ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии, болезнями растений и сорняками

Г0СУЛАРСТНЕШШ1 КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ „ КОЖАХ И ВЫШНЕЙ СРЕДЕ

Данные методшш апробированы в рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при 1Ъскомяссиы„болезнями растений и сорняками

Москва- 1987 г,

Настоящее методичеокпе указания предиаэвачеиы для оанзтар-но- ei?пдемяологическая станций п научко-сдтдедовагедьоаак учреа-девпй Минздрава ОССР_с а такие ветеринарныя₀огрохомпчеокп2₀иоа-тродьно-токсцкодоглчеокия дзбораяорпИ Гооогропрона СССР а лабораторий другая Министерств п ведомств₀зашшавдякол определением оояаточпых подачеств пестицидов и биопрепаратов о продуктов питания,, порток а виеипеП 0реде_о

Срои деЙотвпя временник методичбошн указаний уотоиш~ дпваетбя до утверпдеаия гнгпеничеокик нормашвов.

Методичеокае указания есробпровонн п рекомгвдог>оцы в качестве официальных ГруппоП экспертов при Госкомпссаи «о ишп-чеокпы сргдотааа борьбы о вредителям „болезнями раотопиО в оор-аяяшп.

Методические указания согдасовосн с одобреиы Лобо разорены оовотои при Гдеовом еапитарко-спсдемиологочеоиои увровдепап Минздрава ССС?_с

РШК1Ш0ННЛЯ КОЛЛЕГИЯ

Л.Г.Дяексацдрово₀ JLB_ornpenKO„ ЛЖКедиппне ( эам.иредоедотвая), Мвй.Кдисэпго ( председатель) о Г. во Коротко во ₀ В.ВоК^ао0ачуа_о Г_вЛ«ХоКольцова рА.МсВьсгадвсое

208

УТВВШАЮ

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А.И.Зайченко * 27. " _апреля 1984г.

N 3007-84_

bpemshrub ютоютжив УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕННО ОСТАТОЧНЫХ количеств ВИСЦИНА (БОЛЕТИНА) В ОВОЩАХ, ФРУКТАХ, СВЕКЛЕ (СТОЛОВОЙ. КОРМОВОЙ, САХАРНОЙ) САХАРЕ, ЮМК, МЕЛАССЕ, ВОЛЕ И ПОЧВЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЙ*

1.    Краткая характеристика препарата

Биопия (болетил) - новый отечественный фунгицид, хорошо показавший •абя в борьбе с грибковыми заболеваниями овощных и фруктовых культур. Действующее начало препарата - двойная цинковая соль этиленбисдитиокарба-ииновой кислоты и ы-метилбеяэ**нлоэолилкарбамвт8.

'у*

I    ^CI3^H15ⁿ5°2^S4

CHg-NR-C^^    Мол. масса 466,95

В чистсм виде кристаллы светложелтого цвета, разлагающиеся при температуре ваге 200°С. В воде биопин практически нерастворяется. Растворимость ттр* 20°С в ацетоне 0,0?С, ксилоле 0,03?, хлороформе 0,04£, пюиюгвноаиоае 0,0Я*.

ИДУ биоиина в сахарной свекле 0,1 мг/кг, в овоптх, фруктах, прочей оадъскохозяйствепиой продукции и почве еще не установлены.ПДК в воде 0,005 мг/л.

2.    Методика определения биопиив в овощах, Фруктах, свекле, сахаре, мелиссе, ломе, воде и почве тонкослойной хроматографией

2,1, Основные ттолоявншя

2.1*1. Принцип метода

Метод основав на извлечении |7нгипидя иа анализируемого объекте втвлвцетвтом, очистке вкстрякта перераспределение* биопква в солянокислую среду. • после тпшнелягчнвяния - в етилапетят и о"\*«г**,-.•,_м* ТСХ.

20S

2.1.2,    Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения и хроматографируемой пробе: на пластинках е УФ-добавкой, в УФ свете - Зикг, при проявдааял броыфсн^-довьм правите леи - 3-5 мкг.

Предел обнаружения в овощах, фруктах - 0,15 мг/кг, сахаре -0,15 мг/кг, жо*э - 0,3 иг/кг, мелассе - 0,6 мг/кг, почве - 0,15 иг/кг, вода -0,004мг/я.

Среднее значение определения стандартных количеств биоцина во всех объектах С при п=15 80£.

Стандартное отклонение з при п=15 ±7,1%.

Доверительный интервал среднего определоння для всех объектов при р=0,95 я п=5 80,0+8,8/6.

Размах варьирования для всех объектов 70-90£.

2.1.3.    Избирательность метода

Метод селективен. Парам, цияеб, ТИГД, каптал а другие фунгициды определению па метают. Метают определению БМК и беалат, т.к. определение вводила также проводится по БЙК.

