МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Сборник № 25

Москва 1997 г.

Утверждено Министерством здравоохранения СССР “29” июля 1991 г.

№6234-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТАРЦИЙ ТЕФЛУБЕНЗУРОНЛ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

1. Краткая характеристика препарата.

Торговое наименование: Номолт.

Фирма: Цианамид (США).

Действующее вещество: тефлубеюурон - 1-<3-5-лихлор-2,4-лифторфенил)-3-(2,6-дифторбензоил)-мочевина.

Эмпирическая формула: CuHtCI^NiOi.

Молекулярная масса: 384.

Химически чистое соединение представляет собой белый кристаллический порошок без особого запаха с температурой плавления 222,5° С. Хорошо растворим в органических растворителях (хлороформ, ацетон, бензол и др.), растворимость в воде о|раничена (0,02 М|Ул). Стабилен по отношению к действию света и температуре. В воздухе может находиться в виде аэрозоля.

ОБУВ номолта в воздухе рабочей зоны не установлен.

Краткая токсикологическая характеристика.

Малотоксичен.

Острая оральная токсичность.

ЛДч> для крыс и мышей - более 5000 мг/кг.

Острая дермальная токсичность.

ЛД50 для крыс - более 2000 мг/кг.

Не раздражает кожу и глаза

Область применения препарата.

Номолт используется в качестве ре^лятора роста насекомых против личинок чешуекрылых, жесткокрылых и двукрылых. Рекомендован к применению на яблоне, вино1радной лозе, персике, картофеле, сое, рисе, пшенице, хлопчатнике, кукурузе, овощных культурах.

Изготовляется в виде концентратов суспензий (50 и 150 г д.в./га) и концентрата эмульсии (50 г д.в./л).

Разработчики: Джагацпанян С.А., Петросян М.С., Буиятян Ю.А., НИИГТМУР, г. Ереван.

2. Методика измерении концентраций тефлубензурона в воздухе рабочей зоны.

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Определение основано на концентрировании аэрозолей тефлубензурони из воздуха на фильтр “синяя лента” с последующей идентификацией и количественным определением с помощью газожидкостной (1”ЖХ) или тонкослойной (ТСХ) хроматографии.

2.1.2.    Избирательность методики.

Определению номолта в предлагаемых условиях не мешают близкие по структуре и области применения такие соединения как ДЦТ, ДДД, ДДЕ, ГХЦГ, тальстар, каскад.

2.1.3.    Метрологическая характеристика методики.

2.2.    Реактивы, растворы, материалы.

Тефлубенэурои,х.ч.

Хлороформ, х.ч.,ГОСТ 20215-74. н-Гексан, х.ч., ГОСТ 6-09-3875-78.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.

Спирт этиловый, х.ч., ТУ 6-1710-77.

Натрия сульфат безводный,ч_м ГОСТ 4166-76.

Соляная кислота концентрированная, х.ч.,ГОСТ 3118-77, 12%-й водный раствор (но объему).

Калий марганцевокислый, х.ч., ГОСТ 20490-76, 3%-й водный раствор.

Калий йодистый, х.ч., ГОСТ 4232-74, 1%-й водный раствор.

Крахмал водорастворимый, х.ч., ГОСТ 10163-76. 3%-й водный раствор.

Фильтры бумажные обеззоленные “синяя лента”, ТУ 6-09-1678-77, предварительно промьггыс смесью хлороформ-ацетон (1:1) и высушенные.

Пластинки хроматографические “Силуфол” IJV-254 (ЧССР) размером 15 х 15 см. Азот, особой чистоты, газообразный в баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74. Хроматон N-AW сил актированный ГМДС с 5% ХЕ-60 (0,16-0,20 мм).

2.3.    Приборы,аппаратура, посуда.

Хроматограф, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации. Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Ротационный вакуумный испаритель с набором колб типа ИР-1М (2М),

ТУ 25-11-917-74.

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ИРК-4, ТУ 16-535-280-74.

Фильтродержатели (патроны).

Весы аналитические.

Хроматографическая колонка стеклянная длиною 2 м и внутренним диаметром 3 мм. Секундомер, ГОСТ 5072-72.

Микропипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.

Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы конические на 100 мл, ГОСТ 20292-82.

Воронки химические, ГОСТ 29932-74.

Цилиндры мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пробирки мерные емкостью 10 мл с ценой деления 0,1 мл, ГОСТ 1770-74.

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-79.

2.4.    Отбор проб.

