ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ
ЧАСТЬ ХЕ-я
Москва - 1983
ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР
МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
ЧАСТЬ ХШ
Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками
при МСХ СССР
Москва-1983
-259-
ССДБРЖАНИЕ
Стр,
I
12
23
29
36
46
54 * 61
ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ
I.Временные методические указания указания по
определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.
2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*
3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и
яблоках методом ТСХ.
ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ
1. Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.
2, Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.
3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,
4. Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности
и биосредах методом ТСХ.
5. Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,
260-
6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ. 67
7. Временные методические указания по определению о<$у-
нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов. 76
8. Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами
ГКХ и ТСХ. 82
9. Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ
и ГЖХ. 91
10. временны» методические указания по определению хлоро
фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной. 90
11. Методические указания по определению в зерне и про
дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами. 105
АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]
1. Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.
и растительном материале хроматографическими методами. цу
2. Временные методические указания по определению байгой*
методом ГЗКХ в молоке. 138
3. Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.
- 261 -
4. Методические указания по определению кронетона
в воде,почве,корнеклубнеплодах и растительном материале ТСХ, *54
5. Временные методические указания по определению ридо-
кила методой хроматограмм в воде,почве,растительном материале, *50
6. Временные методические указания по определению ров-
роля методом ТСХ в поде,почве,томатах,картофеле,винограде, виноградном соке и ринэ. I6S
7. Временные методические указания ронилана в растительной продукции,почве и воде ТСХ и ГЖХ. 175
8. Временные методические указания по определению эвисех-
та в растительной продукции,почве и в воде ТСХ, 182
9. Временные методические указания по определению эти-
римала в растительной продукции,почве и воде ТСХ, 188
ПРОЧИЕ ПЕСТИЦИДЫ
I* Времонние методические указания по определению гора-нилбутирата методом ГИХ и ТСХ в почве,воде,корнеплодах и листьях сахарной свеклы. *^5
2. Временные методические указания по определению бром-
пропилата(неорона) в яблоках и цитрусовых методом газовой хроматографии. 206
3. Временные методические указания по определению иллокса-на в воде и печво методом ГП.
4. Временные методические указания по хроматографическому определению иэатрина в печво и воде. 217
5. Временные методические указания по определению омаЯта методами Г££Х и ТСХ в почве,в воде и растениях.
6. Методические указания по определению хлората магния в почве,воде,растениях(подсолнечнике,луке) и в воздухе полярографическим и хроматографическим (ТСХ) методами.
7. Временные методические указания по определению оста точных количеств некоторых аналогов ювенильного гор иона (алтосида.алтозара и п-<5ром*енилового эфира гераниола) в растениях картофеля и почве методами ТСХ и Ш.
Дополнения
Л- 71938 от 20Л«СЗгТирах 2000 экз. .заказ Н» шз Типография ВАСИ:ИЛ
Настоящие методические указания предназначены для
санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарныхвагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.
"Л'ВШдАЮ"
Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР
А.И.Заичеико
22 октября 1981 г.
К» 2461-81
Временные методические указания по определению этирииола в рзстительиой продукции,
почве и воде тонкослойной хроматографией
I* Краткая характеристика препарата
1.1. Зтиримол
1.2. 5-оутил-2-этилаиино-6-мотил-пи|имидии-4-ол 1.8. Структурная формула
Молекулярная масса 209,3
1.4. Кильго, милькурб супер, мильстем
1.9. Химически чистое соединение этиримола представляет, собой кристаллическое вещество с температурой плавления 159-160°С.
Плохо растворимо в воде и ацетоне. Рэстворимо в хлорофорие, трихлорэтилене, диэтиловом эфире ч водных растворах сильных кислот и оснований» Препарат мэлотоксичен для теплокровных животных. Лд^о для крыс при оральном введении составляет 6 340 мг/кг. Выпускается в формр коллсидкых растворов с содерханкеи 250-280 г/л действующего вещества.
