ГОСУДАРСТВЕ ЛАМ КОМИССИЯ ПО ИШИЧЕОШ СРЕДСТВАМ ВОРЬВМ С ШЗДШВЯШ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й (ГОРШКАМИ ПШ ЙСХ СССР

МЕТОДЫ

ап издал ш я вдеотшчЕств весящов

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ* КОРМАХ й ВНЕСШЕЙ СРЕДЕ

Ятт>Т

в в в, 19?! г,

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ

ас яшчесш средствам борьбу с

ВРЕДИТЕЛЯМИ.БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

Утверждено

Заиестителеу Главного cauuTapuoi-o врача Союза ССР

Д.Н.Лоранешш 1971 г.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ иИКРОКППИЧЕСТВ ПЕСТИЦДДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть У,

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкоуиссии по химический средствам борьбы с вредителями.болознями растений и оорнякауи при МСХ СССР

Москва 1971 г.

Колориметрический экспресс-метод определения ДДТ в    49

корне- и клубнеплодах автор: Стеилковская ЛоАо

Определение полихлорпинена в воде* почве, картофеле    58

свекле, ее ботве, мясе в присутствии ДДТ и других ялорорганкческих пестицидов и лсшшслоркамфена в почве авторы: Клисепко М,А., Верблюдова Н.Й., Косматый «ѻ,

Грицианко НоИ.

Определение остатков Ш в растениях методом тонко-    68

одойной хроматографии

авторы: Косматый 2*0*, Полонская ФЛ!._# Тверская Б*Ы«.

Определение кельтана в огурцах методой тонкослойной    66

хроматографии

авторы: Фомичева Л*Г., Ефимова Л.И.

Определение эфирсульфоната в винограде, соке, воде    71

вине методом ТСХ

авторы: Голубев Т«Й₀, Владимирова Л*Г._С Колобродова Ю»И.

Фосфороргаяические соединения

Определение апрекса и каратана в растительных продуктах 74 н воде

авторы: Клисепко М*А*, Им и гида на А„М*

Определение бутифооа в продуктах промышленной лереоа-    80

ботки хлопка-сырца измена» хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

авторы: Талипов ШДа, Дзиянбаева Р.Х., Халимова У До,

Шейнина Р„И., Белобородова Н*Ф«

Полярографический метод определения метилнитрофооа    86

в растительной пробе и почве авторы: Патваыку Ф#И._# Сороковая ЛоВ*

З^ыашо-хроиатохтрафичеокий качественный s колоримотрмческиН 90 ноли явственный методы определения дояиашззрофооа в расти-яельяой пробе и почве автор: Иатраику ®д*

Определение трихлориетафооа-3 в молоке в молочных    &

продуктах с помощью тонкослойной хроматографии авторы: Молочников В.В., Серебренникова' В.А., Мочалов В,И.

Определение фоофамида, антио и карбофооа в воздухе    ЮЗ

методом газо-жидкоотной хроматографии авторы: Клиоенко М«А*, Гиренко Д.Б.

Определение сайфооа в воде, продуктах питания рао-    1°7

тительного происхождении, почве г. биологическом материале

авторы: Клисенко М*А«« Письменная М«В.

Определение оойфооа в воздухе методом хроматографии    П*

п тонкой слое

авторы: Клиоенко М.А,, Письменная М<В»

Определение остаточных количеств фталофооа и фона-    120

лона в_#растительном материале, почве и воде авторы: Новикова К.Ф», Мельцер Ф.Р»

Качественный и количоотвошшй методы определения    Г?.о

фозалона в яблоках» Яблоновых лйотш» почва и вода автор: Вндвпавняа Г.Ф»

ОпределеНИа фталофооа в молоке и мясе методом    133

тонкоовойной хроматографии

авторы: Заболотный К.Ф., Метелица в.К., Пспоклонои А.А.

Количественное колориметрическое опредоление хлорофооа    137

в молоке

автор: СтемпковокаН Л,А.

Определение емндофоов в молоке и *яое авторы: Непоклонов А. А.» Метелица В.К.

Определение байтокса в молоко и мной    jcjft

авторы: Ролз А.П., Непоклонов А.А,

;i9

Ьнаиматический агар-диффуаный метод о ирода ланий    156

фосфороргаанчеоких инсектицидов в продуктах пииотого происхождения авторы: Неиокдонов А.А., Метелица В.К.

