МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Сборник № 25

Москва 1997 г.

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

ТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 25

Москва

Центр научно-технической информации, пропаганды и рекламы 1997г.

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Калинин В.Л. -к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н., Российский институт лекарственных культур; Борисов Г.С.-зав. KTJI РРСТАЗР; Федорова Н.Е.- к.х.н., МНИИГ им.Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А., председатель Госхимкомиссии

тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией защиты растений Департамента химизации и защиты растений Минсельхозпрода РФ.

г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосъемки 11/41 тел.(246) 3-09-52

СОДЕРЖАНИЕ:

1.    Временные методические указания по определению остаточных количеств 2-метил-4-димстиламинометил- бензимидазол- 5 - ол- дигидрохлорида в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91 г. № 6264-91     стр.5

2.    Методические указания по измерению концентраций 2-амино-4,6 диметил-1,3-пиримидина в воде методом жидкостной хроматографии.

29.07.91 г. №6152-91     9

3.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор -

1.3.5- триазина в воде хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6161-91     16

4.    Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6- хлор-

1.3.5- триазина в воздухе хроматографическими методами.

29.07.91    г. №6159-91     21

5.    Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии.

29.07.91    г. № 6230-91     27

6.    Методические указания по измерению концентрации диниконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6156-91     33

7.    Методические указания по определению остаточных количеств N-okhch-2,6 -лутидина в воде, почве, зеленой массе люцерны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    №6179-91     36

8.    Временные методические указания по измерению концентраций М-окиси-2,6-лутидина в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6178-91     40

9.    Методические указания по измерению концентраций 2-метоксикарбонил-М-(4,6 -диметил-1,3-пиримидин-2-ил)-аминокарбонил-бензолсульфамида и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом жидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6171-91     45

10.    Временные методические указания по измерению концентраций карбамоил- метил-пиразола в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6236-91     51

11.    Методические указания по измерению концентраций павстима в воздухе рабочей зоны колориметрическим методом.

29.07.91    г.    № 6277-91     54

12.    Методические указания по измерению концентрации тебутиурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г.    №6199-91     57

13. Временные методические указания по измерению концентраций тефлубензурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91 г. №6234-91

14.    Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии.

29.07.91    г.    №6168-91     65

15.    Методические указания по измерению концентраций М-(4-метокси-б-метил-1,3,5-триазин^-шО-Г'Г -(2,5-диметил фенил) сульфонилмочевина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

29.07.91    г.    № 6240-91     70

16.    Временные методические указания по измерению концентраций флуфеноксурона в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами.

29.07.91    г.    № 6235-91     73

17.    Методические указания по измерению концентраций смеси фосфитов (промежуточные продукты синтеза препарата эфаль-М) в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г.    №6266-91     77

соли в воде методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6167-91     80

19.    Методические указания по измерению концентраций хлорсульфурона и его калиевой соли в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. №6170-91     87

20.    Методические указания по измерению концентраций экостима в воздухе рабочей зоны фотометрическим методом.

29.07.91    г. № 6276-91    ............................................ 94

21.    Методические указания по определению остаточных количеств эталфлуралина в семенах хлопчатника и хлопковом масле методом газожидкостной хроматографии.

29.07.91    г. № 6244-91    ............................................ 97

Алфавитный указатель.     106

4

Министерством здравоохранения СССР “29” июля 1991 года № 6264-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ 2-МЕТИЛ-4-ДИМЕТИЛАМИНОМЕТИЛ-БЕНЗИМИДАЗОЛ-5-ОЛ-ДИГИДРОХЛОРИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ.

1. Краткая характеристика препарата.

Торговое название: Амбиол.

Производитель: Россия.

Действующее вещество: 2-метил-4-диметиламинометил-бензимидазол-5-ол дигкдрохлорид. Структурная формула:

Эмпирическая формула Си His Ns О.

Молекулярная масса 278,18.

Физико-химические свойства: белое кристаллическое вещество с Тпл. 221-226° С. Растворим в воде, этиловом спирте. Основание растворимо в хлороформе,этиловом спирте. МДУ в продуктах питания - не допускается.

ОДУ в воде водоемов - 0,03 мг/дм³ ,ОДК в почве - 0,03 мг/кг.

Применяется в качестве регулятора роста растений в посевах кукурузы.

2. Методика определения амбиола в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы тонкослойной хроматографией.

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Метод основан на извлечении амбиола из объектов смесью этилового спирта с аммиаком в соотношении 50:2, экстракции хлороформом из водного раствора коэкстрактивных веществ при рН< 1, препарата - при рН> 10 и определении хроматографией в тонком слое на пластинках “Силуфол” в подвижной фазе этиловый спирт: аммиак в соотношении 30:2 с обнаружением зон локализации обработкой 0,5%-ным водным раствором нитрита натрия.

