Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 21 Часть 1-ая

МОСКВА

ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.

УТВЕРЖДЕНО МИНИСТЕРСТВОМ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

»    и    ъпптга    IQQIt-

$    6075-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМИЛИНА В ЯБЛОКАХ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

(дополнение к .№ 94S1-S1 от 22.10.1981)

1. Краткая характеристика препарата

Название по номенклатуре ИСС,СЭВ - дифлюбензурон

Химическое название N-(2,6-дифторбензил)-N-(4-хлорфенил)

В чистом виде кристалллы белого цвета с Т.пл. 230-230^0.

Давление паров при °С 0,013 мПа (9»8*10~⁸мм рт.ст.) Растворимость в воде при 20°С 0,1 мг/л.

в неполярных растворителях 10 г/л, в ацетоне 6,5 г/л при 25°С, в

диметилформамиде -104 г/л,диоксане 20 г/л.

ЛД^ф орально для мышей и крыс 4640 мг/кг,для кроликов 2000 мг/кг. СК^ф для рыб 130-140 мг/л.

В США МДУ в пищевых продуктах О,05мг/кг. Допустимое суточное потребление (ADJ) 0,02 мг/гк. В СССР ВДУ в яблоках 0,1 мг/кг

Применяется в качестве инсектицида на яблонях,цитрусовых,овощах.

Разработчики: Т.В.Алдошина,К.Ф.Новикова,ВШШХСЗР,г.Москва

2. Методика определения димилина в яблоках тонкослойной хроматографией .

2 -1 - Основные положения

2.1.1.    Метод основан на извлечении димилина из яблок смесью гексан -ацетон, очистке экстракта кислотно-щелочным перераспределением димилина и определении тонкослойной хроматографией на пластинках "Силуфол¹¹.

2.1.2.    Метрологическая характеристика метода Диапазон измеряемых концентраций -0,03 - 3,30 мг/кг.

Предел обнаружения в хроматографируемой пробе - 0,2 мкг.

Предел обнаружения в яблоках - 0,03 мг/кг.

Среднее значение определения стандартных количеств димилина в яблоках при п=15 - 10/.

Доверительный иетервал среднего определения при п=5 и р=0,95 87-12/. Размах варьирования R 70-100/.

2.1.3.    Избирательность метода

Метод селективен.Избирательность метода обеспечивается сочетанием двух систем подвижных растворителей различной полярности и двух проявляющих реагентов.

2.2.Реактивы и растворы Ацетон, чда,ГОСТ 2603-79-Этилацетат, хч, ГОСТ 22300-76.

Гексан, чда, ТУ 6-09-3375-78.

Бензол, чда, ГОСТ 5955-75-

Хлороводородная кислота, HCI, чда, ГОСТ 3118-74, концентрированная. Гидроксид калия, ч, ГОСТ 24363-80.

Гилроксид натрия, NaOH ГОСТ 11078-78, очищенный 4н раствор.

Сульфат натрия, хч,Г0СТ 4166-76, безводный. о-Толидан, ч, ТУ 6-09-299-73.

22:

Калий йодистый,К1,хч,ГОСТ 4232-74-Натрий нитрит КарЖ)₃,хч, ГОСТ 4197-74-Уксусная кислота, ГОСТ 61-75? ледяная, а- Нафтол, чда, ГОСТ 5838-79.

Калий марганцевокислый, КМпО^, ч, ГОСТ 20490-76-

Проявляющий реагент .№ 1 - Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 1 г KI и доводят до 500 мл дистилиро-заняоЙ водой.Раствор хранить в темном месте. Срок годности 2 недели.

На обработку одной хроматограммы идет около 1 мл реагента-

Проявляющий реагент Л 2. Раствор А. К смеси,состоящей из 46 мл воды и 4 мл концентрированной НС1 добавляют 1,5 г нитрита натрия-Раствор Б.Растворяют 2,8 г КОН в 50 мл дистилироваяной вода и прибавляют 0,3 г а-нафтола.

Растворы А и Б готовят перед использованием.

Стандартный раствор димилина в ацетоне с содержанием 1000 мг/мл (раствор 1) и 10 мкг/мл (раствор 2).

Стандартные растворы димилина стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.

Пластинки^,,Силуфол",производства Хеманол, ЧСФР, размером 150x150мм.

2.3. Приборы,температуры, посуда

Камеры хроматографические, стеклянные, с пришлифованными крышками, ГОСТ 25336-82Е или аналогичные.

Лампа УФ-света, ртутно-кварцевая, с широким диапазоном волн,

ТУ 46-22-236-79 или аналогичная.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76 или аналогичный.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.

Пульверизаторы стеклянные,ГОСТ 25336-82.