-109-
2.Методика, определения этпримола
2.1. Основные полсжения 2.1 Л. Принцип методе
Метод основой на экстракции этиримолв органическим растворителем, очистке экстракта с последующим определением тонкослоА ной хроматографией.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода приводенв в таблице.
Та бл ица
Метрологическая характеристика метода определения этиримола с помощью тонкослойной хроматографии Диапазон определяемых концентраций 0.05-1,0 мг/л или мг/кг
Аьолизируе!Продел обнару4Число пара л-! Резцах варЫСроднев зна-мая проба txaHtin мг/л !дольних !ирования, 1ченио опре-! или иг/кг !определений! % !деления. % |
Бода 0,005 |
3 |
20,0 |
90,0 |
Верно,тра во,
почва 0.02-0.04 |
3 |
25.U |
о5.0 |
Стандартное
Вода 11,1 Зерно,траве,
GOUiifl__II ,8__________ |
отклонение,# |
|
|
2.Х.3. Ипоирательнооть метода
Метод специфичен, другие соединения в данных условиям хроматографирования определению не мешают.
2.2. Реактивы и раствори Ацетон, х.я. ГОСТ 2303-79 Н-гексан.х.ч. ТУ 6-09-8375-78 Хлорофори.х.ч. ГОСТ 9116-74 Офмр для наркоза, Фвриакопея СССР Метиловый олирт.х.ч. ГОСТ 6995-67 К но юта ооляная ,х»ч.
Кислота укоуоная, яедяноч,х.ч. Гост 61-75 Натрий оернокиовый,безводный,чдв ГОСТ 4166-76 О-Толидин,чда UPTJ 6-09-6^37^69 КеякЛ Подмотый.х.ч. ГОСТ 4232-74 Висмут азотнокислый.чдо ГОСТ 4IIO-75 1‘атрий двууглекислый,w ГОС* 4214—«6
-190-
Калий иаргаи--цевокислый,чда, Г XT 20490-75 Силикагель л/м 5/10 (ЧССР)
Силикагель КСК, №2 ГОСТ 8956-76, Силикагель измольчают на шаровой иольнице, просеивают через сито о ptfuepou отверстий 0,2мм промывают концентрированной соляной кислотой и отмыввют на воронке Бюхнера дистиллированной водой до нейтральной реакции.
Суш т 24 часа при 120°С.
Кальций сернокислый, Оеэводный,чда, ГХТ 3210-74 Этиримол,х.ч.
2.2.1, Приготовлэнио стандартного раствора
10 иг химически чистого этиримола растворяют в IX мл метанола. Хранят в склянках с притортой пробкой. Срок хранения 20 дней.
2.2.2, Проявляющие реагенты
1. 160 иг о-толидинэ растворяют в 30 мл ледяной уксусной кист-лоты, доводят дистиллированной водой до 500 мл и прибавляют
I г йодистого калил. Срок хранения но ограничен.
2. 0,85 г азотнокислого висмута растворяют в смеси 40 мл дистиллированной воды и XGO ил 40/*>-ноЙ серной кислоты. Затем прибавляют раствор, состоящий из 8 г Йодистого калия в 20 мл воды. К 6 мл полученнрго раствора приливают 6 ил 40%-ной серной кислоты и доводят объеи до 25 ил. Срок хранения-2 меояца.
