ГОСУДАРСТВЕННОЕ

САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ РОССИЙСКОЙ ФВДЕРАЦИИ

Рбормик_

Щш МЕТОДИЧЕСКИХ ДОКУМЕНТОВ,

НЕОБХОДИМЫХ ДЛЯ ОБЕСПЕЧЕНИЯ ПРИМЕНЕНИЯ ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА ОТ 12.06.08 №88-ФЗ

«Технический регламент на молоко и молочную продукцию»

Часть 9

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

Сборник

методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию»

Часть 9

ББК 51.23 С23

С23 Сборник методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию»:.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009.—72 с.

ISBN 5—7508—0771—1

В сборник включены методические документы, содержащие правила и методы исследований (испытаний) и измерений, а также правила отбора образцов для проведения исследований (испытаний) и измерений, в соответствии с постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г. Г. Онищенко от 08.12.2008 № 67.

ББК 51.23

Технический редактор Г. И. Климова Подписано в печать 14.05.09 Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер, д 18/20

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тсл./факс 952-50-89

ISBN 5—7508--0771 — 1

© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадюра, 2009

Содержание

Энзиматическое агар-диффузное определение фосфорорганических

инсектицидов в продуктах животного происхождения..........................................4

Определение полихлорпииена и полихлоркамфена в воздухе, воде, почве, картофеле и свекле, мясе, молоке, тканях внутренних

органов животных, крови, моче тонкослойной хроматографией...........................8

Определение севина в молоке и молочных продуктах

газожидкостной хроматографией...........................................................................17

Определение фосфамида в молоке и тканях животных

газожидкостной хроматографией...........................................................................20

Определение фталофоса в молоке и мясе тонкослойной

хроматографией.......................................................................................................22

Методические указания по определению метилнитрофоса

в мясе, яйцах, молоке методом газожидкостной хроматографии........................25

Методические указания по определению абата (дифоса) в мясе

и молоке методом хроматографии в тонком слое.................................................27

Методические указания по определению кельтана в молоке

газохроматографическим методом.........................................................................30

Методические указания по определению фоксима (валексона) в

молоке и тканях животных методом газожидкостной хроматографии..............32

Газоадсорбционный метод определения хлорофоса

в молоке, органах и тканях животных и яйцах кур...............................................34

Определение фозалона в молоке и тканях животных, граве, свекле,

картофеле и комбикорме с помощью тонкослойной хроматографии.................37

Определение пропоксура и фенеткарба в молоке и мясе методом

тонкослойной хроматографии................................................................................41

Газохроматографический метод определения валексона в молоке,

органах и тканях животных....................................................................................45

Хроматографические методы определения остаточных количеств 2,4-дихлорфсноксиуксусной кислоты (2,4-Д) в воде, почве, фураже,

продуктах пизания растительного и животного происхождения........................48

Методические указания по определению оксамата в молоке и тканях

животных методом газожидкостной хроматографии..........................................59

Методические указания по определению содержания общей ртути в мясе, мясопродуктах, яйцах, рыбе, молочных продуктах, шоколаде, почве колориметрическим способом или при помощи тонкослойной хроматографии.........................................................................................................62

3

Определение пропоксура и фенеткарба в молоке и мясе методом тонкослойной хроматографии¹

Характеристика препаратов

Пропоксур (байгон, больфо, блаттанекс, Байер 39007) - 2 -изопро-поксилфснил-N- метил - карбамат.

Химически чистый пропоксур - белое кристаллическое вещество со слабым запахом, температурой плавления 91,5 °С, давлением пара 120°С 1 10~² мм рт. ст., хорошо растворяющееся в органических растворителях и слабо в воде - около 1 %.

Пропоксур применяется для борьбы с насекомыми и клещами - эктопаразитами животных, с вредителями растений, запасов и бытовыми насекомыми. Выпускается в виде 96,1 % технического продукта, 20 %-ного эмульгирующегося концентрата, 50 %-ного смачивающегося порошка, 1 %-ного дуста и некоторых других форм.

О -С -N Н -С Н

О

Фенеткарб - белое кристаллическое вещество без запаха, с температурой плавления 97 °С, хорошо растворяющееся в ацетоне, хлороформе, бензоле, эфире и этаноле, и слабо (0,01 %) - в воде.

Фенеткарб применяется для борьбы с комарами, мухами, куриными и иксодовыми клещами. Выпускается в виде 20 %-ного эмульгирующегося концентрата, 60 %-ного смачивающегося порошка и 30 %-ного раствора для ультрамалообъемного опрыскивания.

Принцип метода Метод основан на экстрагировании пропоксура и фенеткарба из исследуемых проб ацетоном и активированным углем, хроматографическом разделении и на пластинах Силуфол в системе бензол-метил-этилкетон, гидролизе препаратов щелочью и проявлении диазотирован-ным паранитроанилином. При этом пропоксур проявляется в виде малинового пятна с Rf 0,46—0,50, а фенеткарб - в виде сиреневого пятна с Rf 0,56—0,60. Количественное определение пропоксура и фенеткарба проводят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен со шкалой стандартов. Процент экстракции пропоксура и фенеткарба из молока - 100 %, из органов и тканей животных - 90 %, чувствительность метода - 0,01 мг/кг.

Реактивы и растворы

Азотно-кислый натрий хч или чда.

