ГОСУДАРСТВЕ ЛАМ КОМИССИЯ ПО ИШИЧЕОШ СРЕДСТВАМ ВОРЬВМ С ШЗДШВЯШ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й (ГОРШКАМИ ПШ ЙСХ СССР

МЕТОДЫ

ап издал ш я вдеотшчЕств весящов

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ* КОРМАХ й ВНЕСШЕЙ СРЕДЕ

Ятт>Т

в в в, 19?! г,

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ

ас яшчесш средствам борьбу с

ВРЕДИТЕЛЯМИ.БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

Утверждено

Заиестителеу Главного cauuTapuoi-o врача Союза ССР

Д.Н.Лоранешш 1971 г.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ иИКРОКППИЧЕСТВ ПЕСТИЦДДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть У,

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкоуиссии по химический средствам борьбы с вредителями.болознями растений и оорнякауи при МСХ СССР

Москва 1971 г.

Колориметрический экспресс-метод определения ДДТ в    49

корне- и клубнеплодах автор: Стеилковская ЛоАо

Определение полихлорпинена в воде* почве, картофеле    58

свекле, ее ботве, мясе в присутствии ДДТ и других ялорорганкческих пестицидов и лсшшслоркамфена в почве авторы: Клисепко М,А., Верблюдова Н.Й., Косматый «ѻ,

Грицианко НоИ.

Определение остатков Ш в растениях методом тонко-    68

одойной хроматографии

авторы: Косматый 2*0*, Полонская ФЛ!._# Тверская Б*Ы«.

Определение кельтана в огурцах методой тонкослойной    66

хроматографии

авторы: Фомичева Л*Г., Ефимова Л.И.

Определение эфирсульфоната в винограде, соке, воде    71

вине методом ТСХ

авторы: Голубев Т«Й₀, Владимирова Л*Г._С Колобродова Ю»И.

Фосфороргаяические соединения

Определение апрекса и каратана в растительных продуктах 74 н воде

авторы: Клисепко М*А*, Им и гида на А„М*

Определение бутифооа в продуктах промышленной лереоа-    80

ботки хлопка-сырца измена» хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

авторы: Талипов ШДа, Дзиянбаева Р.Х., Халимова У До,

Шейнина Р„И., Белобородова Н*Ф«

Полярографический метод определения метилнитрофооа    86

в растительной пробе и почве авторы: Патваыку Ф#И._# Сороковая ЛоВ*

З^ыашо-хроиатохтрафичеокий качественный s колоримотрмческиН 90 ноли явственный методы определения дояиашззрофооа в расти-яельяой пробе и почве автор: Иатраику ®д*

Определение трихлориетафооа-3 в молоке в молочных    &

продуктах с помощью тонкослойной хроматографии авторы: Молочников В.В., Серебренникова' В.А., Мочалов В,И.

Определение фоофамида, антио и карбофооа в воздухе    ЮЗ

методом газо-жидкоотной хроматографии авторы: Клиоенко М«А*, Гиренко Д.Б.

Определение сайфооа в воде, продуктах питания рао-    1°7

тительного происхождении, почве г. биологическом материале

авторы: Клисенко М*А«« Письменная М«В.

Определение оойфооа в воздухе методом хроматографии    П*

п тонкой слое

авторы: Клиоенко М.А,, Письменная М<В»

Определение остаточных количеств фталофооа и фона-    120

лона в_#растительном материале, почве и воде авторы: Новикова К.Ф», Мельцер Ф.Р»

Качественный и количоотвошшй методы определения    Г?.о

фозалона в яблоках» Яблоновых лйотш» почва и вода автор: Вндвпавняа Г.Ф»

ОпределеНИа фталофооа в молоке и мясе методом    133

тонкоовойной хроматографии

авторы: Заболотный К.Ф., Метелица в.К., Пспоклонои А.А.

Количественное колориметрическое опредоление хлорофооа    137

в молоке

автор: СтемпковокаН Л,А.

Определение емндофоов в молоке и *яое авторы: Непоклонов А. А.» Метелица В.К.

Определение байтокса в молоко и мной    jcjft

авторы: Ролз А.П., Непоклонов А.А,

;i9

Ьнаиматический агар-диффуаный метод о ирода ланий    156

фосфороргаанчеоких инсектицидов в продуктах пииотого происхождения авторы: Неиокдонов А.А., Метелица В.К.

Производные карбаматов

Колориметрический метод опредепааиа вупрацшш~1 _э    162

купрьцина-Н, Манеоа, Маркина» ХМТД в воадухе» продуктах питания растительного происхождения и биологических средах авторы: Клисонко М*А«, Векатейн Л.Ш„,

Экспрессное определенно тетраизтилтяураидиоуаьфада    164

(ТМТД) в зерне и зернопродуктах автор: Николаев А.В*

Определение остаточных количеств дикреаила в биодо-    16?

