Федеральная служба но надзору о сфере защиты нраи потребителей и благополучия челонска

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний

Выпуск 2 Часть 3 МУК 4.1.1221—4.1.1223—03

ББК 51.23+51.21 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2005.—30 с.—Вып. 2.—Ч. 3.

1.    Сборник подготовлен: Федеральным научным центром пн мены им. Ф. Ф. Орисматта (чл.-корр. РАМН, ироф. В. Н. Ракитский. проф. Т. В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К. А. Тимирязева (проф. В. А. Калинин, к. хим. и. Довшлевич А. В.): при участии Департамент гос-санэпиднадэора Минздрава России (А. II. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2.    Методические указания рекомендованы к >тверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 16 марта 2003 г.

4.    Введены с I июля 2003 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.23+51.21

© Роспотребнадзор, 2005 © Федеральным центр гигиены и

эн идем полон н Роспотребнадзора, 2005

МУК 4.1.1222—03

примерно 1 мл. Переносят экстракт в мерную пробирку со шлифом. Стенки колб обмывают 0.7—0.8 мл гексана, который также переносят в пробирку. Доводят объем раствора гексана в мерной пробирке точно до 2 мл и хроматографируют по п. 2.7.

2.7. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф, снабженный термоионным детектором (PYE-UNICAM серин 200. Цвет серии 500 или аналогичные).

Основной вариант.

Носитель - хромосорб 750 (100—120 мсш). Неподвижная фаза -5 % PS-400.

Колонка стеклянная, длиной 1.8 м и внутренним диаметром 2 мм.

Газ-носитель - гелий или азот.

Скорость потока: гелий (азот) - 25 см³/мин. водород - 35 c.m Vmhh: воздух - 300 см³/мин.

Температу ра: термостата колонок 190 °С. термостата испарителя 250 °С: термостата детектора 300 °С.

Время удерживания кломазона 3.6 ± 0.1 мин.

Альтернативный вариант.

Носитель - хромосорб 750 (100—120 мсш). Неподвижная фаза -3 %OV-17.

Колонка стеклянная, длиной 2 м и внутренним диаметром 2 мм.

Скорость потока: гелий (азот) - 20 емтмин; водород - ЗОсм^мин: воздух - 300 см³/мин. Температу ра: термостата колонок 190: термостата испарителя 250 °С: термостата детектора 300 °С.

При этих условиях хроматографирования время удерживания кломазона 5.4 ± 0.2 мин.

Вводимый в хроматограф объем пробы - 2 мкл.

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией кломазона 2.5 мкг/мл разбавляют.

2.8. Обработка результатов анали за Содержание кломазона в пробах (А)) вычисляют по формуле:

c-s.-v.-K

s₂-v₂a

С - концентрация стандартного раствора кломазона. мкг/мл;

21

V\ - объем анализируемой пробы, подготовленной для хроматографического анализа, мл;

V₂ - объем раствора анализируемой пробы, вводимого в хроматограф. мкл;

V₃ - объем стандартного раствора, вводимого в хроматограф, мкл;

А - масса пробы, отобранной для анализа, г;

S\ - площадь пика кломазона в пробе (мв-с или мм“) или высота пика (мв или мм);

S₂ - площадь пика кломазона в стандартном растворе (мв-с или мм²) или высота пика (мв или мм).

3.    Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать вес требования безопасности, рекомендуемые при работе с растворителями, токсичными и легковоспламеняющимися веществами, а также правила устройства, техники безопасности. производственной санитарии и личной гигиены при работе в химических лабораториях.

4.    Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осущсстрвлястся в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

Долженко В. И. (Всероссийский НИИ защиты растений, г. Санкт-Пстербург-Пушкин), Басова Ю. Г.. Сабуров Г. Г., Маслаков С. Е. (Санкт-Петербургский НИИ лесного хозяйства, г. Санкт-Петербург).

22

МУК 4.1.1221—1223—03

Содержание

Измерение концентраций клстодима и его основных метаболитов клетодим сульфона и клего;шм сульфоксида в воздухе рабочей юны методом высокоэффективной жи;и<ос пюй хроматографии:

МУК 4.1.1221—03......................................................................................................4

Измерение концентраций кломазона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы, корнеплодах моркови и клубнях карго ([кия методом газожидкостной хроматографии (дополнение к № 5(Х)6-89):

МУК 4.1.1222—03....................................................................................................14

Определение остаточных количеств метрибузина в клубнях картофеля методом газожи;осоепюй хрома гофафии:

МУК 4.1.1223—03....................................................................................................23

3

УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

11ервый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г. Г. Онищенко

16 марта 2003 г.

Дата введения - 1 июля 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерения концентраций кломазона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы, корнеплодах моркови и клубнях картофеля методом газожидкостной хроматографии (дополнение к № 5006-89 от 8 июня 1989 г.)

Методические указания _МУК    4.1.1222—03_

1. Вводная часть

Фирма производитель: ФМС ЕВРОПА Н.В.

Торговое название: КОММАНД. ВР.

Действующее вещество: кломазон (ISO).

