ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде
■*г. М' ( p.Jt
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомисси болезнями растений и сорняками
Москва — 1987 г.
утвевдаю
Заместитель Главнага геоударотвен-к®г® санитарка га врача СССР
А.И.Заичекке
* 27 и апреля__196 4 г.
& 2Г994-84_
ВРШННШ МЕТОДИЧЕСКИЕ УШАШ ПО ОЯРШЛЕШШ ОСТАТОЧНЫХ КОЖЕСГВ ЦНРКШИДА В КАРТОЙ ЕЛЕ, ОГУРЦАХ # ПОМИДОРАХ И ВОДЕ ТОНКО. СВИНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
L Краткая характеристика препарата
Церкецид ~ кевый етечеотваниый фунгицид, ха рана пре явив
шей себя для бврьбы О гриб левыми эабелевакиями карта фа ля* агурцев, тапата в и других аельокахезяйствеиных культур. Действующее начала препарата - трикапралактаии ыадь (И) сульфат дигкдрат.
CHg-CH^CHg
I nh . Сц&он.гя£ c^jjfJ^gOtSf
CHgrCHjr-GO j , И. л. масс. 534,5
В чкетем виде - кристаллы валенашта-галуб©га цвета с T„ru,82-(tteC* Ха рана растверим в »д®, «пилавам спирта, хуже в ацатана, иерастверим в гексана, бензола,
JOUq для крцс 1600 мг/кг, для мшей - 1260 мг/кг.
МДУ парке цида в ирдуктах питания и веде на устава влеки.
2ш Метели ка апрадалаиня церкецида в картофеле .огурцах ,поми до рах к веда теню*елейней хрематеграфией
2* 1« Оскевлые пележаямя
^LI< Принцип метода
Метал еокеваи на ив влечении церкецидж на авещай 0,1м раства рем валя кай киолети, а из падки слеыкей вади - хлереферием* па ре раса редела*** •бразававяегеся калрелактам* ш хлгзреформ, ечметке aaaщмвге ы тмм&гъ ©сстракте «а кел«н*с« с ж*шсые алвмикия, а ха ртефельне га экстракта -
380
осаждением примесей раствором фосфорне^в^льСАЬНо клсло ты о последующим спродолемием тонкослойной хроматографией.
2.1.2* Метрологическая характеристика метода
Диапазон измеряемых концентраций Ж)-40 мкг.
ПрЬл обнаружения Ю мкг.
Продол обнаружения 0,4 мг/кг ш «вещах и 0,01 кг/л в воде.
Среднее значение определения стандартных количеств цоркоцида С при л"15 в овощах 84,4!?, в веде 96,О?.
Стандартное отклонена о А при п "15 в о во ад +5,0?# в воде +5# I?*
Доверительный интервал среднего при рг* 0,95 и п*5 в «вещах 84,4+6,2?, в воде 96,0+6,3??
Размах варьирования R, в о в» щах 80-90?, в вед 5 85-2D0?.
2* 1.3. Избирательность метода
Кроме картецида (фитона) другие пестициды не мшит определению.
2.2. Реактивы и материалы
Этиловый спирт, хч, ГОСТ 5962-77# 93?~ный.
Метиловый спирт, хч, ГОСТ 6995-77.
Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-77.
Вемзол, хч, ГОСТ 5955-75.
HCI, хч, ГОСТ 3118-77, концентрированная, 0,1н 2м,
Феофорио-ыолибдомовая кис лета, чдд,Т7 6-09- 3540-78, 40$-ный растра р.
Гидроксиламим солянокианй, чд&, ГОСТ 5456-79.
Едкий натр, хч, ГОСТ 4328-77, Хн*
Хлорид железа, ЕоСЗ^*б2Ь£, члд, ГОСТ 4Г47...7Ч.
Сульфат натрия, хч,_ безводный, ГОСТ 4166-76.
Проявляющие реагенты, Реактив I, Растворяют 2£г гидр® кс «да мима ооляиокислого в Юи мл веды. Перед обработкой хрзча тиграм* смешивают 20 мл полученного раствора с 5 мл 1я едкого метра. Ряактив 2» К 85 мл воды добавляет 15 мл 2н НСI и растеряют Ю г хлорида железа.
