УТВЕРЖДАЮ
Главный
государственный санитарный
врач
Российской Федерации,
Первый
заместитель Министра
здравоохранения Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
29 июня 2003
г.
Дата
введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовых концентраций (+ -)-2,3-дигидро-3-
метил-9-фтор-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-7Н-
пиридо[1,2,3-dе]-1,4-бензоксазин-6-карбоновой
кислоты
(офлоксацина) в воздухе рабочей зоны методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические
указания
МУК 4.1.1626-03
1. Область применения
Настоящие методические указания
устанавливают количественный хроматографический анализ воздуха рабочей зоны на
содержание
(+-)-2,3-дигидро-3-метил-9-фтор-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-7Н-пиридо[1,2,3-de]-1,4-бензоксазин-6-карбоновой кислоты
(офлоксацина) в диапазоне концентраций от 0,25 до 5,00 мг/м3.
2.
Характеристика вещества
2.1.
Структурная формула
2.2.
Эмпирическая формула C18H20FN3O4.
2.3.
Молекулярная масса 361,4.
2.4.
Регистрационный номер CAS
82419-36-1.
2.5.
Физико-химические свойства.
Офлоксацин - антибактериальный препарат
широкого спектра действия, кристаллический порошок слегка желтоватого цвета, Тпл.
260 - 280 °С, малорастворим в воде и в этиловом спирте, растворим в органических
растворителях, растворим в смеси ацетонитрила и воды (элюенте).
Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
2.6.
Токсикологическая характеристика.
Офлоксацин обладает антимикробным
действием, вызывает нарушение микрофлоры, обладает фотосенсибилизирующим
действием.
Предельно допустимая концентрация (ПДК) в
воздухе рабочей зоны 0,5 мг/м3. Класс опасности - второй.
3.
Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений
массовых концентраций офлоксацина с погрешностью не более ± 16 % при
доверительной вероятности 0,95.
4. Метод
измерений
Измерения массовых концентраций
офлоксацина основаны на использовании высокоэффективной жидкостной
хроматографии с применением спектрофотометрического детектора при длине волны
286 нм.
Отбор проб проводится с концентрированием
на фильтр.
Нижний предел измерения содержания
офлоксацина в хроматографируемом объеме раствора 0,010 мкг.
Нижний предел измерения концентрации
офлоксацина в воздухе 0,25 мг/м3 (при отборе 200 дм3
воздуха).
Определению не мешают сопутствующие
вещества (целлюлоза микрокристаллическая, титана диоксид, поливинилпирролидон
низкомолекулярный, магний стеариново-кислый, оксипропилцеллюлоза).
5.
Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы
5.1. Средства измерений, вспомогательные
устройства, материалы
Хроматограф
жидкостный микроколоночный «Милихром» со спектрофотометрическим детектором
|
|
Хроматографическая
колонка стальная КАХ-44-3, 50´2 мм, заполненная сорбентом Сепарон С18,
фракция 5 мкм
|
|
Пробоотборное
устройство ПУ-3Э
|
ТУ
4215-000-11696625-95
|
Весы
аналитические ВЛА-200
|
ГОСТ 24104-88Е
|
Фильтродержатель
|
ТУ
95.72.05-77
|
Устройство
для фильтрации жидкостей НПФ «Биохром»
|
|
Колбы
мерные, вместимостью 500, 50 и 25 см3
|
ГОСТ 1770-74Е
|
Пипетки,
вместимостью от 1, 2, 5 и 10 см3
|
ГОСТ 29227-91
|
Цилиндр
мерный со шлифом, вместимостью 100 см3
|
ТУ
25.11.900-73
|
Бюксы
50/30
|
ГОСТ 25336-82Е
|
Пробирки
с пришлифованными пробками, вместимостью 10 см3
|
ГОСТ 25336-82Е
|
Фильтры
АФА-ВП-10
|
ТУ
95-743-80
|
Фильтры
«Владипор» типа ММФК-1Г
|
ТУ
6-05-221-433-79
|
5.2.
