Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

21 страница

211.00 ₽

Купить МУК 4.1.2387-08 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Пенцикурона в диапазоне 0,005 - 0,05 мг/дм3 в воде, 0,01 - 0,1 мг/кг в почве и клубнях картофеля.

 Скачать PDF

Оглавление

Введение

1. Метрологическая характеристика метода

2. Метод измерений

3. Средства измерений, вспомогательные устройства и материалы

     3.1 Средства измерений

     3.2 Реактивы

     3.3 Вспомогательные устройства и материалы

4. Требования безопасности

5. Требования к квалификации операторов

6. Условия измерений

7. Подготовка к выполнению определений

     7.1 Подготовка органических растворителей

     7.2 Приготовление растворов для проведения анализа

     7.3 Построение калибровочной кривой

     7.4 Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта

     7.5 Подготовка концентрирующего патрона Диапак С для очистки экстрактов

     7.6 Подготовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстрактов

     7.7 Подготовка концентрирующего патрона Диапак ТА для очистки экстрактов

     7.8 Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

8. Отбор проб и хранение

9. Проведение определений

     9.1 Вода

     9.2 Почва

     9.3 Клубни картофеля

     9.4 Условия хроматографирования

    10. Обработка результатов

11. Контроль погрешности измерений

12. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

13. Оформление результатов

14. Контроль качества результатов измерений

Приложение 1

 
Дата введения05.09.2008
Добавлен в базу01.09.2013
Актуализация01.01.2021

Этот документ находится в:

Организации:

02.07.2008УтвержденРуководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач РФ
РазработанРоссийский Государственный Аграрный Университет - МСХА имени К.А. Тимирязева
Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19
Стр. 20
стр. 20
Стр. 21
стр. 21

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пенцикурона в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2387—08

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пенцикурона в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4Л.2387—08

7.2.2. Приготовление градуировочных растворов

7.2.2. /. Приготовление стандартного раствора с концентрацией Пенцикурона 1,0 мг/см3.

Взвешивают 50 мг Пенцикурона в мерной колбе объемом 50 см3. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.2.2.2.    Приготовление стандартного раствора с концентрацией Пенцикурона 10,0 мкг/см3.

Из стандартного раствора Пенцикурона с концентрацией 1,0 мг/см3 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании.

7.2.2.3.    Приготовление стандартного раствора Пенцикурона с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3 для построения калибровочной кривой.

Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3 и используют эти растворы для хроматографического исследования.

73. Построение калибровочной кривой

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Пенцикурона в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см3.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.6. Измеряют площадь пиков, рассчитывают среднее значение площади пика для каждой концентрации и строят график зависимости площади пика от концентрации Пенцикурона. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений (рис. 1).

7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта

В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 5 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента высотой примерно 5 см. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 см3 ацетонитрила.

7.4.1. Проверка хроматографического поведения Пенцикурона на колонке с окисью алюминия

В концентратор объемом 50 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора Пенцикурона в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см3 и выпаривают

МУК 4.1.2387—08

его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С. Исходную колбу обмывают еще двумя порциями ацетонитрила объемом 10 см3 каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см3 ацетонитрила и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие Пенцикурон, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюата.

Изучение поведения Пенцикурона на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.

7.5. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С для очистки экстрактов

7.5.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С для очистки экстракта

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин.

Патрон Диапак С устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см3 смеси гексана с этилацетатом в соотношении 1:1, затем 10 см3 гексана. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.5.2. Проверка хроматографического поведения Пенцикурона на концентрирующем патроне Диапак С

Из стандартного раствора Пенцикурона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3 отбирают 1 см3, помещают в круглодонную колбу объемом 100 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 этил-ацетата, прибавляют 8 см3 гексана, перемешивают и смыв вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 50 см3, упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают последовательно двумя порциями смеси гексана с этилацетатом в соотношении 4: 1 объемом по 10 см3,

обмывают стенки концентратора и полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюаты после прохождения каждой порции элюен-тов собирают в отдельные концентраторы объемом по 50 см5, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Пенцикурон, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюата.

7.6. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстрактов

7.6.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин.

