УДОБРЕНИЯ

Определение хелатированных агентов. Определение железа, хелатированного o,p-EDDHA посредством реверсивной фазы HPLC

(EN 15452:2008, ЮТ)

Издание официальное

Предисловие

Цели, основные принципы и порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения. обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным унитарным предприятием «Всероссийский научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ» (ФГУП «ВНИЦСМВ») на основе собственного аутентичного перевода на русский язык стандарта, указанного в пункте 4

2    ВНЕСЕН Межгосударственным техническим комитетом по стандартизации МТК 527 «Химия»

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации по переписке (протокол № 59-П от 27 сентября 2013 г.)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны поМК(ИСО 3166)004-97 Код страны no МК (ИСО 3166)004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации Азербайджан AZ Азстандарт Армения AM Минэкономики Республики Армения Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь Киргизия KG Кыргызстандарт Молдова MD Молдова-Стандарт Россия RU Росстандарт Узбекистан uz Уэстандарт

4    Настоящий стандарт идентичен европейскому региональному стандарту EN 15452:2008 Fertilizers - Determination of chelating agents - Determination of iron chelated by o.p-EDDHA by reversed phase HPLC (Удобрения. Определение хелатированных агентов. Определение железа, хелатированного o.p-EDDHA. посредством реверсивной фазы HPLC).

Европейский стандарт разработан Европейским комитетом по стандартизации CEN/TC 260 «Удобрения и известковые материалы».

Перевод с английского языка (ел).

Официальные экземпляры европейского стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным стандартам приведены в дополнительном приложении Д А.

Степень соответствия - идентичная (IDT)

5    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 08 ноября 2013 г. № 1435-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 15452—201 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 01 января 2015 г.

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

ГОСТ EN 15452—2013

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены наслюящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ. 2014

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

III

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

УДОБРЕНИЯ

Определение хелатированных агентов.

Определение железа, хелатированного EDDHSA, ион-парной хроматографией

Fertilizers Determination of chelating agents Determination of iron chelated by EDDHSA by юп pair chromatography

Дата введения — 2015—01—01

1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод хроматографического определения количества железа в хелатной форме каждого из отдельных изомеров хелатообразователя орто-пара EDDHA (o.p-EDDHA) в удобрениях. Метод позволяет идентифицировать этот хелатирующий агент и определить количество водорастворимой части железа, хелатированного этим хелатирующим агентом. Метод неприменим для определения количества свободного хелатообразователя.

Примечания

1    Было показано, что данный метод подходит для определения количества железа, хелатированного каждым из отдельных изомеров хелатирующего агента орто-орто EDDHA (о.о-EDDHA) в удобрениях

2    o.o-EDDHA и o.p-EDDHA являются сокращениями, используемыми в настоящем стандарте Полные наименования приведены в приложении С.

1    Издание официальное

3    Вещества o.o-EDDHA и o.p-EDDHA существуют как разные стереоизомеры. Для о, o-EDDHA существуют мезоформа и d/l пара (рацемические изомеры), для o.p-EDDHA существует две разные 6Л пары. В этом методе все четыре стереоизомера наблюдаются отдельно.

4    В настоящее время аналитически чистый стандартный образец существует только для o.o-EDDHA. Метод для o.p-EDDHA был разработан со стандартным образцом o.p-EDDHA. содержащим неопределенную концентрацию o.p-EDDHA

2    Нормативные ссылки

Для применения настоящего стандарта необходим следующий ссылочный документ. Для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая все его изменения).

EN 1482-2 Fertilizers and liming materials — Sampling and sample preparation — Pari 2: Sample preparation (Удобрения и известковые материалы. Отбор проб и подготовка проб. Часть 2. Подготовка проб)

3    Сущность метода

Используют обратную высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) с УФ-детектором при 277 нм. Образец разделяют на колонке для обращенно-фазовой хроматографии на основе диоксида кремния с использованием формиата натрия (молярная концентрация с=0,015 моль/дм³, pH 3.0). и ацетонитрила в качестве подвижной фазы. Для o,p-EDDHA и o.o-EDDHA наблюдают два пика стереоизомера. Концентрацию железа, хелатированного o.p-EDDHA (o.p-Fe) определяют в соответствии с методом внешнего стандарта.

