ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Часть 17-я
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Москва
ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ЬРЬЦЦ1ТШШ>Б0ДЕ31Ш1 РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ ДОГМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Чаотъ 17-я
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями,боле8нями растений и сорняками
Москва -
6UO -
3* Требования безопасности
Соблюдать требования безопасности, принятые для работы с легковоспламеняииимися жидкостями, кислотами в щелочами.
4* Разработчики
Методические указания разработаны во ВНИИ химических средств защиты растений с опытным заводом.,г.Москва, Д. И. Лещинской,
1C. Ф. Новиковой.
5* Апробаторы
1. НПО "Эфирмасло", Ю.СЛэаранов.
2. ВИЖ, В.Н.Полякова.
отр.
ФосФопооганические пестишиш
1. ременные методические указания по определению актеллика и базудина в чае с помощью тонкослойной газожидкостной хроматографии
22 мая 1985 г. £3888-85
2. Временные методические указания по определению актеллика в биологическом материале хроматографическими методами (дополнение к £2065-79)
21 ноября 1965 г. JW038-65
3. Методические указания по определению дифоса (абата) в продуктах растениеводства методом тонкослойной хроматографии (дополнение к £1350-75 от 22,09.75 г.)
22 мая 1985 г. £3866-65
4. Методические указания по определению примипида в растительном материале и в почве с помощью тонкослойной и газожидкостной хроматографии
21 ноября 1965 Г. £4028-85
5. Методические указания по определению оульфидофоса
в мясе, молоке и кормах методом тонкослойной хроматографа 3 I965 г> *3136-65
6. Методические указания по определению остаточных количеств хлорофоса в картофеле хроматоэнзимным методом (дополнение к £3165-85 от 03.01.85 г.)
Хлорорганнческие пестициды
362.
стр.
43
51
57
60
64
73
7. Временные методические указания по определению блазера в воде, почве, сое и зеленых листьях методом хроматографии в тонкой слое
27 ноября 1984 Г* №3156-84
8. Временные методические указания по определению
дилора в меде методом тонкослойной хроматографа 22 мая 1985 г. №3884-85
9. Временные методические указания по хроматографическому определению Щ в воде
22 мая 1985 г. №3876-85
10. Временные методические указания по определению
модауна в воде и почве газохидкостной хроматографией 21 ноября 1985 Г. №4030-85
11. Методические указания по определению тиолана и продуктов его превращения в воде хроматографическими методами а ноября 1Э65 г. №4035-85
12. Временные методические указания по определению триалдата методом газожидкостной хроматографии в воде, почве и зерне пшеницы
21 ноября 1985 г. №4032-85
13. Временные методические указания по определению мэтодами ПОС н ТСХ аналога ювенильного гормона п-хлорфенилового вФвпа гераниола в Берне пшеницы, почве,воде в зеленых листьях
12 апреля 1985 г. №3254-85
14. Временные методическиеиу указания по определению остаточных количеств фозилада в свекле методом газожидкостной хроматографии
22 мая 1965 г. £3675-85
15. ременные методические указания по определению регулятора роста растений ЭБ£-5 в воде, растительном материале методом ТСХ
21 ноября 1985 г. £4031-65
16. Методические указания по определению остаточных количеств хлорорганлческлх пестицидов и продуктов их разложения (./«-изомера ПИТ. V-изомера ГХИГ. гептахлора, альдрина. кельтана. ДДЭ. ЛЛД. ЛИТ)
в воде хроматографическими методами при совместном присутствия j 1986 Гв Ш20-86
Азотсодержащие пестициды
17. Временные методические указания по определению ацетала в воде, почве, картофеле, верне и зеленой массе кукурузы и сои методами ГаХ и ТСХ
21 ноября 1985 г. £4029-85
18. Методические указать по определению диФенамяда в в воде методом тонкослойной хроматографии
21 ноября 1985 г. £4033-85
19. Методические указания по определению карахола и его метаболита бензоклпродкислоты в почве методом газожидкостной хроматографии
31 июля 1984 г. £3072-84
20. Временные методические указания по определению лентаграна в растительной продукции, почве и воде ТСХ
364
отр.
