МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

Определение витамина В₂ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

(EN 14152:2003, ЮТ)

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения. обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИКОП Россельхозакадемии)

2    ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстан-

дарт)

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 5 ноября 2013 г. №61-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—97	Код страны по МК (ИСО 3166)004—97	Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армении	AM	Минэкономики Республики Армения
Беларусь	BY	Госстандарт Республики Беларусь
Казахстан	KZ	Госстандарт Республики Казахстан
Киргизия	KG	Кыргызстаидарт
Молдова	MD	Молдооа-Стандарт
Россия	RU	Росстандарт
Узбекистан	UZ	Узстандарт

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 6 марта 2014 г. № 100-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 14152—2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2015 г.

5    Настоящий стандарт идентичен европейскому региональному стандарту EN 14152:2003 Foodstuffs — Determination of vitamin B₂ by HPLC (Продукты пищевые. Определение витамина В₂ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии).

Европейский региональный стандарт разработан техническим комитетом CEN/TC 275 «Анализ пищевых продуктов. Горизонтальные методы», секретариатом которого считается DIN.

Перевод с немецкого языка (de).

Официальные экземпляры европейского регионального стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеются в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации.

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам приведены в дополнительном приложении ДА

Степень соответствия — идентичная (IDT)

6    ВЗАМЕН ГОСТ 25999-83 в части раздела 2

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ.2014

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

ГОСТ EN 14152—2013

Содержание

1    Область применения...................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................1

3    Сущность метода.....................................................1

4    Реактивы..........................................................1

5    Аппаратура.........................................................3

6    Проведение анализа...................................................4

7    Обработка результатов.................................................5

8    Прецизионность......................................................6

9    Протокол результатов испытаний...........................................6

Приложение А (справочное) Типичная хроматограмма..............................7

Приложение В (справочное) Данные по прецизионности методики.......................8

Приложение С (справочное) Альтернативные условия хроматографического анализа..........9

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным

международным стандартам....................................10

Библиография........................................................11

III

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ Определение витамина В? с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

Foodstuffs. Determination of vitamin B₂ by HPLC

Дата введения —2015—07—01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения витамина В₂ в пищевых продуктах с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Содержание витамина В₂ определяется как содержание рибофлавина.

2    Нормативные ссылки

Настоящий стандарт содержит отдельные положения из другого нормативного документа, обозначенного приведенной в данном разделе недатированной нормативной ссылкой, предполагающей использование последнего издания документа, включая все изменения.

EN ISO 3696 Water for analytical laboratory use — Specification and test methods (ISO 3696:1987) (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний) (ISO 3696:1987))

3    Сущность метода

Метод основан на экстракции рибофлавина из пробы путем кислотного гидролиза, последующем ферментативном дефосфорилировании рибофлавина и его количественном определении с помощью ВЭЖХ с флюориметрическим детектированием (1]—(8).

4    Реактивы

4.1    Общие положения

Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696 или бидистиллированную воду.

4.2    Реактивы и растворы

4.2.1    Метанол чистотой не менее 99.8 %.

4.2.2    Натрий уксуснокислый трехводный чистотой не менее 99 %.

4 .2.3 Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации c(CH₃COONa ЗН₂0) = 0.1 моль/дм³.

4.2.4    Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации c(CH₃COONa ЗН₂0) = 2,5 моль/дм³.

4.2.5    Кислота уксусная ледяная чистотой не менее 99.8 %.

4.2.6    Кислота уксусная, раствор молярной концентрации с (СН₃СООН) = 0.02 моль/дм³.

4.2.7    Кислота соляная массовой долей 35 %.

4.2.8    Кислота соляная, раствор молярной концентрации с(НС1) = 0.1 моль/дм³.

Издание официальное

4.2.9    Кислота соляная, раствор молярной концентрации с(НС1) = 0.01 моль/дм³.

4.2.10    Кислота серная, раствор молярной концентрации c(H₂S0₄) = 0,05 моль/дм³.

4.2.11    Натрия гидроокись чистотой не менее 99 %.

4.2.12    Натрия гидроокись, раствор молярной концентрации c(NaOH) = 0,5 моль/дм³.

4.2.13    Фосфора пентоксид чистотой не менее 98%.

4.2.14    Дефосфорилирующий фермент, пригодный для гидролиза связанного рибофлавина в пробе.

Примечание — При установлении характеристик прецизионности методики использована така-диастаза¹.

