госкгагассЕР. по швчвсш средства борьбы с вреде елям
БОЛЕЭНЯЯ РЛСТВНИ1 й СОРНЯКАМИ ПРВ ШШСЕЙЫС08Е СССР
Ы2Т0ДЗЧЕСШ Ш8АНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ШКРОКОЛИЧВСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРНАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
часть т-я
Мооюва - 1984
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслег^вательских учреж-дений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продукт' х питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических укаАий устанавливается то утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ ХСР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И.
1 лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом упраздним Минздрава СССР.
РЕДАКЦИОННАЯ КОЛЛЕГИЯ :
Л.Г. Александрова, Д.В. Гиренко, А.А.Калинина (секретарь), М.А. Клисенко (председатель), Г.И. Короткова, Г.А. Хбхоль-кова ( зам. председателя), В.Е. Кривенчук.
г83.
2.5.3* Определение /унтрела в растениях.
Подготовленный образец растительного материала /20г/
переносят в колбу и заливают 200 мл 0,01 н гидроокиси калия, далее проделывают как описано для почвы. После метилирования приступают к очистке. Упаривают раствор ль ротационной испарителе до объема приолиэительно 0,5 ил. Наносят этот раствор на пластину 'йЬ>№
Дважды ополаскивают концентратор 0,5 ил 30$ этилового эфира в гексане, каждый раз нанося раствор на пластинку. Пластинку помелют в хроматографическую камеру. Подвижная фаэа-смеоь дивтяло-
вого эфмра с н-гексаном в соотношении
Экстрагируют метиловый эфир 3,6-дихлорпиколиновой кислоты с плаотинки 50Х-ным диэтиловыи эфиром в н-гекоане. Испаряют до-оуха, растворяют в 1-2 ил того же растворителя и хроматографируют как описано в пункте 2.4.5.
Следует регулярно проверять/^. Для этого на пластинку наносится стандартный раствор, содержащий метиловый эфир 3,6-дихлорпиколиновой кислоты, разгоняют в камере, подсушивают, опрыскивают d,51-ным аммиачным раствором нитрата серебра и выдерживают под ртутно-кзарцевой лампой до появления пятен. Метиловый эфир 3,6-ДХПХ обнаруживается в виде темно-<5урых пятен.
2.5.4. Условия хроматографирования.
Условия хроматографирования приведены в 2.4.5.
2.6. Обработка результатов анализа.
Вычисление содержания исходного вещества производится по формуле
М - содерж:ние 3,$-длхлорпиколиноБой кислоты в образце, в мг/кг; А - содср^чие 3,6—д ихлорпиколиновой кислоты в мкг, определен-
нее нс хрскаюграре;•г&л.
Н - навеска анализируемого вещества в г или мд /для води/
3. Требования безопасности.
При проведении анализа о деду от соб ладить обычные правила техники безопасности при работе в лаборатории Особое внимание следует обращать на безопасность работы о диазометаном. Следует помнить, что диазометан является взрывоопасным и ядовитым газом, опасным при попадании на кожу и в глаза.
*». Разработчик.
Настоящая методика "Определение лонгрела в воде и почве" разработан» о.н.о. Поповым В.Г. ВНИИХлесхоз;
"Определение лонтрела в риотениях" - с.н.о, Юдиным Б.И. м
Лобановым Г.Л., TJXA г.Мс;ква.
347.
СОДЕРЖАНИЕ*
X. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ В ВОЗШЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ:
отр.
