Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

119 страниц

623.00 ₽

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Методические указания устанавливают порядок применения метода отбора проб и методов лабораторных исследований биологического материала от людей с целью обнаружения возбудителей гельминтозов и протозоозов, определения их видовой принадлежности.

Методические указания предназначены для специалистов паразитологических, микробиологических лабораторий санитарно-эпидемиологической службы, медицинских организаций независимо от их организационно-правовых форм, индивидуальных предпринимателей, а также научно-исследовательских институтов, осуществляющих лабораторную диагностику гельминтозов и протозоозов.

Заменяет МУК 4.2.735-99: Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов

Оглавление

Область применения

Раздел 1. Лабораторная диагностика

   1.1. Лабораторная диагностика кишечных гельминтозов

      Отбор проб и условия доставки биологического материала в лабораторию для паразитологического исследования

      Отбор проб кала

      Отбор дуоденального содержимого (желчь)

      Отбор проб мокроты и лаважной жидкости

      Отбор проб мочи

   1.1.1. Методы исследования кала на яйца гельминтов

      1.1.1 1. Макроскопические методы

      1.1.1.2. Микроскопические методы

         1.1.1.2.1. Метод толстого мазка под целлофаном по Като и Миура

         1.1.1.2.2. Методы седиментации

            Метод формалин-эфирной или уксусной седиментации

         1.1.1.2.3. Модификация метода седиментации с применением одноразовых концентраторов "PARASER"

         1.1.1.2.4. Модификация метода седиментации с применением минисистемы "Real"

         1.1.1.2.5. Методы исследования кала с применением флотационных растворов

      1.1.1.3. Методы исследования кала на личинки гельминтов

         Метод Бермана

         Метод Бермана в модификации Супряги

         Метод Харада—Мори в модификации Маруашвили (метод культивирования личинок на фильтровальной бумаге)

      1.1.1.4. Методы исследования перианальных отпечатков

         Метод исследования перианального отпечатка с применением липкой ленты по Грэхэму

         Метод исследования перианального отпечатка с применением стеклянных глазных палочек с клеевым слоем по Рабиновичу

      1.1.1.6. Методы исследования желчи дуоденального содержимого (желчи, мокроты, лаважной жидкости и мочи)

         Методы исследования дуоденального содержимого (желчи)

         Методы исследования желчи с центрифугированием

         Методы исследования мокроты и лаважной жидкости

         Методы исследования нативного мазка мокроты

         Методы исследования нативного мазка мокроты и лаважной жидкости с центрифугированием

         Методы исследования мочи

         Метод концентрации мочи

         Метод фильтрации мочи

      1.1.2. Диагностические признаки возбудителей гельминтозов

   1.2. Лабораторная диагностика эхинококкозов

      Морфологические методы исследования ларвоцист при цистном и альвеолярном эхинококкозах

      1.2.1. Лабораторная диагностика цистного эхинококкоза

         Методы исследования нативных и окрашенных мазков

      1.2.2. Лабораторная диагностика альвеолярного эхинококкоза

      1.2.3. Метод исследования жизнеспособности паразита

   1.3. Лабораторная диагностика трихинеллеза

      1.3.1. Метод трихинеллоскопии

         Компрессорная трихинеллоскопия

      1.3.2. Методы переваривания в искусственном желудочном соке

         Классический метод переваривания по Березанцеву Ю. А.

         Ускоренный метод переваривания по Владимировой П. А.

   1.4. Лабораторная диагностика филяриозов

      1.4.1. Лабораторная диагностика онхоцеркоза

         Метод исследования необогащенного нативного препарата

         Метод исследования обогащенного препарата

      1.4.2. Лабораторная диагностика филяриозов лимфатической системы (вухериоза и бругиоза)

         Метод исследования нативного мазка крови из пальца

         Микрокапиллярный метод обнаружения живых микрофилярий по Супряге

         Методы исследования венозной крови

         Метод концентрации микрофилярий в осадке по Кнотту

         Метод мембранной фильтрации микрофилярий по Беллу, мидифицированный Супрягой и Андреенковым

         Микроскопическое исследование препаратов крови

      1.4.3. Методы диагностики подкожного дирофиляриоза

         1.4.4. Диагностика сердечно-легочного дирофиляриоза

Раздел 2. Лабораторная диагностика протозоозов

   2.1. Лабораторная диагностика протозойных инфекций кишечника

      2.1.1. Микроскопические методы исследования кала на простейшие кишечника

         Основные методы исследования кала на простейшие кишечника

      2.1.2. Специальные методы исследования кала на простейшие кишечника

         Метод приготовления влажного мазка нативного кала с физиологическим раствором, растворами Люголя и метиленового синего