4.2.15    Подвижные фазы для ВЭЖХ

Варианты подвижных фаз подходящего состава приведены в пояснении к рисунку А.1 приложения Айв приложении С. В качестве подвижных фаз используют смеси метанола (см. 4.2.1) с водой, фосфатным или ацетатным буферным раствором при объемной доле метанола от 10 % до 50 %. а также подвижные фазы с добавлением ион-парных реагентов.

4.2.16    Раствор буферный фосфатный (pH = 3,5) молярной концентрации однозамещеиного фосфата калия с(КН₂Р0₄) = 9,0 ммоль/дм³.

4.2.17    Тетраэтиламмония хлорид чистотой не менее 98 %.

4.2.18    Натрия гептансульфонат чистотой не менее 98 %.

4.3    Образцы сравнения

4.3.1    Рибофлавин (C₁₇H₂₀N₄O₆) чистотой не менее 98 %

Рибофлавин выпускают многие производители, при этом его чистота может различаться. Это обусловливает необходимость определения концентрации градуировочного раствора рибофлавина спектрофотометрическим методом по 4 ,4.3.

4.3.2    Рибофлавин-5'-фосфат

Натриевая соль рибофлавин-5'-фосфата (C^H^N^NaOgP) чистотой не менее 95 %.

4.4    Основной раствор рибофлавина

4.4.1    Меры предосторожности

Рибофлавин весьма чувствителен к свету, поэтому образец сравнения рибофлавина и его растворы необходимо защищать от действия света путем всевозможных приемов, например, путем использования для их хранения сосудов из темного стекла.

4.4.2    Приготовление основного раствора рибофлавина массовой концентрации

P(^C17^H20^N4°6) ^{= 100} МКГ/СМ³

Образец сравнения рибофлавина перед использованием высушивают и хранят в темноте в эксикаторе с помещенным в него пентоксидом фосфора (см. 4.2.13) или под вакуумом. Около 50 мг образца сравнения, измеренного с точностью до 1 мг. помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 500 см³ и растворяют в растворе уксусной кислоты (см. 4.2.6).

Срок хранения полученного раствора в темноте при температуре 4 °С — 2 мес.

Рибофлавин трудно растворим, поэтому для облегчения его растворения в мерную колбу с образцом сравнения вносят сначала 300 см³ раствора уксусной кислоты (см. 4.2.6). Колбу выдерживают на паровой бане при постоянном перемешивании до полного растворения рибофлавина. После охлаждения объем содержимого колбы доводят до метки раствором уксусной кислоты (см. 4.2.6). В качестве альтернативы в колбу с образцом сравнения вносят 5 см³ раствора гидроокиси натрия (см. 4.2.12). Поскольку рибофлавин нестабилен в щелочной среде, немедленно после его растворения в колбу вносят 1.5 см³ уксусной кислоты (см. 4.2.5). после чего объем содержимого колбы доводят до метки раствором уксусной кислоты (см. 4.2.6). Точную концентрацию основного раствора рибофлавина определяют Л04.4.3.

4.4.3    Определение точной концентрации основного раствора рибофлавина

В мерную колбу вместимостью 200 см³ помещают 20 см³ основного раствора рибофлавина (см. 4.4.2) и 3,5 см³ раствора ацетата натрия (см. 4.2.3), объем содержимого в колбе доводят до метки водой, полученный раствор используют для спектрофотометрического измерения. Для приготовления

rOCTEN 14152—2013

раствора сравнения в мерную колбу вместимостью 200 см² помещают 20 см² раствора уксусной кислоты (см . 4.2.6) иЗ,5 см² раствора ацетата натрия (см. 4 .2.3), объем содержимого колбы доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность раствора рибофлавина против раствора сравнения на спектрофотометре (см. 5.1) в кварцевой кювете длиной оптического пути 1 см при длине волны 444 нм. Массовую

где А₄₄4 — значение оптической плотности при длине волны 444 нм;

1Сг — коэффициент пересчета концентрации измеряемого раствора в микрограммы на кубический сантиметр;

10 — коэффициент, учитывающий кратность разбавления основного стандартного раствора;

328 — коэффициент экстинкции Д_1с^ раствора рибофлавина в ацетатном буферном растворе с

pH = 3,8 при длине волны 444 нм |9]. соответствующий условной оптической плотности раствора рибофлавина массовой концентрации 10 г/дм².

4.5 Стандартные растворы

4.5.1    Стандартный раствор рибофлавина массовой концентрациир(С₁₇Н2оМ40₆) = 10 мкг/см²

Раствор готовят десятикратным разбавлением основного раствора рибофлавина (см. 4.4.2). Пипеткой отмеряют 10 см² основного раствора рибофлавина (см. 4.4 .2) и помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 100 см². Объем содержимого в колбе доводят до метки раствором уксусной кислоты (см. 4.2.6).

