ГОСУДАРСТВЕ ЛАМ КОМИССИЯ ПО ИШИЧЕОШ СРЕДСТВАМ ВОРЬВМ С ШЗДШВЯШ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й (ГОРШКАМИ ПШ ЙСХ СССР

МЕТОДЫ

ап издал ш я вдеотшчЕств весящов

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ* КОРМАХ й ВНЕСШЕЙ СРЕДЕ

Ятт>Т

в в в, 19?! г,

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ

ас яшчесш средствам борьбу с

ВРЕДИТЕЛЯМИ.БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

Утверждено

Заиестителеу Главного cauuTapuoi-o врача Союза ССР

Д.Н.Лоранешш 1971 г.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ иИКРОКППИЧЕСТВ ПЕСТИЦДДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть У,

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкоуиссии по химический средствам борьбы с вредителями.болознями растений и оорнякауи при МСХ СССР

Москва 1971 г.

Колориметрический экспресс-метод определения ДДТ в    49

корне- и клубнеплодах автор: Стеилковская ЛоАо

Определение полихлорпинена в воде* почве, картофеле    58

свекле, ее ботве, мясе в присутствии ДДТ и других ялорорганкческих пестицидов и лсшшслоркамфена в почве авторы: Клисепко М,А., Верблюдова Н.Й., Косматый «ѻ,

Грицианко НоИ.

Определение остатков Ш в растениях методом тонко-    68

одойной хроматографии

авторы: Косматый 2*0*, Полонская ФЛ!._# Тверская Б*Ы«.

Определение кельтана в огурцах методой тонкослойной    66

хроматографии

авторы: Фомичева Л*Г., Ефимова Л.И.

Определение эфирсульфоната в винограде, соке, воде    71

вине методом ТСХ

авторы: Голубев Т«Й₀, Владимирова Л*Г._С Колобродова Ю»И.

Фосфороргаяические соединения

Определение апрекса и каратана в растительных продуктах 74 н воде

авторы: Клисепко М*А*, Им и гида на А„М*

Определение бутифооа в продуктах промышленной лереоа-    80

ботки хлопка-сырца измена» хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

авторы: Талипов ШДа, Дзиянбаева Р.Х., Халимова У До,

Шейнина Р„И., Белобородова Н*Ф«

Полярографический метод определения метилнитрофооа    86

в растительной пробе и почве авторы: Патваыку Ф#И._# Сороковая ЛоВ*

З^ыашо-хроиатохтрафичеокий качественный s колоримотрмческиН 90 ноли явственный методы определения дояиашззрофооа в расти-яельяой пробе и почве автор: Иатраику ®д*

Определение трихлориетафооа-3 в молоке в молочных    &

продуктах с помощью тонкослойной хроматографии авторы: Молочников В.В., Серебренникова' В.А., Мочалов В,И.

Определение фоофамида, антио и карбофооа в воздухе    ЮЗ

методом газо-жидкоотной хроматографии авторы: Клиоенко М«А*, Гиренко Д.Б.

Определение сайфооа в воде, продуктах питания рао-    1°7

тительного происхождении, почве г. биологическом материале

авторы: Клисенко М*А«« Письменная М«В.

Определение оойфооа в воздухе методом хроматографии    П*

п тонкой слое

авторы: Клиоенко М.А,, Письменная М<В»

Определение остаточных количеств фталофооа и фона-    120

лона в_#растительном материале, почве и воде авторы: Новикова К.Ф», Мельцер Ф.Р»

Качественный и количоотвошшй методы определения    Г?.о

фозалона в яблоках» Яблоновых лйотш» почва и вода автор: Вндвпавняа Г.Ф»

ОпределеНИа фталофооа в молоке и мясе методом    133

тонкоовойной хроматографии

авторы: Заболотный К.Ф., Метелица в.К., Пспоклонои А.А.

