Купить МУ 1544-76 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее
Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.
Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"
Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.
Предисловие
Краткая характеристика препаратов
Методика определения фталофоса и фозалона в воде, рыбе и фозалона в кормах и мясе. Основные положения
Реактивы и растворы
Приборы и посуда
Подготовка к определению
Ход анализа
Обработка результатов анализа
Приложение 1. Отбор проб растительного материала на корню
Приложение 2. Отбор проб мяса и внутренних органов убойных животных и проб рыбы
Приложение 3. Отбор проб материалов со складов, баз, хранилищ, транспортных средств
Приложение 4. Отбор проб лекарственных и ароматических растений
Приложение 5. Выписка из перечня "Допустимые остаточные количества пестицидов в пищевых продуктах" и дополнения к нему, утвержденные Минздравом СССР 24.03.1977 г. № 1735-77, 24.08.1979 г. № 2052—79 и 21.04.1981 г. № 2390-81
Список сокращенных названий научных учреждений, встречающихся в справочнике
Предметный указатель
Дата введения | 01.01.2021 |
---|---|
Добавлен в базу | 01.02.2020 |
Актуализация | 01.01.2021 |
20.12.1976 | Утвержден | Зам. Главного Государственного санитарного врача СССР | 1544-76 |
---|---|---|---|
Разработан | ВИЭВ | ||
Издан | Колос | 1983 г. |
Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРО -КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Под редакцией
доктора биологических наук М. А. КЛИСЕНКО
МОСКВА «КОЛОС» 1983
ББК 44 М54
УДК 632.95.028(03!)
Члены редколлегии: Л. Г. Александрова, Д. Б. Гиренко,
А. А. Калинина, К. Ф. Новикова, Т. М. Петрова, В. Н. Полякова, В. И. Федотова. Г. А. Хохолькова.
Методы определения микроколичеств пестицидов в М 54 продуктах питания, кормах и внешней среде: Справочное издание/М*во сел. хоз-ва СССР. Гос. комис. по хим. средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками; Под ред. М. А. Клисенко. — М.: Колос, 1983.— 304 с., ил.
В справочник включены официально утвержденные Министерством здравоохранения СССР методы определения остаточных количеств хлорорганнческих. фосфорорганичсских, сим.и-триазнноных, ртутьорганических и других групп пестицидов, а также биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Для специалистов химических лабораторий.
м 3802020000 — 133 035(01)—83
158—83
ББК 44
632
© Издательство «Колос», 1983
3 С-
Овощные корнеплоды (морковь, петрушка, сельдерей. с толовая свекла, редис, редька и ДР.) |
Крупные — 3 кг. мелкие — I кг, ранние —0,25—0,5 кг Метод ПД. корни, а для овощей, используемых в ранний период развития (петрушка, столовая свекла). целые растения |
Отбросить несъедобные части растений, остатки материл.'л вымыть, обсушить, крупные овощи почетвертовать и отбросить */,. Пробу измельчить, перемешать и выделить средний образец |
Me ком***»**» «.«■wi пол* ua imi.tvm дли |
Материал |
Способ отбор* гроб |
отборе Проб | ||
6-10 га |
Капуста цветная |
Метол Г1Д, нс пенсе 10 |
растений, не менее 2 кг | ||
6 га |
Капуста кольраби |
Метод ПД, не менее 10 |
растений, не менее 0,5 кг | ||
Б га |
Капуста брюссельская |
Метод ПД. учитывая |
5 г а |
головки, растущие на рваной высоте и равных частях растения, не менее 10 растений | |
Лиственные овощи (са- |
Метод ПД, не менее | |
лат, шпинат, щавель) |
10 растений | |
5 га |
Укроп |
Метод ПД, только |
листья |
Величина средней пробы или исходного обрита* |
ПОДГОТОИК* Среднего образца |
