Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

4 страницы

Купить 1 — официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

  Скачать PDF

Показать даты введения Admin

Изменение № 1 ГОСТ 25382-82 Крупный рогатый скот. Методы лабораторной диагностики лейкозов

Утверждено и введено в действие Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 23.06.89 № 1957

Дата введения 01.01.90

На обложке и первой странице стандарта после обозначения (СТ СЭВ 2702—80) дополнить обозначением: СТ СЭВ 6284—88.

Раздел 1 дополнить пунктом — 1.6: «1.6. Для иммуноферментного анализа используют свежие пробы крови, но не ранее, чем через сутки после взятия-Недостаточно просветленные сыворотки крови центрифугируют. При длительном хранении проб сыворотку крови отделяют от кровяного сгустка. При хранении проб при плюс 4 СС сыворотки годны к исследованию в течение 10 сут.

При хранении сыворотки при температуре минус 20 °С срок пригодности сыворотки для исследований — 1 год. Разложившиеся и сильно гемолизированные сыворотки для исследования не пригодны».

Раздел 2 дополнить пунктами — 2.5—2.5.3: «2.5. ИммуноФерментный метод

Сущность метода заключается в адсорбции антигеном противовирусных антител на поверхности пластины при инкубировании испытуемой сыворотки с антивидовымн антителами, меченными ферментом, с последующей модификацией субстрата.

2.5.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Фотометр одно- или многоканальный с минимальным пределом показаний 1,5 экстинционных единиц и с автоматической регистрацией результатов.

Автоматическое или полуавтоматическое оборудование для промывания пластин.

Термостат, обеспечивающий температуру (ЗТ±0,5)СС.

Микропипетки одноканальные автоматические.

Микропипетки восьми- или двенадцатиканальные автоматические.

Микротитровальные пластмассовые пластины с 96 лунками.

Стаканы химические вместимостью 500 см3 по ГОСТ 1770-74.

Колбы мерные вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770-74.

К#лбы Эрленмейера вместимостью 100 см3 по ГОСТ 25336—S2.

Пробирки по ГОСТ 25336-82.

(Продолжение см. с. 224>

22S

(Продолжение изменения к ГОСТ 25382-82)

Пипетки градуированные вместимостью 1 и 10 см3 по ГОСТ 20292-71.

Буферный раствор карбонатный с pH 8.8—9.6.

Буферный раствор физиологический фосфатный с pH 7,2—7.4. содержащий твин 20 или 80 (промывающий раствор).

Растворитель — промывающий раствор, содержащий инертный белок.

Антиген ВЛКРС для иммуноферментного анализа (ИФА), изготовленный из культуральной жидкости инфицированной ВЛКРС культуры клеток селезенки ягнят-эмбрионов (FLS) или почки ягнят-эмбрионов (FLK), содержащий компоненты вируса GP 51 и р 24, разведенный в карбонатном буферном растворе.

Сыворотка контрольная положительная, разведенная в растворителе.

Сыворотка контрольная отрицательная, представляющая собой смесь не менее чем из 10 отрицательных сывороток крупного рогатого скота, разведенная в растворителе.

Конъюгат — антитела против иммуноглобулинов крупного рогатого скота, меченные пероксндазой или другим ферментом, разведенные в растворителе.

Испытуемая сыворотка из крови крупного рогатого скота.

Субстрат ферментативной реакции.

2.5.2. Проведение исследования

В лунки микротитровальной пластины (панели) вносят по 0.05 или 0.1 или 0,2 см3 раствора антигена. Пластину закрывают и инкубируют в течение 18 ч во влажной камере при температуре плюс 4 °С.

После этого пластину четыре раза промывают физиологическим фосфатным буферным раствором так, чтобы лунки заполнялись полностью, выдерживают в течение 3 мин и затем раствор из лунок тщательно удаляют.

Готовят исходные разведения испытуемых сывороток.

Испытуемые сыворотки в исходном разведении вносят параллельно в две соседние лунки микротитровальной пластины в количестве 0,05 или 0,1 или 0.2 см3. Таким же способом в каждую пластину вносят разведенные контрольные положительную и отрицательную сыворотки. На каждой пластине оставляют несколько лунок заполненных только растворителем (без сыворотки). Количество лунок с растворителем на пластине определяется конструкцией фотометра и используется для установки нулевого положения шкалы прибора.

Пластину закрывают и инкубируют при температуре от 20 до 37 °С во влажной камере в течение 60— 120 мин.

(Продолжение см. с. 225)

224

(Продолжение изменения к ГОСТ 25382-82)

Промывают пластику четыре раза промывающим раствором.

В лунки вносят по 0,05 или 0,1 или 0,2 см3 раствора конъюгата, пластины закрывают и инкубируют при температуре от 20 до 37 °С во влажной камере в течение 60—120 мин.

Промывают пластину четыре раза промывающим раствором.

В каждую лунку вносят по 0,05 или 0.1, или 0,2 см3 раствора субстрата и инкубируют при "температуре от 20 до 37 °С в течение 50—60 мин. При необходимости в лунки добавляют карбонатный буферный раствор, останавливающий

225

(Продолжение см. с. 226)

€ Зак. 1667

(Продолжение изменения к ГОСТ 25382-92$

реакцию, и измеряют оптическую плотность в каждой лунке на фотометре прв> длине волны, характерной для выбранного субстрата.

2.5.3. Обработка результатов

Результат считают положительным, если оптичесхая плотность исследуемой пробы в обеих лунках в два или более раза превышает среднюю арифметическую величину оптической плотности для отрицательной пробы в соответ~ ствующем разведении».

(ИУС Л? 10 1989 г.)

226