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82Е.

224

Колбы плоскодонные ГОСТ 25336-82,вместимостью 500,250 мл.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 и 500 мл.

Пипетки с делениями, ГОСТ 20292-74Е.

Пробирки градуированные с пробками на шлифах, ГОСТ 1770-74Е, вместимостью 5 мл.

Эксикатор, ГОСТ 25336-82Е, вместимостью не менее 2 л.

Микрошприц на 10Q мкл или микропипетка ГОСТ 20392-74Е на 0,1 мл.

2.4.    Подготовка к определению

Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей гексан:ацетон (2:1) и бензол : этилацетат (6:1) для насыщения камер парами подвижного растворителя. Обьем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше,чем на 0,7-1,0 см от уровня дна камеры.

Камеру для хроматографирования готовят следующим образом: на дно эксикатора помещают чашку Петри с 5 г КМпО ^ а затем к ее содержимому осторожно приливают 15 мл концентрированной HCI. Камеру закрывают пршлифованной крышкой. Камера может быть использована через 5-10 минут.

2.5.    Отбор проб

Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом ССР 21.08.1979,    2051-79.

2.6.    Проведение определения

Пробу имельченных яблок (30 г)помещают в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, добавляют 70 мл смеси гексана с ацетоном (2:1) и 0,2 мл концентрированной НС1. Димилин экстрагируют при помощи механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт пропускают

225

через пористый фильтр со слоем безводного сульфата натрия в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию димилина повторяют еще два раза тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (J0 10г), а затем фильтруют через пористый фильтр в круглодонную колбу вместимостью 500 мл.Сульфат натрия промывают 2-3 раза смесью гексан-ацетон (2:1) общим обьемом .№10 мл и полученный раствор также переносят в круглодонную колбу. С помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. Остаток из колбы количественно с помощью 10 мл ацетона переносят в делительную воронку на 500 мл, добавляют 250 мл дистилированной воды и около 0,5 мл 4 Н NaOH до pH 10.Экстракт промывают три раза гексаном,порциями по 50 мл.Гексановую фазу отбрасывают.К водной фазе пипеткой добавляют около 0,5 мл концентрированной HCI до рН-1. И триада экстрагируют димилия гексаном, порциями по 50 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (~5 г), а затем порциями фильтруют в грушевидную колбу вместимостью 50 мл^ Каждую порцию концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1-2 мл.Последнюю порцию гексана удаляют полностью. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана.Колбочку закрывают пробкой на шлифе и тщательно обмывают стенки колбы растворителем.Для хроматографирования отбирают с помощью микрошприца на 10Q мкл или микропипеткой на 0,1 мл аликвотную часть раствора (0,1-0,2 мл) и наносят на хроматографическую пластинку"Силуфол".Справа и слева от рабочей пробы,таким же образом по 0,1мл наносят серию стандартных растворов с содержанием 0,2;0,4;0,6-. .1,0 мкл димилина,подготовленных следующим образом: в ряд градуированных пробирок вместимостью 5 мл пипеткой на 1 мл из стандартного раствора # 2 переносят 1,2,3--- мл и доводят до метки гексаном.

226

Хроматограмму развивают в системе псе сан: ацетон (2:1) или бензол: этилацетат (6:1).После развития хроматограмму на 15 минут помещают под лампу УФ света,затем после полного выветривания паров хлора, хроматограмму обрабатывают проявляющим реагентом Л 1,

Димилин на хроматограммах прояется в виде темно-серых пятен сначала на белом, а затем на бежевом фоне с R^0,40-0,05- в первой системе подвижных растворителей и 0,35-0,02 - во второй.Линейный диапазон определения 0,2-1 ,0 мкг в хроматографируемой пробе. Пятна стабильны в течение нескольких месяцев.

В качестве альтернативного проявления,используют проявляющий реагент J&2. Хроматограмму после облучения в УФ свете последовательно обрабатывают раствором А и Б. Димилин проявляется в виде красных пятен на бледно-желтом фоне.Линейный диапазон определения - 0,5-10 мкг.Пятна стабильны в течение длительного времени.

2.7. Обработка результатов анализа

Количественное определение димилиыа в анализируемой пробе проводят путем сравнения площади и интенсивности пятен рабочей пробы и серии стандартных растворов и содержание его (X) в мг/кг вычисляют по формуле:

А . V

Х= - ,    (мг/кг),где:

• ^р

А- количество димилина, найденное в хроматографической пробе, мкг;

V- общий объем раствора, мл;

V_ - объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл;

а

Р - навеска анализируемой пробы, г.

3 - Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности, принятые для работы с пестицидами и горючими растворителями.

227