Производные карбаматов

Колориметрический метод опредепааиа вупрацшш~1 _э    162

купрьцина-Н, Манеоа, Маркина» ХМТД в воадухе» продуктах питания растительного происхождения и биологических средах авторы: Клисонко М*А«, Векатейн Л.Ш„,

Экспрессное определенно тетраизтилтяураидиоуаьфада    164

(ТМТД) в зерне и зернопродуктах автор: Николаев А.В*

Определение остаточных количеств дикреаила в биодо-    16?

гических средах методом тонкослойной хромалографин автор: Сивохин И.А.

Прочие соединения

Определение 2-*мвтокси-3,6~дихлорбензойной кислоты    172

методом газо~кидкостной хроматографии авторы: Рыжков А*А., Гейд Ю.П,_В Бабин Е.П., Свнри • денко А»С«» Чекавская Л,А.

Количественное определение дикеибы (дианаха,    179

беявеиа~Л) в растениях и в почве методой хроматографии в тонком слое

авторы: Березовский Ч.Я., Самоовах Л.С., Никотин В.В.

Определение диурона, ллнурона, монуронв, проланида,    184

солана, фалорана в воде, почве, овощах методом хрома -тографяи в тонком слое евтор: Оаыосват I.C.

Колориметрический метод определения которая* (пахтаройa)    JH8

в хлопковом масле

аяторц: Новикова К.Ф., Меивцер Ф.Р., Алдомнкч Т*В.

Качественное я количественное определение каптала и    193

фталаиа в лине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, в почве и воде авторы: Вайптрауб Ф.П., Дронь Л,Л,

Определение мельпрокса в воздухе    199

авторы: Сорокина Л.В*, Клнсопго М.А.

Определение прометриня в почве, воде и растительном    203

материале методом хроматографии в тонком слое автор: Дроздова О-А.

Определение фенаэона в свекле, почве и воде    207

авторы: Эгерт В.9., Лиелгалве А.А.

Определение хлората иагиня в препарате-дефолианте,    2.ТЗ

хлопковом масле, ироте, жмыхе, османах, ядрах оемян и волокне хлопчатнике

авторы: Талипов II). Т., "жиппбяова Р.Х., Халимова УЛ*₉ Белобородова Н.Ф.

Определение трихлорметафоса-3 ъ молоке и молочных продуктах с помощью тонкослойной хроматографии*)

У пактеристина препарата

Чистый трихлорметафос представляет собой бесцветную маслянистою жидкость о т.кип. 127°С при 0,16 мм рт.от., летучесть около 8 мг/м⁸. Пн хорошо растворим в большинстве органических растворителей, растворимость в воде меньше 40 мг/л. ЛД_б0 для ранличных экспериментальных животных 330=800 кг/кг*

ДВаШИД метода

Трихлорметафос-8 навлекают иэ пробы смесью органических растворителей, очищают полученный экстракт на хроматографической колонке, элюат отгоняют под вакуумом и определяют хроматографичеоки на тонком слое окиси алюминия по трихлор-фенолу, который образуется при щелочном гидролизе препарата.

Чувствительность определения 0,6 мкг в пробе.

Реактивы и растворы

Ацетон х.ч. перегнанный Хлороформ х.ч. перегнанный

Н-гексан х.ч. перегнанный (или петролейный эфир фракция кипения 40-60°С, перегнанный)

Бензол х.ч. перегнанный

Алюминия окись для хроматографии, просеянная через сито 150 меш.

Гипс (CaJ O^viKpO), выдерканный в сушильном шкафу при температуре Х50^&С 6 часов и просеянный через сито 150 меш»

6% раствор едкого натра на метаноле-бутаноле в соотношении

1:1.

0,5% водно-ацетоновый раствор форрицианида калия(30 мл дистиллированной воды ♦ 70 мл ацетона).

4-аминоантипирин

Насыщенный раствор хлористого натрия % раствор оксалата калия (или насыщенный раствор натрии),

Дрибож.Н по&Щ

Хроматографические колонки 18x330 мм ПриОор для вакуумной отгонки растворителя Ванна хроматографическая Шприц медицинский на I ил (или на 0,5 мл)

Воронки делительные емкостью 250 мл Стаканчики химические емкостью ГОО мл

Приготовление пластинок с тонким слоем сорбента__

Окись алюминия для хроматографии I или 2 степени активности тщательно растирают в фарфоровой ступке с гипсом в соотношении 10:1. 60 г смеси переносят в колбу эрленмейера и добавляют раствор 4-а ыиноантииирин (0,4г 4 аминоантипирина на 60 мл дистиллированной воды. Смесь, тщательно размешав, нанооят на пластинки (либо с помощью прибора, либо вручную). Толщина слоя 0,2-0,3 мм.

