УТВЕРЖДАЮ
Главный
государственный санитарный
врач
Российской Федерации,
Первый
заместитель Министра
здравоохранения Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
29 июня 2003 г.
Дата введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Спектрофотометрическое измерение
массовых концентраций аллохола (по сумме
желчных кислот) в воздухе рабочей зоны
Методические указания
МУК 4.1.1615-03
1. Область применения
Настоящие методические указания устанавливают
количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание
суммы желчных кислот в диапазоне концентраций 0,05 - 0,50 мг/м3.
2.
Характеристика вещества
2.1. Физико-химические свойства.
В состав лекарственного препарата аллохол входят желчь
сухая бычья (38 %), чеснок сушеный (19 %), листья крапивы (2,4 %), уголь
активированный (11,9 %) и вспомогательные вещества (28,7 %). В желчи содержатся
различные желчные кислоты - монокарбоновые гидроксикислоты, относящиеся к
классу стероидов, кристаллы с температурами плавления от 140 до 250 °С. В желчи
быка присутствуют в основном холевая (Тпл. 199 °С) и дезоксихолевая
(Тпл. 177 °С) кислоты в виде щелочных солей конъюгатов указанных
кислот с таурином или глицином, при этом массовая доля холевых кислот
составляет не менее 30 %.
Желчные кислоты плохо растворимы в воде, растворимы в
этиловом спирте.
Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
2.2. Токсикологическая характеристика.
Препарат аллохол обладает общетоксическим и
гепатотропным действием.
Предельно допустимая концентрация препарата аллохола в
воздухе рабочей зоны (по сумме массовых концентраций желчных кислот) - 0,1 мг/м3.
3.
Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений массовых
концентраций суммы желчных кислот в воздухе с погрешностью, не превышающей ± 15
% при доверительной вероятности 0,95.
4. Метод
измерений
Измерение массовых концентраций желчных кислот (по
холевой кислоте) выполняется методом спектрофотометрии. Метод основан на
взаимодействии кислот с сахарозой с образованием окрашенного в желтый цвет
продукта реакции. Измерение проводят при длине волны 575 нм.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания желчных кислот в
анализируемой пробе 20 мкг.
Нижний предел измерения концентрации желчных кислот в
воздухе (при отборе 1000 дм3 воздуха) 0,05 мг/м3.
Определению не мешают крахмал, тальк, магния карбонат,
титана диоксид, тропеолин.
5.
Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы
5.1. Средства измерений, вспомогательные
устройства, материалы
Спектрофотометр СФ-46
Пробоотборное устройство ПУ-3Э ТУ 4215-11696625-95
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ
24104-88Е
Меры массы Г-2-2106 2 кл ГОСТ 7328-82Е
Фильтр АФА-ВП-10 ТУ 95-743-80
Колбы мерные, вместимостью 50, 100 и 500 см3 ГОСТ
1770-74Е
Цилиндр мерный, вместимостью 500 см3 ГОСТ
1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3 ГОСТ
29227-91
Бюксы 50/30 ГОСТ
25336-82Е
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью
10 см3 ГОСТ
25336-82Е
Кюветы с толщиной оптического слоя 50 мм
Стаканчики для взвешивания ГОСТ
25336-82Е
Баня водяная ТУ 64-1-2850-76
Термометр ГОСТ 215-73
Холодильник бытовой ГОСТ
16317-87
5.2.
Реактивы
Холевая кислота, содержание основного вещества 98 % ТУ 6-09-10-1585-83
Серная кислота концентрированная, плотность 1,84 г/см3 ГОСТ 4204-77
Спирт этиловый, хч ГОСТ 5963-67
Сахароза ГОСТ 5833-75
Кислота уксусная ледяная ГОСТ 61-75
Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72
Допускается применение иных средств измерения,
вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели
точности, установленные для данных методических указаний.
6.
Требования безопасности
6.1. При работе с реактивами соблюдают требования
безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и
легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ
должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.
6.3. При выполнении измерений с использованием
спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
6.4. Работа на спектрофотометре должна проводиться в
чистом помещении, свободном от пыли, паров кислот и щелочей. Вблизи
спектрофотометра не должны располагаться громоздкие изделия, создающие
неудобства в работе оператора.
