ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

■*г. М' ₍ p.Jt

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомисси болезнями растений и сорняками

Москва — 1987 г.

312

хлороформом и дальнейшем определений методом хроматографии в тонком слое адсорбента ("Силуфол", силикагель).

В качестве подвижного растворителя попользовали смесь хлороформа и офира в соотношении * 5:2.

Обнаружение зон локализации пестицида в тонком слое сорбента основано на термическом либо УФ-разложении препарата до ами-ноооединения, диазотировании его нитритом натрия в солянокислой среде и азооочетании полученных солей фениддиазония с Л^Т-нафтил-этилендиамином ) либо ol-нафтиламином, dU-нафтолом.

Возможно обнаружение зон локализаций плантвакса другим способом: УФ - раз ложе ше препарата, N -галогенирование с последующим проявлением образующихся продуктов о-толидином (или йод-крахмольным реактивом).

2.1.2.    Петрологическая характеристик^ метода.

Нижний предел обнаружения плантвакса с помощью реакции дна-вотирования и азосочетания - 0*2 мкг (Л/-1-нафтида тиле иди амин), 0,5 мкг (6-нафтиламин), 1,0 мкг (sLr нафтол}_; 0 помощью реакции W-галогенирования - 0,5-1,0 мкг.

Чувствительность определения плантвакса в зерне - 0,0? кг/ кг, в воде - 0,015 мг/л.

Средний процент определения заданных количеств пестицида (О,I мг/л или мг/кг) - 68,0 (в зерне), 35,0 (в вода), стандартное отклонение 17,6# (зерно), 5# -(вода).

Диапазон определяемых концентраций - 0,5-10 мкг.

Доверительный интервал среднего при 2*0,95 и п«5

85,0+4,9# (для воды) и 68,0+14,0# (для верна)

2.2.    Реактивы и растворы.

Алюминия окись П степени активнооти, МРТУ 6-09-5296-68

Ацетон,х.ч..ГОСТ 2603-71

Гипс (кальций сернокислый Са^О^ х 2HgO). В течение 2 суток прокаливают при 180°С и просеивают через сито 100 мои.

Калия йодид,х.ч., ГОСТ 4232-74

Кислота соляная, х. ч^ГОСТ 3116-77

Калий едкий,ч.д.а./ОСТ 9286-78

Крахмал /одораотворимый^^ГОСТ 10163-76

Метилен хлористый,ТУ 6-09-3716-74,&Л.

из

Натрий аеотиотокиолый, х.ч.,ГОСТ 4197-75 Пластинки "Силуфол" (ЧССР)

Натрий оернокиолый безводный, ГОСТ 4166-76,х>.ч*

Калия перманганат, ГОСТ 20490-75, л.у; el- нафтиламин.ч.д.а. ,ГОСТ 8827-74

ГОСТ 5838-70

У -(1-нафтнлэтнлендиаадн)дигидрохлор1д,ч_>ТУ 6-09-2544-72 О -тояидйн, ШП 6-09-6337-69 Силикагель ^МЛ^И (5-40 /т), (ЧССР)

Хлороформ,х.ч„,ГОСТ 200-15-74 Эфир для нарко8&,Г

Проявляющие реагенты (готовят непосредственно перед проявлением), №1. а)^ К оме си, состоящей на 46 мл дистиллированной во-Ам к 4 мл концентрированной соляной кислоты, прибавляют I г азо-ТйСТоки алого натрия.

б) . л/-(1-иафтилэтилекдиамин)дигидрохлорид, #-ныЙ раствор в втяловом спирте.

в) .оС-нафтиламин, IO^-кый раствор в стилетом опирте

г) .ct-нафтод (Зг едкого калия растворяют $ 50 мл двотилли радарной воду, прибавляют 0,5 геб-нафтсш).

%2. Хлорирующий реагент. Готовят смесь равных объемов I,5>f-И0Г0 раствора перманганата калия и 12^-ного раствора соляной кислоты.

0-Толидиновый реагент, а).0,1 г о-толидииа растворяют в §Д ил уксусной кислоты. б),0,4 г йодистого калия растворяет в Небольшом количестве диотидлировашвьой воды.

Растворы а) ш б) объединяют и разбавляют водой до 100 мл.

Йод-крахмальный реагент.Готовят 1£~ш*й раствор йодистого калия и 2£~ешй водный раствор крахмала,последний заваривают, бмввшвают отм растворы в соотношении 1:1.

Стандартный раствор плвитвакоа готовят растворением 10 мг препарата в ацетоне (50 мл).Раствор содержит 200 мкг/мл,

£.3.Приборы и посуда.

Ваня водяная, ТУ 64-1-2850-76

Ворошш химические,диаметр 6 ом. ,Г0СТ 26-13-64.............