После высыхания пластинки отавят в штатив в вертикальном полокении в сушильный шкаф о температурой Н0°С на 16 мин. для активации* После чего плаотиики готовы для работы*

Хранить пластинки необходимо в темноте. Срок их использования не более 8 дней.

Экстракция пестицида и очистка экстрактов

1.    Молоко и киоломолочные напитки (кефир, кумыо, проотокваша и т.п.)

25 мл продукта помещают в делительную воронку на 250-800 мл. приливают о мл оксалата калия и перемешивают. Добавляют 100 мл ацетона и энергично встряхивают в течение 2-8 мин. 8аливают 10^л мл хлороформа и еще раз встряхивают 1-2 мин. 8атем воронку оставляют на 6 мин. до разделения кядкоотей* Верхний одой отбрасываю?, а нлкпвй выливают в круглодонную колбу оо шлифом емкостью 500 мд и отгоняют до полного удаления растворителей. Остаток смывают 80 мл пет-ролейного эфира*

2.    Сгущенное стерилизованное молоко

Отвешивают 10 г продукта в стаканчик и переносят в делительную воронку еикоотью 150 мл, обмывал стаканчик дванды пятью мд насыщенного раотвора хлористого натрия* Содержимое воронки перемешиваю?, приливают 40 мл ацетона, знергично вогрихивают 2-6 мин, затем приливают 60 мл хлороформа и снова встряхивают 2-8 мин» Воронку оотавляют на 5 мин*, нижней фазой собирают в круглодонную колбу и растворители отгоняют о Остаток растворяют в 80 мл петролейиого эфира*

8* Сгущенные молочные продукты

10 г продукта помещают в стаканчик, заливают б мл раствора оксалата калия, содержимое перемешивают и переносят в делительную воронку емкостью 150 мл., Стаканчик обмывают 5 мл

«ого же раствора и сливают в делительную воронку- Содержимое воронки перемешивают, приливают 60 мл ацетона и энергично встряхивают 2-3 мин., добавляют 100 мл хлороформа и вновь встряхивают 7-8 мин. После разделения фаз (обычно до 5 мия) еикнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворители отгоняют, с остатки растворяют в 80 мл петролейного эфира.

4. Сухие молочные продукты я сивой

В делительную воронку емкостью ISO мл вносят Ю мл несмел*» го раствора хлористого натрия и добавляют 2 г продукта. Смео? встряхивают 2-3 мин., приливают 80 нл ацетона, встряхивают 2-8 мин., добавляют 50 мл хлороформа и вновь встряхивают 5-7 мин. После разделения фая нижнюю фазу сливают в кругло-донную колбу, растворитель отгоняют, а остаток растворяют в ВО ил потролейного эфира.

б. Сметана, сливки 80-40:5

б г продукта смешивают о 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия. Сиеоь переносят в делительную воронку, добавляют 50 мл вцетона, встряхивают 2-8 мин., приливают 50 мл хлороформа и встряхивают 2-8 мин. После разделения фае пиннюг фазу сливают в круглодонную колбу, растворители отгоняют, а остаток растворяют в 80 ил петролейвого эфира,

6. Творог, сыр

10 г творога или измельчеввоги на търке сыра растирают в ступке о 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку емкостью 150 мл. Приливают 80 мл ацетона и встряхивают 2-8 мин., добавляют 100 мл хл' • реформа к внооь вотряхивают 4-5 мин. После разделения фаз нижню" феву сливают в круглодонную колбу, растворители отгоняют, а остаток растроряют в ВО мл петролейяого эфира.

- 93 ~

Очистка экстрактов от примесей

В нижнюю часть хроматографической колонки помещают стекловату, затем насыпают 70 ил силикагеля АСК и уплотняют его постукиванием по колонке. Необходимо, чтобы силикагель не находился в расширенной части ее. Колонку промывают 60 мл петролейиого эфира, а прошедший сквозь нее растворитель отбрасывают.

На подготовленную таким образом колонку наносят 80 мл полученного из молока или молочных продуктов конечного экстракта. После того, как экстракт впитается в сорбент, пестициды элюируют НО мл смеси бензол-петролейный эфир (8*8) порциями по 26-80 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250-800 мл. После впитывания в сорбент последней порции раство ттеля выкидают 10 мин. и отжимают растворитель из колонки с помощью резиновой груши.

После очистки элюат упаривают до объема 20-30 мл и переносят его в круглодонную колбу с оттянутый донышком. Споласкивают первую колбу 10 мл гексана и смывы помещают во вторую колбу. Элюат отгоняют до тех пор, пока он не останется в оттянутой части колбы.

