Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2048—4.1.2061—06

Издание официальное

Москва, 2009

ББК51.21

037

037 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009—148с.

1.    Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В. Н. РакитскиЙ, проф. Т. В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ. л.    9,25

Тираж 100 экз.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89

7.7. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.6) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.5. Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения

7.8.1.    Исходный раствор сульфометурон-метила для градуировки (концентрация 1 мг/см³) В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,1 г сульфометурон-метила, растворяют в 50-70 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяцев.

Растворы № 1-6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного градуировочного раствора.

7.8.2.    Раствор М 1 сульфометурои-метьсш для градуировки и внесения (концентрация 10мкг/см³) В мерную колбу вместимостью 100 см*' помещают I см³ исходного грудуировочного раствора с концентрацией I мг/см³ (п. 7.8.1.1. разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения сульфометурон-метила из исследуемых образцов.

7.8.3.    Рабочие растворы №2-6 сульфометурон-метила для градуировки (концентрация 0.05 -1.0мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0.5. 1.0. 2.5. 5,0 и 10.0 см³ градуировочного раствора №1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.8.2.). доводят до метки подвижной фазой (приготовленной по п. 7.6.), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N2X2 2 - 6 с концентрацией сульфоетурон-метила 0.05.0.!. 0.25. 0.5 и 1,0 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более суток.

7.9. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (оти. единицы) от концентрации сульфометурон-метила в растворе (mki/смЧ

/Г

устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки

№№2-6.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного pact вира и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

7.10. Подготовка колонки с кизельгелем для очистки экстракта Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см. внутренним диаметром 8* 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 4 г кизельгеля в 15-20 см³ гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1,5 см. Затем промывают колонку 25 см³ смеси гексан-этилацетат (7;3. по объему). Колонка готова к работе.

7.11. Проверка хроматографического поведения сульфоме туров-метила на колонке с кизельгелем

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора Ка I для внесения с концентрацией сульфометурон-метила 10 мкг/см³ (п. 7.8.2.), растворитель упаривают досуха, добавляют 1,5 см³ этилацетата. помещают на ультразвуковую баню на 1 мин, вносят 3,5 см³ гексана, перемешивают, вновь помещают на ультразв>ковую баню на I мин и наносят на колонку, подготовленную по п. 7.10. Промывают колонку последовательно порциями по 25 см³ смеси гексан-этилацетат в соотношении 8 : 2, затем 1: I по объему, элюат отбрасывают.

Затем колонку промывают 70 см³ смеси гексан-этилацетат (2:8, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек, Фракционно (по 10 см³) отбирают элюат. упаривают, остатки растворяют в 1 см³ ацетонитрила, добавляют 1 см³ подвижной фазы, перемешивают анализируют содержание сульфометурон-метила по п. 9.3.

Фракции, содержащие сульфометурон-метил, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

ПРИМЕЧАНИЕ: Проверку хроматографического поведения сульфомет)рон-метила следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

fir

8. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами Р 51592-2000,1743.01-83,26950-89.

Отобранные пробы воды анализируют в день отбора или хранят при 4^иС в течение 3-х дней. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре ниже - 12°С.

Пробы почвы подсушиваюх при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

9. Выполнение определения

9,1, Вода

Анализируемый образец воды объемом 100 см* помещают в коническую колб> вместимостью 250 см*, вносят 1,18 г однозамещенного фосфата натрия (NaH2P04*2H20), перемешивают до полного растворения соли, с помощью 1 N едкого натра доводят pH раствора до 10, осуществляя его контроль по иономеру. Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 250 см*, добавляют 25 cm' смеси гексан-хлористый метилен (20:80, по объему), интенсивно встряхивают в течение 2-\ мин. После полного разделения фаз нижний органический слой сливают и отбрасывают. Операцию промывки водного раствора смесью гексан-хлористый метилен (20:80) повторяют еше дважды порциями по 15 и 10 см*.

Водную фазу переносят в коническую колбу вместимостью 250 см*, подкисляют с помощью 1 М орто-фосфорной кислоты до pH 3, контролируя его значение по иономеру. Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 150 - 250 см*, добавляют 30 см* хлористого метилена, интенсивно встряхивают воронку в течение 2-х мин. Нижний органический слой собирают в коническую колбу вместимостью 100 см*. Операцию экстракции повторяют еще дважды, используя по 20 и 15 см* хлористого метилена. Объединенную органическую фазу фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помешенный в конусную химическую воронку на бумажном фильтре «(красная лента», в круглодонную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35°С. Сухой остаток в колбе растворяют в 2-х см* ацетонитрила, добавляют 2 см* подвижной фазы, перемешивают и анализируют содержание сульфометурон-метила по п. 9.3.