         Методы приготовления постоянных окрашенных препаратов кала

         Метод окрашивания трихромовой краской

         Модифицированный метод окрашивания по Цилю—Нильсену

      2.1.3. Диагностические признаки трофозоитов и цист кишечных простейших

      2.1.4. Экспресс тест для определения антигенов лямблий и криптоспоридий в пробах кала

   2.2. Лабораторная диагностика трипаносомозов

      2.2.1. Метод исследования нативных препаратов крови

         Метод исследования толстой капли

      2.2.2. Метод исследования неокрашенных мазков из лимфатических узлов

      2.2.3. Метод исследования неокрашенных мазков из спинно-мозговой жидкости

      2.2.4. Диагностические признаки возбудителей трипаносомоза

   2.3. Лабораторная диагностика лейшманиозов

      Отбор проб биологического материала на наличие возбудителей кожного лейшманиоза

      Отбор проб биологического материала на наличие возбудителей висцерального лейшманиоза

      2.3.1. Микроскопические методы исследований на лейшманиозы

      2.3.2. Посев возбудителей лейшманиозов на питательную среду с последующим культивированием

         Приготовление питательной среды

      2.3.3. Диагностические признаки возбудителей лейшманиозов

Раздел 3. Автоматизированные системы микроскопирования с программным модулем "Паразитология"

Раздел 4. Лабораторная диагностика паразитозов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР-диагностика)

Введение

   Аппаратура, материалы, лабораторная посуда, реактивы

   4.1. Подготовка к анализу

      4.1.1. Проведение анализа. Выделение ДНК. Метод выделения ДНК с помощью набора Diatom DNA Prep 100/200

      Амплификация

      4.1.2. Проведение электрофореза в агарозном геле

   4.2. Полимеразная цепная реакция и рестрикция (ПЦР) на идентификацию возбудителей лейшманиозов

      Аппаратура, материалы, лабораторная посуда, реактивы для ПЦР-исследования и рестрикции

      4.2.1. Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР)

      Выделение ДНК

      4.2.2. Выделение ДНК коммерческим набором

      Амплификация

      Проведение электрофореза в агарозном геле

      Рестрикционный анализ

Приложение 1. Информативность микроскопических методов исследований

Приложение 2. Морфологическое строение яиц гельминтов

Приложение 3. Морфологическое строение зрелых члеников цестод

Приложение 4. Морфологическое строение личинок нематод

Приложение 5. Морфологическое строение кишечных простейших

Приложение 6. Морфологическое строение микрофилярий

Приложение 7. Диагностические признаки взрослых дирофилярий

Приложение 8. Реагенты, растворы и методы их приготовления

Показать даты введения Admin

С МУК 4.2.3145-13 покупают: МУК 4.2.3222-14, СП 3.2.3110-13

Страница 1

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

Страница 2

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов

Методические указания МУ 4.2.3145-13

Страница 3

ББК 51.9 Л12

Л12 Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов: Методические указания.—М.: ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора.— 154 с.

ISBN 978-5-7508-1296-7

1.    Разработаны Институтом медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е. И. Марциновского ГБОУ ВПО Первого Московского государственного медицинского университета (МГМУ) им. И. М. Сеченова (В. П. Сергиев, М. Н. Лебедева, Ф. П. Коваленко, Е. Н. Морозов, Е. Н. По-нировский, Т. В. Продеус, Л. В. Федянина, А. А. Фролова, Е. Н. Жирсн-кина, К. Ю. Кузнецова, И. В. Кухалева, В. М. Ракова, Н. А. ТУрбабииа,

Е. А. Черникова, В. Д. Завойкин, О. П. Зеля, Л. Ф. Морозова, Г. Л. Плющева, Н. Р. Цаава); Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Т М. Гузеева); ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии* (Т. Г. Сыскова); кафедрой факультетской хирургии № 1 Первого МГМУ им. И. М. Сеченова (Г. X. Мусаев); отделом хирургии печени НИЦ Первого МГМУ им. И. М. Сеченова (Г. Г. Ахаладзе); ФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» Роспотребнадзора (Т. И. Твердохлебова, Ю. И. Васерин, Е. П. Хроме н ко ва, С. А. Нагорный, Л. Л. Димидова, А. В. Упырев, Л. В. Шишханова, Е. Ю. Криворо-това, А. С. Кожухина); Военно-медицинской академией им. С. М. Кирова (С. С. Козлов); НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи (Д. Б. Гончаров); Российским научным центром хирургии им. Б. В. Петровского РАМН (Г. А Шатверян); кафедрой молекулярной биологии МГУ им. М. В. Ломоносова (А А. Колесников); кафедрой тропических и паразитарных болезней Российской медицинской академии последипломного образования (А. Е. Беляев); Управлением Роспотребнадзора по городу Москве (Т. Н. Иванова); ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве* (Н. И. Тимошенко).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 29 октября 2013 г. № 3).

