ГОСУДАРСТВЕННОЕ

(^IWHO-3ni№nOAOmMECKOE НОРМИРОВАНИЕ РОССИЙСКОЙ ФВДРАЦИИ

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

Сборник

методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию»

Часть 7

Содержание

Определение амидофоса в молоке и мясе тонкослойной

хроматографией...............................................................................................4

Определение ДДТ, ДДЭ, ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и

молочных продуктах газожидкостной хроматографией..............................8

Определение ДДВФ в молоке и воде газохроматографическим и

колориметрическим методами.....................................................................12

Определение диазинона и дурсбана в молоке и тканях животных

газожидкостной хроматографией.................................................................18

Определение метил- и этилмеркурхлорида в продуктах животного

происхождения, кормах и почве газожидкостной хроматографией.........21

Определение альфа- и гамма-изомеров гексахлорциклогексана в кормах и продуктах животноводства газожидкостной

хроматографией..............................................................................................26

Определение гамма- изомера гексахлорциклогексана и фенотиазина в продуктах животного происхождения тонкослойной

хроматографией.............................................................................................29

Ускоренное определение ДДТ в пищевых продуктах....................................34

Определение полихлоркамфена в кормах, продуктах животноводства

и птицеводства газожидкостной хроматографией......................................38

Определение байтекса в молоке и мясе тонкослойной

хроматографией.............................................................................................41

Колориметрическое определение хлорофоса в продуктах растительного происхождения (капуста, картофель, зерно,

огурцы, яблоки) и молоке.............................................................................45

Определение хлорофоса в воде, фруктах, овошах, молоке, мясе

и кормах хроматографией в тонком слое....................................................51

Определение остаточных количеств севина в молоке и молочных продуктах методом газожидкостной хроматографии с детектором

по захвату электронов...................................................................................56

Методика определения варбекса в молоке и тканях животных с

помощью газо-жидкосгной хроматографии................................................61

Методические указания по определению ДДВФ в молоке и воде

методом газо-жидкостной хроматографии..................................................64

Методические указания по определению метил- и этилмеркурхлорида в пищевых продуктах, кормах и почве

методом газовой хроматографии..................................................................67

Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в сырье для производства детских сухих молочных

смесей.............................................................................................................72

Методические указания по определению диквата в воде, молоке фотометрическим методом...........................................................................76

3

Определение байтекса в молоке и мясе тонкослойной хроматографией

Байтекс - 0, 0-диметил-0-(3-метил-4-метилмеркаптофенил)-тиофос-фат. Синонимы: Байер S 1752, Байер 29493, фентион, тигувон, энтекс, лебайцид.

Химически чистый препарат - бесцветное масло без запаха с температурой кипения 109 °С при 0,01 мм рт. ст. Относительная молекулярная масса 278.

Технический байтекс (95—98 %-ный) —желто-коричневая маслянистая жидкость со слабым характерным запахом; перегоняется при 105 °С и 0,01 мм рт. ст. Байтекс хорошо растворяется в метиловом и этиловом спиртах, эфире, ацетоне, многих углеводородах, а также в хлорированных углеводородах и маслах. В петролейном эфире препарат малорастворим. В воде при комнатной температуре растворимость составляет 54—56 мг/л.

Принцип метода. Метод* основан на экстракции препарата из проб и хроматографировании в тонком слое силикагеля с гипсом. В качестве подвижного растворителя используют смесь петролейного эфира с ацетоном (2 : 1). Препарат проявляют раствором азотно-кислого серебра, которое, взаимодействуя с фенолятами, образующимися в результате гидролиза байтекса спиртовой щелочью, дает темно-серые пятна на белом фоне.

Количественное определение байтекса проводят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен со стандартной шкалой. Чувствительность метода 3 мкг в пробе или 0,3 мг/кг.

Реактивы и растворы

Ацетон хч.

Петролейный эфир хч.

А. П. Родэ и А. А. Нспоклонов (ВНИИВС).

41

Хлороформ хч.

Уксусная кислота ледяная хч.

Едкое кали хч.

Этиловый спирт 96°-ный (ректификат).

Метиловый спирт 96°-ный (ректификат).

Бутиловый спирт хч.

Серебро азотнокислое хч.

Силикагель КСК (100 меш).

Гипс медицинский.

100 %-ный байтекс.

1,5 н. раствор КОН в смеси метилового и бутилового спирта (1 : 1).