136
142
148
156
162
167
171
12.04.85 г. №3253-85
21. Методические указания по определению монуро-на и дкуроиа в чае методом газожидкостной хроматография 3 1Шваря Is85 г> >Ш87-85
22. Временные методические укаэания по определению набу в воде, почве, капусте, сое и зеленых листьях методом хроматографа в тонком слое 22 мая 19й5 г> *3860-85
23. Временные методические указания по определению раукдапа в воде методом ТСХ (дополнение к №2434-81)
21 ноября 1985 Г. №4034-85
24. Временные методические указания по определению сонаяена в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами
3 января 1985 г. №3200-85
25. Временные методические укаэания по определению соналена в маслах подсолнечника, репса
и клещевины ISX 22 мая 1985 Г. №3894-85
26. Временные методические указания по определению стомпа методом ПК в табаке
12 апреля 1985 Г. №3252-85
27. Методические укаэания по определению тклта в растениях,почве, воде методом гозоаидкост-
ной хроматографии
стр.
1^9
1Я4
189
196
204
2X1
217
225
3 января 1985 г, $ 3190-86
28. Методические указания по определению триадимо-фона ( байлотона) методом ТСХ в воде
22 мая 1986 г. *• 3692-85
29. Методические указания по определению фонмедл»{Улмп| и
десмедифама в воде природных водоемов ТСХ
21 ноября IQdt> г. > 4036-83
Прочие пестициды
30. бременимо методические указания по определению остаточных количеств арилона по бемзолсульфонамяду в зернах хлопка,почве и воде тонкослойной хроматографией
21 ноября 196эг. '* 4037-85
31. Методические указания по определению гидразида малеиновой кислоты в табаке колориыеярическиы методом
12 апреля I9j5r. $3251-35
32. Методические указания по определению диметилсуль-Фоксида и его метаболита диметнлсульФона методом гаэожидкястной хроматографии в сахарной свекле, картофеле и зеленой массе
28 мая 1986 г. $ 4119-86
33. Временные методические указания по определению
остаточных количеств препарата 320-К в зерне и
воде тонкослойной хроматографией
22 мая 1985 г. $ 3390-85
34. Временные методические указания по определению ДРХ-4189 С ГЛИИ) в воде, почве, растительном материале методом газожидкостной хроматографии 22 мая 1985г. $ 3885-85
Настоящие методпческие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических с таили Я и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома . СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве гфшиальнкх Группой экспертов при Госкомиссяи по химическим ерсдствам борьбы с вредителей,болезнями растений и сорняками Гпоагропрома СССР
Методические указания согласовали и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИОДяТО им.Марпиновского В.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
РЩКШОНШ КОЛЛЕГИЯ
Л.Г.Александрова, Д.Б.Гйрешх, А.А.Калинина (за;4.председателя), Ц.А.Клисенко (председзтеть), Г.И.Короткова, М.В.Письменноя, Г.А.Хохолькога, В.Е.Кривейчук.
i *0 -
"УТВЕРКДАЮ"
Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР
А.И.ЗАЙЧЕНКО
"21" ноября 1985 г, #4037-35
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОШ>ВДШЖЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АРИЛ ОНА ПО БЕНЗОЛСУЛЫЮНАШЩУ В ЗЕРНАХ ХЛОПКА, ПОЧВЕ И ВОДЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
I, Краткая характеристика препарата .
Арилон (хлорааин.Б) кристаллогидрат натриевой соли бензол-
сульфонамида. Арилон показал хорошие результаты в качестве антисептика на хлопке, .п
Арилон хорошо растворим в воде и водных растворах щелочей.
При нагревании выше 150°С разлагается с выделением газообразных продуктов разложения (HCI, CI). В водных и кислых растворах нестабилен, в течение нескольких минут разлагается до бензолсуль-фонамида.
ЧДУ арилона в хлопке еще не установлен .
2, Методика определения арилона в зернах хлопка, почве и воде тонкослойной хроматографией.
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении арилона в виде бензолсульфо-мида (БСА) из анализируемого объекта этилаиетатом, перераспре-
- 197 -
деления в солянокислый раствор, а затем, после подщелачивания - в атидацетат и определении тонкослойной хроматографией.
2.1* Метрологическая характеристика метода
Предел обнаружения
в хлопке в почве в воде
Диапазон измеряемых концентраций 0,1-0,5 мкг в хроматографируемой пробе по БСА.
арилона БСА
0,35 мг/кг 0,2 мг/кг
0,1 мг/кг 0,07 мг/кг
0,003 мг/л 0,002 мг/л
Дальнейшая метрологическая характеристика метода представлена в таблице I.