Патрон Диапак С16 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см3 смеси ацетонитрила с водой соотношении 2:1, затем 10 мл воды. Элюаты отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.6.2. Проверка хроматографического поведения Пенцикурона на концентрирующем патроне Диапак С16

Из стандартного раствора Пенцикурона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см , отбирают 1 см3, помещают в концентратор объемом 50 см3 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 2, затем 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2 : 1 и полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 50 см3, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Пенцикурон, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюата.

МУК 4.1.2387—08

7.7.    Подготовка концентрирующего патрона Диапак ТА

для очистки экстрактов

7.7.7.    Подготовка концентрирующего патрона Диапак ТА

для очистки экстракта

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин.

Патрон Диапак С16 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см3 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см3 смеси ацетонитрила с водой соотношении 1:1, затем 10 мл воды. Элюа-ты отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.7.2. Проверка хроматографического поведения Пенцикурона на концентрирующем патроне Диапак ТА

Из стандартного раствора Пенцикурона в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см3 отбирают 1 см3, помещают в концентратор объемом 50 см3, прибавляют 9 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элю-ат собирают в концентратор, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют.

Исходный концентратор обмывают последовательно двумя порциями по 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 9, и полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 50 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Пенцикурон, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюата.

7. А Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколон-кой Symmetry Cl8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °С и скорости потока подвижной фазы 1 см3/мин 3—4 часа.

13

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», № 2051—79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 1743.01—83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 26950— 89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ 7176-85 «Картофель свежий продовольственный, заготовляемый и поставляемый. ТУ», ГОСТ 26832-86 «Картофель свежий для переработки на продукты питания. ТУ».

Пробы воды хранят в герметично закрытой стеклянной таре в холодильнике при температуре 0—4 °С.

Пробы почвы просушивают в затененном месте, хранят в сухом шкафу при комнатной температуре.

Пробы клубней картофеля хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0—4 °С в течение до 3-х суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °С до 2-х лет.

Перед анализом почву растирают, просеивают через сито с ячейками диаметром 0,1 мм. Клубни картофеля размораживают и измельчают на терке.

9. Проведение определений

9.1. Вода

9.1.1. Экстракция

Пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную воронку объемом 250 см3 и экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 см3, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 см3, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.1.2. Очистка на концентрирующих патронах Диапак С 16

Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают

МУК 4.1.2387—08

последовательно 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 2, элюат отбрасывают.

Пенцикурон элюируют 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:1. Элюат собирают в концентратор объемом 50 см3, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и хроматографируют.

9.2. Почва

9.2.1. Экстракция

Пробу почвы массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, приливают туда 10 см3 воды и экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 50 см3 по 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно по 2 мин на механическом встря-хивателе. Экстракт декантируют и фильтруют через фильтр «красная лента» в концентратор объемом 250 см3. Экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.2.2. Очистка на концентрирующих патронах Диапак С,

Диапак С16 и Диапак ТА

Сухой остаток растворяют в 2 см3 этилацетата, прибавляют 8 см3 гексана, перемешивают и смыв вносят на патрон Диапак-С. Элюат собирают в концентратор. Исходный концентратор обмывают по 10 см3 смеси гексана с этилацетатом в соотношении 4 : 1 и полученный раствор вносят на патрон. Элюаты объединяют и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон Диапак С16. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 2, элюат отбрасывают.

Пенцикурон элюируют 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 2:1. Элюат собирают в концентратор объемом 50 см3, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток растворяют в 1 см3 ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 9 см3 воды, перемешивают и вносят на патрон Диапак ТА. Элюат собирают в концентратор объемом 50 см3. Исходный концентратор обмывают 10 см3 смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 9, элюат объединяют с предыдущим и выпари-

15

МУК 4,1.2387—08

вают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и 20 ммпробы вводят в хроматограф.

93. Клубни картофеля

93.1. Экстракция

Образец измельченных клубней картофеля массой 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, прибавляют 50 см* этилацетата и помещают на 30 мин на механический встряхива-тель. Экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 см3 через фильтр «красная лента». Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 50 см3 этилацетата и помещая на механический встряхиватель на 15 мин. Экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 см3 и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

93.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.3.1, прибавляют 3 см5 этилацетата, обмывают стенки колбы и переносят смыв в делительную воронку объемом 250 см3, процедуру повторяют. К экстракту в делительной воронке прибавляют 100 см3 дистиллированной воды, 5 см3 насыщенного раствора хлорида натрия и перемешивают. Пенцикурон экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 см3, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) собирают в концентратор объемом 250 см3 через слой безводного сульфата натрия. Объединенный экстракт выпаривают досуха при температуре не выше 30 °С.

