ГОСУДАРСТВЕННОЕ

САНИТАРН0-ЗПИДЕМИ0Л01Т1ЧЕСК0Е НОРМИРОВАНИЕ

российской фвдерации

Часть 13

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Сборник методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию»

Часть 13

Продолжение табл. 1

1 2 3 4 5 6 Пиримифос- этил (примицид, ПП-211) 0-(2-диэтил- а.мино-6-метил- пиримидил-4)- 0,0-диэтил- тиофосфат S (C2H50)2-PO-^VCH3 N^N N(C2HS)2 CuH^OjPS Мол. масса 333,4 2,9 ■ 10-4 (25°) 1 ацетон, бензол, эфир, спирт, хлороформ Роннел (фенхлорфос, тролен, три-хлорметафос) О.О-диметил- 0-(2,4,5-три- хлорфенил)- тиофосфат CgHsOjPSCb Мол. масса 321,6 8 • Iff4 (20°) 40 гексан, ацетон, хлороформ Темефос (абат, дифос) Бис(0,0-ди- метилтиофос- форил-О-фе- нил-4)сульфид S [(CH3O)2P-CM0>]2S CieHioO^SaP Мол. масса 466,5 н. ацетонитрил, ССЦ, толуол Тетрахлор- винфос (гардона) 0,0-диметил- 0-[2-хлор-1- (2,4,5,трихлор- фенилфинил] фосфат (СН30)зР-0-С=СНС1 а C10H9CI4O4P Мол. масса 366,0 4,2 • 1041 (20°) И диметил- формамид Тиометон (интратион, М>81, экавит, э катион) О,О-диметил-Б-(2-этилти6-этил)-дитио-фосфат S CH5°^P--S-(CH2)2-S-C2Hs СНзСК CoH.jOjPSj Мол. масса 246,4 3,0 Iff4 (20°) тр*Р- в большинстве растворителей Трихлорфон (хлорофос, негу вон, диптерекс) 0,0-диметил- (1-окси-2,2,2- трихлорэтил) фосфонаг (СН30)2 tf-CHCCh С4Н8О.РС1з Мол. масса 257,4 7,8 • Iff6 (20°) 2300 бензол, хлороформ Фенитрооксон 0,0-диметил- 0-(3-мегил-4- шпрофенил)- фосфат (CH30)2|-0-^N02 C,Hi2N06P Мол. масса 261,2 ацетон, спирт, хлороформ Фенитротион (метатион, су-митион, фо-литион, ме-(тилнитрофос) 0,0-диметил- 0-(3-метил-4- нитрофенил)- тиофосфат (CH30)2P-0-^N02 CJI|2NOsPS Мол. масса 277,2 6,0 • 10* (20°) тр.р. ацетон, бензол, спирт

40

Продолжение табл. 1

1 2 3 4 5 6 Фенкалтон 0,0-дизтил-8- (2,5-дихлор- фенилтиоме- тил)дитиофос- фат (C2H3oJ-S-CH2S-^CI C„H,3Cl2C>2PS3 Мол. масса 377,3 тр.р. метанол, хлороформ Фснтион (байтекс, лсбайцид) 0,0-диметил- 0-(4-метилтио- З-мегалфенил) тиофосфат (CH30)2P-0-OsCH3 СН3 Мол. масса 278,3 3,0 • 10'5 (20е) 0,005 ССЦ, метанол, эфир, спирт Фентоат (цидеал) 0,0-диметил- S^a-карбагсжси- бензил)дитио- фосфат ? (CH3ObP-S-CHCOOC2H5 6 С12Н1704PS2 Мол. масса 320,4 4,0 • КГ5 (40е) тр.р. бензол, дихлорэтан, эфир, сси Фозалон (бензофосфат, золон) 0,0-диэтил-8- (2-[хлорбензо- ксазолином-2- ил-3-метил)ди- тиофосфат S (CiHsO^-SCHr-l^—j0 ^ C,2HisC1N04PS2 Мол. масса 367,8 10 гексан, ацетон, метанол, спирт, хлороформ Фоксим (валексон) 0,0-диэгалгио- фосфсрия-0<а- цианобензаль- доксим) (QHsO^-ON-CCsHj CN C,2H,503N2SP Мол. масса 298,3 7 хлороформ, ацетон, эфир, спирт Фонофос (дифонат) S-фенил-О- (этил)-этилтио- фосфат C2Hi'>P-SC6Hs с2н5о C10HI5OPS2 Мол. масса 246,1 13 ацетон, ксилол Форат (тимет) 0,0-диэтил-8- (этштшомешл)- дитиофосфат 9 (C2H50)2PSCH2SC2H5 c7H17o2s3p Мол. масса 260.4 тр.р. СО,, ксилол, ацетон, диоксан Формотион (антйо) 0,0-диметил-5- (N-mcttui-N- формилкарба- моилмегил) дитиофосфат (CH30)2kcH2C0N-CH0 СНз C6H12N04PS2 Мол. масса 257,3 6,0 • НГ6 (20е) тр.р. бензол, спирт, хлороформ, эфир

