgO в течение 1-2 суток прокаливают при температуре 180°С и просеивают через сито размером 100 меи. Хранят в склянке с притертой пробкой.

Метилоранж. ГОСТ 10816-6*1

Натрий сернокислый безводный, чда. ГОСТ 4166-66 Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-66

Проявляющие реактивы: I) 0,4# ацетоновый раствор ;_:омфеноло-во-синего с 2% водным раствором азотнокислого серебра в равных объемах. Для осветления фона пластинки после опрыскивания проявителем I готовят 2) 2% водный раствор лимонной кислоты (можно уксусной). Лимонная кислота, чда. ГОСТ 3652-69 Силикагель марки "КСК".

Смесь растворителей: гексан и ацетон (72:28); кэооктан и ацетон (70:30); бензол и этилацетат (90:10).

Соляная кислота, х.ч. ГОСТ 3118-67 Спирт этилозый. ТУ 19П-39-69 Спирт метиловый, х.ч. ГОСТ 6995-67

Стандартный раствор байлетона в ацетоне или этиловом спирте с содержанием 200 мкг/мл.

Уксусная кислота, х.ч. ГОСТ 61-69 ХлороЛорм, х.ч. ГОСТ 3i60-5I Этилацетат, х.ч. МГТУ 6-09-6515-70

2.3. Приборы и посуда

Аппарат для встряхивания. АЗУ-1 Баня водяная. ТБ-110 Воронки делительные.

Зоронки химические.

Камера для хроматографирования.(любой сосуд с притертой крышкой).

Колбы мерные емкостью 2S мл. A-IA

Колбы конические, емкостью 250 мл с приалифованыыми пробками. КН

Микропипетки для нанесения стандартных и испытуемых растворов.

Пластинки для хроматографии "силуфол" размером 50x150 км производство Чехословакии.

Пластинки стеклянные размером 50x150 мм с тонким слоем силикагеля.

Пульверизаторы для опрыскивания пластинок.

Ротационный испаритель. ИР-1

Сушильный шкаф.

Цилиндры мерные на 5, 10. Г00 мл.

Часовое стекло.

2.4. Подготовка к определении.

2.4.1. Получение химически чистого байлетона.

Из торговой фирмы 25# смачивавшегося порошка байлетона готовят насыщенный раствор в этиловом спирте, помещают его на водяную баню при 35-40°С и оставляют до полного растворения препарата. Затем растзор отфильтровывают и упаривают до небольшого объема и оставляют в холодильнике для кристаллизации. Выпавшие кристаллы отфильтровывают. промывают эхлааденным этиловым спиртом и высушивают на воздухе.

Дополнительным критериев степени чистоты препарата служит хроматографическая индивидуальность, при определении которой стандартные растворы, будучи нанесенными на пластинку в количестве 5-10 мхг, нс содержат посторонних пятен после хроматографирования.

2.4.2. Приготовление пластинок.

Пластинки тщательно моются хромовой смесью, промываются проточи водой, затем дистиллированной и сушат. Покрывают сорбционной смесью, состоящей из 30г. силикагеля, 5г. сернокислого кальция к 100 см** воды. (Силикагель измельчают, пропускают через сито и промывает с соляной кислотой, уксусной кислотой, дистиллирован-пол водой до нейтрально/, реакции на кет/.лоранл. Один раз промывают метанолом, высувивалг.2 часа на воздухе и 4 часа сушат в су-з.ильном зкофу при 12С°С. Получают силикагель с III степенью активности no i.-poiiM.iuy). Сушат ‘пластики i горизонтальном положении в течение iчас. при комнатной температуре и хранят в эксикаторе над С-.Сх^..

2.5. Проведение спреде >:е г.и я.

2.3.1. акстрлкда.

Почва.ICO г. воздушно-сухой, просеянной через сито с диаметром 1-2 мм, почвы заливают ацетоном до покрытия пробы и оставляют на ночь в колбе с притертой пробкой или экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение ?-х часов. Полученный раствор отфильтровывают. Остаток в колбе и на фильтре промывают небольшими порциями растворителя. Общий экстракт упаривают до небольшого объема и хроматографируют. Сильно окрашенные растзоры обесцвечивают путем добавления 5-10 г. активированного угля.