Реактивы
Офлоксацин, содержание основного
вещества не менее 98,5 %
|
ВФС 42-3556-99
|
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии
|
ТУ 6-09-14-2167-84
|
Калий дигидрофосфат, хч
|
ГОСТ 4198-75
|
ортофосфорная
кислота, хч
|
ГОСТ 6552-58
|
Вода дистиллированная
|
ГОСТ 6709-72
|
Допускается
применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и
материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных
методических указаний.
6.
Требования безопасности
6.1.
При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для
работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
6.2. При
проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают меры противопожарной
безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.
6.3. При
выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила
электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
7.
Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений и обработке
результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием,
имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе.
8.
Условия измерений
8.1.
Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных
условиях при температуре воздуха (20 ± 5) °С, атмосферном давлении 84 - 106 кПа
и влажности воздуха не более 80 %.
8.2.
Измерения на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных
технической документацией к прибору.
9.
Подготовка к выполнению измерения
9.1. Приготовление растворов
9.1.1. Стандартный
раствор № 1 офлоксацина в растворе элюента концентрацией 500 мкг/см3
готовится растворением 25 мг вещества в мерной колбе вместимостью 50 см3.
9.1.2.
Стандартный раствор № 2 офлоксацина в растворе элюента концентрацией 100 мкг/см3
готовится разбавлением стандартного раствора № 1. Растворы устойчивы в течение
месяца при хранении в холодильнике.
9.1.3.
Раствор дигидрофосфата калия концентрацией 0,02 М готовят растворением 1,36 г
указанной соли в 500 см3 дистиллированной воды в колбе данного
объема.
9.1.4.
Раствор элюента готовят смешиванием в мерном цилиндре 90 см3 0,02 М
раствора дигидрофосфата калия и 10 см3 ацетонитрила. Раствор доводят
до рН 3 ортофосфорной кислотой. Непосредственно перед измерением раствор
фильтруют с помощью устройства для фильтрации и фильтров «Владипор» и
дегазируют под вакуумом.
9.2.
Подготовка прибора
Общую подготовку прибора осуществляют
согласно инструкции по эксплуатации.
9.3.
Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость
величины хроматографического сигнала от массы анализируемого вещества в
хроматографируемом объеме раствора, устанавливают по методу абсолютной
калибровки с использованием серии градуировочных растворов, которые готовят
разбавлением стандартного раствора № 2 согласно табл. 1. Растворы устойчивы в течение двух недель при хранении
в холодильнике.
Условия хроматографирования градуировочных
смесей и анализируемых проб:
состав элюента: ацетонитрил-0,02М раствор
дигидрофосфата калия 1:9, рН 3;
скорость потока элюента 100 мм3/мин;
объем вводимой пробы 2 мм3;
длина волны спектрофотометрического
детектора 286 нм;
время удерживания офлоксацина 5 мин.
Таблица 1
Растворы для установления градуировочной
характеристики при определении офлоксацина
№ стандарта
|
Стандартный раствор
офлоксацина № 2, см3
|
Раствор элюента, см3
|
Концентрация вещества,
мкг/см3
|
Содержание вещества в
хроматографируемом объеме пробы, мкг
|
1
|
0
|
20,0
|
0
|
0
|
2
|
1,0
|
19,0
|
5
|
0,01
|
3
|
2,0
|
18,0
|
10
|
0,02
|
4
|
3,0
|
17,0
|
15
|
0,03
|
5
|
5,0
|
15,0
|
25
|
0,05
|
6
|
10,0
|
10,0
|
50
|
0,1
|
7
|
20,0
|
0
|
100
|
0,2
|
Растворы
помещают в пробоотборное устройство хроматографа.
На полученной хроматограмме измеряют
площади пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при
анализе 6 растворов разных концентраций и растворителя, проводя не менее 5
параллельных определений для каждого раствора, и строят градуировочную кривую
зависимости площади пика от количества компонента в хроматографируемом объеме
раствора (мкг). Проверку градуировочного графика проводят при изменении условий
анализа, но не реже 1 раза в месяц.
9.4. Отбор
пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 20 дм3/мин
аспирируют через фильтр АФА ВП-10. Для измерения 1/2
ПДК офлоксацина достаточно отобрать 200 дм3 воздуха.
Пробы можно хранить в течение трех суток.
10.