41

1 Фосмет (фталофос, имидан)	2 0,0-диметил- S-^-фталими- дометил)ди- тиофосфат	3 ----—■ i V— (CH30)2P-SOl3tt''c-'1r^ C,,Hl2NO.,PS2 о Мол. масса 317,3	4 1,0 • 10*	5 тр.р.	rlC IOUJI. 1 6 бензол, метил, спирт, СО* толуол, эфир
Р =* 0 фосмет	0,0-диметил- 8(Ы-фталими- дометил)тио~ фосфат	? с— (CHjObP-SCHjN^C^iQ C„H,2NOjPS2 <? Мол. масса 300,9			ацетон, спирт, хлороформ
Фосфамидон (димекрон)	0,0-диметил- 0-(2-N,N-*h- этилкарбамо- ил-2-хлор-1- метилвишю) фосфат	I 6 %о чс2н, СНз C,0H|»OjCINP Мол. масса 299,7	2,5 • 10 s (20°)	х,р.	ацетон, толуол
Хлорпирифос (дурсбан)	0,0-диэтил-О- (3,5,6-трихлор- 2-пирвдил)тио- фосфат	(С2Н30 N ы С^Н) 1O3NCI3SP Мол. масса 350,6	1,9 • Iff* (25»)	од	бензол, хлороформ
Хлорфенвин- фос (бирлан, супона)	0,0-диэтил-0- [(2-хлор-1-{2,4- дихлорфенил) винил]фосфат	(с2н5о)Хо-с=сна Ч* с,2Нн04а3р Мол. масса 359,6	4,0 • 10* (20°)	145	ацетон, бензол, спирт, толуол
Цианофос (пианокс)	0,0-диметил- 0-(4-цианофе- нидУгаофосфат	§ (СНзОЬР-O^CN C9H10NO3PS Мол. масса 243,2		н	ацетон, метанол, хлороформ
Этафос	S-пропил-О- (2,4-дихлорфе- нил)-0-этил- тиофосфат	СНзССН^ СК С2н50-^^ W CnHjsCbCbPS Мол. масса 328,9		10	ацетон, хлороформ, метанол
Этион (этиокон)	Бис-(0,0-ди- этилдитиофос- форил)метан	S СНзРМОСгНзЫг C9H22O4S4P2 Мол. масса 384,5	1,5 • 10*	тр.р.	бензол, CCI4, хлороформ, дихлорэтан, метанол

42

Продолжение табл. 1

1 2 3 4 5 6 Этринфос (экамет) 0,0-диметил- 0(2-этшь4- этоксипири- мидил-6)тио- фосфат СгН5'—-B-N „S ы(3-ОР(ОСНз)2 CiHsCr C,oH,7N204PS Мол. масса 292 ТР*Р' этанол, ацетон, ксилол Этопроп (мокап, это-профос, профос) О-этил-S- дипропилди- тиофосфат О C2H50-P4SC3H7)2 QH19O2PS2 Мол. масса 242,3 3,5 • W4 (26е) 750 ацетон, бензол, спирт, эфир

2. Принцип метода

Метод основан на экстракции фосфорорганических пестицидов (ФОП) из анализируемой пробы органическим растворителем (ацетон, хлористый метилен, хлороформ, дихлорметан или н-гексан). Выбор растворителя определяется анализируемым объектом и физико-химическими свойствами пестицида. Применение н-гексана в качестве экстрагента фосфорорганических пестицидов ограничено из-за низкого коэффициента распределения соединений в этом растворителе и рекомендуется только для бромофоса, пиразофоса, паратионметила, малатиона, фентоа-та и тетрахдорвинфоса. После очистки экстракта галогенсодержащие растворители упаривают досуха, так как их присутствие мешает дальнейшему определению.

3. Характеристика методов ГЖХ и ТСХ

3.1.    Минимально детектируемое количество: методом ГЖХ зависит от характеристики детектора и колеблется в пределах 0,01—5 нг; методом ТСХ 0,1—5 мкг.

3.2.    Предел определения (табл. 2).

Таблица 2 Пределы определения ФОП методом ГЖХ и ТСХ

Объект ГЖХ ТСХ Растительные объекты 0,2—0,4 м г/кг 0,02—0,05 мг/кг Пробы животного происхождения 0,01 мг/кг 0,2—0,4 мг/кг Вода 0,001—0,005 мг/л 0,005 мг/л Почва 0,01—0,05 мг/кг 0,1—0,3 мг/кг ’ Растительные объекты: яблоки, вишни, виноград, черная смородина, клубника, морковь, картофель, пшеница, горох, свекла, трава, верно

43

3.3.    Среднее значение определения.

В воде 86—92 %, в почве 70—95 %, в растительных объектах 72— 108 %, в пробах животного происхождения 90 % и выше.

Относительная ошибка определения при содержании максимально допустимого уровня воздействия колеблется в зависимости от свойств препарата и анализируемого объекта: для пищевых продуктов для ГЖХ в пределах 2—10 %, ТСХ в пределах 5—20 %; для воды ГЖХ в пределах 3—5 %, ТСХ в пределах 3—12 %, для почвы ГЖХ в пределах 6—14 %. ТСХ в пределах 7—18 %.