Иглнчам среднего обрами. кг |
срезать и отбросить поверхность предыдущего среза, отбросить несъедобные листья, измельчить и выделять средний об- | ||
2 КГ |
Отбросить иесгедобныс части, остальное измельчить, перемешать и выделить средний образец |
0,25 |
0.75 кг |
Отбросить несъедобные части, остальное измельчить, перемешать и выделить средний образец Измельчить, перемешать, выделить с ре..-кнй образец |
0.5 |
Не менее 1 кг |
0,25 | |
Салаг —0.5 кг Щавель —0.25 кг |
Отбросить несъедобные части, растение вымыть, обчистить, измельчить и выделить средний образец |
0.25 |
0.25 кг |
Отбросить непригодные части, измельчить, перемешать и отвесить средний образец |
0.25 |
| ||||||||||||
Луковичные растения |
10 га |
Лук. чеснок. лух-порсЛ |
Метод ПД, в полной зрелости |
Лук, лук-порей — 1 кг, чеснок — 0.5 кг |
Отбросить несъедобные части, растения измельчить, перемешать и отвесить средний образец. Для лука и лука порея с каждой штуки взять половину |
5 г* |
Лук-резанец, лук-батуи, лук-порей в ранней стадии развития |
Метод ПД. целые растения |
Лук, лук-порей — 0.5—I кг, .тук-резанец, лук-батуи— 0,25 кг |
То же |
5 га |
Бобовые овощи (фасоль, горох, боб) |
То же |
0,5—1 кг бобов |
Семена выделить, измельчить и выделить средний образец |
50 га |
Фасоль «зеленый боб» |
> » |
0.5 кг |
Целые бобы измельчить, перемешать и выделить средний образец |
20 г*/30 т |
Помнзоры, перси |
» 1 |
Мелкие овощи — 0,5—2 кг, крупные овощи — 2 кг |
Овощи вымыть, измельчить и выделить средний образец |
ic 3 |
|
П иймяпми | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
• Дл« ыж' инкхо С крупным! плодами проб* должна Cut», не менее 1,5 кг. |
Приложение 2
Отбор проб мяса и внутренних органов убойных животных и проб рыбы | |||||||||||||||||||||||||
|
Материл |
Способ отбора |
Величина средней пробы иди исходного обрами |
Проба |
Велнчипа среднего обрезай, кг | |
Яйца |
В хозяйстве в ареале отбора проб берется по 10 и 20 яиц с определенных пунктов скупа. На птицефабриках — по 5 яиц из каждой пар-ТИМ |
20 ЯИЦ |
Каждый исходный образец составляет средний образец |
20 яиц | |
Молоко |
Со сливного пункта 500 ил. От коров а определенном хозяйстве по 100 мл молока |
500 мл |
То же |
0.5 | |
Рыба |
При массе рыбы менее 0.1 кг берут пробу от нескольких рыб массой 0.5 кг. перемешивают и отбирают среднюю пробу. При массе рыбой |
0.5 кг |
Среднюю пробу п мают за средни раэец |
рини-Й об- |
0.5 |
0,1—1 кг отбирают целые зкземп-ляры. При массе 1—2 кг берут одну продольную часть лолормны рыбы. При массе свыше 2 кг вырезают образец со средней части рыбы 100-200 г | |||||
Икра |
От одной партии берут три образца по 100 г с каждой бочки (ящика) |
0.1 кг |
То же |
0.1 |
Отбор проб материалов со складов, баз, хранилищ, транспортных средств | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
Mukhumm аглнчик* дли отбор* ПС«> |
Матетлал |
Способ отбора про’ |
Величии* средней пробы или ИСХОДНОГО обр*ТЦ* |
Подготовка среднего образца |
Величина среднего образца, кг |
Материал в кусках (картофель, свекла и л |
»- д.) | ||||
100 т |
В хранилищах |
Метод ПР, с верхнего, среднего и нижнего слоев |
7 кг |
Материал иочетвертоватъ, взять 1/4 часть, перемешать, измельчить и выделить средний образец |
0.5—1.0 |
Одно средство транспорта |
В средствах транспорта |
Метод ПР. с верхнего, среднего и нижнего слоев Соломоподоб |
3 кг ный материал |
То же |
0.5—1,0 |
До 100 т |
Непрессован ни А |
Метод ПР, на расстоянии 50 см от верха и низа из 20 мест |