2.2. Реактивы и растворы

Гексан, хч, ХУ 6-09-3375-78, свежелврегваялый.

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74.

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79..

ЭглАшатат, хч, ГОСТ 22300-76, све же перегнанный.

йдкяй натр, чдв, ГОСТ 4328-77 , 4н.

Сернокислый натрий, хч, ГОСТ 4166-76, безводный.

Соляная кислота, хч. ГОСТ 3118-77, 0,1н.

Кислота уксусная ледяная, хч, ГОСТ 61-75.

Азотнокислое серебро, чда, ГОСТ 1277-75.

Броыфенодовый синий, индикатор, чда, ТУ 6-09-1058-76.

ПроявляпциЯ реактив. Растворяют 0,05 Г Оровжрололового синего в 10 мл шетоаа и доводят до 100 мл £*-вш раствором А^ыО^ в смеси ацетона с ведой (3:1). Хранят в темном касте.

Лимонная кислота, чда, ГОСТ 3652-69, 2,36-иьй раствор.

Пластинки "Силуфол" с УФ и бев флюоресцентной добавки.

Стандартный раствор биоцида в апетоне с содержанием 100 мкг/мл. Сталла ртяьй раствор стабилен при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.

2.S. Приборы, посуда и аппаратура

Хроматографическая камера с прашларованыой крышкой.

Ротационный вакуумный испаритель.

Делительные воронки, ГОСТ 10054-75, на 1500, 500 а 300 мл.

Колбы конические, ГОСТ 9737-70, на 250 мл.

210

Колбы плоскодонные, ГОСТ 9737-70, 500 В 250 ши

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

Гробпртш градуированные с оттянутым дпоа п пробкамп на олкфах,

ГОСТ 1770-74, на 10 мл*

Пипетки на 10 и I ил, ГОСТ 1770-74.

Лампе УФ-света типа "Хроматоскоп" шга аналогичная с диапазонов светового излучения 250-260 нм.

Пульверпзаторы стеклянные.

Стаканы стеклянные, ГОСТ 10394-72, на 250 мл.

2.4.    Подготовка к определенно

Хроматографические камеры за один чао до начала хроазатографярованпя заполняют етесыо подвижны* растворителей:    гексан-ацетон-ледяная    уксусная

кислота (30:20:1) пли етиляпетат-хлорофор&ьледяная уксусная кислота (50:50:10) для насыщения иамвр парами подвижных растворитеяэй. Объем под-ввннего растворителя должен по высоте находиться не выше 0,7-1,0 сз от уровня дна к«аерн.

2.5.    Отбор проб

Отбор проб для п палев а проводят в соответствен: с "Унвфщвроваиннмп правшшмн отбора проб сельскохозяйственной продукция, ггрдуктов гшташж о объектов окружающей среды для определения микроколячеств пеетгавдов", утвержденной Минздравом СССР 21 августа 1979 г. R 2051-79.

2.6.    Подготовка проб к анализу

Для анализа картофеля, огурцов, яблок, цитрусовых, лука, свеклы ns средней пробы подготавливают трп параллельные навески массой 20 г. Картофель, огурцы, евеклу, яблока шжгольчагу? нояом на кубшш с разнерсст гране около 5 см. Цитрусовые, томатв, лук ннгаеяъчают на маленькие долька. Сахар анализируют в виде песка ила колотого сахара в отбирают навеска массой 20г. Еой ешаявзпруют в естественнее! виде, отбирая навеска кассой 10 г. Почву просеиваю? через почвенное сито □ отбирают навесив ввасооЯ 20 г.

2.7.    Проведение определения

Картоне ль, „огурцы, „томаты, „я&вогш, _цптру сорые ,„свааяа, „дук_л аса, „сахар, Навеску аншшвнруемой пробы помешают в плоскодонную колбу на 250 мл, залегают 100 мл этЕхпяяетате в извлекают фунгшвд вкстрастней с ноаопко иэхвяо» ческого встряхнваяпя колбы в течение 20 мен. Экстракт фзхътруит через бумэЕяцй фзльтр в делитеяьнуо воронцу сакостьэ 500 мл. Повторяют &ке"?р9кцпэ орда два раза отоЕкпвтатоа порцшэш по 75 еал. йз объединенного апстракто фупгшвд пзвлэкезгт 0, In содпшсЭ пвсдотоЛ трз разя гтзрцээдв по 50 ал. ООьодепсивеЗ оодявокаслотаыЭ вкстраят прозываю? дважды 50 еш хлорс$ор^а.

211

Хлороформный сдой отбрасывают. К солянокислому раствору добавляют 4 мл 4н раствора NaOH (до pH 10) ■ экстрагируют фуипгдяд этилаиетатом трижды, портят по 50 ил. ЭтиляцетатныЯ экстракт сушат над безводным сульфатом натрии (15-20г), фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 200 мл * С помощью ротационного вакуумпого испарители полностью отгоняют растворитель.