Раствор готовят вдень использования.

4.5.2    Градуировочные растворы рибофлавина массовой концентрации от 0,1 мкг/см² до 1 мкг/см²

Пипеткой отмеряют от 1 см² до 10 см² стандартного раствора рибофлавина (см. 4.5.1) и помещают в мерную колбу вместимостью 100 см². Объем содержимого в колбе доводят до метки раствором подвижной фазой (см. 4.2.15).

Растворы готовят в день использования.

5 Аппаратура

При проведении анализа используют лабораторное оборудование, в частности, перечисленное

ниже.

5.1    Спектрофотометр, пригодный для измерений оптической плотности в видимой области спектра при заданной длине волны, в комплекте с кюветами длиной оптического пути 1 см.

5.2    Автоклав или нагревательный прибор

Автоклав для экстракции проб с возможностью контроля температуры и давления или плитка электрическая. или баня водяная с контролем температуры.

5.3    Хроматограф жидкостный

Система для ВЭЖХ, состоящая из насоса, инжектора, флюориметрического детектора, позволяющего проводить измерения при длине волны возбуждения 468 нм и длине волны эмиссии 520 нм. и устройства регистрации и обработки аналитического сигнала, например, интегратора.

5.4    Колонка аналитическая для ВЭЖХ

Колонка внутренним диаметром от 4.0 мм до 4.6 мм. длиной от 100 мм до 250 мм. заполненная обра-щенно-фазовым сорбентом размером частицот 3 мкм до 10 мкм . Допускается использовать колонку других размеров, заполненную сорбентом другого размера частиц, по сравнению с теми, что указаны в настоящем стандарте. Условия хроматографического разделения подбирают применительно к используемой колонке для обеспечения сопоставимости результатов анализов. В приложении С приведены варианты параметров хроматографического анализа, обеспечивающие приемлемую степень отделения пика рибофлавина от пиков сопутствующих компонентов матрицы пробы.

5.5    Установка для фильтрации

Фильтрование подвижной фазы перед ее использованием и раствора пробы для хроматографического анализа перед инжекцией через мембранный фильтр размером пор, например, 0,45 мкм, продлевает срок службы аналитических колонок для ВЭЖХ.

6 Проведение анализа

6.1    Меры предосторожности

Витамин В₂ весьма чувствителен к свету, поэтому при проведении испытания пробу для анализа и ее растворы необходимо защищать от действия света путем всевозможных приемов, например, используя сосуды из темного стекла.

6.2    Подготовка пробы

Пробу гомогенизируют, продукты твердой консистенции измельчают с помощью подходящей мельницы, после чего перемешивают. Перед измельчением пробу рекомендуется охладить, чтобы не подвергать ее длительному воздействию высоких температур.

6.3    Приготовление раствора пробы для анализа

6.3.1    Экстракция

От 2 до 10 г анализируемой пробы, измеренной с точностью до 1 мг. помещают в коническую колбу. Добавляют раствор соляной кислоты (см. 4.2.8) или серной кислоты (см. 4.2.10) объемом от 50 до 200 см³. Значение pH полученной смеси должно быть не более 2.0. Колбу закрывают часовым стеклом и выдерживают либо в автоклаве при температуре 121 °С в течение 30 мин, либо на водяной бане при температуре 100 °С в течение 60 мин.

Примечание — Согласно результатам исследований, кислотный гидролиз допустимо проводить при различных условиях, в частности, при температуре от 95 °С до 130 °С и продолжительности гидролиза от 15 до 60 мин. При этом чем выше температура, тем меньше времени требуется для проведения гидролиза. Однако более длительное тепловое воздействие может привести к потерям рибофлавина и рибофлавин-5'-фосфата. Установлено. что. в частности, для продуктов, содержащих шоколад, эффективность экстракции оказывается ниже при значениях pH экстракта выше 2.

6.3.2    Ферментативная обработка

После охлаждения до комнатной температуры к экстракту добавляют раствор ацетата натрия (см. 4.2.4) до достижения значения pH. оптимального для действия предполагаемого к использованию фермента. В экстракт вносят необходимое количество дефосфорилирующего фермента (см. 4.2.14). Полученную смесь выдерживают в течение определенного промежутка времени и при температуре, оптимальных для используемого фермента. После охлаждения до комнатной температуры полученный раствор переносят в защищенную от света мерную колбу с помощью раствора уксусной кислоты (см. 4.2.6) или другого подходящего растворителя и доводят объем содержимого в колбе до метки (V_E).