2 кг |
Измел.чить, перемешать и выделить средний образец |
0,1—0,2 |
Др 100 т |
Прессованный |
Метод ПР. из тхжов посте снятия с них проволоки Брать горстью с трех разных мест, стараясь не ломать растений |
2 кг |
То же |
0,1-0,2 |
Фрукты и овощи свежие |
Метод ОШ, из различных упаковок, ящиков и т. д. из разных слоев |
Из упаковок |
Как в приложении 1, овощные культуры и фрукты |
0,5—0,25 | |
Яблоки, груши, ПСрСЯКИ, айва |
То же |
10 кг (не менее 100 шт.) |
Как в приложении 1, семечковые фрукты |
0.5 | |
Абрикосы, сливы |
» 1 |
4 кг (не менее 100 шт.) |
Как в приложении 1, вишни. черешни, сливы |
0,5-0,25 | |
Черешня, вишня, виноград, земляника |
» » |
4 кг |
Как в приложении 1, вишни, черешни, сливы, виноград |
0,5-0,25 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Овощи и фрукты сушеные |
ООО упако |
Овощи и фрукты |
Метод ПР, с трех слоев |
1-3 кг |
Кусочки или брикеты из |
вок |
в виде кусочков |
мельчить, перемешать и выделить средний обра | ||
зец | ||||
Овощи и фрукты |
0.6 кг |
То же | ||
ь виде порошка и сушеной зелени |
Ммсгим&льиая величин* для отборе проб |
Материал |
Способ отбора проб |
Величина среднее пробы или исходного обрахца |
Подготовка среднего образца |
Величина среднего образца, кг |
Овощи и фрукты в брикетированной виде |
Метод ВС. брикеты массой более 1 кг — отрезать сектор 1—2 см от крася, брикеты массой менее 1 кг — по одному брикету |
1—3 кг |
Кусочки или брикеты измельчить, перемешать и выделить средний образец |
0.25 |
Пищссш продукты в жидкой форме | |||||||||||||||||||||||
|
Пищевые продукты мазеобразной и твердой консистенции | ||||||||
|
Повышение благосостояния народа всегда находится в центре внимания КПСС. Об этом свидетельствует разработанная в соответствии с решением XXVI съезда партии и одобренная майским (1982 г.) Пленумом ЦК КПСС Продовольственная программа СССР на период до 1990 года. Одной из важнейших задач этой программы является развитие материально-технической базы агропромышленного комплекса, что предусматривает, в частности, расширение производства высокоэффективных средств защиты растений и увеличение их поставки сельскому хозяйству. Более широкое применение химических средств защиты растений позволит получать большую урожайность сельскохозяйственных культур, улучшит качество выращиваемой продукции и условия ее хранения.
Однако если неумело использовать химические средства защиты растений, то остатки пестицидов могут попасть в продукты питания, корма и объекты окружающей среды. Поэтому правильному применению пестицидов в нашей стране, как и вообще охране окружающей среды, уделяется особенно большое внимание. Научно обоснованной программой охраны природы в СССР явились постановления ЦК КПСС и Совета Министров СССР «Об усилении охраны природы и улучшении использования природных ресурсов» (1972 г.) и «О дополнительных мерах по усилению охраны природы и улучшению использования природных ресурсов» (1978 г.), которые директивно обязывают вести контроль за остатками пестицидов в продуктах питания, воде, почве и воздухе. Для предотвращения загрязнения окружающей среды пестицидами введено строгое регламентирование их применения, совершенствуются технология получения и применения пестицидов и препаративные формы их. Одно из обязательных требований, которое позволяет включать пестициды в список препаратов, разрешенных к применению, является разработка методов определения их остатков в продуктах питания, воде, почве и воздухе.