Количественное колориметрическое опредоление хлорофооа    137

в молоке

автор: СтемпковокаН Л,А.

Определение емндофоов в молоке и *яое авторы: Непоклонов А. А.» Метелица В.К.

Определение байтокса в молоко и мной    jcjft

авторы: Ролз А.П., Непоклонов А.А,

;i9

Ьнаиматический агар-диффуаный метод о ирода ланий    156

фосфороргаанчеоких инсектицидов в продуктах пииотого происхождения авторы: Неиокдонов А.А., Метелица В.К.

Производные карбаматов

Колориметрический метод опредепааиа вупрацшш~1 _э    162

купрьцина-Н, Манеоа, Маркина» ХМТД в воадухе» продуктах питания растительного происхождения и биологических средах авторы: Клисонко М*А«, Векатейн Л.Ш„,

Экспрессное определенно тетраизтилтяураидиоуаьфада    164

(ТМТД) в зерне и зернопродуктах автор: Николаев А.В*

Определение остаточных количеств дикреаила в биодо-    16?

гических средах методом тонкослойной хромалографин автор: Сивохин И.А.

Прочие соединения

Определение 2-*мвтокси-3,6~дихлорбензойной кислоты    172

методом газо~кидкостной хроматографии авторы: Рыжков А*А., Гейд Ю.П,_В Бабин Е.П., Свнри • денко А»С«» Чекавская Л,А.

Количественное определение дикеибы (дианаха,    179

беявеиа~Л) в растениях и в почве методой хроматографии в тонком слое

авторы: Березовский Ч.Я., Самоовах Л.С., Никотин В.В.

Определение диурона, ллнурона, монуронв, проланида,    184

солана, фалорана в воде, почве, овощах методом хрома -тографяи в тонком слое евтор: Оаыосват I.C.

Колориметрический метод определения которая* (пахтаройa)    JH8

в хлопковом масле

аяторц: Новикова К.Ф., Меивцер Ф.Р., Алдомнкч Т*В.

Качественное я количественное определение каптала и    193

фталаиа в лине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, в почве и воде авторы: Вайптрауб Ф.П., Дронь Л,Л,

Определение мельпрокса в воздухе    199

авторы: Сорокина Л.В*, Клнсопго М.А.

Определение прометриня в почве, воде и растительном    203

материале методом хроматографии в тонком слое автор: Дроздова О-А.

Определение фенаэона в свекле, почве и воде    207

авторы: Эгерт В.9., Лиелгалве А.А.

Определение хлората иагиня в препарате-дефолианте,    2.ТЗ

хлопковом масле, ироте, жмыхе, османах, ядрах оемян и волокне хлопчатнике

авторы: Талипов II). Т., "жиппбяова Р.Х., Халимова УЛ*₉ Белобородова Н.Ф.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХЛОРОРГАНИЧВЖИХ ЙДСШШИКАТОВ / АЛДРИНА. ГЕКСАХЛОРАНА, ГЕПТАХЛОРА, ДОТ. ДДЦ, ДДЭ и др./ В ВОДЕ. ОВОЩАХ„ ФРУКТАХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Принцип метода

Метод основан на извлечении препаратов экстракцией органа ческами растворителями, очистке экстрактов путем распределений между двумя неомешивающиыися жидкостями: гексан-ацето-нитрид или гекоан-диметидформамид о последующей очисткой на колонке на окиси алюминия* Конечное определение производится г\ хромате, графе о детектором по эахвату электронов,,

Применимость метода

Метод был проверен на пробах воды, картофеля, яблок, биологических средах: кровь, печень, сердце, хир ■ др.,

Реактивы и растворы

Для экстракции и очистки экотракта Н-гекоин, х.ч. перегрей-

ный:

Ацетон, х«ч«, перегнанный ;

Ацетонитрил ч., насыщенный н-гексанон;

Диметнлфорыаиад, ч,, насыщенный н-гекоаном;

Натрий хлористый, насыщенный водный раствор ;

Натрий сернокислый ч,д,а** безводный, свежвяроваленный

и 2% водный раствор.

