ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии, болезнями растений и сорняками

Г0СУЛАРСТНЕШШ1 КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ „ КОЖАХ И ВЫШНЕЙ СРЕДЕ

Данные методшш апробированы в рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при 1Ъскомяссиы„болезнями растений и сорняками

Москва- 1987 г,

Настоящее методичеокпе указания предиаэвачеиы для оанзтар-но- ei?пдемяологическая станций п научко-сдтдедовагедьоаак учреа-девпй Минздрава ОССР_с а такие ветеринарныя₀огрохомпчеокп2₀иоа-тродьно-токсцкодоглчеокия дзбораяорпИ Гооогропрона СССР а лабораторий другая Министерств п ведомств₀зашшавдякол определением оояаточпых подачеств пестицидов и биопрепаратов о продуктов питания,, порток а виеипеП 0реде_о

Срои деЙотвпя временник методичбошн указаний уотоиш~ дпваетбя до утверпдеаия гнгпеничеокик нормашвов.

Методичеокае указания есробпровонн п рекомгвдог>оцы в качестве официальных ГруппоП экспертов при Госкомпссаи «о ишп-чеокпы сргдотааа борьбы о вредителям „болезнями раотопиО в оор-аяяшп.

Методические указания согдасовосн с одобреиы Лобо разорены оовотои при Гдеовом еапитарко-спсдемиологочеоиои увровдепап Минздрава ССС?_с

РШК1Ш0ННЛЯ КОЛЛЕГИЯ

Л.Г.Дяексацдрово₀ JLB_ornpenKO„ ЛЖКедиппне ( эам.иредоедотвая), Мвй.Кдисэпго ( председатель) о Г. во Коротко во ₀ В.ВоК^ао0ачуа_о Г_вЛ«ХоКольцова рА.МсВьсгадвсое

УТВБРЕДДШ

Эаиесуауоль Главного ГосудароУБен-ного оаноуарного врача СССР

АойоЗАМЧЕНКО

^ПХ2^В мая ® 2785-85

ВРЕМЕННЫЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО (ПРЕДЕЛЕН HEJ ФЕКАИА-ТРИБУФОНА МЕТОДАМИ ГАВСКИДКОСТНОа и тонкослойной ХРШАТОГРАФШ Б ЙОДЕ, ПОЧВЕ И РИСЕ о

X, Краткая харакуарэсгяка препарата.

Оакаыа-трпбуфон (бууонау) - акуивноэ ващеоуво 0,0-дпмо-унд- (1-бу?ирокои-2,2₁2-?рихдор8¥ИЛ)фоофонвг.

Технический продукт - провранная маояянисуая шздкооуь ру иелуого до нелуо-коричневого цвета* Нераоуворни в вода, раоуворни в большинстве органических растворителем* УоуоПчпв в нейтральных п сдабокислых водных средах, Деуучвоуь 71,7 иг/а⁵ при 20°С. ЛД^для крыс 1780 ыг/кг*

2, Методика определения фекама-урабуфояа иотодапс гаеошэдясетной и тонкослойной хронатографаи в воде, почве □ рясе.

2*1* Основные полопенпя.

Метод основан на извлечении препарата орг-акпчеосгаце растворе-уе-яяыи, очистке вкоуракуов в опотеие лидпооуь-шздкосуь в последующей определении фекаиа-урпбуфона гаэодндкооуной а уон-посдойьой хроматографией. при гаэохроыатографическом анализе авбирауедьнооть метода обеспэчивавуся вспольеованнем неподвза-иых фаз различной полярности; при уонкослойноы-деуекунроваяи-еа двумя проявдяэдяыа рэагевуаип* ПДК    для    воды,    почвы_сЫДУ

раса не установлены*

тег

Определению не меаают наполнители технического препарата, некоторые хлорорганические пестициды ( у-ГХЦГ, ДДТ) и фос-форорганические (ДДВФ, хлорофос).

2.1.г. Петрологическая характеристика методов ГЖХ и ТСХ.

Таблица I Ивтрологическая оценка методов

Аналн8И-:Раеаах варьи-	Среднее :(4осите-:Довери-:11редел:Диапа-
руемый :розалия, jb	знача - : льнов :гелькыа:о'бнару:зон
объект ;	ние оп-:сган- :интер- :жения.	:опре-
: Ч	редело гдаргнов :вал :мг/кг,	:деля-
:	ния, % :отклоне-:средне-:мг/л	:емых
•	:нив, % :го, % :	:концен-
: •	: :при /ъ-а : : р-0,95	:трацяп, :мг/вг?
:	• • •	:мг/л

вода	82,7-91,1	ш 87,0	8,6 87,0*9,2	0.008	0,01-0,2
почва	72,0-92,0	83,0	15,183,0*15,5	0,02	0.02-0,4
рве	78,0-96,0	87,5	17,2 87,5* 18,6	0,02	0,02-0,4
вода	77,4-90,9	тех 85,5	18.8 85,5*19.9	0,01	0,01-0,2
почва	72,7-90,9	80,3	15,980,3*17,2	0,03	0,03-0,2
рде	72,7-81,8	75,8	12,175,8*14,3	0,03	0,03-0,2

Предел обнаружения в хроматографируеыом объеме - 0,1 мкг,

ГК - 1,25 - 2,5 нг.

