МУ 08-47/248

Методика выполнения измерений содержания папаверина гидрохлорида и дибазола в лекарственном препарате «Папазол» спектрофотометрическим методом

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ТОМСКИЙ ПОЛИТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»

АККРЕДИТОВАННАЯ МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ СЛУЖБА ТПУ

(аттестат аккредитации Ns РОСС RU 01 00143

СВИДЕТЕЛЬСТВО ОБ АТТЕСТАЦИИ МВИ № 08-47/248

Методика выполнения измерений содержаний папаверина гидрохлорида и дибазола в лекарствённом препарате «Папазол» спектрофотометрическим методом, разработанная в Омском государственном университете им. Ф.М.Достоевского и регламентированная в МУ 08-47/248 (по реестру аккредитованной метрологической службы Томского политехнического университета)

Методика выполнения измерений содержания папаверина гидрохлорида и дибазола в лекарственном препарате «Папазол» спектрофотометрическим методом

аттестована в соответствии с ГОСТ Р 8.563 (ГОСТ 8.010).

Аттестация осуществлена по результатам теоретического и экспериментального исследования МВИ.

В результате аттестации МВИ установлено, что данная МВИ соответствует предъявляемым к ней метрологическим требованиям и обладает следующими основными метрологическими характеристиками:

1 Диапазоны измерений, относительные значения показателей точности, повторяемости и воспроизводимости методики при доверительной вероятности Р=0.95

Определяемый компонент Диапазон содержаний, мг/табл Показатель повторяемости (среднеквадратическое отклонение повторяемости), сгг, % Показатель воспроизводимости (среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), <JR , % Показатель точности (границы, в которых находится погрешность методики), 5, % Дибазол От 20 до 40 включ. 2,0 3,0 7,0 Папаверина гидрохлорид От 20 до 40 включ. 1,5 2,0 6,0

2

где С_Ср - результат анализа (массового содержания компонента) в образце для контроля - среднее арифметическое двух результатов параллельных определений, расхождение между которыми удовлетворяет условию (4) раздела 13;

С - аттестованное значение образца для контроля.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К = Л_л,    (8)

где А_л - характеристика погрешности результатов анализа, соответствующая аттестованному значению образца для контроля.

Примечание.

Допустимо характеристику погрешности результатов анализа при внедрении методики в лаборатории устанавливать по формуле:

Ал = 0,84-Д    (9)

с последующим уточнением по    мере    накопления информации в процессе контроля

стабильности результатов измерений.

Процедуру анализа признают удовлетворительной, при выполнении условия:

К_к<К    (10)

При невыполнении условия (10) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (10) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

Периодичность оперативного контроля процедуры анализа, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов анализа регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ РАЗРАБОТЧИКИ:

1.    Власова Ирина Васильевна - к.х.н., доцент кафедры аналитической химии ОмГУ

им. Ф.М. Достоевского

2.    Шелпакова Анна Сергеевна - аспирант кафедры аналитической химии ОмГУ

им. Ф.М. Достоевского

11

1 Область применения

Настоящий нормативный документ МУ 08-47/248 (далее - методика) устанавливает методику выполнения измерений содержаний папаверина гидрохлорида и дибазола в лекарственных таблетированных препаратах «Папазол» и «Папазол-УБФ» в диапазоне от 20 до 40 мг/табл спектрофотометрическим методом.

Для вычисления содержания компонентов используется метод множественной линейной регрессии, реализуемый в программном обеспечении Excel

2 Нормативные ссылки

В настоящей методике использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 ССБТ. Пожарная безопасность. Общие требования

ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ССБТ. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия Реактивы. Натрия гидроксид. Технические условия Вода дистиллированная. Технические условия Бумага лабораторная фильтровальная. Методы определения фильтрующей и разделительной способности Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

Тигли, чаши, стаканы, колбы, воронки, пробирки и наконечники из прозрачного кварцевого стекла. Общие технические условия Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия

Весы лабораторные. Общие технические требования Посуда лабораторная, стеклянная. Колбы. Технические условия Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Г осударственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

3 Приписанные характеристики погрешности измерений и ее составляющих

3.1 Методика выполнения измерений содержания папаверина гидрохлорида и дибазола обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в табл. 1.