Выполнение измерения
Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс
с пришлифованной крышкой и приливают пипеткой 5 см3 раствора
элюента. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин и сливают
его в пробирку. Аналогичным образом проводят повторную экстракцию с фильтра и
объединяют растворы. Степень экстракции с фильтра 92 %. Хроматографирование
раствора пробы проводят в тех же условиях, что и хроматографирование
градуировочных растворов. Количественное определение содержания анализируемого
вещества в растворе проводят по предварительно построенному градуировочному
графику.
11.
Расчет концентрации
Концентрацию офлоксацина (С, мг/м3) в воздухе вычисляют
по формуле:
где
а - содержание вещества в анализируемом объеме пробы, найденное по
градуировочному графику, мкг;
б - объем пробы, взятый для хроматографирования, см3;
в - общий объем раствора пробы, см3;
V - объем
воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, дм3
(см. прилож. 1).
12.
Оформление результатов анализа
Результат количественного анализа
представляют в виде (С ± D) мг/м3,
Р = 0,95, где D - характеристика погрешности, D = 0,16С + 0,02.
13.
Контроль погрешности методики
Значения характеристики погрешности,
норматива оперативного контроля точности и норматива оперативного контроля
воспроизводимости приведены в табл. 2
в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента
в пробе С.
Таблица 2
Результаты
метрологической аттестации методики количественного химического
анализа офлоксацина
Диапазон определяемых концентраций
офлоксацина, мг/м3
|
Наименование
метрологической характеристики
|
Характеристика
погрешности D,
мг/м3 (Р = 0,95)
|
Норматив оперативного
контроля точности К, мг/м3
(Р = 0,90, т = 2)
|
Норматив оперативного
контроля воспроизводимости D, мг/м3 (P = 0,95, m = 2)
|
От 0,25 до 5,0
|
0,02 + 0,16С
|
0,03 + 0,17С
|
0,07 + 0,05С
|
13.1.
Оперативный контроль воспроизводимости
Оперативный контроль воспроизводимости выполняют
в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей
зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно.
Анализируют в соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия
проведения анализа: партии реактивов, наборы мерной посуды и т.д., и получают
два результата С1 и С2 анализов. Результаты анализа не должны отличаться друг от друга
на величину большую, чем норматив оперативного контроля воспроизводимости D:
При превышении расхождения между двумя
результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент
повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины,
приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их. Внутренний
оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже, чем 1 раз в неделю.
13.2.
Оперативный контроль точности
Оперативный контроль точности выполняют в
одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей
зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно.
Затем к одной пробе, отобранной на фильтр, делают добавку анализируемого
компонента δС из раствора, нанося его на фильтр. Величина добавки
должна соответствовать 50 - 150 % от содержания компонента в пробе. Результаты
анализа С1 без добавки и С2 с добавкой получают по возможности в
одинаковых условиях: одним аналитиком, с одной партией реактивов, с одним
набором посуды и т.д. Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем
поверки используемых пробоотборников. Расчет норматива оперативного контроля
погрешности К проводят по характеристике погрешности методики за вычетом
характеристики погрешности пробоотборника. Решение об удовлетворительной
погрешности принимают при выполнении условия:
14. Нормы
затрат времени на анализ
Для проведения серии анализов из 6 проб
при последовательном отборе проб воздуха требуется 4 ч.
Методические указания разработаны
Российским государственным медицинским университетом (Е.Б. Гугля).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к
стандартным условиям
Приведение
объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа)
проводят по формуле:
, где
Vt - объем воздуха, отобранного
для анализа, дм3;
Р - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства
расчета V20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (прилож.
2). Для приведения воздуха к
стандартным условиям надо умножить Vt на соответствующий
коэффициент.
Приложение 2
Коэффициенты для приведения
объема воздуха к стандартным условиям
Давление
Р, кПа/мм рт. ст.
|
t °C
|
97,33/730
|
97,86/734
|
98,4/738
|
98,93/742
|
99,46/746
|
100/750
|
100,53/754
|
101,06/758
|
101,33/760
|
101,86/764
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2058
|
1,2122
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1460
|
1,1490
|
1,1551
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
0,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9778
|
0,9830
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9555
|
0,9605
|
0,9657
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9391
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9199
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
Приложение 3
Указатель основных
синонимов, технических, торговых и фирменных названий веществ
1. Амиодарон
2.