2.3. Приборы, аппаратура и посуда Ротационный испаритель ИР-IU, ТУ 25-II-9I7-74 Вакууыный водоструйный стеклянный ноооо, ГХТ 10696-75 Мерные колбы на 2»Х) ил, ГХТ 1770-74 Делительные воронки на I л, ГХТ 8613-*75 Водяная <Г. ня, ТУ 46-22-603-75 Иикропипетки, ГХТ 20292-74 Электроплитка, ГУ 92-275-76 Сушильный шкаф, ТУ 64-I-I4II-76E
Стеклянный лабораторный холодильник, ХПТ, ГХТ 9499-70 Воронка Бюхнера, дивыотр 13 си, ГХТ 9147-73 Колба Бунзена на 500 ил, ГХТ 6514-75 Аппарзт для встряхивания, TJ 642I-I08I-73
-1'Л-
Дроматографическвн колоик8-стоклпнная бюретке но 25 ил (высота 50 си* внутренний диаметр 10 мл). ГОС'Г 20292-74 Мельница элвктричвскэя для сельскохозяйственных культур,
ТУ 46-22-236-76 Кругл од (нише колбы на 250 ил со шлифом, ГОСТ 10594-72 Стеклянные пластинки 9x12 си пульверизатор стоклянный, ГОСТ 1770-74 Комера для хроматографирования, ГОСТ 10565-73 КоАиро для опрыскивания, ТУ-П-430-7и.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1. Приготовление пластинок
Для приготовления сорбционной массы из силикагеля не 10 пластинок 9x12 си берут 35 г силикагеля, 2 г гипсе и 90 г дистиллированной воды. Силикагель с гипсом растиооют в фарфоровой стулко, прибавляют воду и розмошивоют до образования однородной массы. Ю г суспензии наносят на пластинку и равномерно распределяют по поверхности. Сушат пластинки в горизонтальном полодении при комнатной температуре в течение ХЬ-20 часов.
2.5. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с унифицированными прививали отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания л объектах окружающей среды,- утвержденные заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР te 2051-79.
2.6. Проведение определения
2.6.1. Экстракция
Вода. Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку, подкисляют соляной кислотой до pH-\L и промывают последовательно 25 мл диэтилового эфира и н-гексано. Растворители отбрасывают. После этого pH водной пробы доводят до 6-7 добавленной твердого бикарбоната нэтрия. этиримол экстрагируют тремя порциями диэтилового эфире по 50 мл в течение 3-х минут. Объединенный эфирный экстракт сушат над безводным сернокислым натрием и кои иентри.ругт на ротационном испарителе до объема 0,2-0,3 ил. 'Геи пературе водяной овни J»U-45°C. истаток удаляют в токе воздуха.
Почва, IOO г измельченной почвы помещают в плоскодонную колоу. Этирииол экстрагируют ВО мл хлороформа (диэтилового эфира) путем энергичного встрпхивония в точение одного часа. Растворитель отфильтровывают через бумажным фильтр с безводным сернокислым натрием. Колбу и фильтр дважды промывают 20 мл того же растворителя. Объединенный экстракт концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2-0,3 ил при температуре водяной бани около 50°С. Остаток удаляют в токе воздуха.
Растительный материал.- (зерно, траве).
Тщательно измельченную пробу (100 г зерна, 20 г травы) помещают в плоскодонную колбу на 500 мл с пришлифованной пробкой, заливают 200 мл метэнола и помещают но 15 минут но аппарат для встряхивания. Экстракт фильтруют чероз бумажный фильтр "парная лента"нэ воронко Бюхнера под вакуумом. Осадок на фильтре промывают двумя порциями мотополо ^2x200 мл в случае зерна и 2x150 мл в случае травы). Аликвоту фильтрата (8и мл для зерна и 250 мл для травы) переносят в круглодонную колбу и прибавляют 10 мл воды, упоривогот на ротационной испарителе до объема 10 мл при температуре водяной бани около 50°С.
2.6.2. очистка экстракта.
Сконцентрированный фильтрат из растительного материала переносят количественно дистиллированной водой (3x5 мл) в делительную воронку и подкисляют концентрированной соляной кислотой до рН*1.
Сухой остаток из почвы растворяют в ГО мл 0,0Хн соляной кислоты и также переносят в делительную воронку.
Раствор промывают диэтиловым эфиром и н-гвксаком по 25 ил. Растворители отбра-сывают. Раствор нейтрализуют твердым бикарбонатом натрия до pH 6-7. Этирииол извлекают тремя порциями диэтилового эфира по 50 мл в течение 3-х минут.