/3

9.1 Почва

9.2. L Экстракция

Образец суховоэдушной почвы массой 10 г помещают в коническую ко.юх вместимостью 250 см³, прибавляют 75 см³ смеси ацетонитрил - 0,1 М бикарбонат натрия в соотношении 3:! ( по объему) экстрагируют в течение 15 минут на ультразвуковой бане. После отстаивания супернатант переносят, фильтруя через бумажный фильтр “красная лента*', в концентратор объемом 250 см³. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя по 50 см³ смеси ацетонитрил - 0JM бикарбонат натрия 8 соотношении 3:1 и экстрагируя на ультразвуковой бане по 10 минут. После фильтрования экегракзы объединяют в мерном цилиндре вместимостью 250 см³ с пришлифованной л робкой, перемешивают, измеряют объем раствора, Yj его часть (эквивалентную 5 г помпы) переносят в круглодонную колбу. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.2

9.2.2.    Очистка экстракта перераспределением в системе иесмешиаштцихен растворителей

Экстракт, полученный по п. 9.2.1. и помещенный в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (-20 см') при температуре не выше 35°С, внимательно следя за процессом и не допуская переброса жидкости при вспенивании. К водному остатку добавляют 30 см³ фосфатного буферного раствора, pH 10 (п. 7.5). содержимое колбы тщательно перемешивают. Контролируют pH раствора на иономере, доводят его значение до 10 с помощью 1 N едкого натра.

Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 250 см³, добавляют 20 см³ смеси гексан-хлористый метилен (20:80, по объему), интенсивно встряхивают в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний органический слой сливаю* и отбрасывают. Операцию промывки водного раствора смесью гексан-хлористый метилен (20:80) повторяют еще дважды порциями по 20 см³.

Водную фазу переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, подкисляют с помощью I М орто-фосфорной кислоты до pH 3, контролируя его значение по иономеру. Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 150 - 250 см', добавляют 30 см³ хлористого метилена, интенсивно встряхивают воронку в течение 2-х мин. Нижний органический слой пропускают через слой безводного NajSOj. помещенный в конусной воронке, на бумажном фильтре, и собирают в круглодоиноП колбе вместимостью 250 см³. Операцию экстракции повторяют еше дважды. иснолм)*

по 15 см³ хлористого метилена: Объединенную органическую фазу. прапушешто через NajSO^ упаривают досуха и подвергают дополнительной очистке на колонке с кизельгелем по п. 9.2.3.

9.2.3.    Очистка экстракта на колонке с кизельгелем

Остаток, полученный по п. 9.2.2, находяшийся в круглодонной колбе, растворяют в 1,5 см³ этилацетата, помещая на ультразвуковую баню на I мин. добавляют 3,5 см³ гексана, перемешивают, вновь помещают на ультразвуковую баню на 1 мин. Затем раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.11. Колбу обмывают трижды порциями по 3 см³ смеси гексан-этил ацетат (7:3. по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку последовательно порциями по 25 см³ смеси гексан-этилацетат в соотношении 7:3. затем 1:1. по объему, элкш отбрасывают.

Сульфометкрон-метил элюируют с колонки 60 см³ смеси гексан-этилацетат (2:8. по объему) со скоростью 1-2 капли в сек, собирая элюат в круглодонную ко;ю>. Раствор упаривают досуха при температуре не выше 35°С, остаток в колбе растворяют в 1 см³ ацетонитрила, добавляют 1 см³ подвижкой фазы, перемешивают и анализируют содержание сульфометурон-метила по п. 9.3.

9.3.    Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-E!mer(CLIJA) Колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4.0 мм. содержащая Кромасил 100 С 18, зернением 8 мкм

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода - орто-фосфорная кислота (44:56:0,1, по объему)

Скорость потока элюента: 1,0 см³/мин Рабочая длина волны: 230 нм Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу Объем вводимой пробы: 20 мм³

Ориентировочное время выхода сульфометурон-метила: 6.3 - 6.5 мин Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный pact пор сульфометурон-метила с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой.

/г

10. Обработка результатов анализа

Содержание сульфометурок-метила в пробе рассчитывают по формуле:

(А х К) V

Х =-------------- „где

m

X -содержание сульфометурон-метила в пробе, мг/кп

А - концентрация сульфометурон-метила, найденная по градуировочному графику, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³:

ш -масса (объем) анализируемого образца, г (см³).

К - коэффициент пересчета, учитывающий объем экстрактов проб, используемый для анализа, равный для воды -1, почвы - 2.

И. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерен пн осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 57254-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Разработчики.