Хроматографирование

На расстоянии I,6 ом от нижнего края илаотинки на стартовую линию наносят пробы. Виого на пластинку размером 20х 20 см можно нанести 5-7 проб. Слева ианооят пробы исследуемого материала, справа - стандартный раствор грихлорметафоса-8.

На высоте 10 см от стартовой линии через всю пластинку проводится полоса фронта. Пробы наносят шприцем с тонкой иглой. На плаотинку направляют отрую воздуха и постепенно наслаивают одну на другую капельки из шприца. Каждая капля не должна превышать 0,5 см в диаметре.

После нанесения проб стенки колбы надо смыть несколькими каплями рветноритоля и еще раз «внести ни то хр место не пластинке.

Камера для хроматографирования заполняется на высоту I см гексаном. Герметичность камеры должна обеспечить ее насыщение парами гексана. Пластинка ставится в гексан под углом 45° и разгоняется до линии фронта. После этого ее вынимают, просушивают растворитель и вновь ставят для повторной разгслки. Как только фронт достигает отмеченной линии, пластинку вынимают из камеры и сушат. Для проявления пятен препарата пластинку слегка опрыскивают 6# раствором едкого натрия на метаноле-бутаноле и ставят в сушильный шкаф па б мин. при температуре 80-100°С. Как толы.} пластинка остынет, ее опрыскивают 0,5# раствором феррициавида калия. Пластинку опрыскивают 2-3 раза небольшими количествами раствора до появления розово-малиновых пятен округлой формы.

Для количественного определения трихлорметафоса-9 калибруют шкалу стандартов путем нанесения на пластинку стандартных растворов трихлорметафоса-8, содержащих 0,2; 0,5; I; 4; 5; 10 мкг препарата в 0,1 мл растворителя. Пластинку хроматографируют дважды в системе гексан и проявляют по описанной выше методике.

Величину полученных пятен сравнивают с величиной пятен пробы. Величина трихлормотафооа-3 равна 0,87.

Расчет результатов анализа производят по формуле

X - содержание препарата в пробе в мг/кг или мг/л

А - количество препарата, найденное путем визуального сравнения со стандартным раствором, мкг

В - навеска исследуемой пробы г, мл.

Чувствительность определения для молока 0,02 мг/л, для сметаны - 0,1 мг/кг, для творога - 0,05 мг/кг, для оливочно-Го масла - 0,4 мг/кг, для сухого молока - 0,1 мг/кг.

Процент извлечения ядохимиката из исследуемых продуктов составляет из молока 89,5#, из сухого цельного молока 79,0#,

- /01-

из сухой «твои “Малыга⁰ 93,8# и» сухой снеси "Малявка" 98_tZ%_t из одинок 96,П#, ив сгущенного молока 95,0#, ив творога 914#*

СОДЕРЖАНИЕ

Методические указания по разработке газо-хрома-тографичеоких методов анализа остаточных коли-чеотв пестицидов составлено Пивоваровым Г.А.

ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Определение хлорорганических ядохимикатов салдрина,    II

гексахлорана, гептахлора, ДДТ, ДДД,ДДЭ и д_г.) в воде, овощах, фруктах и биологических средах методом газовой хроматографии- авторы: Гиренко Д.Б., Клисенко М.А.

Определение ДДТ, ДДЭ.ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и    18

молочных продуктах методом газовой хроматографии авторы: Молочников В.В., Мочалов В.И., Моргунова А.П.

Колориметрический метод определения ДДТ в молоке и    23

молочных продуктах

авторы: Молочников В.В., Мочалов З.И.

Определение остаточных количеств гекоахлорбутадиена    27

в вине, соке и воде методом гаэо-кидкоотной хроматографии о использованием детектора по захвату электоронов авторы: Пивоваров Г.А*, Гар К.А., Алексеева Е»М«, Тимофеева 0,Н., Шварцман Г.А.

Спектрофотометрическое определение гекоахлорбутадиена    33

(ГХБД) в воздухе

авторы: Гулько А.Г., Драновокая Л.М.

Определение в растительных ыаолах ДДТ, Гамиа-1ХЦГ и    36

др. хлорорганических пестицидов авторы: Клиоенко М.А., Юркова З.Ф_М

Определение ДДТ,ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола    38

в хлопковых шротах, обогащонннх и иеобогагдинных липидами авторы: Белова А,Б., Новикова Л.В.

Определение ДДТ,ГПХ и у -ГХЦГ в почве, сахарной овекла и 47 картофеле методом тонкослойной хроматографии авторы: Косматый Е.С., Грицаенко Н*Н._в