Агелояа и ситрина.................. 3
Актеллика и пришпида............'. . . . 8
Алвпа........................13
Бен8оилпгюпэтпла и этилового эфипа N-3,4- дяхлор-
фенилаланина........ 17
Беномила и ЕМК.......... 22
Беятаэона......................30
Биопесметрина.....................35
Болстапа.......................40
Боояокота......................48
Бутилкаптакса .......... 52
Бутокагбоксима....................59
Гидрела . '.......................63
ГМК-Na....................... 66
Даконкля...................... 70
Диавиноня, эптама, гамма-изомера ГХЦГ.фенмедедифама,
лекапила.фосфашда и пиразояа..........77
Дигид ~ела...................... 69
Диквата........................93
Зоокука-чпа.....................37
Карбофурана.....................100
Кречетояа......................ХО**
Мепида и 3-хлор-4-метил8тгилина....... X0Q
Метазина и компонентов гярбишщной смеси "карагард" . ИЗ
Митака....................... 118
Офунака............. 124
Пликтрана..................... т28
Ратпяданэ..................... Х32
Раунда на..................... Х38
Ровряля ...................... 143
Розалина..................... Х43
Синтетических пиретроидов (амбуп.депис.рипкорд,
сут/;пп'Д':н). *. ......... 154
С томна....................... XGI
248.
стр.
Сумилекса......... 166
Томллона.................... 173
Триморфамида.................. 180
Фекама-трибуфона................ 136
Фталаиа.................... 192
Лропарата 242 и металлилхлорида (MX) ... . 200
Хоотаквкка ................... 206
Эдила..................... 210
П. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРВДЛШЮ нвслмшиюв в ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Хлороргапическяе пестициды
Методические указания по определению остаточных
количеств гексахлорана (линдэка) в оушеном
картофеле полярографическим методом....... 213
Фосфоропганические пеотипиды
Методические указания по определению дифосв (абата) в продуктах животного происхождения методом тонкослойной хроматографии ....... 218
Методические указания по определению мотафоса, фосфамида и хлорофоса в сушеных овощах и плодах (картофель, морковь, петрушка, яблоки, груши, слива) методами тонкослойной и газо-жидкостной хроматографии .................. 223
Временные методические указания по определению метилпитрофоса.фенитрооксона и п-нитрокреэола в лесной растительности и почьо тонкослойной
хроматографией .................. 241
Методические указами." по определению трихлорметвфоса-3 и его метаболитов в биоматериале методом газожидкостной хроматографии ............ 252
Методические указания по хроматографическому определених|5уторвкбокоима в почве,воде и расти
Методические указания "то определению ,IMK-Na,
гидрела,дигидпела методом спектрофотометрии в
воде .растительном материале (томатн,-блоки,свекла). . 267
Временнне методические указания по определению лонтре-ла в воде,почве и растениях методом газо-жидкостной хроматографии...........•..........275
Временнне методические указания по определению паагшана методом газо-жидкостной хроматографии в почве,табаке п в табачном днме...........285
Временнне методические указания по определению розал'.ша в растительннх объектах,воде и почве хромато-спектпофотометрическим методом ....... 296
Методические указания по определению треФлана в воде,почве,томатех и капусте методом УФ-опектпо-фотометгии с использованием тонкослойной хроматографии .................... 305
Методические указания по фотометрическому определению эдила в воде,растительном масле,семенах подсолнечника, траве....................... 311
Методические указания по определению остаточннх количеств пиреба в сушеннх овощах и плодах фотометрическим методом...........• . . . . 317
Биоппепапатн
Временнне методические указания по определению остаточных количеств препарата вирин-диприояа на растительных объектах ИФ-методом . .........325
Временнне методические указания по определению остаточннх количеств биопрепарата випин-КШ на растительных объектах иммуно-флюор-еспентным методом. .331
" УТВЕРЖДАЮ" Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР
А.И.Зайченко н 6 и августа 1ЭД1 г.
# 2^27-31
БРЫЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ У|(АЗАНП.| ПО ОПРЕДЕЛЕННА ЛОНТРШ 3 БОДЕ,аиЧИЕ И РАСТЕНИЕ М.ГОДОМ ГАЗОХОД КОСТНОЙ ХРОМАТОГРА ш.
I. риоти ^_прегп^ята__
Лонтрвл - торговля карпа фирмы ДАУ для гербицидных композиций, содержащих 3,6-дихлорликолиновуо кислоту /ДХПН/.
Химическое и общее название : 3,6-дихлорпикриновая кислота, Дауко 290,
Эмпирическая формула:
По физическим овойствам белое кристаллическое вещество с температурой пла ления 151-152°С. Давление пара при 25°С-1,2*Ю~" мм рт.от. Растворимость при температуре 20°С /граммов 3,6-ДХПК на 100 мл растворителя/: вода 0,1; ацетон, ксилол, метанол- 25.