4

Таблица 1 Диапазоны измерений, относительные значения показателей точности, повторяемости и воспроизводимости методики при доверительной вероятности Р=0,95

Определяемый компонент Диапазон измеряемых содержаний, мг/табл Показатель повторяемости (среднеквадратичес кое отклонение повторяемости), О' о/ , /О Показатель воспроизводимости (среднеквадратическо е отклонение воспроизводимости), aR, % Показатель точности (границы, в которых находится погрешность методики), 5, % Дибазол От 20 до 40 включ. 2,0 3,0 7,0 Папаверина гидрохлорид От 20 до 40 включ. 1,5 2,0 6,0

3.1    Значения показателя точности методики используют при: оформлении результатов анализа, выдаваемых лабораторией; оценке деятельности лабораторий на качество проведения испытаний;

оценке возможности использования результатов анализа при реализации методики в конкретной лаборатории.

4. Метод измерений

Метод основан на растворении точной массы таблеток в дистиллированной воде (с предварительным взвешиванием таблеток всей упаковки, их растирании до однородного состояния и взятия средней навески) и дальнейшем измерении светопоголощения полученного раствора препарата «Папазол» в УФ-области спектра 250 - 280 нм, обусловленном присутствием папаверина гидрохлорида и дибазола. Другие компоненты лекарственного препарата (крахмал картофельный, кальция стеарат) в данной области спектра не поглощают и не мешают определению.

5 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательное оборудование, посуду, материалы и реактивы:

5.1    Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда

5.1.1    Спектрофотометр СФ-2000 или спектрофотометр СФ-46 или AGILENT-8453.

5.1.2    Весы лабораторные аналитические общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 200 г, 2-го класса точности по ГОСТ 24104.

5.1.3    Пипетки мерные лабораторные стеклянные 2-го класса точности вместимостью 5, 10 см³ поГОСТ 29227.

5.1.4    Посуда мерная лабораторная стеклянная 2-го класса точности по ГОСТ 1770: колбы вместимостью 100, 1000 см³.

5.1.5    Стекло часовое.

5.1.6    Воронки стеклянные по ГОСТ 19908.

5.1.7    Ступка и пестик по ГОСТ 9147.

5

5.1.8 Программное обеспечение Excel на компьютере (для использования метода множественной линейной регрессии)

Допускается использование другого оборудования и приборов, позволяющих воспроизводить технические и метрологические характеристики, указанные в данной методике анализа.

5.2 Реактивы и материалы

5.2.1    Натрия гидроксид по ГОСТ 4328.

5.2.2    Папаверина гидрохлорид, субстанция-порошок (Recordati Industria Chimica & Farmaceutica (Италия))

5.2.3    Бендазол (Дибазол), субстанция-порошок (Second Pharma Со. (Китай))

5.2.4    Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

5.2.5    Бумага фильтровальная по ГОСТ 7584.

Все реактивы должны быть квалификации х.ч. или ч.д.а.

6 Требования безопасности

При выполнении измерений соблюдают следующие требования безопасности.

К работе допускаются лица не моложе 18 лет, обученные для проведения данного вида работ и прошедшие инструктаж по правилам техники безопасности.

Оператор должен соблюдать меры предосторожности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007, требования пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и требования электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019.

Он должен быть ознакомлен со специфическими свойствами и действием на организм человека вредных веществ, применяемых в данной Методике и входящих в состав анализируемых объектов.

7 Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию инженера-химика или техника-химика, изучившие данную Методику и освоившие технику работы на используемом в Методике оборудовании и средствах измерений.

8 Условия измерений

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

-    температура окружающего воздуха    (22    ±    10)°С;

-    атмосферное давление    (84    ±    106) кПа;

-    относительная влажность    не    более    80    %    при    температуре    25°С;

-    частота переменного тока    (50    ±    5) Гц;

-    напряжение в сети    (220    ±    22) В.

9 Подготовка проб

Все таблетки из упаковки препарата (всего 10 шт.) предварительно взвешивают на аналитических весах с точностью до 0,0002 г и рассчитывают среднюю массу таблетки (т_т ). Взвешенные таблетки помещают в фарфоровую ступку, тщательно растирают фарфоровым

6

пестиком до однородного состояния. На аналитических весах берут две навески (т_НАВ) порошка примерно по 0,04 г (точная навеска) с точностью до 0,0002 г. Каждую навеску порошка растертых таблеток переносят в отдельную коническую колбу/стеклянный стакан вместимостью 50- 100 см³, и растворяют в небольшом объеме (примерно 30 см³) дистиллированной воды.