Разработчики: Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., ВНИТИГ, г. Уфа.

2.1.2 Избирательность метода.

Метод селективен. Определению не мешают хлорорганические и фосфорорганичсские пестициды.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице.

Таблица

Значение метрологических характеристик Вода Почва Зеленая масса Зерно кукурузы Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг,л 0,002-0,2 0,003-0,8 0,02-0,8 0,008-0,8 Предел обнаружения, мкг 0,2 0,2 0,5 0,2 Предел обнаружения, мг/кг,л 0,002 0,008 0,02 0,008 Среднее значение определения стандартных количеств, % 73,0 74,0 84,0 81,0 Число параллельных определений, п 6 6 6 6 Стандартное отклонение,% 2,6 3,0 4,1 4,7 Доверительный интервал среднего при Р=0,95 и п=6,% 73,0 ±3,9 74,0+ 4,5 84,0± 6,2 81,0± 7,0

2.2.    Реактивы и растворы.

Ацетон, чда, ГОСТ 2603-79.

Спирт этиловый технический, ГОСТ 18300-72, свежеперегнанный.

Хлороформ, чда, ГОСТ 20015-74, свежеперегнанный.

Кислота соляная, ч, ГОСТ 3118-77.

Аммиак водный, ГОСТ 3760-79.

Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Натрий уксуснокислый 3-х водный, ТУ 199-78.

Натрий азотистокислый, хч, ГОСТ 4197-74.

Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.

Проявляющий реактив - 0,5%-ный водный раствор азотистокислого натрия. Пластинки “Силуфол” производства фирмы Хемапол, ЧССР, размером 150 х 150 мм.

2.3.    Приборы и посуда.

Сосуды СЦ-3, ГОСТ 25336-32 Е.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74 или аналогичные.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73 или аналогичный.

6

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-П-917-76 или аналогичный, с набором колб.

Воронки делительные, ГОСТ 10054-82, вместимостью 300 мл.

Колбы плоскодонные, ГОСТ 9737-70, вместимостью250 мл.

Колбы Эрленмейера, ГОСТ 9737-70, вместимостью 250 мл.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 25 мл.

Пипетки с делениями, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10, 5, 1 мл.

Пробирки градуированные с пробками на шлифах, ТУ 1770-74 Е.

Мельница лабораторная (кофемолка).

Сушильный шкаф.

2.4.    Отбор проб.

Отбор проб проводится в соответствии с “Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микро количеств пестицидов”, утверждеными 21.08.1979 г. № 2051-79.

2.5.    Подготовка к определению.

2.5.1.    Подготовка хроматографической камеры.

Хроматографические камеры за 1 час до начала хроматографирования заполняют подвижными фазами: первую - ацетоном, вторую, стенки которой обложены фильтровальной бумагой - смесью этиловый спирт: аммиак в соотношении 30:2. Объем подвижной фазы в камере должен находиться на высоте не выше, чем 0,7-1,0 см от уровня дна камеры.

2.5.2.    Приготовление стандартных растворов.

Стандартный раствор № 1 амбиола концентрации 1 мг/мл готовят растворением навески 0,0250 г в 25 мл этилового спирта в мерной колбе.

Стандартный раствор JVe 2 амбиола концентрации 0,1 мг/мл готовят разбавлением 5 мл стандартного раствора № 1 до 50 мл этиловым спиртом в мерной колбе.

2.6.    Проведение определения.

2.6.1.    Экстракция и очистка экстракта.

2.6.1.1.    ВОДА. Пробу воды (100 мл), насыщенную хлористым натрием (30 г), помещают в делительную воронку, приливают 3 мл 1N раствора соляной кислоты и экстрагируют трижды хлороформом порциями по 10 мл. Хлороформ отбрасывают. К водному слою приливают 5 мл водного аммиака и экстрагируют амбиол тремя порциями хлороформа по 50 мл. Хлороформные экстракты объединяют, промывают 10 мл воды, пропускают через слой безводного сернокислого натрия, помещенного на фильтровальную бумагу в коническую воронку. Фильтрат концентрируют на ротационном испарителе до объема 1-2 мл, затем в токе воздуха до объема 0,3-0,5 мл и всю пробу наносят на пластинку. Колбу обмывают двумя мл хлороформа, который концентрируют в токе воздуха до объема ~ 0,3-0,5 мл и этот объем также наносят на пластинку в то же пятно.