6.5. В процессе работы необходимо соблюдать правила
техники безопасности при работе с химической посудой.
7.
Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов
допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, имеющие навыки
работы на спектрофотометре.
8.
Условия измерений
8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к
анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 ± 5) °С, атмосферном
давлении 84 - 106 кПа и влажности
воздуха не более 80 %.
8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в
условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
9.
Подготовка к выполнению измерений
9.1. Приготовление растворов
9.1.1. Приготовление стандартного раствора кислоты холевой
концентрацией 100 мкг/см3. Навеску 10 мг кислоты холевой растворяют
в нескольких см3 спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100 см3
и доводят объем раствора спиртом до метки. Срок годности раствора - 10 суток
при хранении в холодильнике.
9.1.2. Приготовление раствора сахарозы концентрацией 10
мг/см3. Растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 см3
1 г сахарозы и доводят объем раствора водой до метки. Раствор используют
свежеприготовленным.
9.1.3. Приготовление 8 М раствора кислоты серной. В колбе
вместимостью 500 см3 к 200 см3 дистиллированной воды
осторожно, при постоянном перемешивании, прибавляют 213 см3 кислоты
серной концентрированной и доводят водой до метки. Срок годности раствора - 1
месяц при хранении в комнатных условиях.
9.2.
Подготовка прибора
Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с
руководством по его эксплуатации.
9.3.
Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость
величины оптической плотности раствора от массы вещества в анализируемой пробе,
устанавливают по методу абсолютной градуировки с использованием серии
градуировочных растворов согласно табл. 1, которые готовят путем
соответствующего разбавления стандартного раствора кислоты холевой этиловым
спиртом с помощью пипеток в пробирках с притертыми пробками. Растворы можно
хранить при комнатной температуре в течение 7 ч, в холодильнике - в течение
недели.
Для получения градуировочной зависимости по 2 см3
каждого градуировочного раствора переносят в колбу на 50 см3 с
притертой пробкой, прибавляют 0,8 см3 раствора сахарозы, пробирку с
раствором ставят в стакан со смесью воды со льдом, прибавляют 10 см3
8 М раствора кислоты серной и тщательно перемешивают. Пробирку с раствором
помещают в водяную баню при 60 °С на 20 мин., после чего сразу же охлаждают в
стакане со смесью воды со льдом, прибавляют 10 см3 кислоты уксусной
ледяной и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре в максимуме
поглощения при длине волны 575 нм в кювете с толщиной слоя 50 мм. В качестве
раствора сравнения используют градуировочный раствор № 1.
Проводят по 5 параллельных определений для каждого из
6 растворов и строят градуировочную зависимость величины оптической плотности
от количества вещества в анализируемой пробе.
Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3
месяца или в случае смены партии реактивов, оборудования или приборов.
Таблица 1
Растворы для установления градуировочной характеристики
при измерении массовых концентраций желчных кислот
№
стандарта
|
Стандартный раствор холевой кислоты, см3
|
Спирт этиловый, см3
|
Концентрация вещества, мкг/см3
|
Содержание вещества в анализируемом объеме раствора, мкг
|
1
|
0
|
10
|
0
|
0
|
2
|
1,0
|
9,0
|
10
|
20
|
3
|
2,0
|
8,0
|
20
|
40
|
4
|
3,0
|
7,0
|
30
|
60
|
5
|
5,0
|
5,0
|
50
|
100
|
6
|
7,5
|
2,5
|
75
|
150
|
7
|
10
|
0
|
100
|
200
|
9.4. Отбор
проб воздуха
Воздух с объемным расходом 40 дм3/мин аспирируют
через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2
ПДК аллохола следует отобрать 1000 дм3 воздуха. Пробы можно хранить
в течение недели.
10.
Выполнение измерения
Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс с
пришлифованной крышкой и приливают пипеткой 5 см3 этилового спирта.
Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин и сливают в
пробирку. Степень экстракции с фильтра 95 %. Отбирают пипеткой 2 см3
экстракта и проводят фотометрические реакции аналогично тому, как и при
построении градуировочного графика. Количественное определение содержания суммы
свободных желчных кислот в растворе проводят по предварительно построенному
градуировочному графику, полученному с помощью растворов холевой кислоты по
отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр.
11.
Расчет концентрации вещества
Концентрацию суммы желчных кислот в воздухе (С, мг/м3) вычисляют по
формуле:
где
а - содержание желчных кислот в объеме пробы, взятой для
анализа, мкг;
в - общий
объем экстракта с фильтра, см3;
б - объем пробы, взятой для анализа, см3;
V - объем воздуха,
отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, дм3
(см. прилож. 1).
12.
Оформление результатов анализа
Результат количественного анализа представляют в виде
(С ± D) мг/м3, Р = 0,95, где D - характеристика погрешности, D = 0,005 + 0,15С.
13.
Контроль погрешности методики
Значения характеристики погрешности, норматива оперативного
контроля точности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены
в табл. 2
в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента
в пробе С.
Таблица 2
Результаты метрологической аттестации методики
количественного химического анализа
Диапазон определяемых концентраций желчных
кислот, мг/м3
|
Наименование
метрологической характеристики
|
Характеристика
погрешности D,
мг/м3 (Р = 0,95)
|
Норматив оперативного
контроля точности К, мг/м3 (Р = 0,90, m = 2)
|
Норматив оперативного
контроля воспроизводимости D, мг/м3 (P = 0,95, m = 2)
|
От
0,05 до 0,5
|
0,005 + 0,15С
|
0,007 + 0,16С
|
0,015 + 0,02С
|
13.1.
Оперативный контроль воспроизводимости
Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в
одной серии с анализом рабочих проб. Проводят отбор двух воздушных проб с
использованием двух пробоотборников одновременно. Анализируют в соответствии с
прописью методики, привлекая различных исполнителей и максимально варьируя
условия проведения анализа: партии реактивов, наборы мерной посуды и т.д., и
получают два результата С1
и С2 анализов.
Решение об удовлетворительной воспроизводимости принимают при выполнении
условия:
где
D -
норматив оперативного контроля воспроизводимости. При превышении расхождения
между двумя результатами анализа норматива оперативного контроля
воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного
норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и
устраняют их.
Внутренний оперативный контроль воспроизводимости
проводят не реже, чем 1 раз в месяц.
13.2.
Оперативный контроль точности
Оперативный контроль точности выполняют в одной серии
с анализом рабочих проб. Проводят отбор двух воздушных проб с использованием
двух пробоотборников одновременно, затем к одной пробе делают добавку
анализируемого компонента δС,
нанося на фильтр дозу раствора, содержащего анализируемый компонент.
Величина добавки должна соответствовать 50 - 150 % от содержания компонента в
пробе. Результаты анализа С1
без добавки и С2
с добавкой получают по возможности в одинаковых условиях: одним аналитиком,
с одной партией реактивов, с одним набором посуды и т.д.
Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем
поверки используемых пробоотборников. Решение об удовлетворительной погрешности
принимают при выполнении условия:
где
K - норматив оперативного контроля точности.
14. Нормы
затрат времени на анализ
Для проведения серии анализов из 6 проб при
последовательном отборе проб воздуха требуется 6 ч.
Методические указания разработаны Российским
государственным медицинским университетом (лаборатория токсикологии и экологии,
Е.Б. Гугля).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к
стандартным условиям
Приведение
объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа)
проводят по формуле:
, где
Vt - объем воздуха, отобранного
для анализа, дм3;
Р - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства
расчета V20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (прилож.
2). Для приведения воздуха к
стандартным условиям надо умножить Vt на соответствующий
коэффициент.
Приложение 2
Коэффициенты для приведения
объема воздуха к стандартным условиям
Давление
Р, кПа/мм рт. ст.
|
t °C
|
97,33/730
|
97,86/734
|
98,4/738
|
98,93/742
|
99,46/746
|
100/750
|
100,53/754
|
101,06/758
|
101,33/760
|
101,86/764
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2058
|
1,2122
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1460
|
1,1490
|
1,1551
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
0,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9778
|
0,9830
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9555
|
0,9605
|
0,9657
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9391
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9199
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
Приложение 3
Указатель основных
синонимов, технических, торговых и фирменных названий веществ
1. Амиодарон
2.