933. Очистка экстракта на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак С

Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 см3 ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора, наносят на подготовленную колонку, элюат собирают в концентратор. Исходную колбу обмывают 10 см3 ацетонитрила и вносят на колонку. Элюаты объединяют и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

Сухой остаток подвергают дальнейшей очистке на концентрирующем патроне Диапак С, как указано в п. 9.2.2. После очистки элюат упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре

МУК 4.1.2387—08

не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см3 ацетонитрила и 20 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.6. Условия хроматографирования.

Хроматограф «Waters» или другой с аналогичными характеристиками с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.

Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 4,6 мм х 25 см, зернением 5 мкм.

Предколонка стальная Symmetry С 8, 3,9 мм х 2 см, зернением 5 мкм

Температура колонки: 25 °С.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода в соотношении 70 : 30

Длина волны 240 нм

Время удерживания Пенцикурона 10,07 ± 0,2 мин.

Чувствительность 0,005 ед. оптической плотности на шкалу.

Объем вводимой пробы 20 мм3.

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2—20 нг

10. Обработка результатов

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Millenium 3.05.01. Альтернативная обработка результатов.

Содержание Пенцикурона рассчитывают по формуле:

Ру где

Х=

Sm • А • V

пр_

100-Scm

ЛГ- содержание Пенцикурона в пробе, мг/кг или мг/дм3;

Scm - высота (площадь) пика стандарта, мм;

Snp - высота (площадь) пика образца, мм;

А ~ концентрация стандартного раствора, мкг/см3;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3; т - масса анализируемого образца, г (см3);

Р - содержание Пенцикурона в аналитическом стандарте, %.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

17

МУК 4.1.2387—08

12. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

2\Х, -Jr2|-100

(х, +х2)


(1)


^г, где


За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

Xh Х2 - результаты параллельных определений, мг/кг;

г - значение предела повторяемости (табл. 1), при этом г = 2,8 аг.

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

13. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

( X ± А) мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д= 3 • X/100, где

3 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 0>01 мг/кг»*

* -0,01 мг/кг — предел обнаружения.

14. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки Сд должна удовлетворять условию:

сд= &п,х + Дл,*\ где

МУК 4.1.2387—08

±ДЛ, х Дл, х 0 ~ характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

Дл - ± 0,84 Д, где

Д - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д=<5 • JP/100,

8 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:

Кк=Х' -Х-Сд, где

Х\ X, Сд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К = >/д\ х'+    х

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

Ю<К    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

2\Х, -Jf2|-100 (*, +Х2)


< Л, где


(3)


Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

Хи Х2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

19

ББК 51.21 060


060 Определение остаточных количеств пенцикурона в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009.—20 с.


1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» (В. А. Калинин, Е. В. Довгилевич, А. В. Довгилевич, Н. В. Устименко).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-гигиеническому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1 от 3 апреля 2008 г.).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 2 июля 2008 г.

4.    Вводятся в действие с 5 сентября 2008 г.

5.    Введены впервые.


ББК 51.21


Формат 60x88/16


Тираж 200 экз.


Печ. л. 1,25


Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, телУфакс 952-50-89


© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009


Приложение 1

Полнота извлечения Пенцикурона из воды, почвы и клубней картофеля (5 повторностей для каждой концентрации, Р = 0,95)

Среда

Предел обнаружения, мг/кг (л)

Среднее значение определения, мг/кг (л)

Доверительный интервал среднего результата,

± SE, %

Полнота

определения,

%

Вода

0,005

0,0046

1,95

92

0,010

0,0094

0,79

94

0,020

0,0186

1,41

93

0,050

0,0481

0,36

96,2

Почва

0,01

0,0075

0,5

75

0,02

0,0148

0,93

74

0,05

0,0370

0,53

74

0,10

0,0788

1,2

78,8

Клубни

картофеля

0,01

0,0076

1,01

76

0,02

0,0153

0,76

76,5

0,05

0,0387

1,04

77,4

0,10

0,0748

0,46

74,8

МУК 4.1.2387—08


УТВЕРЖДАЮ


Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации


Г. Г. Онищенко


2 июля 2008 г.