Для каждого ферментного препарата устанавливают оптимальное значение pH и оптимальные температуру и продолжительность инкубации.

Для установления оптимальных условий дефосфорилирования проводят процедуру ферментативной обработки проб с добавлением рибофлавин-5-фосфата (см. 4.3.2), а также проб, аналогичных исследуемой пробе по составу матрицы и являющихся аттестованными образцами сравнения.

При использовании для дефосфорилирования така-диастазы возможно привнесение в пробу с ферментным препаратом некоторого количества рибофлавина, что необходимо учитывать при расчете результата испытания.

Примечании

1    При установлении характеристик прецизионности, приведенных в настоящем стандарте, для проведения дефосфорилирования использована така-диастаза при следующих условиях. Значение pH экстракта доводилось до 4,0 добавлением раствора ацетата натрия по 4.2.4, после чего в экстракт вносили така-диастазу из расчета 100 мг препарата на грамм пробы. Полученную смесь инкубировали при температуре от 37 *С до 46 *С, продолжительность инкубирования составляла от 16 до 24 ч.

2    Скорость дефосфорилирования зависит от используемого ферментного препарата и матрицы пробы (7). (Ю). (11).

6.3.3    Разбавление экстракта

Раствор пробы по 6.3.2 фильтруют через бумажный фильтр или мембранный фильтр размером пор 0.45 мкм. Осветление раствора допускается также проводить путем его центрифугирования при подходящем центробежном ускорении. Аликвотную часть прозрачного фильтрата (V_A) разбавляют до определенного объема (V) подходящим растворителем, совместимым с подвижной фазой для ВЭЖХ, например, к 1 см³ экстракта по 6.3.2 добавляют 1 см³ метанола (см. 4.2.1). Полученный раствор используют для анализа с помощью ВЭЖХ. ³

fOCTEN 14152—2013

6.4    Идентификация аналита

Пик рибофлавина на хроматограмме раствора пробы идентифицируют по совпадению его времени удерживания со временем удерживания пика рибофлавина на хроматограмме градуировочного раствора. В качестве альтернативы пик рибофлавина на хроматограмме раствора пробы идентифицируют путем ее сопоставления с хроматограммой раствора пробы с добавлением малого количества стандартного раствора рибофлавина.

Примечание — Ниже приведены условия хроматографического анализа, гарантированно обеспечивающие удовлетвори тельное качество хроматографического разделения и количественного определения (см. также рисунок А. 1 приложения А). Альтернативные условия приведены в приложении С.

Аналитическая колонка длиной 250 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. заполненная сорбентом* диаметром частиц 5 мкм.

Состав подвижной фазы: смесь метанола (см. 4.2.1) с фосфатным буферным раствором (pH = 3.5) по 4.2.16. содержащим 1 г/дм³ хлорида тетраэтиламммония(см.4.2.17)и5ммоль/дм³гептансульфонатанатрия(см.4.2.18)в объемном соотношении 35:65.

Скорость протока подвижной фазы — 1,0 см³/мин.

Обьем инжекции — 20 мм³.

Условия флюоримегрического детектирования: длина волны возбуждения 468 нм. длина волны эмиссии 520 нм.

6.5    Количественное определение

Проводят хроматографический анализ градуировочных растворов (см. 4.4.2) и раствора пробы по

6.3.3 при одинаковых объемах инжекции (до 100 мм³). Количественное определение проводят по методу внешнего стандарта путем соотнесения площади или высоты пика аналита на хроматограмме раствора пробы с аналогичными параметрами пиков на хроматограммах градуировочных растворов. Проверяют соблюдение требования проведения измерений в линейной области градуировочной зависимости.

7 Обработка результатов

Результат определения рассчитывают с использованием градуировочного графика либо с применением соответствующей программы расчета системы обработки данных, либо используют приведенный ниже упрощенный способ расчета.

Содержание витамина В₂ в пробе w. мг/100 г. рассчитывают по формуле

w =    100-!?**    (2)

A_srm_sV1000 m_s

где A₉ — площадь или высота пика рибофлавина на хроматограмме раствора пробы, выраженная в единицах площади или высоты; р — массовая концентрация рибофлавина в градуировочном растворе (см. 4,4.2). мкг/см³;

V — объем раствора пробы для хроматографического анализа, приготовленного по 6.3.3, см³;

V_E — объем приготовленного экстракта из пробы по 6.3.2, см³;

A_ST— площадь или высота пика рибофлавина на хроматограмме градуировочного раствора, выраженная в единицах площади или высоты; m_s — масса ферментного препарата, добавленная к экстракту из пробы для ферментативной обработки. г;

1000 — коэффициент пересчета результата из мкг/100 г в мг/100 г;

100 — коэффициент пересчета результата как содержания аналита в 100 г пробы:

V_A — объем приготовленного экстракта из пробы по 6.2.2, см³; т_Е — масса пробы для анализа, г;

Е — содержание рибофлавина в ферментном препарате, использованном для ферментативной обработки экстракта, мг/100 г.