4    Влияющие факторы

Влияющих факторов не выявлено. Хелаты железа с EDTA. HEDTA, DTPA и EDDHMA не интерферируют__

Издание официальное

1

5    Реактивы

5.1    Общие требования

a)    Все реактивы должны быть аналитической степени чистоты.

b) Вода. используемая для приготовления элюентов. стандартных растворов и растворов образцов. должна соответствовать степени чистоты 1 по стандарту (4).

c)    При использовании для приготовления стандартных растворов реактивов с заявленной чистотой (Р) менее чем 99 % необходимо сделать поправку для получения требуемой концентрации раство-ра.

5.2    Натрия гидроксид, раствор c<NaOH) = 0.1 моль/дм . растворяют в воде, не содержащей диоксид углерода. 4 г гранулированного NaOH в мерной колбе вместимостью 1 дм³, доводят до метки и гомогенизируют.

5.3    Кислота соляная, раствор с(НС1) = 4 моль/дм³: разбавляют 395 г концентрированной соляной кислоты (37 %) до 1000 см³ водой.

5.4    Кислота соляная, раствор с(НС1) = 0.1 моль/дм³: разбавляют 25 см³ соляной кислоты (5.3) до 1000 см³ водой.

5.5    Железа (III) нитрат.раствор p(Fe) = 4200 мг/Дм³: растворяют 3.04 г нонагидрата нитрата железа (III) [Fe(N0₃)3^-9H₂0] в 80 см³ воды, добавляют 1 см³ соляной кислоты (5.3). переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят до метки водой и гомогенизируют. Проверяют, что концентрация Fe этого раствора - (4200 ± 100) мг/дм³. (например. AAS или йодометрическим титрованием). Этот раствор является стабильным примерно в течение одной недели.

5.6    o.p-Fe-EDDHA. стандартный раствор p(o.p-Fe) = 100 мг/дм³: в стакане вместимостью 100 см³ взвешивают с точностью до 0.1 мг (64.5 ± 1.0) мг • 100/Р (где Р- комплексонометрическая чистота стандартного образца в процентах кислотной формы o,p-H₄-EDDHA, полученного ручным или автоматическим фотометрическим титрованием со стандартным раствором Fe (III) при постоянном pH 6 (непрерывная система контроля pH)). o.p-H₄-EDDHA (т^сор - см. 5.1,). Добавляют 5 см³ NaOH (5.2) и тщательно растворяют образец путем перемешивания. После полного растворения добавляют 35 см³ воды и 2.5 см³ раствора нитрата железа (III) (5.5). Доводят pH раствора до 3.0. используя NaOH (5.2) или HCI (5.4). Количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 100 см³ Доводят до метки водой и гомогенизируют.

5.7    Элюент раствор: растворяют 1,0 г формиата натрия в 800 см³ воды. Доводят значение pH до 3.0. используя HCI (5.3 или 5.4). Переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 см³. Разбавляют до метки водой и гомогенизируют. Фильтруют раствор через мембранный фильтр пористостью 0.45 мкм. Смешивают 915 см³ раствора формиата натрия (pH 3.0) с 85 см³ ацетонитрила. Гомогенизируют и дегазируют раствор.

Примечание — Качество и состояние колонки может влиять на время удерживания Чтобы настроить время удержания, может варьируют соотношение раствора формиата натрия и ацетонитрила

6    Оборудование

6.1    Общие положения

Используют обычное лабораторное оборудование, посуду и:

6.2    Магнитную мешалку с магнитами.