Воздух со скоростью 5 л/мин аспирируют через фильтр “синяя лента" в течение 5 минут. (Для определения на уровне чувствительности методики необходимо отобрать 25 л воздуха). Пробы анализировать сразу.

2.5.    Подготовка к определению.

2.5.1.    Приютовление проявляющего реактива для ТСХ определения.

Проявляющий реактив для ТСХ определения: хлорирование-йодид калия-крахмал.

Раствор для хлорирования. Смешивают равные объемы 3% раствора перманганата калия и 12% раствора соляной кислоты. Готовят перед употреблением в количествах необходимых для разового пользования.

Проявляющий реагент: а) 1% раствор йодистого калим; б) 3% раствор крахмала; перед употреблением смешать растворы а), б) и лиловый спирт в соотношении 2,5:2,5:1.

2.5.2.    Приготовление стандартных растворов.

Стандартный раствор Яа 1 с содержанием тефлубензурона 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг вещества в ацетоне в мерной колбе на 100 мл.

Растворы, содержащие 20, 10, I мкг/мл готовят соответствующим разбавлением раствора Я» I. Хранят в холодильнике не более месяца.

2.5.3.    Построение |радуировочного (рафика.

Для количественного определения тефлубензурона методом ГЖХ строят |ридуировочный график методом абсолютной калибровки. Готовят серию стандартных растворов с содержанием 1-20 мкг/мл в ацетоне, 1 мкл каждого разведения вводят в хроматограф. Но полученным данным строят график зависимости интенсивности пика от количества тефлубензурона.

Для определения тефлубензурона с помощью ТСХ применяли метод оценки по размерам пятна. Площадь пятен известных количеств стандартных растворов измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и строят график зависимости “площадь ниша-количество’' в пределах линейности детектирования (1-10 мкг).

2.6.    Описание определения.

Фильтр переносят в коническую колбу и экстрагируют тефлубензурон хлороформом трижды по 15-20 мл, периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,1-0,2 мл. Растворитель удаляют на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее анализируют методами ГЖХ и ТСХ.

Условия IЖХ анализа следующие: хроматограф, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации, включают в соответствии с инструкцией на следующий режим: температура термостата колонок 180° С; температура испарителя 230^е С; температура детектора 190" С; скорость потока газа-носителя (азота) - 60 мл/мин; скорость диаграммной ленты 600 мм/чне, рабочая шкала электрометра 5 х 10-’² А; хромато(рафирусмый объем - I

мкл; нижний предел обнаружения - 1 нг. Абсолютное время удерживания на колонке с 5% ХЕ-60 - 4 минуты 30 секунд.

Количественную оценку тефлубетурона проводят с помощью калибровочного графика. На полученной хроматограмме измеряют интенсивность пиков и по калибровочному |рафику определяют количество тефлубетурона.

Для определения тефлубетурона с помощью ТСХ экстракт после анализа методом ГЖХ концешрируют до объема 0,1-0,2 мл и количественно наносят на хроматографическую пластинку “Силуфол”. Справа и слева от пробы наносят известные количества стандартного раствора тефлубетурона в пределах диапазона линейности.

Хроматографирование проводит в системе гексан-ацетон в соотношении 5:3. После поднятия фронта растворителя на 14 см пластинку проветривают на воздухе до полного удаления растворителей. После этого пластинку подвергают облучению УФ светом в течение 30-35 минут, а затем помещают в камеру с хлорирующей смесью на 3 минуты. После этого оставляют пластинку на воздухе до полного удаления запаха хлора (около 15 минут) и обрабатывают из пульверизатора проявляющим реагентом (йод-крахмальный реактив). Зоны локализации номолта обнаруживаются в виде синих пятен на светлом фоне. Величина Кг составляет 0,4± 0,02. Линейный диапазон измерения на пластинке составляет 1,0-10,0 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона линейности (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть экстракта.

На полученной хроматограмме тмеряют интенсивность пятен (по окраске и площади) с помощью миллиметровой бумаги и по калибровочному графику определяют содержание тефлубетурона.

2.7. Обработка результатов анализа.

Концентрацию (С, мг/м' ) тефлубетурона вычисляют по формуле:

С= а. V V,. V»

где:

а - количество номолта, найденное по калибровочному графику, мкг;

V • общий объем анализируемого раствора, мл;

Vi - хроматографируемый объем пробы, мл;

V» - объем анализируемого воздуха, приведенный к стандартным условиям^.

З.Требования безопасности.

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы М3 СССР (Я* 2455-81 от 20.10.81).

64