Окиоь алюминия, AI^o^, П отелекм активности грекмону, нейтральная, ВНР, и Реахим* или аналогичная.
Пластины силуфол 7^254*
Стандартные растворы церкоцида в этиловом спирте с содержанием 100 мкг/мл (раствор А) и Ю мкг/мл (раствор Б). РЬот^ры стабильни При хранении в холодильнике в течение трех месяцев.
381
2.3* Прибери» аппаратура, деоудд
Ретяциенный яакуувши* иояарятеору ту 25-II-9I7-76
Аппарат для встряхивания^ ТУ 6^-1-1081-73
Камера для хр»мат®графир*ваийя%ГООТ 10565-74
Хромат» графическая келея&а длиной ID ом и внутренним диаметром 0,6 ом о кранам.
Су аильный шкаф* ТУ 64-Ы4Ц~7ь
Колбы плоскодонные, ГОСТ 9737-70, т 250 к 500 нл#Делительные ееренки, ГОСТ 30054-75, на 25, 250 и 3500 мл.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на JOO ыл.
Пульверизаторы стеклянные* ГОСТ 10351-74
Пипетки на I и ГО мл о делениями, ГОСТ I77tV74.
Пробирки кеиичесхие градуированные, ГОСТ Г770-74, гм ID мл.
2.4. Подготовка к ©пределетп
X ре мате графические камеры за чао да начала хроматографирования запел няют смесь» подвижных растворителей хле ре фе р«: метиловый опирт (90:4)
Аеиэол: эгиде шй спирт (30:4) ддя тоищвтя камеры подвижным раствор»" телам#
X рема то графическую юелеягу запелшшт 2г окиси алшияня я 25 мл хлороформа, Избыток хле{*ефэрма сливают о подсоединением слабого ашсуума, оставляя слей растворителя на у щ вне 1-2 иш над поверхность® сорбента»
2.5. Отбор проб
Отбор пр^б проводят * оеответе темя о "Унифицированными правиле ни етбет га роб оаяьсюехезяйствеяней продукции, продукте» питании и Фбъоктои окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов*1, утверждай-иыми Минздравом СССР 21 августе 19?9г р Й 2051-779.
Аля анализа на рте ф* я я н огурцов полгетавлквшет три параллельные навески массой 25г предварительно измельченные ш& кубики о размоем граней «коле 5 им. Немило ры предварительна измельчает целом на не л км в до л ь ни , отбирал от какдег» п«мидера узкий сегмент. Каждая из трех на насек также с» стенд нет 25 г,
2*6. Проведение * прадед вин я
Картофель * Навеску анализируемой прябы помещают в плоскодонную юйлбу на 500 мл, заливают 50 мл 0,1я НОТ и экстрагируют церкецид с помощью механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт п репу с кают через бумажный фильтр * пле око дакну» колбу на 250 мл.
382
Экстракцию картофеля проводят еще два раза там кв количеством раствори-паля* К объединенному экотракту добавляют Ю мл *Ю#-неге раствора фо офе рн о-мо либ де и о во й киодеты* В&отвер выдерживают при кемнатмей температур# в течении# 20-30 ими, пасла чего отфильтровывают полученный белый осадок череда бумажный фильтр, собирая фильтрат в делительной воронке емкость» 250 мд* Препарат из о# л я но киолег# раствора извлекают экстракцией хлороформом три раза, порциями по 50 мл* Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия* порциями фильтруют в грушевидную колбу емкостью 25 мл и концентрируют с помощь» ротационного вакуумного испарителя до объема 0,1-0,2 мл*
Огурцы. Навеску огурцов помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 заливают 50 нл 0,1н HGI к экстрагируют цоркоцид о помощью механического встряхивания колбы в течение 30 мин* Экстракт пропускают через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 250 мл* Экстракцию церюоцида повторя-ют еще два раза тем же количеством соляной кислоты* Из объединенного экстракта выделившийся капролактам экстрегируют хлороформом* порциями по 30 мл три раза* Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия, порциями фильтруют в кругледоину» колбу емкость» 50 мл м о помощь» ротационного вакуумного испарителя концентрируют раотвер до' объема /v I мл* Остаток перек®рытом кране* Кран колонки открывают, дают возможность экстракту впитаться ш с^рбоит, колбочку носколысо раз промывают хлороформом к полученный раствор каждый раз перекосят на хроматографическую колонку. Капролактам элюируют с колонки с подсоединением слабого вакуума со скоростью 2кал/о. Общий объем элю ста 15 мл* отбирают шш&т в грушевидную колбочку емкостью 25 мл» Полученный раствор концентрируют о помощью ротационного вакуумного испари толя т объема 0,1-0*2 мл.