Амоксициллина тригидрат
3. Ацикловир
4. Витамин А
5. Галоперидол
6. Ксиланаза
7. Лоперамида
гидрохлорид
8. Мексидол
9. Мексикор
10. Офлоксацин
11. Пиразинамид
12. Ретинола
ацетат
13. Родопол-23
14. Симвастатин
15. Трамадол
16. Хладон-23
17.
Хладон-31-10
18. Хладон-116
19. Хладон-122
20. Хладон-R11511
21.
Цианборгидрид натрия
22. Этамбутола
дигидрохлорид
Приложение 4
Вещества, определяемые по
ранее утвержденным методическим указаниям
Название
вещества
|
Ссылка
на опубликованные методические указания
|
1
|
2
|
1. №-децил-N,N-диметил-1-деканаминий
хлорид (дидецилдиметиламмоний хлорид; «Арквад 2.10.50»)
|
МУ по фотометрическому измерению
концентраций диалкилдиметиламмоний хлорида (С17 - С20)
и алкилбензилдиметиламмоний хлорида (С10 - С16)-ДОН-2, диалкиламинопропионитрила
(С7 - С9)-ИФХАН-ГАЗ, алкилтриметиламмоний хлорида (С10
- С16), ДОН-52 в воздухе рабочей зоны. № утв. 4905-88, дата утв.
12.12.88, вып. 25. М., 1989, с. 49
|
2. Поликарбонофторид
|
МУ на гравиметрическое определение пыли в воздухе
рабочей зоны и в системах вентиляционных установок. МУ № 1719-77, дата утв.
18.04.77, вып. 1 - 5. М., 1981, с. 235
|
3. Препарат МЭК-Сх-3
|
МУ по фотометрическому измерению массовых
концентраций эндо-1,3в-ксиланазы (ксиланаза) в воздухе рабочей зоны. МУК
4.1.1642-03, дата утв. 29.06.03, вып. 42
|
4. Препарат ПФП-1
|
МУ по спектрофотометрическому измерению
концентрации амилазы в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1575-03, дата утв.
29.06.03, вып. 38
|
5. Препарат Феркон
|
МУ по фотометрическому измерению массовых
концентраций целловиридина в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1753-03, дата утв.
29.06.03, вып. 46
|
6. Селенит натрия
|
МУ по атомно-абсорбционному измерению
массовых концентраций селена и диоксида селена в воздухе рабочей зоны. МУК
4.1.1368-03, дата утв. 16.05.03, вып. 41
|
7. Триамин G-12Д
|
МУ по спектрофотометрическому измерению
концентраций N’, N’-бис-(3-аминопропил)-додециламина(лонзабака)
в воздухе рабочей зоны. МУК 4.1.1522-03, дата утв. 29.06.03, вып. 37
|
СОДЕРЖАНИЕ
1. Область применения. 1
2. Характеристика вещества. 1
3. Погрешность измерений. 2
4. Метод измерений. 2
5. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы, реактивы.. 2
5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы.. 2
5.2. Реактивы.. 2
6. Требования безопасности. 2
7. Требования к квалификации оператора. 3
8. Условия измерений. 3
9. Подготовка к выполнению измерения. 3
9.1. Приготовление растворов. 3
9.2. Подготовка прибора. 3
9.3. Установление градуировочной характеристики. 3
9.4. Отбор пробы воздуха. 4
10. Выполнение измерения. 4
11. Расчет концентрации. 4
12. Оформление результатов анализа. 4
13. Контроль погрешности методики. 4
13.1. Оперативный контроль воспроизводимости. 5
13.2. Оперативный контроль точности. 5
14. Нормы затрат времени на анализ. 5
Приложение 1. Приведение объема воздуха к стандартным
условиям.. 6
Приложение 2. Коэффициенты для приведения объема
воздуха к стандартным условиям.. 6
Приложение 3. Указатель основных синонимов,
технических, торговых и фирменных названий веществ. 6
Приложение
4. Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям.. 7
|