3.4.    Избирательность метода.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием селективных детекторов, различных фаз при ГЖХ и различных систем подвижных растворителей и проявляющих реагентов при ТСХ.

4. Приборы, посуда* и реактивы

4.L Приборы и посуди

4.1.1.    Для экстракции и очистки экстрактов.

Мерная посуда I класса точности; воронки делительные емкостью 1 500—2 000, 500, 200 мл; источник УФ-света; ротационный вакуумный испаритель с набором колб; аппарат для встряхивания; микросублиматор; колонки для адсорбционной хроматографии размером 400 х 20 мм, 300 х 18 мм, 200 х 10 мм, 100 х 3 мм; почвенное сито.

4.1.2.    Для ГЖХ.

Хроматограф с ДЭЗ, ТИД или ПФД; колонки стеклянные длиной 1,5 м и внутренним диаметром 3,5 мм; микрошприцы на 10 мкл.

4.1.3.    Для ТСХ.

Стеклянные пластинки 9 х 12 см (20 х 20 см); пластинки «сиду-фол», камера для хроматографирования; пульверизаторы; прибор для нанесения слоя; эксикатор; микропипетки (капилляры); фен; термостат.

4.1.3.1. Приготовление пластинок для ТСХ.

Для приготовления пластинок готовят сорбционную массу из расчета 14 г силикагеля, 1 г гипса, 40 мл воды (на 6—7 пластинок). Слой наносится общепринятым способом.

Стеклянная посуда перед использованием кипятится в 20 %-ном растворе бикарбоната натрия, тщательно промывается водой, 1 %-иым раствором ИСТ, затем многократно промывается дистиллированной водой.

44

4.2. Реактивы в растворы

Основной стандартный раствор препарата 100 мкг/мл в ацетоне или в н-гексане для веществ, растворяющихся в гексане (10 мг вещества в 100 мл раствора) можно хранить в холодильнике не более одного месяца. Стандартный раствор в бензоле с тем же содержанием можно хранить в холодильнике в течение 6 месяцев. Рабочие стандартные растворы готовят разбавлением основного раствора в ацетоне, н-гексане или бензоле (содержание препарата 0,2; 0,5; 1 или 5 мкг/мл). Готовят ежедневно, гранят в холодильнике.

4.2.1.    Для экстракции.

Ацетон, х.ч., н-гексан, х.ч., бензол, х.ч., хлороформ, ч., хлористый метилен, ч. Все растворители перегнанные*. Ацетонитрил., ч., свежепе-регнанный (хранить 1 сутки), метанол, ч.; натрий сернокислый, безводный, ч. и 2,5 % водный раствор; натрий хлористый 10 % водный раствор, кислота соляная 0,1 н водный раствор; кальций хлористый 0,05 н водный раствор; полистирольный гель (размер гранул 0,5—1 мм). В анализе пестицидов используют сополимер стирола с 2 % дивинилбен-зола для концентрирования их из водных растворов. Это сополимеры типа: амберлит ХАД-4; Beads или Styren 2 % DVB.

4.2.2.    Для очистки экстрактов.

Уголь активированный БАУ, КАД, молотый; оксид алюминия по Брокману П-нейтральный; оксид алюминия «Woelm V» нейтральный и щелочной «Woelm 200».

04583, 04574; силикагель КСК, ТУ 6-09-2523-72 (размер частиц 100—150 меш); силоксид; силикагель «W6elm 02747 активность I степени; оксид магния, чда; диатомит, промытый кислотой

4.2.3.    К методу ГЖХ.

Носитель хроматон N-AW-НМДБ, хромосорб W, HP, газохром Q, варапорт 30 (0,16—0,20 мм или 80—100 меш.). Стационарная фаза; неполярная ДС-200, SE-30, SE-301, OV-101 и др.; средне полярная OV-17, ХЕ-60 QP-I или др. в количестве 2%, полидиэтиленгликоль-оукцинат (ПДЭГС) в количестве 2 %; полифенилметалсиликон (ПФМС) в количестве 5 %. Водород из баллона или получаемый из генератора водорода; воздух из баллона или нагнетаемый компрессором; азот особой чистоты (содержание О2 не более 0,003 %).

4.2.4.    К методу ТСХ.

Срок хранения две недели.

45

Силикагель марки КСК ТУ 6-09-25-23-72 с размером частиц 100— 150 меш.; мерк; ЛС 5/40 с размером частиц 70—100 меш. или аналогичный сорбент; оксид алюминия по Брокману II ст. активности, для хроматографирования; кальций сернокислый, х.ч., прокаленный в течение 6 часов ври 160 °С; пластинки «Силуфол» ЧССР.

Реагенты для проявления хроматограмм:

Раствор азотнокислого серебра в аммиаке и ацетоне.

0,5 г AgN0₃ растворяют в 5 мл дистиллированной воды, после чего прибавляют 7 мл аммиака и разбавляют раствор ацетоном до объема 100 мл. Готовят в день употребления. Хранят в темном месте. Применяют для ФОД, содержащих галоид.