Ацетон ОСЧ

Ацетон, 80 %-ный водный раствор Активированный уголь МРТУ 6-09-1049-64 Бензол хч

Метилэтилкетон хч Метиловый спирт 96 %, ректификат Н - Бутиловый спирт хч Едкий калий хч

Соляная кислота, 0,1 и раствор

Паранитроанилин перекристаллизованный из горячей воды Пропоксур 96,1 %-ный Фенеткарб 95 %-ный

Приборы и оборудование Хроматографическая камера Гомогенезатор для измельчения тканей Центрифуга на 5—6 тыс. об/мин.

Ротационный испаритель Бюксы на 50 мл

Микропипетки или микрошприцы на 0,1 мл

Пульверизаторы

Пластинки силуфола

Фен

Вентилятор настольный 42

Воронки стеклянные

Мерные колбы для приготовления стандартных растворов пропоксура и фенеткарба.

Приготовление реактивов

Реактив № 1 1,5 н КОН в смеси бутилового и метилового спиртов, взятых 1 : 1 (8,4 г КОН растворяют в 100 мл смеси 1 : 1 бутилового и метилового спиртов).

Реактив № 2 а) 0,1 %-ный раствор паранитроанилина в 0,1 н растворе соляной кислоты, б) 4 %-ный раствор нитрата натрия.

Растворы а) и б) перед употреблением смешивают в соотношении 10: 1. Готовят реактив № 1, растворы а) и б) впрок и хранят в холодильнике при + 4 °С.

Подвижная фаза для разгонки - бензол - метилэтилкетон 3:1. Стандартные 0,001 %-ные ацетоновые растворы пропоксура и фенеткарба (1 мкг в 0,1 мл).

Ход анализа

Экстракция. 20 г исследуемой ткани гомогенизируют, заливают 15 мл 80 %-ного водного раствора ацетона, перемешивают и ставят на 1 час в морозильную камеру холодильника. Экстракт отфильтровывают через бумажный обеззоленный филыр в стеклянный бюкс, добавляют в гомогенат еще 5 мл 80 %-ного водного раствора ацетона и фильтруют его в тот же бюкс. К фильтрату добавляют 20 мл дистиллированной воды и выпаривают ацетон в ротационном испарителе или в вытяжном шкафу под струей воздуха. Затем переносят экстракт в центрифужную пробирку, добавляют 0,5 г мелко измельченного активированного угля, перемешивают стеклянной палочкой, центрифугируют при 5 тыс. оборотах в течение 15 минут и сливают жидкую часть. К осадку приливают 10 мл ацетона, добавляют 0,1 г безводного серно-кислого натрия для удаления остатков воды и перемешивают. После оседания угля ацетон сливают в чистый бюкс и выпаривают в ротационном испарителе или вытяжном шкафу под током воздуха.

Для экстракции пропоксура и фенеткарба из молока, к 20 мл пробы добавляют 0,5 г мелко измельченного угля, перемешивают в течение 2—3 минут и центрифугируют 15 минут при 5—6 тыс. оборотах. После этого сливают молоко и удаляют ватой остаток жировой пленки со стенок пробирки, к осадку добавляют 0,1 г безводного серно-кислого на-

трия, 10 мл ацетона и перемешивают стеклянной палочкой. Затем дают углю осесть, сливают надосадочную жидкость в чистый бюкс и выпаривают в ротационном испарителе или в вытяжном шкафу под током воздуха. Сухой остаток растворяют 0,2 мл ацетона и наносят из микрошприца или микропипетки на хроматографическую пластинку по общепринятым правилам тонкослойной хроматографии. Смывание сухого остатка ацетоном проводят 2—3 раза и каждый раз наносят его в одну точку на хроматографическую пластинку. Диаметр нанесенных пятен не должен превышать 2 мм.

Затем пластинку с нанесенными пробами помещают в хроматографическую камеру системой бензол - метилэтилкетон 3:1, выдержанную в закрытом состоянии в течение 1—2 часов.

Как только фронт растворителей поднимется на высоту 10—12 см от линии старта, пластинку вынимают из камеры и подсушивают на воздухе в течение 10—12 минут.

Чтобы проявить хроматограмму, пластинку опрыскивают из пульверизатора реактивом № 1, через 10—20 минут пластинку подогревают над пламенем горелки или над электроплиткой, дают остыть и опрыскивают реактивом № 2.

Если в исследуемых пробах имелся пропоксур, на хроматограмме проявляются пятна малинового цвета с Rf 0,46—0,50. Фенеткарб проявляется в виде пятен сиреневого цвета Rf 0,56—0,60. Количественные определения пропоксура и фенеткарба проводят путем сравнения пятен со шкалой стандартов, полученной при нанесении на хроматографическую пластинку, разгонке и проявлении 0,5; 1,62; 5; 10; 20 мкг препарата.

Расчет количества препарата проводят по формуле:

AS₂ ” BS_l

X - содержание препарата в пробе, мкг/кг;

А - содержание препарата в стандарте, мкг/кг; В - навеска исследуемой пробы, г, мл;

$2 - площадь пятна пробы, мм²;

SI - площадь пятна стандартов, мм².

44

1

Разработан И. А. Антоновой. Московская ордена Трудового Красного Знамени ветеринарная академия им К. И. Скрябина Утвержден 20 декабря,    1565—76.

41