Юдина Т.В., Федорова Н.Б., Волкова В.Н., Рогачева С.К. - Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (ФНЦГ им. Ф.Ф.Эрисмана)

Содержание

1.    Методические указания по определению остаточных количеств

сульфометурон-метнла в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2048-06........................................................................4

2.    Методические указания по измерению концентраций глифосата в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии. МУК

4 Л.2049-06...................................................................................................17

3.    Методические указания по измерению концентраций Карбосульфана в воздухе

рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4Л.2050-06...................28

4.    Методические указания по измерению концентраций тефлутрина в воздухе рабочей

зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2051-06..............................35

5.    Определение остаточных количеств метальдегида в воде, почве, овощах (капуста,

салат, Китайская капуста, шпинат, редис и др.), фруктах (яблоки, сливы и др,), ягодах (земляника, смородина и др.) и винограде методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2052-06.......................................................................44

6.    Методические указания по определению остаточных количеств метамитрона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2053-06............................................................................................58

7.    Методические указания по определению остаточных количеств Прохлораза в воде,

почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2054-06......................................................67

8.    Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в

зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2055-06...................................................................................................80

9.    Методические указания по определению остаточных количеств оксифлуорфена в семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2056-06............................................................................................91

10.    Методические указания по определению остаточных количеств карбоксила в клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2057-06..........................................................................................101

11.    Методические указания по определению остаточных количеств флуазифоп-п-бутила

в семенах и масле рапса, подсолнечника, зерне и масле сои, зерне гороха и луке по основному метаболиту флуазифоп-п кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2058-06.....................................................................109

12.    Методические указания по определению остаточных количеств прометрииа в

семенах и масле подсолнечника и сои, зерне и масле кукурузы, зерне гороха, клубнях картофеля и корнеплодах моркови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4,1.2059-06...,.................................................................117

13.    Методические указания по определению остаточных количеств никосульфурона в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2060-06..........................................................................................126

14.    Методические указания по определению остаточных количеств абамектина в

ягодах и соке винограда, перце и баклажанах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4,1.2061-06.....................................................137

з

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по определению остаточных количеств сульфометурон-метила в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воде и почве массовой концентрации сульфометурон-метила в диапазонах 0,002 -0,02 мг/дм³; 0,02 - 0.4 мг/кг.

Сульфометурон-метил - действующее вещество препарата АККОРД, ВДГ

(750 г/кг), фирма ООО «Агромир», Россия.

2-(4,б-диметялпнримидин-2-илкарбамоилсульфамоил)бензойная кислота, метиловый эфир (ШРАС)

c_i5h_I6n.as

Мол. масса 364.4

Бесцветное твердое вещество. Температура плавления 203-205¹¹С. Давление ларов при 25°С: 7,3x10'¹¹ мПа. Плотность: 1,48. Коэффициент распределения н-октанол-вода; K_ow logP * 1,18 (pH 5) - 0.51 (pH 7). Растворимость в органических растворителях при 25°С (г/кг): дихлорметан - 15; ацетон - 3,3; ацетонитрил - 1.8: метанол - 0,55; этилацетат - 0,65; октанол - 0.14; толуол - 0,24; диэтиловый эфир -0,06; гексан - менее 0,001.    Растворимость в воде при 25°С: 244 мг/дм³ (pH 7).

Константа диссоциации рКа 5.2.

Водные суспензии устойчивы к гидролизу в нейтральной и щелочной средах (pH 7 - 9), гидролизуются в кислой среде: DT,₍₎ -18 дней (pH 5).

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD 5<0 для крыс > 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD $о) для кроликов > 2000 мг/кг: острая ингаляционная токсичность (LK₅o) для крыс > 11 мг/дм\

Область применения препарата

Препарат АККОРД, ВДГ (750 r/кг), д.в. сульфометурок-метил рекомендуется в качестве гербицида широкого спектра действия для борьбы с одно* и многолетними травянистыми и широколистными сорными растениями, а также древесно-кустарниковой растительностью на землях несельскохозяйственного использования (трасы газо- и нефтепроводов;ч^сыли и полосы отчуждения железных и шоссейных дорог, охранные зоны линий электропередач, аэродромы, контрольно-следовые полосы и другие промышленные территории).

Гигиенические нормативы для сульфометурон-метила калиевой соли:

ПДК в воде водоемов - 0,1. мг/дм³.

ОД К в почве - 0,04 мг/кг.

1. Метрологические характеристики метода Метрологические характеристики метода представлена в таблицах I и 2.