I/ Раяработан Д,Б. Гиренко, М.А.Клиоеяко, ВНИВГИИТСКС,Киев

//

Окно* алюминия, безводная или II степени активности.

Перед употреблением окись алюминия заливают на 2 часа водным раствором ооляной кислоты I-I; затем отмывают дистиллированной водой до pH суспензии 4-5* Высушивают при 80°С.

Стандартные раствори х.ч. пропаратов в н-гексане, 5 икг/ил.

Носитель хромосорб 60-80 меш., обработанный соляной кислотой.,

Нидкая фаза - силиконовое масло ДС-20 или другая неполярная кремнаорганичеокяя фаза, / Е - 301;    Е-30,    ДС-П/, СКТВ, в коли

честве 10% /веоовнх/ от веса носителя.

Хлороформ, ч., очиненный концентрированной серной кислотой.

I л хлороформа встряхивают на аппарате для встряхивания 3-4 чаоа о 0,5 л концентрирован*эй серной кислоты* Отделяют сернокислотный слой, промывают хлороформ дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, осушают безводным хлористым кальцием* Перегоняют. Азот газообразный, 99,97%чистоты. Перед введением в хроматограф азот пропускают через колонку с индикаторным силикагелем.

Стекловата,

Приборы и посуда

Хроматограф о детектором по захвату электронов или о пламенно-ионизационным детектором

Кпллон о азотом, содержание 0₂ менее 0,003%

Колонки стальные или стеклянные, диаметр 3,4,6 мм, длине -1,5-2 м.

Шприц 1,5 или 10 мкл.

Сушильный шкаф

Центрифуга, окорость оборотов 2500 об/мин.

Делительные воронки, 500 мл.

Прибор для отгонки растворителей

Колонки стеклянные хроматох'рафичеокие диаметр 18-20 мм, длина 20 ом.

-/г-

Колонка заполнился адсорбентом следующим образом; в у аква конец колонки вкладываетоя ватный тампон и наливается ваввоь окиси алюминия о н-гексаноы в таком количестве, чтобы иосло оседания адсорбента висота его олоя достигала 7-8 см. На окись алюминия насыпается слой 3-Л см. безводного сернокислого натрии,

Баня водяная

Прибор для встряхивания.

Опиоанае определения

Экстракция препаратов и очистка экстрактов.

Вода: 500 мл воды после фильтроваг я через ваткыГ тампон встряхивают на аппарате для встряхивания с 25 мл.н-гексана в течение 30 мин.Экстракцию повторяют трижды, экстракты объединяют, сушат над беэводным се_гнокиолым натрием и отгоняют растворитель до небольшого объема, переносят в мерную пробирку? несколько рае смывают колбу для отгона растворителя небольшими порциями н-гек-оана» смывы объединяют. Конечный объем раотвора не должен превышать I—I_в5 ил. 2~5^этого раотвора вводят в газовый хроматограф.

Картофель. 50 г картофеля измельчают* заливают 100 мл. н-гексана, встряхивают в течение 15-20 мин. Отгоняют экстракт в делительную воронку, встряхивают о 20 мд. концентрированной серной кислота, гексановый слой осушают безводный сернокислым натрием, упаривают раствор как оиисано для воды и хроматографируют.

Яблоки. 50 г яблок измельчают на аппарате для встряхивания в течение 15 мин. Отделяют эвотракт в колбу для отгонки и упаривают досуха. В эту колбу прибавляют предварительно охлааденную до + 5® - 0° С сиеоь ацетон-вода / 4 : I/, быотро фильтруют раствор я к фильтрату прибавляют 25 мл,гексана. Отбрасывают водный слой осушают,гексановый слой беэводным сернокислым натрием, испаряют до 1-2 мл,, которые количественно вносят в хроматографическую колонку с о.киоью алюминия. Дают раствору впитаться и элюируют ядохимикаты ТОО мл. смеси, состоящей ив ТО мл. эфира и 90 мл.