3.    Утверждены врио руководителя Федеральной службы но надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А. Ю. Поповой 26 ноября 2013 г.

4.    Введены взамен МУК 4.2.735—99 «Паразитологические методы диагностики гельминтозов и протозоозов*.

ББК 51.9

© Роспотребнадзор, 2014

© Федеральный центр гигиены

и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014

Страница 4

МУК 4.2.3145—13

Содержание

Область применения...............................7

Раздел 1. Лабораторная диагностика......................7

1.1. Лабораторная диагностика кишечных гельминтозов..........7

Отбор проб и условия доставки биологического материала

в лабораторию для паразитологического исследования.....8

Отбор проб кала.............................8

Отбор дуоденального содержимого (желчь)............8

Отбор проб мокроты и лаважной жидкости............8

Отбор проб мочи............................9

1.1.1.    Методы исследования кала на яйца гельминтов...........9

1.1.1.1.    Макроскопические методы......................9

1.1.1.2.    Микроскопические методы.....................10

1.1.1.2.1.    Метод толстого мазка под целлофаном по Като и Миура . . 10

1.1.1.2.2.    Методы седиментации.......................11

Метод формалин-эфирной или уксусной седиментации. ... 11

1.1.1.2.3.    Модификация метода седиментации с применением

одноразовых концентраторов «PARASEP*............13

1.1.1.2.4.    Модификация метода седиментации с применением

минисистемы «Real*.........................15

1.1.1.2.5.    Методы исследования кала с применением

флотационных растворов......................16

1.1.1.3.    Методы исследования кала на личинки гельминтов......17

Метод Бермана............................17

Метод Бермана в модификации Супряги.............18

Метод Харада-Мори в модификации Маруашвили (метод культивирования личинок на фильтровальной бумаге) .... 19

1.1.1.4.    Методы исследования перианальных отпечатков........20

Метод исследования перианального отпечатка

с применением липкой ленты по Грэхэму............20

Метод исследования перианального отпечатка с применением стеклянных глазных палочек с клеевым слоем по Рабиновичу........................21

1.1.1.6. Методы исследования желчи дуоденального содержимого

(желчи, мокроты, лаважной жидкости и мочи).........22

3

Страница 5

МУК 4.2.3145—13

Методы исследования дуоденального содержимого

(желчи).................................22

Методы исследования желчи с центрифугированием.....22

Методы исследования мокроты и лаважной жидкости.....23

Методы исследования нативного мазка мокроты........23

Методы исследования нативного мазка мокроты

и лаважной жидкости с центрифугированием..........23

Методы исследования мочи.....................24

Метод концентрации мочи.....................24

Метод фильтрации мочи......................24

1.1.2. Диагностические признаки возбудителей гельминтозов.....24

1.2.    Лабораторная диагностика эхинококкозов...............31

Морфологические методы исследования ларвоцист

при цистном и альвеолярном эхинококкозах..........31

1.2.1.    Лабораторная диагностика цистного эхинококкоза........31

Методы исследования нативных и окрашенных мазков .... 31

1.2.2.    Лабораторная диагностика альвеолярного эхинококкоза . . . . 34

1.2.3.    Метод исследования жизнеспособности паразита

/л vivo (биопроба)...........................42

1.3.    Лабораторная диагностика трихинеллеза................45

1.3.1.    Метод трихинеллосколии.......................46

Компрессорная трихинеллоскопия................46

1.3.2.    Методы переваривания в искусственном желудочном соке. . .47

Классический метод переваривания по Березанцеву Ю. А. . . 47 Ускоренный метод переваривания по Владимировой П. А.. . 48

1.4.    Лабораторная диагностика филяриозов.................48

1.4.1.    Лабораторная диагностика онхоцеркоза..............49

Метод исследования необогащенного нативного препарата . 50 Метод исследования обогащенного препарата.........50

1.4.2.    Лабораторная диагностика филяриозов лимфатической

системы (вухериоза и бругиоза)..................51

Метод исследования нативного мазка крови из пальца .... 52 Микрокапиллярный метод обнаружения живых