2.2 Реактивы и растворы.

Фекама-трибуфон^х.ч.

Основное стандартный раствор фекаыа-трибуфона,содержащий 500 ыкг/ыл в ацетоне. Хранят в течение 2-х месяцев в холодильнике. Стандартный раствор фекама-трибуфона, содержаний 10 мкг/ыд. Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79 Бензол, ГОСТ 5955-75,Jf-«

■-Гексан, х.ч., ТУ-6-09-3375-78

Натрия сульфат безводный, ч., ГОСТ 4166-76

Кальций хлористый, ГОСТ 4161-77, jcv.

Ххор&форм, х.ч., ГОСТ 20015-74 Азотнокислое серебро, х.ч., ГОСТ 1277-81

да

Аммиак водный, ч., ГОСТ 3760-79 Пласгинки "Силуфол" ( CfremQpot ,ЧССр)

Проявляющие реагенты:

1. a) 1% раствор 4-п-нитробенэилпиридина в ацетоне; б) 10% раствор тетраэтилонпентамица в ацетоне.

2.    Авотнокислое серебро: 0,5г серебра азотнокислого растворяют в 5 мл воды, прибавляют 7 мл 25% аммиака, оыесь доводя* до 100 мл ацетоном.

Носитель для хроматографической колонки хроматон hJ-AW (0,16-0,20 мм) с нанесенной неподвианой фазой 5% S Е-30 Для дополнительной идентификации исполь8уегоя смешанная непод-винная фаза 4%S Е-30 + 6% OF -I.

Азот газообразный, особой чистоты, содоравняв О^нв более 0.003%, ГОСТ 9293-74

2.3 Приборы и посуда Прибор для отгонки растворителей (ротационный вакуумный подари гель,) л‘ -::с:->б Лампа 11РК-4, ГОСТ 64-I-I6I8-77

Колбы конические со шлифами на 250-500 мл, ГОСТ 10394-72

Колбы круглодонные на 100 ил, ГОСТ 10397-22

Колбы мерные на 100 ил, ГОСТ 1770-74

Делительные воронки на 0,5-1 л, ГОСТ 8613-75

Фильтры бумааные ("красная лонга"). ТУ 6-09-1678-77

Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75

Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74

Пипетки на 0,1 н I ыл, ГОСТ 20292-74

Цилиндры мерные на 50-100 ня, ГОСТ 1770-74

Газовый хроматограф с детектором по захвату электронов (детоп-

тор постоянной скорости рекомбинации - ДДР) марки "Цвет-106",

"Цвет-ПО", Газохром 1109 и др.

Колонка стеклянная длиной I м, внутренний диаметр 3 мм.

2.4    Отбор, хранение и доставка проб

Отбор проб производится в соответствие с ^гапфицпрованяымв правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов п объектов окруваюцеа среды для определения микроко-анчеств пестицидов .^утвержденными Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР fc 2051-79 от 21.08.79 р. Срон хранении не более 3-х сутом о холодильнике.

2.5    Проведение опрадодсная

2.5.1 Экотр&кция ^А очиства экстрактов.

149

Вода. 500 мл пробы помещают в делительную воронку и экстрагируют фекама-трибуфон трижды по 50 мл хлороформа. Объединяют органический растворитель, сушат натрием сернокислым безводным (10-20г), концентрируют на ротационном испарителе до 0,2-0,3 мл при температуре бани не выше 4U°C. Досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в I мл гексана и хроматографируют (Г£Х,ТСХ).

Почва. 25г пробы помещают в коническую колбу, заливают 50 мл смеси ацетон - 0,05н раствор CaCIp (1:1) и оставляют на ночь. Раствор фильтруют через бумажный фильтр ("красная лента"), пробу смывают дважды ецетоном по 30 мл, .фильтруют. Раствор переносят в делительную воронку, прибавляют 100 мл дистиллированной воды и экстрагируют фекама-трибуфон трижды хлороформом по 50 мл. Экстракты объединяют, оушат натрием сернокислым безводным (10-20 г). Растворитель концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2-0,3 мл при температуре бани не выше 40°С, досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в I мл гексана и хроматографируют (ПХ и ТСХ).