В предлагаемой книге представлены методические указания по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, разработанные спе-циалистами-аналитиками различных министерств и ведомств. В разработке данных указаний принимали участие: Т. Г. Аббасов, В. Д. Агарков, С. Л. Акоронко, Т. В. Алдошина, И. А. Антонова, Ж. А. Арутюнян, Г. У. Аслалян, Э. И. Бабкина, Ю. С. Баранов, Г. А. Бегунов, А. Б. Белова, С. Г. Билуши, Н. П. Бирюков, Ц. И. Бобовникова, 3. Н. Богомолова, М. Ф. Болоховец, К. А. Большакова, Г. С. Борисов, А. М. Ботвиньева, Л. И. Бублик, Г. Т. Брюшнина, Н. В. Букина, А. Л. Бурштейн, А. С. Василенко, Л. В. Васильковская, Р. Д. Васягина, Л. В. Воронин, И. В. Воинова, К. А. Гар, С. Г. Геворкян, В. М. Гезиков, Г. Н. Георгиева, Д. Б. Гиренко, И. Н. Гладенко, Н. И. Глембицкий, В. Е. Горбунова, Р. С. Горенштейн, В. А. Давтян, Э. Б. Данилова, Е. Г. Даурова, В. Ф. Демченко, А. В. Дибцева, Т. А. Евстегнеева, В. В. Егоров, В. В. Ермаков, А. В. Жарков, В. Н. Жуленко, А. Ф. Заболотный, И. Ш. Заманская, А. И. Затула, И. 3. Зисерман. 3. Златьев, А. И. Зорсва, Т. И. Зубко, Л.Н. Ка-вецкая, И. Н. Карпова, У. С. Кашимов, В. И. Кириченко, Н. И. Киселева, М. А. Клисенко, Е. С. Ковалева, А. Ф. Конюхов, В. В. Королев, Ф. И. Копытова, Е. И. Косачева, И. А. Кочеровская, В. И. Кофанов, И. Ш. Кофман, А. Н. Крылова, О. С. Кухтина, В. В. Лещев, Л. И. Лещинская, С. А. Ликунова, А. М. Макеева, О. А. Малинин, И. Н. Матвиенко, И. Л. Меерзон, Ф. Р. Мель-цер, Л. Д. Микадзе, Г. В. Миронюк, Н. А. Мовсетян, В. В. Молочников,
Мнхгмыаль*»» величии* для отбор* проб |
Матерная |
Способ отбор* проб |
Величии* средней пробы ИЛИ неходкого Обрило* |
Подготояк» среднего обрило* |
Величин* среднего обрив*, кг |
Пии |
\гше продукты в упаковке (консервы, товар в бумажной или пластмассовой упаковке, в мешках и |
от. д.) | |||
Сгущенное молоко, джем, повидло и др. |
Метод ПУ |
1 банку от варки или 2 кг |
В случае взятия 1 банки она составляет средний образец, а других случаях перемешать н выделить средний образен |
0,5—1 | |
Мясные консервы |
То же |
1 кг |
Измельчить, перемешать и выделить средний образец |
0.5 | |
Другие товары (мука, крупа, чай, кофе и др.) |
> 1 Продукты в ку |
1 кг сках без упаковки |
Удалить упаковки, перемешать, если нужно, измельчить н выделить средний образец |
0,25-0,5 | |
Мясопродукты (ветчина. бекон, сало, колбаса и др.) |
Метод ИР |
0.5 кг |
Отрезать исходные образцы массой 10 г с разных единиц продукции, измельчить и перемешать, средняя проба составляет средний образец |
0,5 | |
Сосиски и сардельки |
Метод ОШ |
0.4—0.5 кг |
Отделить как исходные образцы сосиски и сардельки, ие нарушая их целостности |
0.4—0,5 | |
Твердый сыр |
Метод ПР |
0.05-0.1 кг |
Исходные образцы измельчить, перемешать, они составляют средний образец |
0,05-0,1 |
Л. П. Моргунова, Г. К. Морина, Ю. Ф. Моряков, В. И. Мочалов, В. И. Мурзой А. А. Непоклонов, И. П. Нестерова, К. Ф. Новикова, Л. В. Новикова, Н. И. Пав лова, Ф. И. Патрашку, К. Н. Пашкевич, С. Д. Павлов, Т. М. Петрова Н. В. Перетолчин, Р. Д. Петухов, М. С. Петросян, А. Л. Перцовский, И. И. Пи лснкова, М. В. Письменная, Т. В. Пластинина, Л. Р. Полищук, В. Н. Полякова Н. Г. Попова, Н. Я. Пестовский, Л. С. Прииутина, IO. А. Присмотров Н. В. Птицина, У. Ф. Пулатов, Г. Г1. Пушкина, Б. А. Рехтер, Л. Д. Рузанкова И. И. Ряженов, П. А. Самгин, Э. О. Сахкалян, В. А. Силаев, М. А. Стемпков ская, Л. С. Самосват, Л. А. Смирнова, А. А. Сиверина, Л. К. Слепова Ж. С. Степанян, Н. Г. Стеланченко, В. В. Стеценко, Г. А. Таланов, С. М. Ти хомиров, Г. А. Трондина, Г. П. Угрюмова, А. Д. Фатьянова, Ь. Ф. Филимонов М. М. Филимонова, Л. А. Хилик, Л. И. Хлюпнна, В. Д. Чмиль, Д. И. Чканни ков, Л. Д. Чудакова, Э. П. Чурпий, Н. И. Шадрин, А. М. Шмигидина А. И. Шумкова, 3. Ф. Юркова.