микрофилярий по Супряге.....................52

Методы исследования венозной крови..............53

Метод концентрации микрофилярий в осадке по Кнотту ... 53 Микроскопическое исследование препаратов крови......55

1.4.3.    Методы диагностики подкожного дирофиляриоза........56

1.4.4.    Диагностика сердечно-легочного дирофиляриоза.........58

Раздел 2. Лабораторная диагностика протозоозов.............59

2.1. Лабораторная диагностика протозойных инфекций кишечника . . 59

2.1.1. Микроскопические методы исследования кала

на простейшие кишечника..........................59

Страница 6

МУК 4.2.3145-13

Основные методы исследования кала на простейшие кишечника...............................59

2.1.2.    Специальные методы исследования кала на простейшие

кишечника..............................60

Метод приготовления влажного мазка нативного кала с физиологическим раствором, растворами Люголя

и метиленового синего........................61

Методы приготовления постоянных окрашенных

препаратов кала............................62

Метод окрашивания трихромовой краской...........62

Модифицированный метод окрашивания

по Цилю-Нильсену.........................64

2.1.3.    Диагностические признаки трофозоитов

и цист кишечных простейших...................65

2.1.4.    Экспресс тест для определения антигенов

лямблий и криптоспоридий в пробах кала...........72

2.2.    Лабораторная диагностика трипаносомозов..............74

2.2.1.    Метод исследования нативных препаратов крови........75

Метод исследования толстой капли................75

2.2.2.    Метод исследования неокрашенных мазков

из лимфатических узлов.......................76

2.2.3.    Метод исследования неокрашенных мазков

из спинно-мозговой жидкости...................76

2.2.4.    Диагностические признаки возбудителей

трипаносомоза............................77

2.3.    Лабораторная диагностика лейшманиозов...............77

Отбор проб биологического материала на наличие

возбудителей кожного лейшманиоза...............78

Отбор проб биологического материала на наличие возбудителей висцерального лейшманиоза............79

2.3.1.    Микроскопические методы исследований на лейшманиозы . . 79

2.3.2.    Посев возбудителей лейшманиозов на питательную

среду с последующим культивированием............81

Приготовление питательной среды....... 81

2.3.3.    Диагностические признаки возбудителей лейшманиозов .... 83 Раздел 3. Автоматизированные системы микроскопирования

с программным модулем «Паразитология»...............83

Раздел 4. Лабораторная диагностика паразитозов методом

полимеразной цепной реакции (ПЦР-диагностика).........86

Введение.....................................86

Аппаратура, материалы, лабораторная посуда, реактивы ... 86

4.1. Подготовка к анализу...........................89

5

Страница 7

МУК 4.2.3145-13

4.1.1.    Проведение анализа. Выделение ДНК. Метод

выделения ДНК с помощью набора Diatom DNA Prep 100/200 . . . . 92 Амплификация............................93

4.1.2.    Проведение электрофореза в агарозном геле............95

4.2. Полимеразная цепная реакция и рестрикция (ПЦР)

на идентификацию возбудителей лейшманиозов...........96

Аппаратура, материалы, лабораторная посуда, реактивы для ПЦР-исследования и рестрикции..............96

4.2.1.    Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) ......101

ВыделениеДНК..........................101

4.2.2.    Выделение ДНК коммерческим набором.............103

Амплификация...........................105

Проведение электрофореза в агарозном геле..........107

Рестрикционный анализ......................108

Приложение 1. Информативность микроскопических методов

исследований...............................111

Приложение 2. Морфологическое строение яиц гельминтов......113

Приложение 3. Морфологическое строение зрелых члеников цестод . 123

Приложение 4. Морфологическое строение личинок нематод.....126

Приложение 5. Морфологическое строение кишечных простейших . 128

Приложение 6. Морфологическое строение микрофилярий......141

Приложение 7. Диагностические признаки взрослых дирофилярий. . 146 При/южение 3. Реагенты, растворы и методы их приготовления . ... 148

6

Страница 8

МУК 4.2.3145-13

УТВЕРЖДАЮ

Врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

А. Ю. Попова

26 ноября 2013 г.

Дата введения: с момента утверждения

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов

Методические указания МУК 4.2.3145-13

Область применения

1.    Методические указания (далее — МУК) устанавливают порядок применения метода отбора проб и методов лабораторных исследований биологического материала от людей с целью обнаружения возбудителей гельминтозов и протозоозов, определения их видовой принадлежности.

2.    Методические указания предназначены для специалистов паразитологических, микробиологических лабораторий санитарно-эпидемиологической службы, медицинских организаций независимо от их организационно-правовых форм, индивидуальных предпринимателей, а также научно-исследовательских институтов, осуществляющих лабораторную диагностику гельминтозов и протозоозов.