2.6.1.2.    ПОЧВА, ЗЕРНО И ЗЕЛЕНАЯ МАССА КУКУРУЗЫ. Навеску пробы (25 г) экстрагируют трижды смесью этанол: аммиак в соотношение 50:2 мл на механическом встряхивателе в течение 30; 15; 15 мин. Экстракты фильтруют под вакуумом через бумажный фильтр в конической воронке, концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,5-1 мл, затем в токе воздуха до отсутствия запаха этилового спирта. К остатку приливают 20 мл дистиллированной воды, 3 мл 1N раствора соляной кислоты и фильтруют через бумажный фильтр. Колбу и фильтр промывают 5 мл дистиллированной воды. К фильтрату приливают 1 мл этилового спирта и экстрагируют 5 раз хлороформом порциями по 5 мл. Хлороформный экстракт отбрасывают. К водному слою приливают 5 мл водного аммиака ( pH не менее 10) и экстрагируют четырьмя порциями хлороформа по 20 мл. Объединенный хлороформный экстракт промывают тремя порциями по 5 мл насыщенного

7

водного раствора хлористого натрия, пропускают через слой безводного сернокислого натрия в конической воронке и концентрируют на ротационном испарителе до объема 1 мл, затем в токе воздуха до ~ 0,3-0,5 мл* Остаток с помощью капилляра наносят на пластинку. Колбу дважды обмывают 2 мл хлороформа, который после концентрирования в токе воздуха до 0,3-0,5 мл также наносят на пластинку.

2.6.2. Условия хроматографирования.

На пластинки с нанесенными пробами на расстоянии 15 мм друг от друга наносят серию стандартных растворов амбиола, содержащих 0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мкг. Для этого в семь пробирок вносят 2; 5; 10 мл стандартного раствора № 2 и наносят в хлороформе, как описано для проб.

Хроматограмму развивают в системе № 1 до тех пор, пока фронт растворителя не поднимется на всю высоту 10 см. После развития в двух системах пластинку подсушивают при температуре 60-80° С и обрабатывают проявляющим реактивом. Амбиол проявляется в виде желтооранжевых пятен на светлом фоне с Rr 0,30±0,03. Окраска пятен и фона устойчивы.

2.7. Обработка результатов анализа.

Количественное определение амбиола в анализируемой пробе проводят путем сравнения площади и и интенсивности пятен пробы и серии стандартов.

Содержание амбиола в пробе (X) в мг/кг или мг/л вычисляют по форму ле;1К1Л]

А

X = Р

где:

А - количество вещества, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

Р - навеска анализируемой пробы в г или объём анализируемой воды в мл.

3. Требования безопасности.

Соблюдать все необходимые “Требования безопасности работы в химических лабораториях, правила устройств, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждениях системы Минздрава СССР” № 2455-81 от 20.10. 1981 г., а также соблюдать правила безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и пестицидами.

8

Алфавитный указатель

стр.

1. 2-Амино-4,6-днмстил-1.3-пиримилнн - 9 2. 2-Амнно-4-лиметнламнно-6-хлор~1.3.5-триазин - 16.21 3. 2-Метил-4-лнметнламннометил-бензнмнлазол-5-ол-днгилрохлорнл -5 4. 2-Метокснкарбонкл-М-(4.б-лнмсткл-1.3-пирнмнлнн-2ил>-ямннокарбонкл- бензо л сульфамид - 45 5. 2-Метокснкар6оннл-М-(4.6-лнметнл-1.3-пнрнмндн11-2ил')-ами11окарбоннл- бензолсульфамнд калиевая соль - 45 6. 5-оксн-КЗ-бензоксатнолон -2 - 65 7. N - Г4-метокси-6-метнл~1.3,5-триазин-2ил)-Г'Г -42.5-днметилфенил)сульФо- ннлмочевнна - 70 8. 1Ч-окснд-2,6-лутидина и янтарной кислоты комплекс - 36.40 9. Амбиол -5 10. Аминопиримнднн -9 И. Аминофумаровой кислоты лиметнловый эфир -27 12. Анкор-5 -45 13. Анкор-85 -45 14. Грамекс.метаболит и полупродукт синтеза - 16,21 15. Лигнлроаспарагиновой кислоты лнмстиловый эфир -27 16. Днннконазол - 33 17.1-Карбамоил-3(5)-метилпнразол -51 18. Каскад -73 19. Ленок - 80.87 20. Люцис - 36.40 21- ММП -51 22. Номолт -61 23. Павстим -54 24. Препарат-1 - 80.87 25. Соналан -97 26. Спайк -57 27. Суми-8 -33 28. Тсбутиурон -57 29. Тефлубензурон -61 30. Тиолон -65 31. Утнур -70 32. Флуфеноксурон -73 33. Фосфитов смесь -77 34. Фумар - 27 35. Хардин - 80.87 36. Хлорсульфурона калиевая соль - 80.87 37. Экостим -94 38. Эталфлуралнн -97 39. Эфаль-М.промежуточные продукты синтеза -77

106