Методические указания апробированы группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Министерства сельского хозяйства СССР, одобрены лабораторным советом при Министерстве здравоохранения СССР и утверждены заместителем Главного государственного санитарного врача СССР в качестве официальных.
Методические указания предназначены для контроля за содержанием остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктах, кормах, объектах окружающей среды агрохимическими, ветеринарными, контрольно-токсикологическими лабораториями Министерства сельского хозяйства СССР, санитарно-эпидемиологическими станциями и научно-исследовательскими институтами Министерства здравоохранения СССР, лабораториями Госкомгидромета СССР, а также лабораториями научно-исследовательских институтов других министерств и ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
У твержда ю Заместитель Главного государственною санитарного врача СССР
А. И. Зайченко 20.12.1976 Ко 1544-76
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФТАЛОФОСА И ФОЗАЛОНА В ВОДЕ И РЫБЕ И ФОЗАЛОНА В КОРМАХ И МЯСЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ1
Краткая характеристика препаратов приведена ранее.
Методика определения фталофоса и фозалона в воде, рыбе и фозалона в кормах и мясе. Основные положения. П р и н-
цип метода. Метод основан на извлечении препаратов из пробы органическим растворителем, очистке экстрактов из исследуемых объектов с помощью колоночной хроматографии и перераспределения в несмсшивающихся растворителях, концентрировании экстрактов и хроматографическом определении фталофоса и фозалона в тонком слое сорбента. Обнаружение препаратов на хроматограмме проводят после обработки пластинок бромфеноловым проявляющим реактивом с последующим обесцвечиванием фона раствором лимонной или уксусной кислоты. Обнаружение фозалона проводят также по хлориминфенолу, образующемуся после щелочного гидролиза препарата, путем опрыскивания хроматограммы растворами 4-аминоантипирина и феррицианида калия.
Метрологическая характеристика метода. Нижний предел определения пестицидов 0,5—3,0 мкг в пробе, что составляет на пластинках «Силуфол1 для фталофоса и фозалона в рыбе 0,25 мг/кг; в воде 0,005 мг/кг; фозалона в кормах и мясе 0,3 мг/кг. На пластинках с силикагелем предел обнаружения в 4 раза выше.
Степень определения составляет 85±9%.
Реактивы и растворы. Гексан х. ч. Хлороформ х. ч. Ацетон х. ч. Силикагель КСК и АСК. Бензол х. ч. Крахмал. Гипс, проявляющие реагенты: бромфеиоло-вый реактив (0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят до 100 мл 1%-ным раствором азотнокислого серебра в водном ацетоне (ацетон : вода=3: 1)]. Лимонная кислота, 1%-ный раствор. Уксусная кислота, 10%-ный раствор. 4-аминоаитипирин, 2%-ный раствор. Феррицианид калия, 10%-ный раствор. Едкий натр, 5%-ный раствор. Стандартные растворы фталофоса и фозалона в гексане 100 мкг/мл.