Дата введения: 5 сентября 2008 г.


4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пенцикурона в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии


Методические указания МУК 4.1.2387—08


Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Пенцикурона в диапазоне 0,005—0,05 мг/дм3 в воде, 0,01—0,1 мг/кг в почве и клубнях картофеля.

Пенцикурон.

1 -(4-хлоробензил)-1 -циклопентил-3-фенилмочевина (ИЮПАК)



Эмпирическая формула: Ci9H2iC1N20.

Молекулярная масса: 328,8.

Агрегатное состояние: порошок.

Цвет, запах: белого цвета, без запаха.

Давление насыщенного пара 5 х 10‘7 П м3 моль'1 (расчетное). Температура плавления: 128 °С.

Коэффициент распределения в системе октанол/вода при 20 °С:


KoW logP = 4,68 .


Растворимость в воде: 0,3 мг/дм3 при 20°.


3


В воде гидролизуется: DT50 - 64—302 дня при 20°.

Растворимость в органических растворителях (г/дм3 при 20 °С): ацетон - 89,4, ацетонитрил - 24,9, гексан - 0,12, диметилсульфоксид -152,9, хлористый метилен >250, этилацетат - 43,8 .

Пенцикурон слабо передвигается в почве, относительно стабилен, разлагается с образованием п-хлорбензиламина и п-хлорбензилформа-мида.

В растениях метаболизируется с образованием гидроксилирован-ных метаболитов (частично в виде конъюгатов).

Из организма теплокровных более 74 % выводится с мочой и фекалиями в течение 3 дней в неизменном виде и в виде метаболитов. Основной путь разложения - гидроксилирование фенильной группы с образованием диольных и триольных производных, которые быстро выводятся в виде коньюгатов с сульфатами и глюкуроновой кислотой.

Краткая токсикологическая характеристика: Пенцикурон относится к веществам малоопасным по оральной (ЛД50 для крыс - более 5 000 мг/кг) и дермальной (ЛД50 для кроликов - более 2 000 мг/кг) токсичности, но к чрезвычайно опасным веществам по ингаляционной (ЛК50 для крыс (4 часа) более >268 мг/м3, аэрозоль) токсичности. Не вызывает покраснения кожи, слабо раздражает слизистую оболочку глаз. Не проявляет тератогенных и онкогенных свойств.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ПДК в воде - 0,15 мг/дм3; ОДК в почве - 0,2 мг/кг; ВМДУ в клубнях картофеля - 0,1 мг/кг.

Область применения препарата

Пенцикурон - контактный фунгицид с длительным защитным действием. Рекомендуется для опрыскивания и опыливания растений, для обработки семян или внесения в почву. Применяется для подавления ризоктониоза и частично фитофтороза картофеля, пирикуляриоза риса, болезней всходов хлопка, овощей, сахарной свеклы, декоративных растений.

Пенцикурон используется также в качестве компонента смесевых препаратов с имидаклопридом, тирамом и тебуконазолом.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности

4

МУК 4Л .2387—08

Р - 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п - 20) приведены в табл. 2

Таблица 1

Метрологические параметры метода

Анализи

руемый

объект

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг

Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5,%Р = 0,95

Стандартное отклонение повторяемости, оп %

Предел повторяемости, г, %

Предел

воспроиз

водимости,

*,%

Вода

0,005—0,010

100

4,0

11,2

13,4

0,01—0,05

50

3,5

9,8

11,7

Почва

0,01—0,10

50

4,5

12,6

15,0

Клубни

картофеля

0,01—0,10

50

3,3

9,2

10,95

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для Пенцикурона

Анализи-

руемый

объект

Метрологические параметры, Р = 0,95, и = 20

предел обнаружения, мг/кг

диапазон определяемых концентраций, мг/кг

среднее значение определения, %

стандартное отклонение, S,%

доверительный интервал среднего результата, ±, %

Вода

0,005

0,005—0,05

93,8

3,8

1,3

Почва

0,01

0,01—0,1

75,4

2,6

4,3

Клубни

картофеля

0,01

0,01—0,1

76,2

3,3

3,5

2. Метод измерений

Методика основана на определении Пенцикурона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции органическим растворителем, очистки перераспределением между двумя несмешиваю-щимися фазами, на колонках с окисью алюминия и и на концентрирующих патронах на основе силикагеля (Диапак С, Диапак С15, Диапак ТА).