Meласой.Навеску мелассы (5г) растворяют в 100 мл дистиллированной в<ь да, добавляют 0,5-1 мл 4н NaOH до pHГО * экстрагируют фунгицид в делительной воронке на 500 мл этилацетятом, насыщенн»! водой, трижды, порциями по 50 мл. ^гилшетатный экстракт промывают водой (50 мл два раза), а затем экстрагируют образующийся ЕМК 0,1л HCI три раза, порциями по 50 мл. Соляно-кислотный экстракт дважды промывают хлороформом, порциями по 50 мл, а затем подщелачивают до pH 10 2-3 мл 4н NaOH. Из щелочной среды ЕМК экстрагируют этилацетатсм три раза, порциями по 50 ил. Подученный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (15-20г), 8атем фильтруют и с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель.

Почва.Навеску почвы растирают в ступке, переносят в плоскодонную колбу на 500 мл, увлажняют из пипетки 5 ил дистиллированной воды. Бяоцин экстрагируют 100 мл этилапетата с помощью механического встряхивания колбы в течение одного часа. Повторяют экстракцию этнлацетатом еще два раза, порциями по 50 мл. Надкую порцию экстракта фильтруют в делительную воронку я дальнейшее определение проводят по схеме, описанной выше.

Вода* одного л воды биоцмл извлекают экстракцией в делительной во-роике емкостью 1,5л этилацетатом, порциями по 100мл и два раза по 50 мл.

Для лучшего разделения слоев в делительную воронку добавляют около 5г NaOH. Очистку экстракта и определение проводят по схеме, описанной выше.

Хроматографирование. Сухой остаток после удаления растворителя смывают количественно с помощью 2-3 мл ацетона в пробирку с оттянутш дном. В пробирку помещают за плавленный в верхней части стеклянный капилляр и удаляют ацетон нагреванием пробирки на горячей водяной бане до объема v0,I мл. Остаток с помощью того ко капилляра, по с отломанным наплавленным концом, наносят на хроматографическую пластинку. Параллельно на пластинку наносят оерию стандартных растворов бвоцкнп с содержанием 3,4,5 ... 10 мкг.

Хромотоrpewey развивают в системе гексан:ацетон:ледяная уксусная кислота (30:20:1) иля этиля1втат:хлороформ:ледяная уксусная кислота (50:50:10). В первом случае препарата 0,48*0,02, во втором - 0,37+0,02.

Келл хрематогравису развивали на пластинках с флюоресцентной добавкой, т© после высушивания ее помещают под лампу УФ-света. Фунгицид проявляется в виде сиреневых пятен на лсэсонном флюоресцирующем поле. Нижний предел огфелеления 3 мкг. Линейность определения в пределах 3-10 мкг. Если хроматограьесу развивали на обычных пластинка енлуфол, то хроматограмму

212

обрабатывав? пз пульверизатора бромфеполовым проявителем, в затем, поало высушивания пластинка - 2,5^-ньи растворен двойной кпслоты. Фунгицид проявляется в воде синих пятен яа лшонно-яолтом фэне. Ншшпй предел опрэ-деленая 3 миг. Линейный диапазон определения 3-15 мкг.

2о7« Обработка результатов анализа

Количественное определение бвацшаа в пробе проводят путем сравнения плскдадв и пнтонспвностп окраска пятен рабочей пробы □ серив стандартов «

Прп большем содерплнии биоцпяо на пластинку наносят алвквотяув часть рао-твора, концентрируя конечный раствор э пробирке не доп/0,01 мл, а бодьвег© замеренного в градуированной прооирке объема.

Содержание биоцкна в анализируемой пробе(X) мг/кг или мг/л вычисляю? по формуле:

А . Y

X о ---- мг/кг    (мг/л)*    где

ifl р

А - количество быоцина, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

V* - об|цпй объем раствора, ав которого отбирают аляквоту, ил;

У(^ - объем аликвоты, нанесенной на хршаатографяческую пластинку, мл (при нанесеннп всей пробы Р - навеска анализируемой пробы в г шш объем анализ пру ecsofl воды в мд.

3. Требования безопасвостп

Собдадатз требования безопасности, прдшттыэ для работу с дэгковоспло-меаЕлцгвшся шдпоотяип, крапкеоп шасяотенп о пестнцпдшпо

^.Р&оработчапп

Иотодпчесппе указания раоребогавв ?₀В.АддовавоЙ₀ £.B,5a^seE08_e КвФ*Новнковой (Вайя хсмечеоких средств аеаяты раотевый о OmiTSas ва содом г«,Йосввя)₀ Д.Й* РаяушсоО (Государственный Львовский медвпетп-

иу?)

Зо Авробатора

Методвчеовае укоаашзя аяробаромпи со Вооооюапои пас тс туте овеоорзмоатаяъвоЙ сетерзварзп , йоодеэ