Приборы и посуда. Колбы конические с притертыми пробками на 100— 150 мл. Цилиндры мерные на 100 мл. Воронки делительные на 100—250 мл. Воронки химические. Чашки фарфоровые на 20 и 100 мл. Ступка фарфоровая. Пульверизаторы стеклянные. Пластинки стеклянные (9x12 см). Груши резиновые. Шприцы медицинские на 1 мл с ценой деления 0,02 мл. Палочки стеклянные. Пипетки градуированные на 1, 2, 5 и 10 мл. Ножницы. Хроматографичес-
кая камера (можно использовать эксикатор). Камера для опрыскивания хроматограмм. Сито 100 меш. Мельница для размалывания гранулированного силикагеля. Весы технические. Весы аналитические. Сушильный шкаф. Прибор для встряхивания. Прибор для вакуумной отгонки растворителя. Баня водяная. Хроматографические пластинки «Силуфол UV»<». Пластинки с тонким слоем силикагеля. Хроматографические колонки высотой 25 см, внутренний диаметр 1,5 см.
Подготовка к определению. Приготовление пластинок для хроматографирования. Стеклянные пластинки размером 9x12 см моют хромовой смесью, дистиллированной водой, сушат, протирают спиртом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Для приготовления сорбционной массы используют две прописи: 1) берут 20,0 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100 меш, 0,5 г крахмала, 63 мл дистиллированной воды, крахмал заваривают в 10 мл воды, доливают остальную воду, засыпают силикагель и хороша
перемешивают; 2) смешивают в фарфоровой ступке 35 г силикагеля, просеянного через сито 100 меш, с 2 г гипса; смесь переносят в коническую колбу с
притертой пробкой, приливают 90 мл дистиллированной воды и встряхивают в
течение 15 мин.
Приготовленную массу в количестве 10 г наносят на каждую п ласти тку и равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат в течение 16—20 ч при комнатной температуре в горизонтальном положении. Готовые пластинки хранят в эксикаторе.
Подготовка хроматографических колонок. В нижнюю узкую часть колонки помещают небольшой тампон ваты, предварительно промытой в гексане и высушенной, затем насыпают силикагель АСК на высоту 18 см и уплотняют его, постукивая по колонке. Перед работой колонку промывают 20 мл гексана.
Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта при определении фталофоса и фозалона в воде и рыбе. Пробу воды 200 мл наливают в делительную воронку и трижды экстрагируют фталофос и фозалон хлороформом порциями по 30, 20 и 10 мл, периодически встряхивая воронку в течение соответственно 30, 20 и 10 мин. Экстракты переносят в колбу, сушат безводным сульфатом натрия (10 г) в течение 30 мин и фильтруют в фарфоровую чашку или колбу для отгонки растворителя.
Колбу с сульфатом натрия дважды промывают хлороформом порциями по 10 мл, хлороформ пропускают через тот же фильтр. Затем растворитель испаряют либо из фарфоровой чашки на водяной бане при температуре 60°С, либо при использовании вакуумного ротационного испарителя. Из колбы испарителя сухой остаток смывают 10 мл хлороформа, которые переносят в фарфоровую чашку. Хлороформ испаряют. После удаления растворителя из фарфоровой чашки сухой остаток со стенок смывают 2—5 мл хлороформа, который испаряют на воздухе, а затем проводят хроматографирование, как описано ниже.
Пробу рыбы (мышиы, стенки кишечника, почки, печень, жабры, кожа, кровь) 20 г тщательно измельчают ножницами, помешают в колбу с притертой пробкой и проводят экстрагирование препаратов гексаном дважды порциями по 30 и 10 мл, встряхивая соответственно в течение 60 и 10 мин. Экстракты объединяют и пропускают через колонку, заполненную силикагелем АСК. Затем колонку промывают 100 мл элюирующей смеси пстролейного эфира и ацетона в соотношении 9 : 1, пропуская се небольшими порциями (15—20 мл). Экстракт концентрируют либо при использовании вакуумного ротационного испарителя при температуре 50°С, либо на воздухе без нагревания.
Сухой остаток смывают трижды по 5 мл дистиллированной водой и раствор пропускают в делительную воронку через фильтр, смоченный водой. Из водного раствора препараты извлекают хлороформом, экстрагируя двумя порциями растворителя по 10 мл в течение соответственно 30 и 10 мин. Хлороформные экстракты сливают в фарфоровую чашку через фильтр с безводным сульфатом натрия. Фильтр промывают двумя порциями хлороформа по 5 мл. Растворитель испаряют, как указано выше.