Таблица I
/йетрологическая характеристика метода
Объект |
Среднее значение опредеделения стандартных количеств С при п=15 |
Стандартное отклонение при п=15
S % |
Доверительный интервал среднего определения при р=0,9|, п=5 |
Размах
варьирования
Д
% |
Хлопок |
85,7 |
± II.2 |
85,7+13,8 |
70-100 |
Почва |
92,7 |
+ 7,0 |
92,7+8,6 |
80-100 |
Вода |
86,7 |
+ 9,7 |
86,7+12,1 |
70-100 |
2.1.3. Избирательность метода
Метод селективен. Другие пестициды, применяемые на хлопчатнике, в том числе хлороргавяческие и фоофорорганическяе определению не
мешают,
2.2. Реектичы и растворы
Ацетон, осч, ГОСТ 2609-79, свекегтерэгианный.
Этплацетат, хч, ГОСТ 22300-76, свежеперегнанный.
Этиловый спирт, 96*-ныЯ, ТУ 6-09-1710-77.
Бензол, чла, ГОСТ 5955-75.
Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74.
Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-76.
no2s04, хч, ГОСТ 4166-76, безводный.
КМп04, хч. ГОСТ 4220-75.
о-Толидин, ч, ТУ 6-09-2992-73.
К I, йодистый кали, хч, ГОСТ 4232-74.
Соляная кислота, фиксанал, осч, ГОСТ 14261-77, 0,1н, 10£-«ыЧ.
КОН, едкое кали, техн., ГОСТ 9265-73.
Уксусная кислота, осч, ГОСТ 18270-72, ледяная.
Проявляющий реаг£Н2 I.Растворяют 0,16 г о-толядина в 30 мл Уксусной кислоты, доводят до 500 мл водой и прибавляют I г К I. Раствор хранить в темном месте.
Хлорирующая оме свешивают равные объемы 1,5£-ного раствора K.h04 и 10£-нэго раствора НС1 в чашечке Петри. Оесь в чашке Петри помещают на дно хлорирующей камеры с притертой крышкой. Для этой цели обычно достаточно 10-12 мл хлорируппей с/еси.
_П£огаляшиЛ_реагент_2х Свешивают 50 мл 1>-ного водного раствора К 3 с 50 мл Энного водного свежеприготовленного, доведенного до кипения крахмала и 20 мл этилового спирта. При хранении на холоде раствор стабилен в течение нескольких дней.
Стандартные растворы бензолсульфонамкда в ацетоне с содержанием 100 и 10 мкг/мл. Раствор I с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг бензолсульФонамида , помешенного в мерную колбу не 100 мл
- 199 -
в ацетоне. Для приготовления раствора 2 с содержанием 10 мкг/мл, аэ раствора I олпеткоЯ отбирают в мерную колбу на 100 мл 10 мл и доводят до метка ацетоном. Растворы I я 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение одного месяца.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда
Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-75 или аналогичная.
Аппарат для встряхивания.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-Ы, ТУ 25-П-Э17-76 с набором колб или аналогичный.
Делительные воронки, ГОСТ 6613-75, на 250 и 1500 мл.
Стеклянные пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.
Уернке колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-77, на 10, 15 и 2 мл.
Кофейная мельница.
Пробирки с пробками на шляТах, ГОСТ 10515-75, на 10 мл.
Круглодонные колбы, ГОСТ 9737-70, на 100 и 250 мл.
Плоскодонные колбы, ГОСТ 9737-70, на 100, 500 мл.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.
Камера хлорирующая с пришлифованной крышкой.
Чашечки Петри, ГОСТ I990&-74.
.Чикрошпрнц на 100 мкл.
Пластинки силуФол, 150x150 см, производство ЧССР.
2.4. Подготовка к определению
Хроматографические камеры за один час до начала хроматогра’ировьнйЯ заполняют смесью подвижных растворителей гексан :эт;ишцетат (1:1) или бензолгацетон (7:3).Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше, чем 0,7-1 см от уровня дна камеры.
2.5. Отбор проб
Отбор проб проводят в соответствия с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектах окружающей среды для определения микроколкчеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21 августа 1979 г, ь 2051-79.