- /J-

к-гекоана со скоростью 3-4 капли в секунду.Элюат упаривают как описано выше и хроматографируют.

Биологические среды

Кровь.О,2-0,3 мл.цельной крови трижды экстрагируют по 5 мл.н-гексана. Экстракты объединяют и дважды встряхивают с 20 мл концентрированной серной кислоты.Гексановые экстракты объединяют,сушат над безводным сернокислым натрием,переносят в прибор для отгонки растворителя и далее поступают так, как описано для воды.

Печень.сердце.почки.жир. 5 г измельченной ткани заливают 25 мл концентрированной сорной кислоты, встряхивают 5 мин,, прибавляют 25 ил н-ге:сана и оставляют на 30 мин. Гексановый слой отделяют,а пробу заливают свежей порцией н-гекоана и повторяют экстракцию.

Экстракты объединяют переносят в прибор для отгонки растворителя,отгоняют растворитель до 5-10 мл.Переносят раствор количественно в делительную воронку,прибавляют 15-30 мл диме-тилформамида или ацетонитрила,насыщенных гексаном. Необходимо, чтобы соотношение раствора гексана и демитилформамида было не менее 1:2.

Встряхивают воронку I мин.дают разделиться слоям и переносят демитилфорнамидлый или ацетонитрильный слой в другую де лительную воронку, в которой находится 350-400 мл 2% раствора сернокислого натрия и 50 мл гексана в случае диметилформамида или 350-400 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 50 нг гексана в случае ацетонитрила.

Переворачивают воронку 3-4 разе и дают разделиться слоям.

Отделяют слой гексана, водный слой экстрагируют ете раз 50 мл гексана. Объединяют гексановые фракции,промывают ХСОмл дистиллированной воды,упаривают до небольшого объема 2-3 мл вносят в колонку с окисью алюминии и далее поступают так, как описано для яблок.

Подготовка хроматографической колонки

Нанесение жидкой фазы. 2 г силиконового масла растворяют

в небольшом количестве органического растворителя,чаще всего хлороформа, и приливают в фарфоровую чашку, в которой находится 18Г носителя,залитого полностью тем же растворителем. Тщательно перемешивают всю массу и выпаривают раствор на водяной бане. Досуха упаривают остаток растворителя на воздухе,сухой остаток подеушивам 4-5 часов в сушильном шкафу при температуре 80°. Приготовленный но-* ситель хранят в склянке с притертой пробкой.

Заполнение колонки. Один конец колонки закрывают стеклянной ватой, а в другой через воронку засыпают носитель. Заполняют колонку постукиванием,закрывают второй конец тампоном из стеклянной ваты и через переходы соединяют до длины 180-200 см.Колонку загружают в ка меру нагрева,отключают детектор и продувают 2-3 дня при температуре 220-250°С. Перед началом анализа подсоединяют детектор,проверяют герметичность и утечку газа-носителя.

Хроматографирование. Устанавливают температуру колонки и детектора 200^0 камеры испарения - 220°С. Скорость азота 120 мл/мин. Напряжение и чувствительность устанавливают таким образом, чтобы сила тока в ячейке детектора составляла 1,6-10-10-а.

Вводят определенное количество /0,1-0,01 икс/ стандартного раствора препарата в гексане. Записывают его время удерживания,т.е.время от момента ввода раствора до появления вершины пика. Время удерживания проверяется каждый день перед началом анализов. Установив время удерживания /несколько раз вводят один и тот же раствор/, вводят дозу конечного экстракта пробы - 2-3 мкп. Для количественного расчета ядохимиката вслед за пробой вводят такое количество стандартного раствора,площадь пика которого соответствует примерно площади пика анализируемой пробы.