Амоксициллина тригидрат
3. Ацикловир
4. Витамин А
5. Галоперидол
6. Ксиланаза
7. Лоперамида
гидрохлорид
8. Мексидол
9. Мексикор
10. Офлоксацин
11. Пиразинамид
12. Ретинола
ацетат
13. Родопол-23
14. Симвастатин
15. Трамадол
16. Хладон-23
17.
Хладон-31-10
18. Хладон-116
19. Хладон-122
20. Хладон-R11511
21.
Цианборгидрид натрия
22. Этамбутола
дигидрохлорид
Приложение 4
Вещества, определяемые по
ранее утвержденным методическим указаниям
Название
вещества
|
Ссылка
на опубликованные методические указания
|
1
|
2
|
1. №-децил-N,N-диметил-1-деканаминий
хлорид (дидецилдиметиламмоний хлорид; «Арквад 2.10.50»)
|
МУ по фотометрическому измерению
концентраций диалкилдиметиламмоний хлорида (С17 - С20)
и алкилбензилдиметиламмоний хлорида (С10 - С16)-ДОН-2, диалкиламинопропионитрила
(С7 - С9)-ИФХАН-ГАЗ, алкилтриметиламмоний хлорида (С10
- С16), ДОН-52 в воздухе рабочей зоны. № утв. 4905-88, дата утв.
12.12.88, вып. 25. М., 1989, с. 49
|
2. Поликарбонофторид
|
МУ на гравиметрическое определение пыли в воздухе
рабочей зоны и в системах вентиляционных установок. МУ № 1719-77, дата утв.
18.04.77, вып. 1 - 5. М., 1981, с. 235
|
3. Препарат МЭК-Сх-3
|
МУ по фотометрическому измерению массовых
концентраций эндо-1,3в-ксиланазы (ксиланаза) в воздухе рабочей зоны. МУК
4.1.1642-03, дата утв. 29.06.03, вып. 42
|
4. Препарат ПФП-1
|
МУ по спектрофотометрическому измерению
концентрации амилазы в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1575-03, дата утв.
29.06.03, вып. 38
|
5. Препарат Феркон
|
МУ по фотометрическому измерению массовых
концентраций целловиридина в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1753-03, дата утв.
29.06.03, вып. 46
|
6. Селенит натрия
|
МУ по атомно-абсорбционному измерению
массовых концентраций селена и диоксида селена в воздухе рабочей зоны. МУК
4.1.1368-03, дата утв. 16.05.03, вып. 41
|
7. Триамин G-12Д
|
МУ по спектрофотометрическому измерению
концентраций N’, N’-бис-(3-аминопропил)-додециламина(лонзабака)
в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1522-03, дата утв. 29.06.03, вып. 37
|
СОДЕРЖАНИЕ
1. Область применения. 1
2. Характеристика вещества. 1
3. Погрешность измерений. 1
4. Метод измерений. 1
5. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы, реактивы.. 2
5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы.. 2
5.2. Реактивы.. 2
6. Требования безопасности. 2
7. Требования к квалификации операторов. 2
8. Условия измерений. 3
9. Подготовка к выполнению измерений. 3
9.1. Приготовление растворов. 3
9.2. Подготовка прибора. 3
9.3. Установление градуировочной характеристики. 3
9.4. Отбор проб воздуха. 4
10. Выполнение измерения. 4
11. Расчет концентрации вещества. 4
12. Оформление результатов анализа. 4
13. Контроль погрешности методики. 4
13.1. Оперативный контроль воспроизводимости. 5
13.2. Оперативный контроль точности. 5
14. Нормы затрат времени на анализ. 5
Приложение 1. Приведение объема воздуха к стандартным
условиям.. 5
Приложение 2. Коэффициенты для приведения объема
воздуха к стандартным условиям.. 6
Приложение 3. Указатель основных синонимов,
технических, торговых и фирменных названий веществ 6
Приложение
4. Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям.. 7
|