Раствор азотнокислого серебра с 2-феноксиэтанолом.

0,5 г AgN0₃ растворяют в 5 мл дистиллированной воды, после чего прибавляют 1 мл 2-феноксиэтанола и разбавляют раствор ацетоном до объема 100 мл. Готовят в день употребления, хранят в темном месте.

Раствор хлористого палладия.

0,2 г PdCb помещают в коническую колбу емкостью 100 мл, прибавляют 40—50 мл 0,01 н раствора HCI, опускают колбу в нагретую до 50—60 °С водяную баню на 10—15 мин, затем охлаждают при комнатной температуре. Во время нагревания и охлаждения колбу с содержимым часто встряхивают. Через 2—3 часа после полного растворения реактива раствор переливают в цилиндр и доводят 0,01 н раствором НС1 до 100 мл. Раствор хранят в холодном месте. Срок хранения несколько месяцев.

Бромфеноловый проявитель.

Смесь раствора бромфенолового синего (БФС) и азотнокислого серебра. Готовят два раствора:

1)    0,5 %-ный водноацетоновый (1 :3) раствор AgN0₃ и

2)    0,05 %-ный ВФС в 10 мл ацетона. Раствор 2 разбавляют «I» (AgN0₃) до объема 100 мл. Хранят в темном прохладном месте. После обработки хроматограмм бромфеноловым проявителем осветляют фон обработкой пластин 2 %-ным раствором лимонной кислоты или 5 %-ным раствором уксусной кислоты. Хранить в темном месте. Применяется для обнаружения дитио- и тиофосфатов.

Раствор 2, б-дибром-Ы-хлорхинонимта.

0,5 %-ный раствор в гексане. Хранить в прохладном темном месте.

0,5 %-ный раствор бриллиантового зеленого в ацетоне.

46

2 %-ный раствор резорцина и 10 %-ный раствор Na₂C0₃ (перед обработкой хроматограмм реактивы смешивают в соотношении 2 : 3), (для обнаружения трихлорфона и дихлорфоса).

4 %-ный водный раствор едкого натра. Для ФОП, содержащих группы N0₂.

1 %-ный раствор 4-(п-нитробензил)пиридина в ацетоне и 10 %-ный раствор тетраэтиленпентамина в ацетоне.

5. Условия отбора, хранения проб и подготовка ах к анализу

Отбор проб производится по методике, оекомендованной СЭВ (Унифицированные правила отбора проб, 1980).

Пробы животного происхождения следует хранить в холодильнике, анализировать в день отбора. Пробы воды, почвы и растительного материала можно хранить в холодильнике не более 5 дней¹. Каждую пробу воды отбирают в стеклянную бутылку с притертой пробкой, объемом не менее 1 л. Почву перед анализом просеивает через почвенное сито и анализируют в естественно-влажном состоянии. Параллельно проводят определение содержания влаги в почве в пересчете на воздушно-сухую массу.

6. Ход анализа 6.7. Экстракция

Вода. 1 л анализируемой пробы помешают в делительную воронку емкостью 1 500—2 000 мл, подкисляют 0,1 н раствором НС1 (5—10 мл) до pH 4—5, хорошо перемешивают, добавляют 50 мл 10 %-ного раствора хлористого натрия, экстрагируют из водной фазы хлороформом² (хлористым метиленом) трижды, порциями по 100, 50, 50 мл. Экстракт объединяют, сушат над безводным Na₂S0₄, фильтруют небольшими порциями в грушевидную колбу ротационного вакуумного испарителя емкостью 50 мл. Порциями отгоняют растворитель с помощью ротационного испарителя до объема 0,5—1 мл. Оставшийся растворитель отгоняют досуха на воздухе при комнатной температуре. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл ацетона, колбу закрывают пробкой, тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2—5 мкл

полученного раствора. После определения ФОП методом ГЖХ с ТПД или ПФД в пробирку помещают наплавленный сверху стеклянный капилляр и удаляют растворитель при помощи слабого нагревания на водяной бане с температурой 40 °С до объема меньше 0,2—0,3 мл. Остаток количественно, с помощью того же стеклянного капилляра, но с отломанным заплавленным концом, переносят на хроматографическую пластинку.

Для извлечения некоторых ФОП (бромофос, пиразофос, паратион-метил, малатион, тетрахлорвинфос, фентоат) в качестве экстрагента может быть также рекомендован н-гексан. В этом случае из подготовленной, как описано выше, пробы воды (pH 4—5) указанные пестициды экстрагируют н-гексаном трижды порциями по 100 мл и далее поступают о н-гексановыми экстрактами, как описано выше для хлороформных экстрактов,

Концентрирование ФОП из воды можно производить на сополимере стирола с дивинилбензолом.