Помидоры» Навеску томатов помещают в плеседоиную колбу емкостью 250 мл, добавляют 10-15 г безводного сульфата натрия, полученную массу тщательно переманивают, приливают 50 мл 0,1н HCI и далее определение проводят по схеме, описанной для егурwi«
Вода. Один литр воды помещают в дели твоя ую воронку емкостью 1,5-2 л, добавляют 5 ыд ювнцемтрире ванной соляной кислоты и проводят ажотракцию хлорофороем четыре раза, порциями по 50 мл. Объединенный хлороформный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия, порциями фильтруют в кругло донну» колбу емкость© 50 мл и с помощь» ротационного вакуумного испарителя концентрируют раствор мм объема vl мл. Очистку акст ра кто и дальнейшее определенна проводят по схема, о писан ной для огурце*.
383
ОЯктОК, ПОЛучОКНЫЙ П® СЛ О ОЧИСТКИ экстракта , о ПОМОЩЬЮ ОТОКЛЯНИОГО капилляра количественна переносят на х реме те графическую пластинку. Параллельно на пластинку наносят серию стандартных раствор©» церкецидд о содержанием $, 15, 20...¥) и кг, которые готовят следующим образом,
В серию делительных воронок омкоотью 25 мл, которые содержат по Ю мд О, Dt НСI помещают соответственно I; 1,5; 2; ,, мл стандартного раствора Б с концентрацией церке цяда 10 мкг/мд. Выделившийся капролактам экстрагируют хлороформом три раза, порциями по Ю мл. Хлороформные экстракты сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют в грушевидны® колбочки емкостью 25 мл и о помощью ротационного вакуумного испарителя концентрируют раЛор до объема 0,1-0,2 мл. Хроматограмму развивают в смотано хлороформ:метиловый спирт (50;4) или бензол:Этиловый спирт (30:4), После развития хроматограммы пластинку сушат на воздухе, a ватой обрабатывают из пульверизатора раствором гидре юс нламииа (рааютмв1)| Влажную хроматограмму выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120*С в точение 15-20 мин, а затем обрабатывают ДОХ-*ии раствором PeCI^ (реактивом 2). Капролактам проявляется иа плаотияках в виде коричневых пятой ио желтой фоне о ЕЦ0,*Ю*0,05 в первой и 0,28+0,03 - во второй * Пятка стабильны в течение 5-7 мин,
2*7, Обработка результатов анализа
Количественное еародедонке церкецнда проводят путем сравнения
площади и мкто к ««внести окраски пятен рабочей пробы и скрин стандартов. При большем содержании цоркоцида п& пластинку наносят аликвотную часть раствора.
Содержание цоркоцида в анализируемой пробе (X) в мг/кг иди мг/д вычисляют по формуле
А*
X *------мг/кг (мг/л), где;
%. р
А -количество цоркоцида, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;
^ - общий объем раствора, из которого при необходимости отбирают
аликвоту, мл;
- аликвота, нанесенная на пластинку, мл ( при нанесении всей пробы
v;>»
Р - навеска овощей в г или объем пробы воды В мл.
384
3« Т]р«й»Ш(кл бваепаомоти
ОфбЛЮДДТЪ Тр«бф*ЛКИЯ ТвХКИКЯ бФЗФГШОШОТН, уОТЙКФ»Я««ИК£ для porftTK а легком ап л&моядоцимиая шдкеошмм к pad «ты а моткловдо огшртвм»
4* ftrepadoTSBKg
Методические укавявия рвереботаш *.Р.Квдщ*р, К.®„ Новиков об. И.В.Ажцошикой (Во*оос8Шв КИЯ химических оредотв ведата раотеийй о опытным ваводом, г. Мооява)