1 %-ный водный раствор азотнокислого серебра.

Дистиллированная вода.

Приборы и посуда

Хроматографическая камера (стеклянный цилиндрический сосуд с притертой крышкой).

Гомогенизатор для измельчения тканей.

Центрифуга (6—8 тыс. об/мин).

Термостатическая водяная баня.

Конические колбы на 100 мл.

Роторный испаритель.

Делительные воронки на 150 мл.

Фарфоровые чашки для выпаривания.

Пульверизаторы.

Мензурки на 50 и 100 мл Пипетки разные.

Микропипетки.

Фильтры бумажные обеззоленные.

Стеклянные пластинки для хроматофафии 13 х 18 см.

Приготовление пластинок

На обезжиренную пластинку 13 х 18 см наносят слой сорбента. Для приготовления сорбента берут 50 г силикагеля и смешивают с 2,5 г гипса. Смесь заливают 150 мл 5,0 %-ной уксусной кислоты и тщательно перемешивают. Две чайных ложки полученной гомогенной массы распределяют по поверхности пластинки ровным слоем. Пластинку подсушивают в горизонтальном положении при комнатной температуре 24 ч, после чего она готова к употреблению.

42

Ход анализа. Мясо. Пробу нежирного мяса массой 10 г заливают 5 мл ацетона и гомогенизируют 2 мин при 1000 об/мин. Гомогенат помещают в коническую колбу. Четыре раза ополаскивают сосуд, в котором измельчали ткань, порциями ацетона по 5 мл; выливают ацетон в колбу с пробой. Смесь гомогената с ацетоном оставляют при комнатной температуре на 30 мин, затем ее центрифугируют 15 мин при 6—8 тыс. об/мин. Жидкую фазу через бумажный фильтр отфильтровывают в делительную воронку, куда затем наливают 10 мл насыщенного раствора поваренной соли и 20 мл хлороформа. Содержимое воронки хорошо перемешивают. После полного разделения слоев нижний слой (смесь ацетона с хлороформом) сливают и фильтруют через бумажный фильтр. В делительную воронку наливают еще 10 мл хлороформа и процедуру повторяют. Для обезвоживания экстракта на поверхность фильтра насыпают 5 г сульфата натрия. Экстракт выпаривают при комнатной температуре под тягой, на водяной бане или в роторном испарителе.

Молоко. К пробе (10 мл) добавляют 20 мл ацетона. Дальнейший ход экстракции байтекса такой же, как при экстракции из мяса. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл ацетона, выпаривают растворитель до объема 0,1—0,2 мл и наносят микропипеткой на хроматографическую пластинку. Эту процедуру повторяют 3 раза, нанося ацетоновый смыв в одну и ту же точку. Пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой петролейный эфир—ацетон (2 : 1) и выдерживают, пока растворитель не поднимется на 10 см. Пластинку вынимают из камеры и высушивают в течение часа на воздухе. Для проявления хроматограммы пластинку опрыскивают из пульверизатора 1,5 н. раствором едкого кали в смеси метилового и бутилового спиртов (1: 1), а через 15—20 мин опрыскивают 1 %-ным водным раствором азотнокислого серебра. Проявление ускоряется, если после опрыскивания азотнокислым серебром пластинку 2 мин подержать над плиткой или другим источником тепла. Байтекс проявляется в виде темно-серых пятен на белом фоне.

При наличии в пробах байтекса /?/составляет 0,67—0,72 Яг для ок-сианалога байтекса составляет 0,24—0,26.

Количественное определение байтекса в исследуемом материале проводят путем сравнения интенсивности окраски и величины пятен со шкалой стандартов. Для приготовления стандартной шкалы готовят растворы байтекса в ацетоне 1 : 100 000, 1: 50 000, 1 : 20 000, 1 : 10 000, 1 : 5 000. По 0,1 мл каждого разведения наносят на хроматографическую пластинку. После разгонки и проявления получают пятна, соответст-

вующие 1, 2, 5, 10 и 20 мкг байтекса. Пятна измеряют и сравнивают визуально.

Расчет. При вычислении количества байтекса учитывают, что из молока и мяса экстрагируется в среднем 80 % препарата. Расчет проводят по формуле:

1,25/1 1000 Р

X- количество препарата в продукте, мг/кг;

А - количество препарата, выделенное из пробы, мкг; Р - масса пробы, г;

1,25 - коэффициент экстракции.

44