Рис. 25 г риса, измельченного в кофемолко, помещают в коническую колбу, эаливаюг 5U мл ацетона и оставляют на I час. Раствор фильтруют через бумажный фильтр ("красная лента"), омывают пробу дважды 30 мд ацетона. Объединенный фильтрат переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и экстрагируют фекама-трибуфон трижды хлороформом по 30 мл. Экстракты объединяют, сушат натрием сернокислым безводным (10-20 г), концентрируют на ротационном испарителе до объеме 0,2-0,3 мд при температуре бани не выше 40°С, досуха упаривают на воэдухе. Остаток в колбе раотворяют в I мд гексена и хроматографируют (ПХ, ТСХ).

2.5.2 Идентификация и количественное определение фекама-трибуфона.

2.5.2.1 Метод газожидкостной хроматографии Вводимый объем - 5 мнд.

Таблица 2

Условия ПХ определения

Хроматографические . параметры ДПР с ДПР : ТИД X : г • 3 ----■.— : 4

Неподвижная фазз 5%$Е-30    4%S E-30+6£GT-I    5^5    2-30

150

I : 2 : 3 \ 4 Температура колонки MprtVtbfb 180 °С 180°С 20D°C Температура испари- 220 °С 210^0 210 °С ттэшоатета Температура )а 220 °С 230°С 210 °С Время удераивания ЛинеИный диапазон детектирования Минимально детокти-руемое кол-во 2 мин 2,6-10 нг 3 мин 1,25-внг 1,25 нг 2 мин ВЗ сек 2,6 нг Скорость газа-носителя (азот) 70 л/мвн 70л/мин 24л/ынн Скорость воздуха Шкала электрометра 20-Ю‘12а 400л/мин Количественное определение проводят путем сравнения рас

чигываоыого пика о пикой, подученный при введении иввестного количества стандартного вещества при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора. Площадь пика на хроиатограиме расчитывают, умноная высоту пика на ширину, намеренную на половине высоты.

Оодераание пестицида в исследуемом объекте ведут по фор-

^иулв:    о_-    if,    •    S

где;

^ст ^VI ^г - количество препарата в пробе, иг/иг (мг/л); _ст“КОЛичество препарата во введенном в хроматограф стандарт

ном растворе, ыкг;

5_сг-площадь пика на хроматограмме стандартного раствора препарата, введенного в хроматограф, иtr;

Sj- площадь пика на хроматограмме исследуемого раствора, мм;

объем экстракта, введенный в хроматограф, ыкд;

I/,- общий объем экстракта после упаривания, мл;

Р - масса иди объем анализируемой пробы, г (мл).

2.5.2.2 Метод тонкослойной хроматографии

Пробу, сконцентрированную до и,2-0,3 мл, количественно переносят на пластинку "Снлуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с содераанием 3, 5 в 10 ыкг действующего вещества фекама-трибуфона. Хроиатогрефируюг в системе

бенвод-ацетон (3:1), просуиивеют на воздухе и обрабатывают одним иа проявляющих реактивов:

X)хроматограмму обрабатывают 5 мд 1% раствором Ч-(-п-нитробен-вид)пиридином, нагревают пластинку в течение 5 мин при темпе-ратуре ИО°С, аатем обрабатывают 5 мл 10£ раствора тетраэтилен-пентамина.

Фенама трибуфоа проявляется в виде ярко фиолетово-синих пятен на белом фоне.

2) Хроматограмму обрабатывают 10 мл раствора азотнокислого серебра в ацетоне, ватем помещают под иоточник УФ-света иа 3 мин.

Фекама-трибуфон проявляется в виде черных пятен на сором

фоне.

Я{ фекама-трибуфона в системе бензол-ацетон (3:1) составляет 0,68 ♦ 0,05.

8 качество подвижного растворителя можно использовать смеоь гекоан-ацетоя (1:1), В.^равно 0,68.

Количественная оценка хроматограмм проводится путем сравнения площадей и интенсивности окраски пятен проб и стандартных растворов.

Содержание фекама-трибуфона в Исследуемом образце вычисляют по формуле f    .

х*__ нг/кг, (мг/л), где:

Р

Х-кодичество фекама-трибуфона в пробе, мг/кг (мг/л);

А- количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнения оо стандартами, мкг;

Р- масса или объем пробы, г (мл).

2.6. Техника безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе о органическими растворителями а токсическими веществами.

5. Методика разработана 8.А.Лейка и Д.Б.Гиренко (ННИИШТОКС, Киев).