20г сополимера стирола с 2% дивинилбензола (размер гранул 0,5—1,0 мм), предварительно отмытого бензолом упомещают в делительную воронку, куда наливают бензол (100 мл). После набухания сополимера в органическом растворителе (1,5—2 часа) набухший сополимер переносят с водой в стеклянную колонку (высота 40 см, диаметр 2 см). Высота слоя сополимера в колонке 21 см, количество бензола, связанного сополимерам, 72—75 мл. Через эту колошу пропускают 10 л воды содержащей фосфорорганические пестициды со скоростью 80— 100 мл/мин. Оставшуюся воду отсасывают водоструйным насосом, колонку на 30—60 мин заливают бензолом, а затем элюируют бензолом поглощенные вещества со скоростью 2 мл/мин. Собирают 100 мл элюа-та, упаривают растворитель и проводят определение с помощью газожидкостной или тонкослойной хроматографии.

Почва. 10—25 г пробы помещают в коническую колбу, заливают 50 мл метанола или смеси ацетон - 0,05 н водный раствор СаСЬ, (1:1), время экстракции 30 мин при периодическом встряхивании. Экстракцию повторяют трижды. Экстракт фильтруют (или центрифугируют).

Метанольный раствор разбавляют 150 мл воды и ФОП экстрагируют хлороформом³ (30 мл х 3).

Из водно-ацетонового экстракта ФОП извлекают хлороформом³ (хлористым метиленом) трижды по 10 мл, объединяют хлороформный

экстракт, сушат и упаривают как описано выше при определении в воде. При необходимости экстракты чистят сублимацией в вакууме, на колонках с адсорбентами (см. ниже).

Растительный материал не содержащий воска. 25—50 г пробы экстрагируют смесью ацетона и воды (1:1) или ацетонитрилом трижды по 50 мл, время каждой экстракции 15 мин при механическом встряхивании. Объединенный экстракт переносят в делительную воронку и прибавляют 250—300 мл дистиллированной воды.

Из водно-ацетонового раствора экстрагируют пестициды хлористым метиленом* (хлороформом) трижды по 50 мл. Экстракт содержащий пестициды сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют, как описано выше при определении в воде, до объема 0,2—0,3 мл (досуха на воздухе) и анализируют методами ГЖХ или ТСХ. При необходимости экстракт очищают микросублимацией в вакууме, на колонке с углем или перераспределением в системе н-гексан~ацетонит~ рил как описано ниже.

Сушеные фрукты с высоким содержанием сахара (например; финики, фиги, изюм, сушеные сливы).

Взвешивают 20 г исследуемой пробы, заливают 50 мл дистиллированной воды и оставляют на 2 часа. Пробу измельчают гомогенизатором при высоких оборотах, а затем после прибавления 150 мл ацетона гомогенизируют еще 2—3 мин. Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера. Промывают ножи гомогенизатора, посуду и осадок на фильтре 20— 30 мл ацетона. Фильтрат переносят в делительную воронку емкостью 1 000 мл и добавляют в него 450 мл дистиллированной воды, содержащей 0—4% сернокислого натрия. Количество соли зависит от образующейся эмульсии (например, к экстракту бананов нужно 0 %, клубники 2 %, яблок 4 % раствор сернокислого натрия). Из этой смеси экстрагируют триады дихлорметаном порциями по 100, 50, 50 мл. Нижнюю органическую фазу фильтруют через 30 г безводного Na₂S0₄, промывают сульфат натрия 30 мл дихлорметана. Объединенный экстракт упаривают до 3—5 мл на ротационном испарителе.

Добавляют в колбу 10 мл ацетона и испаряют до 2—3 мл. Эту операцию повторяют еще два раза, сконцентрированный остаток количественно переносят в мерную пробирку и доводят объем до 5 мл ацетоном. Полное удаление дихлорметана необходимо, так как его присутствие мешает дальнейшему ГЖХ определению.

Из 5 мл раствора отбирают пипеткой 1 мл для газовой хроматографии. Оставшиеся 4 мл экстракта упаривают до 1 мл и используют для

49

ББК 51.23 С23

С23 Сборник методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию».—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.—78 с.

ISBN 5—7508—0771—1

В сборник включены методические документы, содержащие правила и методы исследований (испытаний) и измерений, а также правила отбора образцов для проведения исследований (испытаний) и измерений, в соответствии с постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г. Г. Онищенко от 08.12.2008 № 67.

ББК 51.23

© Роспотребнадзор, 2010 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010

ТСХ. Прибавляют 1 мл бензола к ацетоновому раствору и испаряют до 0,5—0,8 мл, затем доводят бензолом до 4 мл. Вычисляют полное количество экстракта, используемого для ТСХ и этим количеством (X мкл) корректируют количество пробы, соответствующее бензольному раствору. Бензольный раствор используется для очистки колоночной хроматографией либо на смешанном сорбенте, либо на оксиде алюминия, либо на силикагеле как описано ниже.

Сухие материалы с низким содержанием масла и жира (например: хлебные культуры, кукуруза, мука, сухие корма, чай).

Взвешивают 50 г измельченной в порошок исследуемой пробы, прибавляют 200 мл дихлорметана, закрывают и встряхивают в течение 30 минут. Декантируют растворитель и повторяют экстракцию 30 мл дихлорметана. Фильтруют пробу через воронку Бюхнера и промывают посуду и фильтр 20 мл дихлорметана. Фильтрат переносят в 1 000 мл делительную воронку и промывают смесью вода-ацетон (5 :2) трижды по 50 мл. Сушат дихлорметановую фазу над безводным сульфанатрия и в дальнейшем поступают как описано для сухофруктов.