6.3    Хроматограф, оборудованный:

a)    изократическим насосом, доставляющим элюент при скорости потока1,0 мл/мин;

b)    нагнетательным клапаном с петлевым дозатором 20 мкл;

c)    модифицированной капиллярной кварцевой колонкой С18 (ODS-2); 250 х4.6 мм ID: cf^Ps5мкм**;

d)    защитной колонкой С18 (ODS-2) (рекомендуется использовать);

e)    UV/VIS-детектором с фильтром пористостью 277 нм;

О интегратором.

6.4    Фильтры микромембранные, устойчивые к водным растворам, пористостью 0,45 мкм. ^{1 2}

7 Отбор и подготовка пробы

Отбор пробы не является частью метода, установленного в настоящем стандарте. Рекомендованный метод отбора пробы приведен в стандарте (1).

Подготовку пробы проводят в соответствие с EN 1482-2.

Примечание - Для уменьшения размера образцов с большим количеством хелатирующих агентов не рекомендуется использовать высокоскоростную лабораторную мельницу Более удобно изметяать образец в ступке до размера частиц менее чем 1 мм

8 Проведение анализа

8.1    Подготовка раствора образца

Взвешивают с точностью до 0.1 мг примерно (250 ± 10) мг образца (т^ в химическом стакане вместимостью 250 см³. Добавляют 200 см³ воды и растворяют образец перемешиванием в течение 30 мин. Количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 250 см³. Доводят до метки водой и гомогенизируют.

Примечание - Если концентрация o.p-Fe менее 0.5 % или более 5 %, то концентрация этих хелатов железа будет находиться за пределами диапазона градуировки Для более точного определения ввод должен быть соответственно увеличен или уменьшен

8.2    Подготовка стандартных растворов

Отбирают пипеткой объем стандартного раствора o.p-Fe-EDDHA V (см³) (5.6) (см. таблицу 1) в шесть мерных колб вместимостью 50 см³. Доводят до метки водой и гомогенизируют. Эти растворы содержат хелатированное о.р-EDDHA железо в апроксимированных концентрациях, приведенных в таблице 1.

Точную массовую концентрацию хелатированного o,p-EDDHA железа, мг/дм³, рассчитывают по формуле

Po.p-Fe ⁼ Pdi-i ⁺ Pd/i-2 •

где V- количество использованного стандартного раствора, см³;

т^сор- количество o.p-H₄-EDDHA, использованного для подготовки стандартного раствора, мг;

Р- чистота стандартного образца для градуировки, %.

Примечание — Предполагается, что стандартный образец o,p-EDDHA кислоты содержит равное количество двух стереоизомеров

Таблица 1- Подготовка стандартных растворов

Раствор V.CM3 o.p-EODHA dl изо мер-1 dil изомер -2 Fe, мг/дм3 Fe, мг/дм3 1 _2 5_ _2Л_ 25 2 5 5.0 5.0 з 10 _т_ 100 4 _15_ _ш_ __15.0 5 20 _ш_ 200 6 25 25.0 25 0

8.3 Хроматографический анализ

Непосредственно перед введением все растворы должны быть отфильтрованы через мембранный фильтр (6 4) пористостью 0.45 мкм. Вводят стандартные растворы (8.2) в хроматографическую систему (6.3). Измеряют время удерживания и площади двух изомеров o.p-Fe-EDDHA (d/l-1 и d/l-2) для всех растворов. Проводят разную линию калибровки для каждого из двух изомеров со значениями

площадей пиков стандартных растворов в сопоставлении с точной концентрацией Fe (мг/дм³). хелатированного каждым изомером хелатирующего агента.

Вводят раствор образца (8.1). Идентифицируют различные изомеры по времени удерживания полученных пиков (рисунок А. 1, приложение А). Измеряют площадь пика для каждого изомера. Определяют концентрацию железа в хелатной форме (мг/дм³) для каждого изомера, используя соответствующую линию калибровки.

9    Обработка результатов

Рассчитывают массовую долю железа Fe. хелатированного o.p-EDDHA. w. %. в удобрении по формуле

⁼ <V*""*^/V”"*.»    (3)

m,

где Ро.гнм-i — массовая концентрация Fe. хелатированного первой группой стереоизомеров (d/1-l) o.p-EDDHA, мг/дм³;

Ро.рчМ-2 — массовая концентрация Fe. хелатированного второй группой стереоизомеров (d/1-2) O.p-EDDHA. мг/дм³;

m_s — масса образца, взятого для анализа, мг.