Острая токсичность 3,6- ДХПК для крыс ЛД^-ЗООО мг/кг живого жеоа. Выпускается в виде водного раствора соли о отиламинон о оодераанием кислоты 100 и 300 г/л, а также в виде смесей о 2М-**ХП / также в виде оолей о этиламином/.
3,6-ДХЛК - оелективный гербицид, эффективный против оорняков устойчивых к феноксиуксусным и феноксипропионовыч кислотам в пооевах хлебных злаков, оорго, льна, пастбищных трав, сахарной овекЛы и рапса. Применяется также в смеси о другими гербицидами после во ход оь в дозах 50-LX) г/га.
щб-
3. Методика определения Лонтрела в воме, почве и растениях истодом газо-жидкостной хроматографии*
3*1. Основные положения
2-1*1* Принцип метода.
Метод основан ю извлечении лонтрела из объекта раствором щелочи, переэкстракции пробы в диэтиловый эфир, метилировании и определении на хроматографе о детектором по захвату электронов
в виде метилового эфира 3,6-дихяорпиколи новой киолоты.
3*1*3* Метрологическая характеристика метода.
Диапазон определяемых концентраций:
йода - U,0006 мг/л-0,006 мг/л '
Почва -0,001 -0,01 мг/кг •
/
Растения -С.Хч ^0,04 мг/кг
Предел обнаружения метилового э^ира 3,5-ДХП&-0,01 мкг.
Предел обнаружения :
Вода -0,0006 мг/л;
Почва - 0,001 мг/кг •
Гастения •0,004 мг/кг
вреднее значение определения стандартных количеств лонтрела в I при /г -3 для почвы и воды, для растений:
Бода - ЮЗ *
Почва - 93;
Растения - S3
Стандартное отклонение в X :
Вода - t 1,86;
Почва - £ 3,68;
Растения-^ 3,77
Относителоное стандартное отклонение S*A ъ I г
Бода - t 0,02 I Почва- ± 0.03;
Растения'0,05
Доверительный интервал для среднего в % при Р*0.95 и п-8 дли почвы и /1^-6 для растении:
Бода - 102 |
|
1.51] |
Почва - 96 |
+ |
2.20; |
Растения - 83 |
|
3.77 |
2•I•3, Изб ирательность^иетода
Метод избирателен в присутствии пиклорама А-амино--3,5,6-ТрИХЛОрПИКОЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ/.
2.2* Реактивы^ и _ материалы
Ортофоофоркая кислота, ГОСТ 6552 -80
Натрия хлористый^чда, ГОСТ 4233-77
Натрий оернокислый^езводный,х.ч^ГОСТ 4166-76
Диазометан.готовится по прописи приведенной в 2.4.2.
Содяная кислотаt х.ч.# ГОСТ 3118-67
Солянокислый м€тидамин;ГОСТ 5456-65
Мочевина ,х.ч., ГОСТ 6691-77
Нитрат натрия;х.чв| ГОСТ 4197-74
Серная кислота, ГОСТ 4204-66
Азотнокислое серебро^ГОСТ 1277-75
Нитрозо метилмочевина,готовится по прописи.изложенной в 2,4.2.
Дизтиловый эфир trOCT 6265 -74 Гидрокись натрия ^ГОСТ 4328-77, хч.
278.
Метанол^’ОСТ 699» -77
Этанол ректификат,ГОСТ 5962-67,1 сорт /ТУ 19ЧФ-39-69/ Н-гексан;ТУ 6-09-3375-78 Бумажные фильтры,ТУ 6-09-1673-77 Пластинки " -56068 -76/ЧССР/
3,6-дкхлорпиколинован киолота, хч.