Полученные растворы фильтруют через бумажный фильтр в две мерные колбы вместимостью по 100,0 см³ (каждую навеску пробы в отдельную колбу), фильтры и колбы/стаканы несколько раз промывают дистиллированной водой. Объемы растворов доводят до метки дистиллированной водой.

10 Подготовка к выполнению измерений

10.1    Подготовка средств измерений

Спектрофотометр СФ-2000 готовят к работе в соответствии с инструкциями по их эксплуатации.

10.2    Приготовление растворов

10.2.1    Раствор натрия гидроксида молярной концентрации 0,1 моль/ дм³

Навеску натрия гидроксида 4,0 г, взвешенную с погрешностью не более 0,1 г, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки дистиллированной водой.

10.2.2    Основной раствор папаверина гидрохлорида

Навеску папаверина гидрохлорида 0,0100 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0001 г, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в дистиллированной воде и доводят до метки дистиллированной водой.

10.2.3    Основной раствор дибазола

Навеску дибазола 0,0100 г, взвешенную с погрешностью не более 0,0002 г, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в дистиллированной воде и доводят до метки дистиллированной водой.

10.2.4    Аттестованные смеси - растворы смесей папаверина гидрохлорида и дибазола

В три мерные колбы объемом 100,0 см³ вводят аликвоты основных растворов

папаверина гидрохлорида объемом 2,50 см³, 5,0 см³ и 7,50 см³ и аликвоты раствора дибазола объемом 7,50 см³, 5,0 см³ и 2,50 см³. Доводят растворы в колбах до метки раствором гидроксида натрия. Получают три аттестованные смеси папаверина гидрохлорида и дибазола с концентрациями в каждом растворе: папаверина гидрохлорида 0,0025 мг/см³ и дибазола 0,0075 мг/ см³ (раствор А); папаверина гидрохлорида 0,0050 мг/см³ и дибазола 0,0050 мг/см³ (раствор Б); папаверина гидрохлорида 0,0075 мг/см³ и дибазола 0,0025 мг/см³ (раствор В).

11 Выполнение измерений аттестованных смесей и вычисление градуировочных

коэффициентов

В кварцевую кювету толщиной 10,0 мм поочередно вносят три приготовленных раствора аттестованных смесей папаверина гидрохлорида и дибазола (раствор А, Б и В). Измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре в интервале длин волн 250 - 280 нм с шагом 5 нм (250, 255, 260, 265, 270, 275, 280 нм). В качестве раствора сравнения используют раствор натрия гидроксида концентрации 0,1моль/дм³.

Все результаты - концентрации папаверина гидрохлорида (ПГ) и дибазола (Дб) в трех растворах и значения оптических плотностей растворов при всех длинах волн заносят на лист Excel.

7

Вычисляют градуировочные коэффициенты папаверина гидрохлорида и дибазола при каждой длине волны методом множественной линейной регрессии.

Для этого в пакете Excel выбирают в меню «Сервис» —««Анализ данных» —► «Регрессия». В окне «Входной интервал X» делают ссылку на массив концентраций папаверина гидрохлорида и дибазола (3 х 2), в окне «Входной интервал Y» делают ссылку на строку, соответствующую оптическим плотностям растворов трех смесей при первой длине волны, 250 нм. Задают константу ноль и в окне «Выходной интервал» делают ссылку на любую свободную ячейку листа Excel. Результат работы программы - переменные 1 и 2, являются градуировочными коэффициентами папаверина гидрохлорида и дибазола при заданной длине волны.

Операцию повторяют при каждой из семи длин волн.

Сформированную таким образом матрицу коэффициентов (7 х 2) используют в дальнейшем для расчета концентраций папаверина гидрохлорида и дибазола.

12 Выполнение измерений

12.1. В две мерные колбы вместимостью по 100,0 см³ переносят по 5,0 см³ анализируемых растворов препарата «Папазол», приготовленных из разных навесок по разделу 9 настоящей методики, доводят объемы до метки раствором натрия гидроксида концентрации 0,1моль/дм³ и перемешивают.

12.2 В кварцевую кювету толщиной 10,0 мм вносят поочередно каждый из приготовленных растворов препарата «Папазол». Измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длинах волн 250, 255, 260, 265, 270, 275 и 280 нм. Раствор сравнения - натрия гидроксид концентрации 0,1 моль/дм³.

Проводят два параллельных измерения оптической плотности в растворе анализируемого препарата.