Очистка в системе адетонитрил-гексан,

Сухой остаток растворяют в 10 мл н-гекоаиа, раствор переносят в делительную воронку и встряхивают с 10 мл ацетонитрила, насыщенного гексаном, в течение 2 мин. После разделения фаз отделяют ацетонитрильный слой. Гексановый слой экстрагируют еще два раза ацетонитрилом, порциями 5—10 мл. Объединенную ацетонитрильную фазу промывают без встряхивания 5 мл гексана, гексановый слой отбрасывают. К ацетонитрилу прибавляют 2 %-ный раствор сернокислого натрия, чтобы содержание ацетонитрила составляло не более 20 % (200—250 мл раствора сернокислого натрия). ФОП экстрагируют иа водно-ацетонитрильного раствора гексаном трижды, порциями по 30 мл.

Гексановый слой сушат над безводным Na₂SC>4, отгоняют растворитель досуха. Сухой остаток растворяют в 2—5 мл гексана и аликвотную часть хроматографируют. При наличии большого количества пигментов, мешающих дальнейшему определению, рекомендуется проводить дополнительную очистку на колонке с активированным углем, как описано ниже.

Очистка на колонке с углем,,

Подготовка адсорбент 150 г активированного угля нагревают в 500 мл кипящей 1 н НС1 в течение 4 часов. Затем промывают его водой до исчезновения ионов хлора в сушат при 95—100°С до постоянного веса. Температура не должна превышать 100 °С.

50

УТВЕРЖДАЮ Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А. И. Зайченко 11 марта 1985 г,

№ 3225-85

Унифицированная методика определения остаточных количеств фосфорорганических пестицидов

Москва 1985

Унифицированная методика рекомендуется для применения практическими лабораториями, осуществляющими контроль за содержанием пестицидов в сельскохозяйственном сырье, пищевых продуктах, воде, почве.

В разработке методики принимали участие специалисты стран-членов СЭВ: ВНР (Центр защиты растений, Институт питания), ГДР (Центральный институт питания АН ГДР, Институт защиты растений), ПНР (Институт органической промышленности. Государственный институт гигиены, Институт ветеринарии), СРР (Институт защиты растений), СССР (ВНИИГИНТОКС, ВНИИХСЗР, ВИЗР), ЧССР (Институт агрохимической технологии, Институт гигиены и эпидемиологии).

Перечень методик, утвержденных М3 СССР, положенных в основу Унифицированной методики, приведен в приложении.

34

Пояснительная записка к Унифицированной методике определения фосфорорганических пестицидов

В настоящих методических указаниях обобщены сведения:

•    о физико-химических свойствах фосфорорганических пеетидидов, применяемых в странах-членах СЭВ;

« об основных растворителях и реактивах, применяемых для экстракции пестицидов и анализа их методами тонкослойной (ТСХ) и газожидкостной хроматографии (ГЖХ);

•    дана информация о способах очистки экстрактов в зависимости от свойств анализируемого материала;

•    приведены сведения об основных приемах аналитического определения ФОП методами ТСХ и ГЖХ;

•    детально изложена методика хромато-энзимного определения ФОП;

•    методика ГЖХ определения дитиофосфахов в виде сульфонов.

И разработке методики принимали участие специалисты стран-членов СЭВ: ВНР (Центр защиты растений. Институт питания), ГДР* (Центральный институт питания АН ГДР, Институт защиты растений), ПНР Институт органической промышленности. Государственный институт гигиены. Институт ветеринарии), СРР (институт защиты растений), СССР (ВНИИГИНТОКС, ВНИИХСЗР, ВИЗР), ЧССР (Институт агрохимической технологии. Институт гигиены и эпидемиологии).

Перечень методик, утвержденных М3 СССР, положенных в основу Унифицированной методики, приведен в приложении.

Методика расчитана на специалистов СЭС, имеющих опыт работы в области анализа остаточных количеств пестицидов и хорошо знакомых с методическими указаниями, перечень которых приведен в приложении, и предназначена для руководства при проведении арбитражных анализов по контролю остаточных количеств пестицидов в пищевом сырье и продуктах питания, импортируемых из стран-членов СЭВ.

35

Унифицированная методика определения остаточных количеств фосфорорганических пестицидов

Фосфорорганические пестициды:    азинфосметил,    азинфосэтил,

афос, бромофос, бутонат, гетерофос, ДАЕР, деметон-О, деметон-S, дна-зинон, диметоат, дисулъфотон, диталимфос, дихлорфос, ИБП, иодфос, изофос-3, кротоксифос, кумафос, малатион, налед, параоксонметил, па-раоксон, паратионметил, паратион, пиразофос, пиримифосметил (этил), роннел, темефос, тетрахлорвинфос, тиометон, трихлорфон, фенитроок-сон, фенитротион, фенкаптон, фентоат, фентион, фозалон, фоксим, фо-нофос, форат, формотион, фосмет, Р=0 фосмет, фосфамидон, хлорпири-фос, хлорфенвинфос, цианофос, цианофос, этафос, этион.