Метиловый эфир 3,6 дихлорпиколиНОВОЙ кислоты,хч
2.3, Приборы, аппаратура, посуда
Хроматограф и ]вет"-106 с девектором по захвату электронов
Колонка стеклянная,длиной 180 см,диаметрои 2 мм
Твердый носитель хрома то н-ЖЧ/Ю/*г/ /0,20-0,25 мм/ с нанесенной фазойS £-30 /51/
Пенный расхсдомер
Кислородный редуктор, ГОСТ 5,1331-72
Азот особой читоты^ГОСТ 9293 -7*»
Механический встряхиватель,МРТУ 2451-6*1
Испаритель вакуумный ротационный ИР -1Ч^ТУ 25-П-9Г7-74
Делительные воронки на 500 мл^ГОСТ 10054-^5
Колбы конические на 500 нл, ГОСТ 10394-72
Химические стакань^ГОСТ 10394 -72
Пипетки смк. 1,5,10 мл,,ГОСТ 1770-74
Мерные цилиндры^ГОСТ 1770-74
КолЗы мерные на IOj мл^ГОСТ 1770-74
Дампа ртутно-кварцевая 0KH-IifTy64 -I-I6i3-<2
Колзы грувевидные^ГООТ 1^3*4-72
Ьакуумныи насоо ^TJ-64-1-861-72
Ооратный холодильник Лилиха^ОЗТ 9499-70
279.
Баня водяная, ТУо**-1-2350 -76
Микроаприц МШ-10
Сито о отверстиями X мм
Мельница электрическая для с/х культур, ТУ **6-22-236-76
Центрифуга ЦЙН-1
Колба Бунзена,ГОСТ 6514-75
Воронка Бюхнера,ГОСТ 9147-73
Капилляры для внесения образцов на плаотмнкм
Хроматографическая камера, ГОСТ 10565 -75
2.4. Подготовка к определение.
2*4.1. Отбор проб и подготовка к определение.
Отбор проб производят в соответствии о унифицмрованными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окру^юией среды, утвержденных заместителем Главного Государственного оанитарного врача СССР 21.08.1979 г. за * 2051-79.
Перед определением почву т«цательно растирают и пропускают через сито с отверстиями I мм. Раст «тельный материал размалывают на мельнице или гомогенизируют.
2.4.2* Приготовление нитрозометилмочезины: в I-литровую круг-лодоннуг колбу наливают 100 г /105 мл/ 25^-ного водного раствора метиламина добавляют концентрированную соляную киолоту 92,8 г/78 мл/, 57,2 мл дистиллированной во. ы и 150 г мочевины.
Раствор медленно кипятят на глицериновой бане при температуре I20°C С обратным холодильником ^ течение 2 чао.*5 мин., затем повышают температуру бани до 127? и кипятят более энергична еще 15 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, растворяют 55 г азотнокислого натрия и охлаждают до 0°.
280.
8 2-х литровом стакане /который охлаждают в бане со льдом и ос;.ы> /готовят смесь из 200 г льде и 50 г концентрированной серной киологы н к этому раствору при помешивании приливают холодный растьор метилмочевины и нгтрите, полученный ранее, с тихой скоростью, чтобы температура не повышалась более 0°.
Нитроэометилмочевина всплывает на поверхность в виде пены. По окончании реакции содержимое стакана переносят на воронку о бумажным фильтром и фильтруют с водоструйным насосом; оставшуюся на бумажном фильтре нитрозометилмочевину промывают дистилирован-ной водой 10-20 мл и сушат в вакуум-эксикаторе до постоянного веса, Нитрозометилмочевину хранят в холодильнике в склянке о притертой пробкой,
2.**.3. Метилирование.
Метилирование сухого остатка 3,6-дихлорпихолиновой кислоты можно проводить диазометаном двумя способами.
1- й способ описан нами в "Методических указаниях по определению пиклорлма методом газо-жидкостной хроматографии", утвержденных зам“стителем Главного Государственного санитарного врача ССОР * 1579 5.06.1978 г.