Действующее вещество:    2-(2-.\лоробснзил)-4.4-диметил-1.2-

оксазолидин-3-он (ШРАС).

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C|2H_uC1NO_:.

Молекулярная масса: 239.7.

Вязкая светло-коричневая жидкость с рыбным запахом. Плотность 1.192 при 20 °С.

Давление паров при 25 °С 19.2 мПа.

14

МУК 4.1.1222—03

Растворимость в воде 1.1 г/л.

Растворимость в органических растворителях (г/л. 20 °С): хорошо растворим в ацетоне, ацетонитриле, хлороформе, цнкогексаноне. гексане. гептане, хлористом метилене, метаноле, димстилформамидс. толуоле. диоксане и других органических растворителях.

Кломазон устойчив при хранении. При комнатной температуре может храниться бет потерь в течение года, при 50 °С - в течение 3 месяцев. В водных растворах период полураспада при солнечном свете более 30 дней.

Гигиенические нормативы. ВМДУ моркови, свеклы сахарной -0.1 мг/кг.

Область применения препарата: Селективный системный гербицид. используемый для борьбы со злаковыми и некоторыми двудольными сорными растениями на посевах сои при довсходовом или предпосевном внесении с заделкой в почву, а также в смеси с другими гербицидами применяется на других культурах - рапсе, картофеле, бобовых. хлопчатнике.

2. Методика измерения концентраций кломазона в ботве и

корнеплодах сахарной свеклы, корнеплодах моркови н клубнях картофеля методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Иринipm методики

Методика основана на определении кломазона с помощью газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после извлечения гербицида из проб гексаном, очистке экстрактов на колонке с флорисилом и концентрировании.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых у словиях метод специфичен в прису тствии пестицидов. применяемых для борьбы с сорной растительностью, защиты овощных и масличных культу р от вредителей и болезней (хлор- и (|юс-форорганичсские пестициды, амиды, тио- и дитиокарбаматы. синтетические пирстроиды). Избирательность метода обеспечивается очисткой экстрактов анализируемых проб, а также сочетанием селективного детектора и условиями хроматографирования.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Метрологическая характеристика метода представлена в табл.

15

Таблица Метрологическая характеристика метода

Анализируемый объект Предел обнаружения, mi 7кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определе ния, % Стандартное отклонение S, %, Доверительный шггервал среднего при п = 5 и р = 0,95, % Свекла сахарная (корнеплоды) 0,01 0,025—0,25 85 5,1 4,0 Свекла сахарная (ботва) 0,02 0,05—0,5 87 6,5 5,2 Морковь 0,01 0,025—0,25 86 6,0 4,8 Картофель 0,01 0,025—0,25 88 5,4 4,3

Минимально детектируемое количество кломазона в хроматографируемом объеме - 0.5 нг.

Граница суммарной погрешности измерения - 10 %.

Линейный динамический диапазон детектирования - 0.5—5 нг.

2.2. Реактивы у растворы и матери (иы

Аналитический стандарт кломазона с содержанием д.в. 99 %. (ФМС. Европа НВ)

Азот газообразный высокой чистоты Бумага фильтровальная Вода дистиллированная н-Гсксан. хч

Гелий очищенный марки Б

Натрий серно-кислый, безводный, чда свежепро-

каленный

Неподвижная жидкая фаза OV-17. Супелко Инк. США

Неподвижная жидкая фаза PS-400. Alltech Associates. Inc.. США

Супслкосил (60-100 меш). Супелко Инк. США Флориил (100-120 меш). Мерк. Германия Хромосорб 750 зернением 100-120 меш. Sen а.

Г ермания Эгилацетат. хч

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и кондиционирование колонок для газожидкостной хроматографии

Готовую насадку (5 % PS-400 или 3 % OV-17 на хромосорбс 750) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и выдерживают при температу ре 260 °С в течение 10—12 ч.

2.5.2. Подготовка растворителей

Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки нс требуют.

Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. Для этого 100 мл растворителя испаряют при помощи вакуумного ротационного испарителя при температу ре 40 °С досуха, обмывают стенки колбы 2 мл растворителя и хроматографируют полученный раствор. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.

2.5.3. Приготовление растворов

Раствор гексан-этилацетат в соотношении 95 : 5 по объему. В мерную колбу на 1 л наливают 50 мл этилацстата и доводят объем до метки гексаном.

Раствор гексан-этилацетат в соотношении 90 : 10 по объему. В мерную колбу на 1 л наливают 100 мл этилацетата и доводят объем до метки гексаном.

2.5.4. Приготовление стандартных растворов

Взвешивают 100 мг аналитического стандарта кломазона. переносят в мерную колбу объемом 100 мл, доводят объем до метки гексаном (основной стандартный раствор № 1 с концентрацией 1 мг/мл).

Методом последовательного разбавления стандартного раствора № 1 гексаном готовят рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,25. 0.5, 1. 2.5 мкг/мл. которые используются при определении степени извлечения и построения калибровочного график*!.

Основные и рабочие стандартные растворы устойчивы при хранении в холодильнике при температуре 4 °С в течение трех месяцев.