Растительный материал.10 г. листьев, 20 г. корней или побегов, 50 г. плодов растирают с кварцевым песком и безводным сернокислым натрием, заливают тем же растворителем (ацетоном) и обрабатывают аналогично пробам почвы. После этого добавляют уголь, вытяжку, для лучшего ее обесцвечивания, выдерживают 30 мин. на водяной бане при 35-40°С, затем перемешивает на аппарате для встряхивания в течение I часа. Раствор отфильтровывают, высушивают сульфатом натрия, упаривают и хроматографируют.

Примечание:при работе с оводненными плодами после выпаривания ацетона довольно часто на дне колбы остается вода, которая при 70°С не выпаривается. 3 ^аком случае надо:

1.    Добавлять небольшие количества ацетона (через б/в сернокислый натрий), взбалтывать и снова выпаривать. Так 2-3 раза до окончательного объема 0,1 мл.

2.    Водный остаток с насыщенным раствором попаренной соли (/VaCI) добавить хлороформ, равный по объему жидкости и экстрагировать препарат в течение часа на аппарате для встряхивания. Отделить хлороформ, пропустить его через б/в сернокислый натрий, а к жидкости снова добавить такое же количество хлороформа и еще раз поставить на качалку на 30 мин. Экстракты объединить, выпари-ь и хроиато графировать.

d .5.2. Хроматографирование.

Сухие остатки растворяют в 0,1 мл (4-5 капель) ацетона и наносят на хроматограмму. Обмывают колбу 3-4 раза по 0,1 мл растворите ля и опять наносят так, чтобы размеры пятен не превышали 5-6 мм. Слева и справа от пробы наносят 3-5 мкг стандартного раствора Пластинку высушивают и опускает в хроматографическую камеру. Приготовляют одну из подвижных фаз. наливают на дно камеры л опускают пластинку. Готовую пластинку остагляют на воздухе для лр.сушки и опрыскивания проявляющим реактивом.

1оЗ

Байлетон проявляется, как правило, в виде двух сиьих пятен на желтом фоне пластинки с R|l -0,22 и -0,56 на пластинке ^Иси-луфол"; на силикагеле соответственно - 0,16 и 0,44.

2.,6. Обработка результатов анализа.

Полухоличественноз определение проводится путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов. Для получения количественных данных содержание байлетона определяют путем измерения площади пятен на хроматограмме с помощью кальки, протертой вазелиновым или растительным маслом. Площад^- пятка высчитывают методом наложения кальки на миллиметровую бумагу.

Расчет результатов анализа производят по формуле:

X ..й.х.З п_Еоок-    _{(    где}

Б х Jстандарта

X - содержание препарата в пробе в икг/г или мг/кг веса;

А. - количество препарата, найденное путем визуального сравнения размера и интенсивности пятен пробы и стандартного раствора в ккг;

3 - вес или объем исследуемой пробы;

5пробы * плогадь лятна анализируемой пробы d мм^;

^стандарта " ^ПЛ0В^Д^Ь пятна стандартного раствора в юг.

2.7. Требования безопасности.

Необходимо соб. юдать требования безопасности обычно рекомендуемые для работы орхиническими растворителями, концентрированными кислотами.

Строго рук ^водстзозаться "Правилами по технике безопасности в химических лас-раториях".

Принечануц.ДОК и FULK байлетона не установлены.

С.З. Литература, ореспс Д. L.athode ииг gaschroraatographischen Besciraaing der ir.IJc Fabcrioasol, Fluotriaazol und TriodiiscfOD in Pflaojiaa »in<l IV*dc£- •r'/liim.eaichutz !«ochx. Boyer, 1977. j50, Is 55-71 •

i6»i

Настоящие методические указания по определению остаточных количеств фунгицида байдетона в почве, корнях, зеленых листьях, плодах томатов и огурцов методой ТСХ разработано

1)    Бажановой Ниной Васильевной - ст.н.с. с лаборатории биохимии растений и вредных организмов института защити растений »ЧСХ Армянской ССР.

2)    Аветисян Каринэ Вараэдатовной - мл.н.с. в лаборатории биохимии растений и вредных организмов института защиты растений КСХ Армянской ССР.

3)    Папоян Фрунзе Аптаваздовичем - зав. отдела фитопатологии института защиты растений МСХ Армянской ССР.

U5

1

г    \    }¥

'

2

²    2.²-..    Реактивы и раствори    ,

■    Активированный    порошкообразный    уголь    (любой    марки)-.    ■

3

А.ц :ток, х.ч. fW 2603-63    •

Vi'    IW’r «йчЛ »ТП