Объекты анализа:    Метод    анализа

пищевые продукты раститель-    газожидкостная, тонкослойная

иого и животного    хроматография, хроматоэнзимный

происхождения, корма, вода, почвы

1. Характеристика действующего вещества - см. табл. 1

Таблица 1 Характеристика действующих веществ

Название по номенклатуре СЭВ (синонимы) Химическое название по женевской номенклатуре Структурная формула, брутго-формула, молекулярная масса Давление ларов, ммрт. ст. Растворимость в воде, мг/л органический растворитель 1 2 3 4 5 6 Азинфосметил (гузатион, М, гутион) ОХКдиметил-S (3,4-дигидро- 4-кего-1ДД-беш- триазинил-3- метил)дитио- фосфат (CH,ObP-S-CH2-f|^[Q| CI0H12O3N3S2P Мол. масса 317,3 33 ацетон, бензол, дихлорэтан, метанол, СО, Азинфосэтил (гузатион-А, этигутион) 0,0-диэтил-8 (3,4-дигидро- 4-кеп)-1ДЗ-бею- триазинил-3- метил)дигио- фосфат (C2H50b/sCHr-N|^^] C.jH^OjNjSaP Мол. масса 345,4 2Д-10-1 (20°) ацетон, бензол, спирт, хлороформ, эфир Афос 0,0-дифсиил- 1-ацетокси-2, 2,2-тоихлор- этилфосфоиат О С6Н50^р_сн_ОС^н3 с6н5о ссь CI6H1405PCI3 Мол. масса 432,5 ацетон, ксилол, спирт, хлороформ

36

Продолжение табл. 1

1 2 3 4 5 6 Бромофос (нексион) 0,0-диметил- 0-(2,5-дихлор- 4-бромфенил) тиофосфат S С1 (СН30)2Р-0-^Вг СвНвВЮзСЬРБ Мол. масса 365,0 1,3 • 10* (20°) 40 ацетон, бензол, диметил- формам ид, хлороформ, эфир Бутонат (трибуфон) 0,0-диметил- (1-бутирокси- 2,2,2-трихлор- этил)фосфонат (СНзОЬР-СНОСОСзНу О ССЬ С8Н1405С13Р Мол. масса 327,5 н. ацетон, метанол, спирт Гетерофос S-пропил-О- фенил-О-этил- тиофосфат О ^s0^P-S(CH2)2CH3 с2н5о CnHl703PS Мол. масса 260,1 ацетон, бензол, хлороформ, гексан ДАНР (амифос, аминфос) 0,0-диметил- 8-(2-ацетами- доэтил)-дитио- фосфат (CHjO^MCHabNHCOCHs CjH^NCbPSz Мол. масса 243,3 ацетон, бензол, эфир, метан, толуол Деметон-0 (систокс) 0,0-дагшл-0-[(2-этилтио) этил] тиофосфат (C2H30}2^(HCH2)r-S-C2H5 СвН^ОзРБг Мол. масса 258,3 60 ацетон, бензол, метанол Деметон-S (изосистокс) 0,0-даэтал-Б- [(2-этилтио) этил]тиофос- фат (CjMsObP-S-CCHzb-S-CjHs CgH^OsPSa Мол. масса 258,3 200 бензол, спирт, хлороформ Деметон-S- сульфоксид (изосистокс- сульфоксид) 0,0-дютил-$- (2-этилсуль- финилзтил) тиофосфат (C2HsO)2?-S-CH2SOC2H5 C8HI904PS2 Мол. масса 274,3 ацетон, спирт, хлороформ Деметон-S- сульфон (изосистокс- сульфон) 0,0-дюшл-8- (2-этилсуль- фонилэтил) тиофосфат (C2H5O)2^-S-CH2S0jC2Hs C8H1905PS2 Мол. масса 290,3 ацетон, спирт, хлороформ Демефион (Тинокс) 0,0-димегшл-0- (2-метилтио- этил) тиофосфат; 0,0-диметил-8- (2-метилтио- этил)фосфат (СН30)2 РЧНСНгЬ S СН3 (CH30)2P-MCH2)2SCH3 О СзН^ОзвгР Мол. масса 216,3 оа метанол, спирт, хлороформ