2.5.5. Подготовка флорисила (супелкосила) и хроматографических колонок для очистки экстрактов

Флорнсил (супслкосил) прокаливают в муфельной печи при температуре 350—400 °С в течение не менее 16 ч. Осту жают в эксикаторе.

18

МУК 4.1.1222—03

Сорбент помещают в плоскодонную колбу, добавляют 3 % дистиллированной воды (по весу) и встряхивают содержимое колбы на механическом встряхивателе в течение 2 ч. Оставляют стоять на 48 ч. периодически встряхивая содержимое колбы (2 pa w в сутки по 30 мин).

В нижнюю часть колонки для очистки экстрактов помещают тампон из стекловаты. Заполняют колонку на '/., гексаном. Навеску флориста или супслкосила (10 г) смешивают в химическом стакане с 15— 20 мл гексана. Заполняют колонку суспензией флорисила (супслкосила) в гексане. Уровень растворителя над флорисилом должен составлять 10—15 мм. Промывают колонку последовательно 30 мл этилацетата и 50 мл гексана.

Для каждой приготовленной партии флорисила (супслкосила) проверяют объем удерживания кломазона на хроматографической колонке.

2.5.6. Определение объема удерживания кломазона на хроматографы ческой колонке

Уровень растворителя в хроматографической колонке с флорисилом понижают почти до верхнего слоя сорбента. При помощи стеклянной или автоматической пипетки вносят 1 мл раствора кломазона в гексане концентрацией 10 мкг/мл. Дают раствор) впитаться, приоткрывая кран колонки и осторожно сливая растворитель, так чтобы слой растворителя ши верхним краем сорбента составлял % 0.3 см. Промывают колонку 100 мл смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95 : 5. Элюат отбрасывают. Элюируют кломазон из колонки смесью гексан - этилаце-тат в соотношении 9 : 1 со скоростью 2 мл/мин. Отбирают фракции объемом 10 мл в мерные цилиндры на 10 мл. Всего отбирают 6—7 фракций. Из цилиндров растворы переливают в кругло до иные колбы на 50 мл (каждую фракцию помещают в отдельную колбу). Каждый цилиндр ополаскивают 1—2 мл гексана, который также вносят в соответствующую колбу. Выпаривают растворитель в каждой колбе на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не более 40 °С до объема примерно 1 мл. Переносят экстракты в мерные пробирки со шлифом. Стенки колб обмывают 0.7—0.8 мл гексана, который также переносят в соответствующие пробирки. Доводят объем раствора гексана в каждой пробирке точно до 2 мл и хроматографируют. Суммарный объем фракций. в которых обнаружен кломазон. представляет собой объем растворителя, который необходим для элюирования кломазона из колонки.

2.5.7. Построение калибровочного графика

Рабочие стандартные растворы кломазона с концентрацией 0.25. 0.5. 1. 2.5 мкг/мл хроматографируют, а затем на основании данных хро-

19

матографирования рабочих стандартных растворов строят калибровочный график, откладывая на оси ординат площади (высоты) пиков, на оси абсцисс - концентрацию кломазона.

Осуществляют нс менее 5 параллельных намерений хм каждой концентрации. Находят среднее значение высоты (площади) пика хтя каждой концентрации. Строят градуировочный график зависимости высоты в мм (мв) или площади (мм² (мв • с) хроматографического пика от концентрации кломазона в растворе, мкг/мл.

2.5.8. Подготовка приборов и средств измерения

Установка и подготовка всех приборов и средств намерения производится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

2.6. Описание и шерении

2.6.1. Экстракция

Навеску намельченной пробы картофеля, моркови, корнеплодов сахарной свеклы (20 г) или ботвы сахарной свеклы (10 г) помещают в коническую колбу емкостью 500 мл. добавляют в нее 100 мл гексана и встряхивают на механическом встряхиватслс в течение 30 мин. Содержимое колбы фильтруют в круглодонную колбу методом декантации через фильтр «белая лента» со слоем безводного сульфата натрия высотой 1—2 см. Экстракцию повторяют дважды используя 100 и 50 мл гексана. Осадок на фильтре промывают тремя порциями гексана по 20 мл. Объединенный экстракт упаривают до объема 2—3 мл на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани нс выше 40 °С. Лисе проводят очистку пробы на колонке с флориенлом по п. 2.6.2.

2.6.2. Очистка на колонке с флорисилом (супелкосилом)

Перед внесением пробы уровень растворителя в колонке понижают почти до верхнего края сорбента. Пипеткой количественно переносят анализируемую пробу из колбы в колонку и дают ей впитаться. Колбу ополаскивают двумя порциями гексана по 2 мл. которые также вносят в колонку. Дают раствор) впитаться, приоткрывая кран колонки и осторожно сливая растворитель, так чтобы слой растворителя над верхним краем сорбента составлял % 0.3 см. Промывают колонку 100 мл смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95 : 5. Растворитель отбрасывают. Элюируют кломазон из колонки 50 мл смеси гексан - этилацетат в соотношении 9:1 со скоростью 2 мл/мин. Элюат собирают в кругло-донную колбу на 100 мл. Выпаривают растворитель на вакуумном ротационном испарителе при температу ре бани нс более 40 °С до объема