12.3    Вычисление результатов измерений

Расчет концентрации дибазола и папаверина гидрохлорида ведут по методу множественной линейной регрессии. В пакете Excel выбирают в меню «Сервис» —«-«Анализ данных» —► «Регрессия». В окне «Входной интервал X» делают ссылку на массив градуировочных коэффициентов (7x2), а в окне «Входной интервал Y» - на столбец оптических плотностей анализируемого раствора препарата «Папазол». Задают константу ноль и в окне «Выходной интервал» делают ссылку на любую свободную ячейку листа Excel. Результат работы программы - переменные 1 и 2, являются концентрациями папаверина гидрохлорида и дибазола в растворе, выраженные в мг/см³.

Содержания дибазола (Хдб) и папаверина гидрохлорида (Хпг) в одной таблетке в миллиграммах вычисляют по формулам:

где С'_дб, С_пг - концентрации дибазола и папаверина гидрохлорида в растворе,

вычисленные методом множественной линейной регрессии; тт - средняя масса таблетки, г; шнав - масса навески таблетки, г.

Вычисления проводят отдельно для каждой из двух навесок, получая значения Х\ и Хг отдельно для каждого определяемого компонента.

12.4 Проверка приемлемости результатов измерений

За результат анализа Х_ср принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений Х\ и Х2

для которых выполняется следующее условие:

\Х,-Х₂\ <г,    (4)

где г - предел повторяемости, значения которого приведены в таблице 2.

Диапазон измерений, значения пределов повторяемости

Таблица 2 при доверительной вероятности Р=0,95

Наименование определяемого компонента Диапазон измеряемых содержаний, мг/табл Предел повторяемости (для двух результатов параллельных определений), г Дибазол От 20,0 до 40,0 включ. 0,042 -X Папаверина гидрохлорид От 20,0 до 40,0 включ. 0,056 -X X - среднее арис содержаний папавери эметическое значение результатов параллельных определений на гидрохлорида или дибазола.

При невыполнении условия (4) могут быть использованы методы проверки приемлемости результатов параллельных определений и установления окончательного результата согласно раздела 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

13 Оформление результатов анализа

Результат анализа Х_ср в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде содержания папаверина гидрохлорида и дибазола в одной таблетке:

(Х_ср ± А) мг/табл, Р = 0,95,

где А - показатель точности методики.

Значение А рассчитывают по формуле:

А = 0,01-8Хср.    (5)

Значение 8 приведено в табл.1.

Допустимо результат анализа в документах, выдаваемых лабораторией, представлять в виде: (Х_ср ± А_л) мг/табл, Р = 0,95, при условии А_л < А,

где Х_ср - результат анализа, полученный в соответствии с прописью методики;

± Д_л - значение характеристики погрешности результатов анализа, установленное при реализации методики в лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов анализа.

Примечание.

Характеристику погрешности результатов измерений при реализации методики в лаборатории допускается устанавливать по формуле:

9

А_л = 0,84-Д    (6)

с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.

14 Проверка приемлемости результатов измерений для двух лабораторий

Расхождение между результатами анализа, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости. При выполнении этого условия приемлемы оба результата анализа, и в качестве окончательного может быть использовано их среднее арифметическое значение. Значения предела воспроизводимости приведены в таблице 3.

Диапазон измерений, значения пределов воспроизводимости

Таблица 3 при доверительной вероятности Р=0,95

Наименование определяемого компонента Диапазон измеряемых содержаний, мг/табл Предел воспроизводимости (для двух результатов измерений), R Дибазол От 20,0 до 40,0 включ. 0,056 • X Папаверина гидрохлорид От 20,0 до 40,0 включ. 0,084 • X X - среднее арифметическое значение результатов анализа, полученных в двух лабораториях

При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов анализа согласно раздела 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

15 Контроль качества результатов анализа при реализации методики в лаборатории

Контроль качества результатов анализа при реализации методики в лаборатории предусматривает:

оперативный контроль процедуры анализа (на основе оценки погрешности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры);

контроль стабильности результатов анализа (на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения повторяемости, среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности, погрешности).

Алгоритм оперативного контроля процедуры анализа с применением образцов для контроля

Образцами для контроля являются растворы с известными концентрациями папаверина гидрохлорида и дибазола, приготовленные из исходных реактивов.

Оперативный контроль процедуры анализа проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К.

Результат контрольной процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к=\С_ср-С\,    (7)