37

Продолжение табл. 1

1 2 3 4 5 • 6 Диазинон (базудин, алфатокс, экзодин) 0,0-диэтил-0- (2-изопропил- 4-метилпири- мидил-6)тио- фосфат (C2H50bP-0-,^f \ЛСН(СН3)2 Ci2H21N203PS Мол. масса 304,4 о ^ 00 40 ацетон, бензол, спирт, эфир, ксилол, хлороформ Деметоат (рогор, фос-фамид, Би-58, пигон) ОДдамеггил-S- (N-метилкар- бамоилметил) дьпиофосфаг (CH30)j ^-S-CH2CONHCH3 CsH^NOjPSj Мол. масса 229,3 8,5 • КГ6 (20е) 3900 ацетон, метанол, дихлорэтан, эфир, хлороформ Дисульфотон (дисистон, тиодеметон) 0,0-диэтил-Б- (2-этилтио- этил)дитио- фосфат (С2Н50)2 l-S-<CH2)2-SC2H3 C8H1902S3P Мол. масса 274,4 1,8- КГ* (20°) ацетон, бензол, эфир, метанол Дихлорфос (ДДВФ, хлорвинфос) 0,0-диметал-0- (2Д-дихлорви- нил)фосфат (СНзОЪ^ОСНССЬ С.Н7С1204Р Мол. масса 221 1,2 • 10г (20°) 1000 ацетон, бензол, ДХЭ, хлороформ, метанол Диталимфос (плондрел, лаотран) 0,0-диэтил-№ фталимидо- тиофосфат (С2Н^-<^Х) Ч c,2h,4o2nps О Мол. масса 299,9 н ацетон, бензол, этилацетат, хлороформ ИБП (рацид П, китацин) 8-бензил-0,0- диизопропил- тиофосфат [(СНз)2СНО]2^-СН2СеН5 CnH,703PS Мол. масса 260,3 5 ацетон, ДМФ, метанол Изофос-3 0-(2-хлор-4- метилфенил-N- вторбутилами- до)-хлорметшь тиофосфат СНгГ£<СНгС1 w п nchc2h3 s 1 PH C,2H,80NC1PS 3 Мол. масса 290,8 н спирт, толуол, ДМФ ИОДФЕНФОС (иодофос, Нуванон-Н) 0,0-диметил- СЦ4-иод-2,5- дихлорфенил)- тиофосфат ? Cl (СН30)гР-О-^-1 CsHsCUOjPS Мол. масса 413,0 2 ацетон, бензол, метилен- хлорид Кротоксифос (циодрин) 0,0-диметил- 0-(1-метил-2- карбоксид(а- фенилэтил)ви- нилфосфат (СН30)|-0(р=СНС0(^Н-^) 6 сн3 сн3 С14Н1906Р Мол. масса 314,3 1,4 • 10 s (20°) 0,1 метанол, эфир, хлороформ

38

Продолжение табл. 1

1 2 3 4 5 6 Кумафос (корал) 0,0-диэтил-0- (З-хлор-4-ме- тилкумарин- иил-7)тиофос- фат S (С2Н5О)2Р-О-0ф^° CI4H1605C1SP CHj Мол. масса 362,8 H бензол, ксилол, толуол, хлороформ Малатион (карбофос) фостион, меркаптоти- он) 0,0-димешл-!5-(1,2-дикарбэ-токсиэтил)ди-тио фосфат (СНзОЬ <%СН-СООС2Н5 СН2СООС2Нз C10H|9O6PS2 Мол. масса 330,4 1,25 - Iff4 (20°) 150 (20°) ацетон, метанол, дихлорэтан, спирт Налед (дибром) 0,0-диметил- 0-(1,2-дибром- 2,2-дихлор- этил)фосфат (СН3ОЬРрСНВгСС12Вг и ОН704С12Вг2Р Мол. масса 260,3 2 • Iff3 (20°) H бензол, толуол, ксилол Параоксон- метил 0,0-диметил- 0-(4-нитрофе- нил)фосфат О (CHsObP-O-Q-NOa CgH.oOePN Мол. масса 247,1 ацетон, спирт, хлороформ Параоксон (минтакол) 0,0-диэтил-0- (4-нитрофе- нил)фосфат (C2H5Objj>-OH0>-NO2 CioHr40<jNP Мол. масса 275 H ацетон, спирт, толуол, хлороформ Парзтонметил (метафос, метацид, вофатокс, фолидол) 0,0-диметил- 0-(4-нитрофе- шл)гиофосфат S (CHsObP-O-^NCb CgHioNOjPS Мол. масса 263,2 9,7 ■ 103 (20°) 55 дихлорэтан, хлороформ Паратион (тиофас) 0,0-дизтил-0- (4-нитрофе- нил)тиофосфат S (C2H3O)2P-Oh0NO2 C,0HmNO5PS Мол. масса 291,3 3,8 • lO3 (20°) 0,002 бензол, диоксан, метанол, хлороформ Лиразофос (афуган, курамил) О,О-диэтил-0- (5-метил*4- карбзтоксипи- ридопиразолил- 9)гиофосфат Ct^l^OsPS Мол. масса 373,2 1,7 -103 (50°) 4,2 бензол, ксилол, спирт, толуол Пиримифос- метил (актелик, ПП-511) 0,0-диметил- 0-(2-диэтил- амино-6-метагь пиримидил-4)- тиофосфат S (СНзОЬР-О- f^VCH3 N^N N(C2H5)2 С, 1H20N3O3PS Мол. масса 305,4 1,0 -103 (30°) тр.р. ацетон, бензол, эфир, спирт, хлороформ

39

1

При определении дихлорфооа пробы необходимо анализировать в день отбора.

2

Растворители перед экстракцией предварительно встряхивают в течение 2—3 мин с дистиллированной водойдеем воду отбрасывают.

47

3

Растворители перед экстракцией насыщают водой как указано выше.