Определение фталофоса в молоке и мясе
тонкослойной хроматографией
Фталофос (имидан) - 0,0-диметил-(N-фтальимидометил)
дитиофосфат. Химически чистый препарат - белое кристаллическое вещество с
температурой плавления 72 - 72,7 °С. В 1 л воды при 25 °С растворяется около 25
мг препарата. Он хорошо растворим в ацетоне метилэтилкетоне, циклогексаноне и
других, органических растворителях. Исключение составляют алифатические
углеводороды, в которых препарат труднорастворим. Фталофос выпускается в виде
20 %-ного эмульгирующегося концентрата, 50 %-ного смачивающегося порошка и 10
%-ного гранулированного препарата.
Принцип метода. Метод* основан на извлечении
препарата из пробы ацетоном и последующем хроматографировании в тонком слое
окиси алюминия. Подвижным растрорителем служит смесь гексана с метанолом
(19:7). Проявляют фталофос раствором азотно-кислого серебра, которое при
взаимодействии с продуктами гидролиза препарата щелочью дает темно-серые пятна
на белом фоне.
________
*К.Ф.
Заболотный, В.К. Метелица, А.А. Непоклонов (ВНИИВС).
Количественное определение фталофоса проводят путем
сравнения интенсивности окраски и размеров пятен проб со стандартной шкалой.
Чувствительность метода 1 мкг в пробе, что составляет 0,1 мг/кг мяса и 0,1 мг/л
молока.
Реактивы
и растворы
Ацетон х.ч
Хлороформ х.ч.
Уксусная кислота ледяная
20 %-ный водный раствор едкого натра
Метиловый спирт
1 %-ный водный раствор азотно-кислого серебра
Окись алюминия для хроматографии
Гипс медицинский
Фталофос х.ч.
Приборы
и посуда
Хромотографическая камера (стеклянный цилиндрический сосуд с
притертой крышкой)
Гомогенизатор для измельчения тканей
Центрифуга (8 тыс. об/мин)
Делительные воронки на 150 мл
Бюксы стеклянные на 50 - 100 мл
Пульверизаторы
Пипетки разные
Фильтры бумажные обеззоленные
Пластинки фотографические 13×18 см
Стеклянный или металлический валик с ограничительными
кольцами для нанесения слоя окиси алюминия с гипсом.
Приготовление
пластинок
В качестве сорбента используют смесь, состоящую из 98 массовых
частей окиси алюминия и 7 массовых частей медицинского гипса. На матовую
поверхность стеклянной пластинки насыпают сорбент и разравнивают его валиком с
ограничительными кольцами по всей поверхности ровным слоем толщиной 0,2 мм. Для
закрепления слоя пластинку выдерживают 30 - 40 с над водяным паром, затем
орошают из пульверизатора 5 %-ным водным раствором уксусной кислоты до полного
насыщения сорбента, что отчетливо видно по образованию глянца. Пластинки сушат
в горизонтальном положении при комнатной температуре 18 ч, после чего они
готовы к употреблению.
Ход анализа. Пробу мяса массой 10 г заливают 2 - 3 мл
ацетона, гомогенизируют 1 - 2 мин при 1000 об/мин. Гомогенат заливают 20 мл
ацетона, оставляют на 1 ч при комнатой температуре, после чего экстракт
центрифугируют 15 мин при 8000 об/мин. Водно-ацетоновый слой фильтруют через
бумажный фильтр делительную воронку, добавляют 20 мл хлороформа и перемешивают
вращением и легким покачиванием воронки. После расслоения нижний
ацетоно-хлороформный слой отделяют и фильтруют через бумажный фильтр в
круглодонную колбу вместимостью 30 мл. Экстракт выпаривают досуха на водяной
бане или ротационном испарителе.
При определении препарата в молоке к 10 мл пробы добавляют
20 мл ацетона. Дальнейший ход анализа молока такой же, как для мяса. После
выпаривания хлороформа сухой остаток растворяют в 0,5 мл ацетона и наносят на
пластинку. Пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой
гексан-метанол (19:1). Растворители наливают в камеру за 2 ч до хроматографирования.
После того как фронт растворителя поднимается на высоту 10
см, пластинку вынимают из камеры и подсушивают 10 - 15 мин на воздухе, чтобы
испарились растворители. Затем пластинку опрыскивают 20 %-ным раствором едкого
натра до насыщения, а через 10 мин - 1 %-ным раствором азотно-кислого серебра.
Фталофос проявляется в виде темно-серых пятен на белом фоне с Rf = 0,62.
Количественное определение фталофоса проводят путем
сравнения интенсивности окраски и размеров пятен проб и стандартных растворов,
которые хроматографируют одновременно.
Стандартную шкалу готовят следующим образом. Растворы
фталофоса в ацетоне (1, 2, 5, 10 и 20 мкг препарата и 0,1 мл) наносят на
хроматографическую пластинку, разгоняют и проявляют. Размеры пятен измеряют и
сравнивают визуально. При расчете количества фталофоса учитывают, что из молока
и мяса экстрагируется в среднем 50 % препарата.
Расчет. Содержание
препарата вычисляют по формуле;
Х - количество препарата в
продукте, мг/кг;
С - количество препарата, найденное в пробе, мкг;
Р - масса пробы, г,
2 - коэффициент экстракции.
