ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХЕ-я

Москва - 1983

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХШ

Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками

при МСХ СССР

Москва-1983

260-

6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ.    67

7.    Временные методические указания по определению о<$у-

нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов.    76

8.    Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами

ГКХ и ТСХ.    82

9.    Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ

и ГЖХ.    91

10.    временны» методические указания по определению хлоро

фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной.    90

11.    Методические указания по определению в зерне и про

дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами.    ₁₀₅

АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]

1.    Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.

и растительном материале    хроматографическими методами. цу

2.    Временные методические указания по определению байгой*

методом ГЗКХ в молоке.    138

3.    Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.

- 261 -

4.    Методические указания по определению кронетона

в воде,почве,корнеклубнеплодах и растительном материале ТСХ,    *54

5.    Временные методические указания по определению ридо-

кила методой хроматограмм в воде,почве,растительном материале,    *50

6.    Временные методические указания по определению ров-

роля методом ТСХ в поде,почве,томатах,картофеле,винограде, виноградном соке и ринэ.    I6S

7.    Временные методические указания ронилана в растительной продукции,почве и воде ТСХ и    ГЖХ.    175

8.    Временные методические указания по определению эвисех-

та в растительной продукции,почве и в воде ТСХ,    182

9.    Временные методические указания по определению эти-

римала в растительной продукции,почве и воде ТСХ,    188

ПРОЧИЕ ПЕСТИЦИДЫ

I* Времонние методические указания по определению гора-нилбутирата методом ГИХ и ТСХ в почве,воде,корнеплодах и листьях сахарной свеклы.    *^5

2.    Временные методические указания по определению бром-

пропилата(неорона) в яблоках и цитрусовых методом газовой хроматографии.    206

3.    Временные методические указания по определению иллокса-на в воде и печво методом ГП.

4.    Временные методические указания по хроматографическому определению иэатрина в печво    и    воде.    217

5.    Временные методические указания по определению омаЯта методами Г££Х и ТСХ в почве,в воде и растениях.

6.    Методические указания по определению хлората магния в почве,воде,растениях(подсолнечнике,луке) и в воздухе полярографическим и хроматографическим (ТСХ) методами.

7.    Временные методические указания по определению оста точных количеств некоторых аналогов ювенильного гор иона (алтосида.алтозара и п-<5ром*енилового эфира гераниола) в растениях картофеля и почве методами ТСХ и Ш.

Дополнения

Л- 71938 от 20Л«СЗгТирах 2000 экз. .заказ Н» шз Типография ВАСИ:ИЛ

Настоящие методические указания предназначены для

санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарных_вагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.

-225-

адоорбентами.

2.1*2. Метрологичеокая характеристика методов определния омайта.

Метрологичеокая характеристика метода

Таблица I

Анализируемый ! Размах    ! Среднее    Ютноситель!Доверитель-

объект    {варьирования ! значение !ное стан- !ный интер-

!    %    !определения!дартное от!вал средяе-

!    !    %    !клонение,£!го % при

!    !    1    !    =0,95

Метод газожидкостной хроматографии

Реактивы и растворы

Ацетон ГОСТ 2603-79

Серебро азотнокислое ГОСТ 1277-81

Кислота лимонная ТУ 6-09-584-75

Алюминия окись для хроматографии ТУ 6-09-3916-75

Бензол ГОСТ 5955-75

Гексан, х.ч. ТУ 6-09-3375-78

Натрия сульфат безводный, ч. ГОСТ 4166-76

Уголь активированный, молотый, марки БАУ, КАД

Пластинки "Силуфол И-254" CCKtf-majioC» ЧССР)

Хлороформ, х.ч. ГОСТ 20015-74

Бромфеноловый синий ТУ 6-09-1058-76

-236-

Калий марганцовокислый ГОСТ 20490-75 Проявляющие реагенты

1.    БромфеноловыЙ синий: 0,03 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона, затем доводят до 100 мл 0,5% водно-ацетоновым раотвором азотнокислого серебра (I часть воды я 3 чаоти ацетона); 5% раствор лимонной кислоты в смеси вода-ацетон 1:3;

2,    Калий марганцевокислый: 0,05% раствор в смеси вода-ацетон (1:2).