Сухой остаток, образовавшийся в фарфоровой чашке после испарения экстрактов из проб, смывают дважды порциями гексана по 0,2 мл, который с помощью шприца наносят на хроматографическую пластинку «Силуфол» или на пластинку с силикагелем, закрепленным крахмалом, на расстоянии 1,5 см от
края в одну точку так, чтобы диаметр пятна не превышал I см. Слева и справа от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартные растворы фталофоса н фозалона, содержащие предполагаемые в пробе количества (1—30 мкг).
Хроматографирование при определении фталофосаи фозалона в воде и рыбе. Пластинку помещают в камеру для хроматографирования, куда за 30 мин до анализа наливают подвижный растворитель — смесь хлороформа и бензола (2: 1). После того как фронт растворителя поднимется на 10 см от стартовой линии, пластинку вынимают и оставляют на несколько минут в вытяжном шкафу для испарения растворителя.
Хроматограмму опрыскивают бромфеноловым проявляющим реактивом, а через 5 мин —1%-ным раствором лимонной кислоты. При наличии в пробе фталофоса и фозалона на желтом фоне пластинки проявляются синие пятна, соответствующие по цвету и значению Rf пятнам стандартных растворов. Значения Rf фталофоса на пластинках «Силуфол» — 0,63±0,05, фозалона — 0,83± ±0,05; в тонком слое силикагеля значение Rf соответственно равно 0,4±0,05 и 0,6±0,05. Метаболит фталофоса — фталимид проявляется на пластинках «Силу-фол» в виде пятна зеленоватого цвета с Rf 0,9±0,02.
Для идентификации фозалона на пластинках «Силуфол» рекомендуется также использовать селективный проявляющий реактив 4-аминоантипирин. Пластинку опрыскивают 5%-ным раствором едкого натра и нагревают в термостате при 100°С в течение 10 мин. Затем пластинку вынимают и опрыскивают последовательно 2%-ным раствором 4-аминоантипирина и 10%-ным раствором феррициа-нида калия. Фозалон проявляется в виде пятна бордово-коричневого цвета на слабо-желтом фоне пластинки.
Экстракция и очистка экстракта при определении фозалона в растительном материале и мясе. Исследуемую пробу растительного материала (люцерна, кукуруза, овес, корнеплоды, разнотравье, комбикорма) или мяса измельчают, отбирают 10 г, помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 30 мл гексана и встряхивают на Шуттель-аппарате в течение 15 мин. Экстракт сливают в фарфоровую выпарительную чашку через бумажный фильтр, смоченный гексаном. Для полноты извлечения пестицида экстракцию выполняют дважды.
Экстракты объединяют и концентрируют на водяной бане при 45—50°С до 1—2 мл, а затем досуха при комнатной температуре. В чашку приливают 2 мл ацетона, растирают остаток стеклянной палочкой и сливают в делительную воронку через бумажный фильтр, смоченный ацетоном. Для количественного переноса пестицида из чашки в делительную воронку эту процедуру выполняют трижды. К трехкратному ацетоновому раствору (6 мл) приливают 12 мл дистиллированной воды и 15 мл хлороформа, затем энергично встряхивают 1 мин и отделившийся нижний хлороформно-ацетоновый слой сливают в фарфоровую выпарительную чашку через бумажный фильтр, заполненный безводным сернокислым натрием, смоченным хлороформом.
Хлороформно-ацетоновый раствор выпаривают на водяной бане при 45— 50°С до 1 мл, а затем при комнатной температуре до 0,1—0,2 мл, который забирают медицинским шприцем или микропипеткой и наносят на пластинку с силикагелем, закрепленным гипсом. Фарфоровую чашку, в которой концентрируют экстракт, смывают еще 2 раза 0,2 мл ацетона и наносят на пластинку в ту же точку.