Объединенный экстракт сушат над безводным сернокислым натрием, Половину высушеиного эфирного экстракта из растительного материала помещают в круглодонную колбу не 250 мл. Растворитель отгоняют на ротационной испарителе.
Очищенный эфирный экотраг.т из почвы твкхс отгоняют на ротационном испарителе.
—Г 93—
При наличии в проба коэкстрактивных веществ (особенно при анализе травянистых образцов) очистку можно провести на колон-ке с силикагелей. 3 г силикагеля переносят дизтиловым эфиром в стеклянную бюретку на 25 мл, на дно которой предварительно помещают тампон стекловолокна. Растаоритолю дают сточь до уровня силикагеля. Затои открывают кран и через колонку пропусквют высушенный эфирный экстракт пробы.
Зтиримол элюируют 60 мл смеси метаноп:ацвтон:диэтиловый эфир =1:2:7. Растворители упэриввют досуха.
2.3.3. Условия хроматографирования
Сухой остаток растворяют в небольшом количество метаноле и количественно переносят на пластинку n$itu}»(n или стеклянную пластинку с тонким слоем силикагеля. Справа наносят стандартные растворы препарата с содержанием 2, 5 и 10 шсг этиримола и проводят хроматографирование в системе подвижных растворителей хлороформ:метанол (10:1)- при работе с пластинками"^^* в " или гексан:ацетон (3:2)- для стеклянных хроматографических пластинок. Хроматографическую камору в точение 2-х часов насыщают парами подвижных растворителей, для чего стенки камеры ос-клоды вают фильтровальной бумагой, которая пропитывается подвижными растворителями.
После окончания хроматографирования пластинку извлекает из камеры и сушат не воздухе до удаления паров растворителя.
Для обиоружопия этиримола пластинку "SiiujoC" помещают иод "хроматоскоп”. Препарат обнаруживается в виде томных пятен но зеленом фоне (пластинки с люииносцентной добавкой). Предел обнаружения - 0fc2 шсг. Контуры пятен отмечают иглой, поело чего плостинку помещают в камеру с парами хлора, для этого в акси-квтор приливают 5и мл 1,5^- го раствора марганцовокислого калия и 50 мл 1($-го водного раствора соляной кислоты. Через 30 минут камера готова для использования. Пластинку выдерживают в камлро 5 минут и затем ив воздухе в течение одного часа, для удаления избьтка хлора. После этого ое обрабатывают реактивом К*1 и в течете 5 минут облучают УФ-светои. Зтиримол обнаруаиреотся в вило $ислотовых пятен на желтом фоне. Величина Я 43*0.01.
Стеклянные пластинки обрабатывают реоктивои №2. Этирииол проявляется в ведо яркокрасних пятен с величиной fy:=0,5(>-u,55.
2.7. Обработка результатов анвлизв
Оценка содержания этириыола на хроматограммах проводится сравнением площади и окраски пятен стандарта с пятнами пробы.
Для определения содержания этиримола в пробах используют формулы;
а) б воде и почве 101 2*А
Х= -ат~П---
где X- содержание этиримола в пробе, иг/п или иг/кг;
А- количество препарата в пробе, нвйденное сравнением оо стандартом, икг; а- объем или масса пробы, мл или г;
процент определения, найденный предварительно, %.
б) в растительном материале
y I02 А_
х~ а к
где X- содержание этиримола в пробе, иг/кг;
к- коэффициент, равный в случав зерна - 0,01 в случае травы - 0,005.
Остальные обозначения та же.
3. Требования безопасности
Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями и УФ-светои.
1
Настоящие методические указания подготовлены кандидатом химических наук Чмилем В,Д., старшим инженером Чуйковой С.В. {Всесоюзный НИИ гигиены и токсикологии полимерных и плестичео-
2
ккх масс* г.Киев, Героев обороны,б), кандидатом о/х наук Красных А.А., Павловой Л.Г.(Всероссийский НИИ защити раотаний, Рамонь Воронежской обл.).