Носитель для хромотографическоЯ колонки - Хроматом (0,16-0,20 мм) с нанесенной неподвижной базой 5% ,*>£-30 MuniAjwt» ЧССР)

Основной стандартный раствор омайта. 500 мкг/мл в ацетоне. Хранят в течение 2-х месяцев в холодильнике.

Стандартный раствор омайта 10 мкг/мл в ацетоне. Хранят в течение 2-х недель в холодильнике.

2.3.    Приборы и посуда

Прибор для отгонки растворителей (ротационный вакуумный испаритель МРТУ 42-2589-66

Колбы конические со шлифом на 250-500 мл ГОСТ 103У4 Колбы круглодонные на 100-500 мл ГОСТ 10394-72 Делительные воронки на 0,5-1,0 л ГОСТ 8613-75 Колбы мерные на 100 мл ГОСТ 22524-77 Колонки для адсорбционной хроматографии (300 х 15 мм)

Пипетки на 0,1 мл и I мл ГОСТ 1770-74 Цилиндры мерные на 50-100 мл ГОСТ 1770-74 Газовый хроглатограф с детектором по захвату электронов (детектор достоянной скорости рекомбинации) - марки Цвет- 106, Цвет-ПО, газохром 1109 и др.

Колонка стеклянная длиной I м, внутренний диаметр 3 мм Азот газообразный, оообой чистоты, содержание не более 0,003% ГОСТ 9293-74.

2.4.    Отбор, хранение и доставка проб

2.4.1, Отбор проб производится в соответствии с унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, аидевых продуктов и объектов окружающей среды для определения

-227-

микроколичеств пестицидов, утвержденными Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21,08.1979 за Я 2051-79.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Экстракция и очистка экотрактов.

Вода. 500 мл пробы помещают в делительную воронку и экстрагируют омайт трижды по 50 мл хлороформа. Объединяют органический растворитель, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют при температуре бани не выше 50°С. Досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в I мл ацетона и хроматографируют (Г£Х и ТСХ).

Почва. 25 г пробы помешают в коническую колбу, заливают 50 мл сме^-и гексан-ацетон (7:1) л встряхивают I чао. Раствор фильтруют через слой безводного сульфата натрия. Операцию проводят трижды. Объединенные экстракты концентрируют под вакуумом при температуре 40°с до объема 0,5 - 1,0 мл. Далее прооу очищают на колонке. В стеклянную колонку (20 см х 2,0 см) помещают последовательно 3-4 г безводного сульфата натрия, 5 г окиси алшиния для хроматографии, 2 г активированного угля и снова 2 г безводного сульфата натрия. Колонку закрепляют строго вертикально и промывают 30 мл хлороформа, полученный элюат отбрасывают. После этого в коленку вносят пробу, которую предварительно в холбе для упаривания растворяют в 2^- 3 мл хлороформа. Как только проба полностью впитается в сорбент, начинают элюирование омайта из колонки 50 мл хлороформа. Полученный злюат упаривают до объема 0,2-0,3 мл, затем остатки растворителя удаляют струей воздуха. Остаток растворяют в I мл ацетона и хроматографируют (ТСХ, ГдХ).

Растения. Навеску 10-25 г измельченного растительнсго материала (зеленые листья яблони, хлопчатника, виноградной лозы, плоды винограда, яблоки) заливают в конической колбе смесью г.ксан-ацетона (7:1), таким объемом, чтоб проба была полностью покрыта растворителем. Встряхивают 1 час. Экстракт декантируют в другую колбу. Экстракцию повторяют еще два раза. Объединенные растительные экстракты освобождают от носков, помещая пробы в морозильную камеру холодильника на полчаса или в смесь соли со льдом, далее пробы в холодном состоянии отфильтровывают через бумажный фильтр и концентрируют под вакуумом до 0,5-1,0 мл.