Хроматографирование при определении фозалона в растительном материале и мясе. Для идентификации пестицида и количественного определения на ту же пластинку наносят из стандартного раствора 2,5 и 10 мкг фозалона и помещают ее в камеру с подвижной фазой — смесью гексана и ацетона (2: 1). Камеру предварительно выдерживают в течение часа в закрытом состоянии для насыщения парами подвижного растворителя. После подъема подвижной фазы на 10 см от линии старта пластинку вынимают и сушат при комнатной температуре в вытяжном шкафу в течение 20— 30 мин. Затем пластинку опрыскивают проявителем из пульверизатора и помещают на 5—7 мин в сушильный шкаф при температуре 50°С, после чего ее охлаждают и опрыскивают 10%-ным раствором уксусной кислоты для обесцвечивания темно-синего фона.
Фозалон проявляется на желтоватом фоне пластинки в виде темно-синих пя-
тсн c Rf 0,41—0,49. Частично неотделившиеся коэкстрактивные вещества проявляются в виде слабого синего следа ниже фозалона.
Обработка результатов анализа. Количественное определение пестицидов в воде, рыбе, мясе и растительном материале проводят путем сравнения площадей пятен пробы и стандарта при измерении их на миллиметровой бумаге, учитывая визуально интенсивность их окрасок.
Необходимо отметить, что количественное определение фозалона и фтало-
Йоса с надежной точностью можно проводить лишь до 20—30 мкг в пробе.
ри большем содержании препаратов зоны их локализации получаются размытыми, что затрудняет сравнение их со стандартами. В этом случае для исследования следует брать меньшую пробу или аликвотную часть экстракта. Содержание препарата (л, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:
Х =
StAK
StP
где S| — площадь пятна исследуемой пробы, мм2; S2 — площадь пятна стандарта, мм2; А—количество препарата в стандарте, мкг; Р — навеска пробы, г или мл; /( — коэффициент пересчета на объем всего анализируемого экстракта.
Отбор проб растительного материала на корню
Максимальная величина поля или партия дли отбора проб |
Маге риал |
Способ отбора проб* |
Величпа средней npoSM или исходного обрами |
Подготовка среднего обратив |
Величина среднего об рези*, кт |
100 га |
Злаковые на корню |
Зерновы Методы ОШ, 0,5 кг в |
3 кг |
Зерно отделить, измель- |
0,25—0,50 |
100 га |
Кукуруза |
точке Семена кормовых культ Методом СС, не менее |
пур на корню Початки из 18 рас- |
чить, тщательно перемешать и выделить средний образец Зерно отделить, измель- |
0,25-0,50 |
50 га |
Боб кормовой |
18 растений Методом ПД |
тений 1000 бобов |
чить и отвесить средний образец То же |
0,5—1,0 |
50 га/30 т |
Рапс, сурепица, горчица |
Промышленные Метод СС. 0.5 кг в |
культуры 3 кг |
Семена вышелушить, |
0,25 |
50 га/30 т |
Мах масличный |
точке Метод СС, 0,5 кг в |
3 кг |
измельчить, перемешать и отвесить средний образец То же |
0,25 |
50 га/ЭО т |
Подсолнечник |
точке Метод СС, по 5 корей- |
20—30 корзинок |
> » |
0,25 |
20 га/30 т |
Лен |
иок в точке Метод СС |
1 кг коробочек |
а » |
0,25 |
20 га/30 т |
Хмель |
Метод ПД, взять нес- |
0,30 кг шишек |
Шишки измельчить, пе- |
0,25 |
100 га |
кольхо шишек |
ре мешать и выделить средний образах |
|
Лодгото»** среднего обрааца |
Листья измельчить, перемешать и взять средний образец
Общую пробу измельчить. перемешать и выделить средний образец
Весь собранный материал измельчить, перемешать и выделить */4 часть, которую снова измельчить, тщательно перемешать и выделить средний образец
Отделить листья от корней. Листья считать отдельной пробой. Корин вымыть, обсушить, почетвертоватъ. От каждого взять ‘/« часть: четвертинки
измельчить, перемешать и отвесить средний образец. Листья
Величин* ергдмего обрат*, иг
0,25
0.5—1,0
0,5—1.0
Листья
-0.5
1
Методические указания разработаны Г. А. Т р о н д и н о й и А. Ф. К о-н ю х о в ы м (ВИЭВ).