Раздел 1. Лабораторная диагностика

1.1. Лабораторная диагностика кишечных гельминтозов

Гельминты человека относятся преимущественно к двум типам червей: типу плоских червей Plathelminthes и типу круглых червей Nemathelminthes. Тип плоских червей, поражающих человека, включают два класса: ленточные черви — Cestoda и сосальщики — Trematoda. Тип круглых червей включает в себя один класс, имеющий медицинское значение, собственно класс Nematoda.

7

Страница 9

МУК 4.2.3145—13

Большинство гельминтозов можно диагностировать прямыми методами, то есть по обнаружению в биологическом материале (кал, моча, мокрота, дуоденальное содержимое и пр.) гельминтов на разных стадиях развития (взрослых особей, яиц или личинок). Для этого используют макроскопические и микроскопические методы диагностики.

Отбор проб и условия доставки биологического материала в лабораторию для паразитологического исследования Материалом для лабораторных паразитологических исследований на гельминтозы служит различный биологический материал: кал, кровь, моча, мокрота, лаважная жидкость, дуоденальное содержимое, содержимое кист, биопсионный или постоперационный материал, гистологические препараты внутренних органов и тканей и другой.

Отбор проб кала Кал после дефекации отбирают из разных участков в количестве не менее 50 г.

Пробу помещают в чистую сухую, стеклянную или пластмассовую посуду с крышками.

Проба кала доставляется в лабораторию и исследуется в день дефекации.

При невозможности исследования пробы кала сразу после дефекации или в день поступления материала в лабораторию, пробу кала хранят при температуре от 0 до 4 ‘С не более суток или собирают в консервант (прилож. 8).

Отбор дуоденального содержимого (желчь)

Материал доставляется в лабораторию в чистых химических или центрифужных пробирках сразу после зондирования пациента натощак.

Доставляют все три фракции (порции «А», «В», «С») и исследуют сразу после поступления в лабораторию.

Порцию «А» доставляют для исследования на наличие возбудителей стропгилоидоза, трихостронгилоидоза, анкилостомидоза.

Порции «В* и «С* доставляют для исследования на яйца гельминтов, паразитирующих в протоках печени и желчном пузыре.

Отбор проб мокроты и лаважной жидкости В лабораторию доставляется мокрота, выделенная при откашливании (не слюна и не слизь с носоглотки), в стерильной посуде с крышками. Проба мокроты исследуется сразу после поступления в лабораторию.

8

Страница 10

МУК 4.2.3145-13

Лаважная жидкость в лабораторию доставляется в стерильной посуде и исследуется в день доставки.

Отбор проб мочи В лабораторию доставляется моча, собранная между 10 ч утра и 14 ч дня, или все порции суточной мочи; желательно собрать мочу после физической нагрузки (например, 20—30 приседаний).

1.1.1. Методы исследования кала на яйца гельминтов /. /. 1.1. Макроскопические методы

Макроскопические методы служат для обнаружения в кале целых половозрелых гельминтов или их фрагментов невооруженным глазом или с помощью ручной лупы и/или стереоскопа.

На поверхности кала после дефекации можно видеть активно ползающих остриц; иногда выделяются с калом аскариды; у больных дифиллоботриозом могут выделяться обрывки стробилы лентеца (в виде «лапши»), а у инвазированных тениидами (свиной или бычий цепень) с калом часто отходят членики гельминтов.

Необходимые реактивы и оборудование Чашки Петри Черная бумага Пинцеты

Препаровальные иглы

Предметные стекла большие (6 х 10; 8 х 12 см)

Лупа, микроскоп и бинокулярный стереоскопический микроскоп типа МБС

Подготовка к исследованию

1)    Извлекать пинцетом или препаровальной иглой все подозрительные частицы и крупные образования на отдельное предметное стекло или чашку Петри.

2)    Образования, подозрительные на фрагменты гельминтов, рассматривать под микроскопом МБС или подлупой между двумя предметными стеклами.

3)    Мелких гельминтов рассматривать в капле глицерина или физиологического раствора под микроскопом при увеличении: окуляр х7 или х10, объектив х8 или х10.

4)    Членики ленточных гельминтов поместить на предметное стекло, подсушить, закрыть другим предметным стеклом, слегка сдавить и рассмотреть строение матки.

5)    Микроскопия всех визуально обнаруженных в кале паразитов или фрагментов обязательна для уточнения морфологических особенностей и идентификации паразита.

9