5

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

ЗА. Средства измерений Весы аналитические «OHAUS», £ 11140 Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г «ACCULAB» V600.

Колбы мерные на 25, 50 и 100 см3    ГОСТ 1770-74

Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50—100 мм3

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3    ГОСТ 20292-74

Хроматограф жидкостной Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа, номер госрегистрации 15311-02.

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3    ГОСТ    1770—74

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Пенцикурон, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,6 % (фирма Байер Кроп Сайенс)

Алюминий оксид L 40/250, нейтральная для хроматографии, Lachema Ацетонитрил осч, УФ-200 нм Вода бидистиллированная, деионизированная Гексан, хч для спектроскопии Калий марганцовокислый, чда Кальций хлористый, хч Магний сернокислый Метилен хлористый

6

МУК 4.1.2387—08


Натрий сернокислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч Натрия гидрокарбонат, хч Фос(У)оксид

ГОСТ 4166-76 ГОСТ 4233-77 ГОСТ 2156-76 ТУ 6-09-41—73 ГОСТ 223000-76 ТУ 4215-002-05451931—94 ТУ 4215-002-05451931—94 ТУ 4215-002-05451931—94 производителей с ана-

Этиловый эфир уксусной кислоты, чда Концентрирующие патроны Диалак С (0,6 г) Концентрирующие патроны Диапак С 16 (0,6 г) Концентрирующие патроны Диапак ТА (0,6 г) Допускается использование реактивов иных логичными или лучшими характеристиками.

33. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак С Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYP LT1»

Банки с крышками для экстракции на 250 см3, полипропилен, кат. № 3120-0250, NALGENE. Ванна ультразвуковая «UNITRA» UNIMA OLSZTYN UM-4

Воронки химические для фильтрования, стеклянные

Воронки делительные на 250 см3 Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней

Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 см3, КПШ-100, КПШ-250 Колбы конические, плоскодонные объемом 250, 500 и 1 000 см3

Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18, зернение 5 мкм, фирма Уотерс Концентраторы грушевидные и круглодонные, объемом 100 и 250 см3    ГОСТ 10394-75

Насос диафрагменный FT Л 9 фирмы KNF Neu Laboport

Предколонка хроматографическая стальная,

Symmetry С 18, длиной 20 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма Уотерс Стаканы стеклянные, объемом 100—500 см3    ГОСТ 25366—80Е

7


Установка для перегонки растворителей

Фильтры бумажные «красная лента»    ТУ-6-09-1678—86

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма Уотерс

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению определений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концен-

8

МУК 4.1.2387—08

трирующих патронов Диапак Амин для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на патронах, построение калибровочной кривой.

7Л. Подготовка органических растворителей 7.J.L Очистка ацетонитрила Ацетонитрил перегоняют.

7.1.2. Очистка гексана Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд Спутник химика, Москва, 1976, с. 441).

7.1.3. Очистка бидистиллированной воды

Бидистиллят кипятят в течение 6 ч с марганцовокислым калием, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.

7.1.4. Очистка хлористого метилена

Хлористый метилен встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают водным раствором карбоната натрия, водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют над оксидом(У) фосфора (А. Гордон, Р. Форд Спутник химика, Москва, 1976, с. 440).

7.1.5. Очистка этилового эфира уксусной кислоты

Этиловый эфир уксусной кислоты промывают равным объемом 5 % раствора соды, сушат над безводным хлористым кальцием (Беккер Г. и др. Органикум, Москва 1979, с. 372), кигопят в течение 1 ч с прокаленным сульфатом магния и затем перегоняют.

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ В плоскодонную колбу объемом 1 дм3 помещают 700 см3 ацетонитрила и 300 см3 очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 см3/мин в течение 5 мин, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

9