2.6. Подготовка проб к анализу
Зерна хлопка измельчают на кофейной мельнице до консистенции муки грубого помола. Для определения берут 3-5 проб массой по 10 г. Почву просеивают, отбирают средние пробы массой по 15 г. Перед анализом почву увлажняют 2 мл воды.
2.7* Проведение определения
Хлопок* ПОЧВ2. Навеску анализируемого образов помещают в плоскодонную колбу на 500 мл, заливают 75 мл перегнанного этилацетота и экстрагируют БОА на механическом встряхизателе в течение 30 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 250 мл. Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 мл этилапетата. Объединенный этилапетатный экстракт концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема около 2 мл, а почвенный экстракт досуха. К остатку в колбе приливают 15 мл 0,1 н HCI в эк<&акт из хлопка и 30 мл 0,1 я HCI - в почвенный экстракт. Полученный раствор фильтруют через бумажный Фильтр в делительную эорояку на 250 мл. Стенки колбы тщательно обмывают 0,1 я HCI порциями по 15 и 30 мл. Полученные растворы такте фильтруют в делительную воронку. В результате жир из хлопкового экстракта остается на бумажном фильтре. Беля делительная воронка все-таки испачкалась ккром, солянокислотный экстракт переносят н другую
— C\J A —
воронку, ори этом жир остается на стенках первой колонки. Далее к экстракту добавляют 1,25 мл 4 н КОН до рН= 10. БСА извлекают экстракцией этилацетатом, порциями по 30 мл три раза. Экстракт сушат над безводным сульфатом натрия 115-20 г), Фильтруют и концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя досуха.
К сухому остатку от хлопка пипеткой приливают I мл этилаце-тата, а к почвенному экстракту - 0,5 ал ацетона. Колбу закрывают пробкой и тщательно обмывают стенки колбы растворителем. Для хроматографирования отбирают аликвоты в 100 мел .
ЗодаА К I л воды, помещенной в делительную воронку емкостью 1,5 л приливают I мл 4 н КОН и экстрагируют БСА этилацетатом, насыщенным водой, порциями по 150 мл и два раза по 100 мл. Этилацетат-ный экстракт концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя досуха. Остаток с помощью 0,1 н HCI (30 мл х 3) переносят в делительную воронку на 500 мл, з воронку добавляют 1,25 мл 4 н КОН в трижды экстрагируют БСА этилацетатом порциями по 30 мл. Этилацетатньй экстракт сушат над безводным сульфатом ватрия, а затем порциями концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема около 2 мл. Последнюю порцию концентрируют досуха. К сухому остатку пипеткой приливают I мл ацетона, колбу закрывают пробкой па тлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. Для ТСХ отбирают аликвоту в 100 мкл.
На пластинку наносят микрошгтрицем 100 мкл полученного раствора. Справа я слева от рабочей пробы на пластинку микрошприцем наносят серию стандартных растворов 2 в количестве 10, 20, 30 ... 50 мкл. что соответствует 0,1; 0,2; 0,3; ....0,5 мкг БСА. Хроматограмму развивают в смеси этялапетата с гексаном (1:1) или бензола с
- -
ацетоном (7:3). После развития хроматогрвьмн пластинку во влажном состоянии помещают в камеру о хлорирующей смесью на 2-3 мин, затем пластинку вынимают из камеры, помещают ее под тягу и дают возможность избытку хлора испариться, после чего обрабатывают пластинку аз пульверизатора о-толидяновым реагентом. Бензолсульфонамид проявляется на пластинках в виде сиреневых пятен на белом фоне с 1^(10,45+0,03 в первой системе подвижных растворите лелей и с R^O, 50+0,03 - во второй. Линейный диапазон определения 0,1-0,5 мкг БСА. Пятна стабильны в течение длительного времени.
Хроматограмму можно проявлять также проявляющим реагентом 2*
В этом случае БСА проявляется на пластинках в виде голубых пятен на белс« фоне с нижним пределом определения 0,1-0,2 мкг.
2.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности окраски пятен рабочей пробы и серии стандартов.
Содержание арилона в анализируемой пробе X в мг/кг вычисляют по формуле:
С . 1/. К X = —-- , где
К-р
С - количество (^нзолсульфонамяда, найденное на пластинке методом соотношения со стандартом, мкг;
V* - обаяй объем раствора, мл;
/1/Уа'-объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл;
? - навеска анализируемой пробы в г;
К - коэффициент пересчета БСА на врилон, ровен 1,71.