* Например. Supelco(R) LC-18-DB. пригодный для целей применения настоящего стандарта. Данная информация приведена для удобства применения настоящего стандарта, не является рекламной поддержкой МГС данного изделия и не исключает возможность использования других изделий с аналогичными свойствами. ⁴

8    Презиционность

8.1    Общие положения

Значения характеристик прецизионности методики при использовании различных параметров ВЭЖХ-анализа при определении рибофлавина установлены в 1996 г. для сухого молока (CRM 421) и свиной печени сублимационной сушки (CRM 487) в результате межлабораторных испытаний, организованных Европейской Комиссией в рамках « Программы стандартных измерений и испытаний». Статистические данные, полученные в результате межлабораторных испытаний, приведены в приложении В. Значения метрологических характеристик, полученные в результате межлабораторных испытаний, могут быть не применимы к другим содержаниям аналита и другим типам матриц, по сравнению с теми, что указаны в приложении В.

8.2    Повторяемость

Абсолютное расхождение между результатами двух независимых единичных определений, полученными одним методом на идентичном объекте определений в одной лаборатории одним оператором с использованием одного оборудования в течение короткого промежутка времени, не должно превышать предел повторяемости г более чем в 5 % случаев.

Значения предела повторяемости равны:

для сухого молока х = 14,54 мг/100 г, г = 1.304 мг/100г;

для свиной печени х = 105.46 мг/100 г. г= 5.1104 мг/100г.

8.3    Воспроизводимость

Абсолютное расхождение между результатами двух единичных определений, полученными одним методом на идентичном объекте определений в разных лабораториях разными операторами с использованием разного оборудования не должно превышать предел воспроизводимости R более чем в 5 % случаев.

Значения предела воспроизводимости равны:

для сухого молока х = 14.54 мг/100 г. R = 3,007 мг/100 г;

для свиной печени х = 105.46 мг/100 г. R = 23.5342 мг/100 г.

9    Протокол результатов испытаний

Протокол результатов испытаний должен содержать как минимум следующие сведения:

a)    фамилию и подпись лица, ответственного за проведение анализа;

b)    всю информацию, необходимую для идентификации пробы;

c)    указание использованного метода анализа со ссылкой на настоящий стандарт;

d)    дату и способ отбора пробы (если известен);

e)    дату поступления пробы в лабораторию;

f)    дату проведения анализа;

д) результаты испытаний с указанием единиц измерения;

h)    все особенности, наблюдавшиеся при проведении анализа;

i)    все операции, не оговоренные в методике или рассматриваемые как необязательные, которые могли повлиять на результат испытания. ⁵

rOCTEN 14152—2013

Приложение A (справочное)

Типичная хроматограмма

Рисунок А.1 — Пример хроматограммы градуировочного раствора рибофлавина

Условия хроматографического анализа.

Колонка длиной 250 мм. внутренним диаметром 4,0 мм. заполненная сорбентом Supelco® LC-18-DB’ диаметром частиц 5 мкм.

Состав подвижной фазы — смесь метанола (см. 4.2.1) с фосфатным буферным раствором (pH = 3.5) по 4.2.16. содержащим 1 г/дм³ хлорида тетраэтиламмония (см. 4.2.17) и 5 ммоль/дм³ гептансульфоната натрия (см. 4.2.18)в обьемном соотношении 35:65.

Скорость протока подвижной фазы — 1.5 см³/мин.

Обьем инжекции — 20 мм³.

Условия детектирования — измерение флюоресценции при длине волны возбуждения 468 нм и длине волны эмиссии 520 нм.

* Supelco® LC-18-DB —пример изделия, пригодного для целей применения настоящего стандарта. Данная информация приведена для удобства применения настоящего стандарта, не является рекламной поддержкой МГС данного изделия и не исключает возможность использования других изделий с аналогичными свойствами. ⁶

1

Така-диастаза Ne Т00040 — торговое наименование изделия, выпускаемого Plat/ and Bauer. Waterbury. CT 06708. США. Данная информация приведена для удобства применения настоящего стандарта и не является рекламной поддержкой МГС данного изделия. Допускается использовать аналогичные изделия при условии обеспечения идентичных результатов.

2

3

4

5

6