-гэв-

Остаток растворителя удаляют струей воздуха. После этого пробу переносят ацетонитрилом порциями по 3 мл (трижды) в делительную воронку, объем вытяжки доводят до 50 мл дистиллированной воды. Из водно-ацетонитрильного раствора омайт реэкстрагируют в и-гексан три раза порциями по 100 мл в течение 15 минут. Объединенные гексановые фракции сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют до объема О,3-0,5 мл. Этот остаток переносят на хроматографические пластинки или часть аликвоты вводят в хроматограф для количественного определения.

2.5.2. Идентификация и количественное определение омайта.

2.5.2.I. Метод газожидкостной хгюматографии.

Носитель - Хроматон N-A\f (0,16-0,20 мл)

Неподвижная фаза - 5# SE-3Q Скорость азота - 70 мл/мин

_ I р

Шкала электрометра - 20*10 а

Температура колонки - 2Ю°С

Температур:, испарителя - 230°С

Температура детектора - 230°С

Вводимый объем 4-6 мкл

Линейный диапазон детектирования 10-50 нг

Минимально детектируемое количество 10 нг

Время удержания при указанных услозиях 5,7 мин

Количественное определение проводят путем сравнения расчитываемого пика с пиком, полученным при введении известного количества раствора при при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора. Количественную оценку пиков хроматограммы проводят по площади пика, расчитывая ее как произведение высоты пика на ширину, измеренную на половине высоты.

Раочет ведут по формуле:

„. £г±1    ,

■ ^,'Р

где:    X - количество препарата в пробе, мг/кг; мг/л;

С_Ст~ количество препарата во введенном в хроматограф стандартном растворе, мкг;

$_сг- площадь лика стандартного раствора омайта, введенного в хроматограф, мм^;

-229-

o

^ - площадь пика исследуемого раствора, мм*;

}/( - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;

У_д- общий объем экстракта после упаривания, мл; р - масса или объем анализируемой пробы, г (мл),

2.5,2.2. Метод тонкослойной хроматографии

Пробу, сконцентрированную до и,3 мл, количественно переносят на пластинку "Силуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием 3, 5, 10 мкг действующего вещества омайта. Хроматографируют в системе гексан-ацетон (4:1), просушивают и обрабатывают однн>д из проявляющих реактгвов:

1.    хроматограмму обрабатывают бромфенсловым синим с последующим просушиванием, а затем раствором лимонной кислоты для обесцвечивание. фона. Омайт проявляется в виде пятен синего цвета

на желтом фоне пластинки. Нижний предел обнаружения - 3 мкг;

2.    Хроматограмму опрыскивают раствором марганцевокислого калия. После подсыхания пластинки омайт проявляется в виде пятен желтого цвета на розовом фойе. Нижний предел обнаружения - 3 мкг.

омайта в системе н-гекса-зцитон (4:1) составляет 0,46 -0,05. В качестве подвижного растворителя можно использовать бензол. омайта э этом случае составляет 0,53 - 0,05.

Содержание омайта в исследуемом образце эычиоляют по формуле:

у    ^А

^А ~    Р    мг/кг (мг/л)

где:    А    -    количество    препарата, найденное на хроматограмме

при сравнении со стандартами, мкг;

Р - навеска почвы в г или объем воды в мл;

X - содержание омайта в пробе, мг/кг или мг/л.

2.6.    Расчет результатов анализа.

Формулы расчета результатов анализа приведены в 2.5.2.

2.7,    Техника безопасности.

Необходимо соблюдать принятые правила безопасности при роботе с органическими растворителями и токсическими веществами.

3. Методика разработана Гиренко Д.Б., Клясенко '/.А. (ВНИИ ГИНТОКС), петровой Т.М. (ВИЗР, Ленинград), Шв<мх Д.А. (ВНИИЗР, г. Рамень).

-259-

ССДБРЖАНИЕ

ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ

I.Временные методические указания указания по

определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.

2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*

3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и

^яблоках методом ТСХ.

ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ

1.    Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.

2,    Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.

3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,

4.    Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности

и биосредах методом ТСХ.

5.    Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,