Ре сход реагентов ка одну пластинку - 5 мл

31*

Воронки делительные, емк.250,500 мл,ГОСТ 10054-75

Камера для опрыскивания, ТУ 11-430-70

Камера для хроматографирования размером 150-200 мм

Колбы мерные,емк.50,100 мл,ГОСТ 1776-74

Колбы круглодонные,н/ш,емк.150,200 мл,ГОСТ 10-394-63

Лампа кварцевая ПРК-4 или ПРК-7

№кропилетка,ГОСТ 1770-74 (для нанесения стандартного раотвора).

Пластинки отеклянные размером 90х 120 мм Пипетки емк.1,5,10 мл, ГОСТ 1770-74 Прибор для отгонки растворителя.

Пульверизаторы стеклянные* ГОСТ 10391-74 Цилиндры мерные,емк.25,50,100,250 мл,ГОСТ 1770-74

2.4.    Подготовка к определению.

2*4.1. Приготовление пластинок.

1,5 г растворимого крахмала заваривают в 15 мд воды,прибавляют НО мл воды и 40 г силикагеля “Г* (или 60 г окиси алюминия), размешивают до образования однородной массы и по 5 г накосят на стеклянные пластинки, равномерно распределяя ее по поверхности.Сушат пластинки на воздухе в течение суток при комнатной температуре.

2.4.2. Отбор проб.

Пробы для проведения анализа отбираются ооглаонсГУинфицированным правилам отбора сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов,утвержденным Зам.Главного го* оуАьрствеМШЩ$$8 СССР *г051-79г.

2.5.    Проведение определения.

2.5.1. Экстракция,очистка экстракта.

Зерно. 25-50г* зерна (пшеница,овес) помешают в коническую колбу,приливают хлороформ в таком количестве,(^50 мл), чтобы проба была полностью покрыта им и экстрагируют в течение I часа, периодически перемешивая пробу.

Экстракцию повторяют еще дважды по 50 мл растворителя, проводя экстракцию в течение ЗО^мми каждый раз*Экстракты o6w

315

единяют и фильтруют через бумажный фильтр (синяя лента).Упаривают на ротационном испарителе досуха* Колбы охлаждают. Прибавляют £0 мд омеск,воды и ацетона в соотношении 3:I.Помещают колбы в морозильную камеру холодильника на 1,5-2 часа. Производят фильтрование растворов через плотный бумажный фильтр (синяя лента)* Прибавляют несколько капель оолякой киолоты (конц.)до рН*1 и производят скотракцкю хлороформом трижды по 20 мл каждый раз в течение 5 мин.Экотракты объединяют и пропускают через воронку, заполненную б/в сернокислым натрием.Упаривают на ротационном испарителе до небольшого объема (0,05 мл) и наносят на хроматографическую пластинку. Б качестве свидетеля наносят стандартный раствор плактвакоа (200 мкг/мл) в количестве 5-10 мкг.

Рода.200 мл анализируемой воды помещают в делительную воронку, подкиоляют соляной кислотой до рН«1 и екотрагируют хлороформом или хлористым метиленом трижды по 50 мл.Экотракты объединяют и фильтруют через одой безводного сернокислого натрия и упаривают до небольшого объема (0,05 ^.Сконцентрированную пробу количественно наносят на хроматографическую пластинку*

2.5.2. Хроматографирование,

Производят хроматографирование екотрактов в системе растворителей хлороформ*эфир » 5;2^х.Когда фронт растворителя поднимется на высоту 10 см,пластинку вынимают,сушат на воздухе к облучают УФ-цветом в течение 30 мин. на расстоянии 25 ом от источника. Обрабатывают пластинку проявляющим реактивом §1 (вначале реактивом а), через I мин. - реактивом б) или д),г>При наличии ллаитвак-т появляются пятна сиреневого (^-1-нефти лоти лендиамин) или розового цвета ( о^-кафтилашн, нафтол).Величина Щ- плантвакоа 0*38-0,40 (**Свлуфол^й), 0,77 (силикагель) ш 0,70 (окись алюминия) Другой метод обнаружения плантвакса состоит в оледующем,

Дооле УФ-равложения препарата производят хлорирование,помаотив плаотинку в экоикатор, т дне которого находится хлорирующий реактив, в течение 3-х минут.Плаотинку вынимают из зксикатора и оставляют в вытяжном шшфу в течение I часа для удаления избытка хлора* Обрабатывают пластинку о-тодвдношм или йод-крохмалышм реактивом. Су ват плаотинку на воздухе и облучают УФ-Светом ш течение 5 кин.При наличии плантвакса появляются пятна сике~фиол*т0~ wro дата.

^-Объем подшшй® фазы т кашру лжет 50 mju