10    Точность

10.1    Межлабораторное испытание

В 2005 г. 12 лабораториями было проведено межлабораторное испытание 4 разных товарных проб. Результаты этого межлабораторного испытания приведены в приложении В Повторяемость и воспроизводимость были рассчитаны в соответствии со стандартом (2).

10.2    Повторяемость

Абсолютное расхождение двух результатов независимых единичных испытаний, полученных одним и тем же методом на идентичном анализируемом материале в одной лаборатории одним и тем же лаборантом, с использованием одного и того же оборудования в течение короткого интервала времени, будет не более чем в 5 % случаев превышать значения г, приведенные в таблице 2.

10.3    Воспроизводимость

Абсолютное расхождение двух результатов независимых единичных испытаний, полученных одним и тем же методом на идентичном анализируемом материале в различных лабораториях разными лаборантами с использованием разного оборудования, будет не более чем в 5 % случаев превышать значения R, приведенные в таблице 2.

Таблица 2 — Средние значения, пределы повторяемости и воспроизводимости

Образец o.p-Fe. % Р п г R 1 2.17 10 2 0,037 0.25 2 1,33 10 2 0,051 0.29 3 0,47 9 2 0,047 0.16 4 0,15 8 2 0.0070 0.25 Примечание-В настоящей таблице использованы следующие условные обозначения o.p-Fe - среднее значение концентрации в процентах Fe. хелатированного o,p-EDDHA; р - количество участвующих лабораторий; п - количество повторных испытаний, г - предел повторяемости, r/100 г o.p-Fe; R - предел воспроизводимости, г/100 г o,p-Fe.

ГОСТ EN 15452—2013

Примечание - Пределы воспроизводимости, полученные для более низких концентраций Fe. хелатированного o.p-EDDHA, выше, чем допустимые значения, принятые регламентом [3)для содержания микроэлементов

11 Протокол испытания

Протокол испытаний должен содержать:

a)    всю информацию, необходимую для полной идентификации образца;

b)    используемый метод испытания со ссылкой на настоящий стандарт;

c)    результаты испытания вместе с единицами измерения;

фдату окончания испытания;

е) информацию о том. выполнены ли требования по пределу воспроизводимости;

0 все этапы методики, не указанные в настоящем стандарте, или рассматриваемые как необязательные. а также данные о любых отклонениях от метода настоящего стандарта, которые могут повлиять на результаты испытания. ⁴

ГОСТ EN 15452—2013

Приложение В (справочное)

Статистические результаты межлабораторных испытаний

Статистические результаты межлабораторных испытаний приведены в таблице В 1

Таблица В. 1 — Статистические результаты

Образец 1 2 3 4 Количество лабораторий 11 11 11 9 Количество выбросов 1 1 2 1 Оставшиеся лаборатории 10 10 9 8 Среднее значение, г/100 г 2.17 1,33 0,47 0,15 Стандартное отклонение повторяемости st, г/100 г 0,013 0.018 0,017 0,0025 Предел повторяемости г, г/100 г 0.037 0,051 0.047 0,0070 RSD„ % 0.61 1.4 3.6 1.7 Стандартное отклонение воспроизводимости sR, г/100 г 0,089 0,10 0,057 0,090 Предел воспроизводимости R, г/100 г 0,25 0,29 0.16 0,25 RSD*. % 4.1 7.8 12,3 61,2 Значение Хорвица RSDH, % 3.6 3.8 4.5 5,3 Коэффициент Хоррата 1,15 2,04 2.75 11.5

7

1

Spherisorb ODS-2 от Waters или Allsphere OOS-2 от Alltech являются примерами подходящих продуктов, доступных на коммерческой основе Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не свидетельствует о поддержке CEN данного продукта

2

3

4