2- й способ. 3 колбу на 250 мл заливают 35 мл гидроокиси калия и 100 мл диэтилового эфира. Помещают в колбу со льдом и поваренной солью, при охлаждении добавляют нитрозометилмочевину до получения интенсивной желтой окраски. Насыщенный диазометаном
эфирный слой переносят в сухую емкость и сузат над кристаллической гидроокисью калия. Для метилирования в емкость с сухим остатком
3.6-дихлорпиколиновой кислоты приливают 5 мл насыщенного эфионого ^створа, закрывают пробкой и выдерживают не менее часе. Упари-
*ei.
»ают досуха. Сухой остаток растворяют в этиловом огирте и хроматографируют для воды к почвы, а для растений переходят к очистке. Z.*»**». Построение калибровочной кривой.
Для построения калибровочной кривой готовят серию концентрации 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 мкг,мл химически чистой 3,6-дихлорпиколиновой кислоты. Готовят 10 проб воды, почвы и раотитель-ного материала и вносят в них по одному миллилитру стандартного раствора, начиная с меньшей концентрации /модельные обриэцы/.
Дают экспозицию не меньше ''пса и приступают к экстракции, кик будет описано ниже для води. Почвы и растения. После хроматографии на основании полученных данных, проводят построение калибровочной кривой. По оси координат откладывают высоту или площадь пика, по оси абоцисо - концентрацию в мхг/кл.
2.**.5. Условия хроматографирования.
Скорость газа-носителя /азот особой чистоты/ через кслэнку-ЗЭ мл/мин, через детектор-ЭЭ мл/мин. Температура испарителя-2 50°С* термостата колонки-18С°С, термостата детектора-280° J. Икала электрометра 2#5 а А. Скорость .движения диаграмной ленты само
писца- 30 см/час. Качественная идентификация проводитоя путем сравнения времен удерживания метилового Эфира 3,6-дихлорпик~линовой кислоты /стандарта/ и анализируемого вещества при разных температурах колонки и применении дополнительно фвзы*0|/-17. Абсолютное время удерживания метилового о-^м-рех j,6- дихлорпиколиновоя кислоты на колонке с фазой./7£-ЗС*10^, да фазе 0^-17,-121 сек. Количественное определение производят методом аооолютной калибровки на модельных образцах.
При риараооткё методики для растений использовались следующие условия хроматографирования: скорость потока газа-нс&ителя :
28 г.
через колонку -40 мл/мин, через детектор - i6u мл/мии. Температура иопормтеля - 250° С# термостата колонки - 200°С, термостета детектора - 250°С. Неподвижная фаза й^-I. В этих уоловиях приведенное время удерживания метилового эфира 0,6-дихюрпиколиновой кислоты ооотавляст 40 сек, абсолютное время удерживания - 60 оек.
2*5. Проведение определения.
2.5*1. Определение донтрела в воде.
Пробу /250 мл/ води помещают в делительную воронку на 500 мл( попкиоляют ортофосфорной кислотой до pH 1-2* Прибавляют 40 г хлорида натрия, экстрагируют тремя порциями диэтилового эфира /100, 100 и 50 мл/. Объединенный эфирный экстракт суоат над безводным сульфатом натрия /5 г/ и упаривают досуха на ротационном испарителе при темпе-ратерв 40°С. Сухой остаток метилируют, как описано вине, упаривают, растворяют ь 1-2 мл этилового спирта и хроматографируют. Если концентрация превышает линейный диапазон детектирования пробу разбавляют,
2*5.2. Определение лонтрела в почве.
Подготовленный образец почвы /50 г/ помещают в колбу на 250 мд, заливают 100 hJ 0,01 н раствора гидроокиои калия,экотраги-румг на механичеоком вотряхивателе' 40 минут. Супернотаит декантируют. Осадок еще дважды экстрагируют 100 и 50 мл гидроокиси калия. Объединенный супернотаит.центрифугируют 10 минут при 5000 об/мин.
К раотвору добавляют 40 г хлористого натрия, переносят раствор в делительную воронку, далее поступают как описано для воды.
Пооле построения шкалы для установления процента обнаружения брали по две повторности воды /250 мл/ и почвы /50 г/ и вносили в них хммичеокм чистую 3,6 -дихлорпиколиновую кислоту. После часовой эхопозицим приступали к анализу как описано для воды и почвы.