В табл.1 для примера приведены чувствительность определения и время удерживании /Т-уд/, наиболее распространенных хлорорганичес-ких ядохимикатов, а также относительный удерживаемый объем /Иотн/, число теоретических тарелок /    / и высота эквивалентная теоретической тарелке / II / ,    которые характеризуют размывание

полосы в котике, очной из иопольэоваиных колонок.

Таблица I

• - —----t ----- —    •

Препарат * Чувотвительиооть : мкг/нл экстракта

^аЖ-иаомар ГХЦГ	0,5 0*5	5,2 2>	2.0 9,4	780 250	0,21 0,72
Геш 'хлоран /1,4% дуо*/	0,5	1,2 2,0 2 4 з!о
Гептатлор	0,5	4,0	15,2	760	0,21
,1ЩТ; 4,4 - наонвр	0,1	15,6	63,0	480	0,38
ДДТ} 2,4 - иаоивр	2,0	13,0	-	-	-
ДДТ; 5 % дуох	1,0	2:3 12$ 15,6
ДТП	0,5	12,4	50,0	304	0,61
ДДЭ	0,5	9,6	38,5	260	0,72
Метоксшхяор	2,0	20,0	80,0	195	0,96
миллбвко^	2,0	14,4	55,8	НО	1,7
Пвртав	2,0	7,2	28,0	210	0,89
Вфироулвфовах	2,0	10,4	42,5	145	1,3
1/ 4~хлорфвн*л 2,4,5 хритлорФа		ооульфид

-16-

у . i__• V 2 : Y? . где

к, • л • к,

А ~ количество ДДТ в стандартном растворе, введенное в хроматограф, в мкг;

J! ~ площадь ника стандартного раствора ДДТ, введенного в хроматограф, в шг;

S₂ - площадь пика пробы, в мы²; у - объем экстракта, введенный в хроматограф, ь мд;

У_а - общий объен экстракта после упарнванин, в ил;

У - объем апяляэируемой пробы ыолока, в мл;

X - количество препарата, в мг/л;

СОДЕРЖАНИЕ

Методические указания по разработке газо-хрома-тографичеоких методов анализа остаточных коли-чеотв пестицидов составлено Пивоваровым Г.А.

ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Определение хлорорганических ядохимикатов салдрина,    II

гексахлорана, гептахлора, ДДТ, ДДД,ДДЭ и д_г.) в воде, овощах, фруктах и биологических средах методом газовой хроматографии- авторы: Гиренко Д.Б., Клисенко М.А.

Определение ДДТ, ДДЭ.ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и    18

молочных продуктах методом газовой хроматографии авторы: Молочников В.В., Мочалов В.И., Моргунова А.П.

Колориметрический метод определения ДДТ в молоке и    23

молочных продуктах

авторы: Молочников В.В., Мочалов З.И.

Определение остаточных количеств гекоахлорбутадиена    27

в вине, соке и воде методом гаэо-кидкоотной хроматографии о использованием детектора по захвату электоронов авторы: Пивоваров Г.А*, Гар К.А., Алексеева Е»М«, Тимофеева 0,Н., Шварцман Г.А.

Спектрофотометрическое определение гекоахлорбутадиена    33

(ГХБД) в воздухе

авторы: Гулько А.Г., Драновокая Л.М.

Определение в растительных ыаолах ДДТ, Гамиа-1ХЦГ и    36

др. хлорорганических пестицидов авторы: Клиоенко М.А., Юркова З.Ф_М

Определение ДДТ,ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола    38

в хлопковых шротах, обогащонннх и иеобогагдинных липидами авторы: Белова А,Б., Новикова Л.В.

Определение ДДТ,ГПХ и у -ГХЦГ в почве, сахарной овекла и 47 картофеле методом тонкослойной хроматографии авторы: Косматый Е.С., Грицаенко Н*Н._в