Таблица I

Метрологические параметры

Метрологические параметры. Р « 0,95. п * 5 20 Анализируемый объект Предел обнару жения, мг/кг (дм3) Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (дм3) Среднее значение извлечения % Стандартное отклонение. S.% Доеери гель-нмй ингериа.1 средне! о результата. +% Вода 0,002 0,002-0,04 88,33 3,18 4.4 Почва 0,02 0,02 - 0,4 72,72 2,80 3.9

S

Полнота извлечения сульфометурон-метила из воды и почвы (5 повторнрстей для каждой концентрации)

Таблица 2

Среда Внесено сульфометурон-метила мг/кг (дм3) Обнаружено сульфометурон-метила мг/кг (дм3) Полнота извлечения. % 1 2 3 4 0,002 ±о,\т*\6л 86,23 Вода 0,004 3,5564* 10‘3± 0,3352* 10‘} 88.91 0,02 0,0178284 + 0,0019762 89.14 0,04 0.0356136 + 0,0035539 89.03 0.02 0,014401 ± 0,001249 72.00 Почва 0,04 0,029249 ± 0,003070 73.12 02 0,144336 ± 0,016485 72.17 0.4 0,294336 ± 0,041011 73,58

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной    хроматографии (ВЭЖХ)    с ультрафиолетовым детектором после

экстракции    из анализируемой пробы воды (после подкисления) - хлорин ым

метиленом, почвы - смесью ацетонитрил-бикарбонат натрия, очистки экстракта перераспределением между двумя яесмешиваюшимися фазами, а также на колонке с кизельгелем (почва).

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3,1. Средства измерений Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым Номер Госреестра 15945-97 детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer, США)

Весы аналитические В ЛА-200    ГОСТ    24104

Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим ГОСТ 7328

4

пределом взвешивания до    500    г и    пределом

допустимой погрешности +/- 0,038 г

Иономер ЭВ-74    ГОСТ    22261

Колбы мерные 2-100-2. 2-250-2 и 2-1000-2    ГОСТ 1770

Меры массы    ГОСТ 7328

Пипетки градуированные    2-го    класса    точности    ГОСТ 29227

вместимостью 1.0,2,0,5,0,10 см³

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью ГОСТ 1770 10,25,50, 100, 500 и 1000 см³ Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Сульфометурон-метил с содержанием действующего вещества 95,2% (фирма «Rotam India Ltd.»)

Ацетонитрил для хроматографии, хч Вода деионизованная или перегнанная над КМ1Ю4

н-Гексан, хч

Кизельгель 60, для колоночной хроматографии. 30-60 мкм (Riedel-de-Наёп, Германия)

Кислота орто-фосфорная, хч, 85%

Метилен хлористый (дихлорметан), хч Натрий двууглекислый (гидрокарбонат), хч Натрий гидроксид (натр едкий), чда Натрий сернокислый, безводный, хч Натрий фосфорнокислый однозамещенный, 2-водный (NaH₂P(V2H₂0), чда Натрий хлористый, хч Этиловый эфир уксусной кислоты, ч

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Бумажные фильтры "красная лента", обеззоленные    ТУ    6-09-2678-77

¥

Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария) Воронки делительные вместимостью 150 и 250 см³ Воронхи конусные диаметром 30-37 и 60 мм Г руша резиновая

Колбы плоскодонные вместимостью 200 - 250 см³

Колбы круглодокные на шлифе вместимостью 10. 100 и ГОСТ 9737 250 см³

Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм Насос водоструйный

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ТУ 25-11-917-74 ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,

Швейцария

Сито с диаметром отверстий 1мм.

Стаканы химические, вместимостью 100,400 и 1000 см³ ГОСТ 25336 Стекловата

Стеклянная колонка длиной 25 см, внутренним диаметром 8-10 мм

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см,

внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100

С18, зернением 8 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50-100 мм³

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12,1.007. требования

&

электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019. а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2,5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции:    очистка

органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подготовка буферных растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ. кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной харакгериегмки. подготовка колонки для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонке с кизельгелем.

7.7. Подготовка органических растворителей

7. IJ. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора нс менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.}. 2, Очистка этилацетата

Этилаиетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50,

7,1.3. Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.2. Приготовление IN раствора гидроксида натрия В мерную колбу вместимостью 250 см³ помешают 10 г едкого натра, растворяют а 100 - 150 см³ дистиллированной воды доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7,3. Приготовление 1Мраствора орто-фосфорной кислоты В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 6,9 см³ орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.4.    Приготовление 0,J Мраствора бикарбоната натрия Навеску бикарбоната натрия массой 2,1 г помещают в мерную колб*

вместимостью 250 см³, растворяют в 150-200 см³ дистиллированной воды, доводят водой до метки, перемешивают.

7.5,    Подготовка фосфатного буферного раствора (pH 10)

Навески однозамещенного фосфата натрия (ЫаНгРО^НгО) массой 1.423 г и

хлористого натрия (NaCl) массой 40 г помещают в химический стакан вместимостью 1000 см³ и растворяют в 400 см³ дистиллированной воды. Контролируют pH буферного раствора с помощью иономсра, доводят значение до pH 10. применяя 1N раствор едкого натра.

7,6. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 440 см³ ацетонитрила. 560 см³ деионизованной воды н I см³ 85%-ной орто-фосфорной кислоты перемешивают, фильтруют и дегазируют.

/о