гических средах методом тонкослойной хромалографин автор: Сивохин И.А.

Прочие соединения

Определение 2-*мвтокси-3,6~дихлорбензойной кислоты    172

методом газо~кидкостной хроматографии авторы: Рыжков А*А., Гейд Ю.П,_В Бабин Е.П., Свнри • денко А»С«» Чекавская Л,А.

Количественное определение дикеибы (дианаха,    179

беявеиа~Л) в растениях и в почве методой хроматографии в тонком слое

авторы: Березовский Ч.Я., Самоовах Л.С., Никотин В.В.

Определение диурона, ллнурона, монуронв, проланида,    184

солана, фалорана в воде, почве, овощах методом хрома -тографяи в тонком слое евтор: Оаыосват I.C.

Колориметрический метод определения которая* (пахтаройa)    JH8

в хлопковом масле

аяторц: Новикова К.Ф., Меивцер Ф.Р., Алдомнкч Т*В.

Качественное я количественное определение каптала и    193

фталаиа в лине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, в почве и воде авторы: Вайптрауб Ф.П., Дронь Л,Л,

Определение мельпрокса в воздухе    199

авторы: Сорокина Л.В*, Клнсопго М.А.

Определение прометриня в почве, воде и растительном    203

материале методом хроматографии в тонком слое автор: Дроздова О-А.

Определение фенаэона в свекле, почве и воде    207

авторы: Эгерт В.9., Лиелгалве А.А.

Определение хлората иагиня в препарате-дефолианте,    2.ТЗ

хлопковом масле, ироте, жмыхе, османах, ядрах оемян и волокне хлопчатнике

авторы: Талипов II). Т., "жиппбяова Р.Х., Халимова УЛ*₉ Белобородова Н.Ф.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ САЙФОСА В ВОДЕ, ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ, ПОЧВЕ И БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ

Характеристика препарата

Синонимы: меназон, PP-I75,

Чистый препарат представляет собой белый кристаллический порошок с температурой плавления 1ГО-162⁰. Растворимость его в воде 0,1#, он трудно растворим в большинстве органических растворителей. Выпускается препарат в виде 70# смачивающегося порошка и гранул для внесения в почву.

Принцип метода¹)

Метод основан на извлечении препа-ата иэ исоледуемой пробы органическим растворителем, очистке экстракта и последующем хроматографировании в тонком слое силикагеля. Подвижным растворителем при хроматографировании сайфоса служит смесь - ацетон : н-гекоан : аммиак 16 : 5 : 8. Боны локализации препарата обнаруживают после обработки пластинок раствором бромфенолового синего с азотнокислым серебром с последующим обосцвечиванием фона уксусной кислотой. Количественное определение производят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб о интенсивностью окраски и размером пятен стандартных растворов. Чувствительность определения 1-2 мкг в пробе. Метод специфичен

в присутствии других тиофосфорорганичеоких пестицидов (фовалова, фег^аптона, ци .вала, карбофоса, метафоса, тиофо-оа и др.).

Реактивы и растворы

Диэтиловый эфир медицинский, ацетон х.ч., хлороформ х.ч., аммиак о уд.весом 0,9.

Силикагель марки КСК или ШСК, предварительно очищенный от примесей.

Бромфеноловый оиний водонерастворимый (индикатор).

Кислота уксусная х.ч.

Кислота соляная О^ба

Лаотнокислое серебро х.ч.

Проявляющий реактив: 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и дс.одят до 100 мл I# раствором азотнокислого оеребра в водном ацетоне (ацетон-вода 8:1).

Стандартный раствор сайфооа на эфире или этиловом спирте с содержанием препарата 100 мкг/ыл (0,0100 г чистого ояй-фосе в 100 мл растворителя или 0,0148 г 70# сайфооа н 1«о мл растворителя).

приборы и ваша

Стеклянные пднотинки для хроматографирования размером 9x12 ом.

Делительные воронки на 60 и 250 мл.

Мерные колбы на 100 и 50 мл Конические колбы на 50, 100 и 250 мл Приборы для отгонки растворителей Пульверизаторы стеклянные йямеры л пи хромотогряфиронания

Шприцы или микронипотки для нанесения стандартных рр_Ст. роров.

• Ю9

Капиллярные пипетки для нанесения проб

Бани водяные

Прибор для встряхивания

Камора для опрыскивания хроматограмм

Сушильный шкаф

Приготовление пластинок

Для приготовления сорбционной масон на 16 пластинок берут 40 г силикагеля, I г крахмала, 126 мл дистиллированной волы, Эяваривают крахмал в небольшом количестве воды (15-20 мл), доливают остальную воду, засыпают силикагель и хорошо перемешивают. 10 г сорбционной массы наливают на пластинку и равномерно распределяют по поверхности. Сушат плвотинки при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.

описание определения

Отбор проб. Для отбора средней пробы необходимо?

воды 500 мл овощей 500 г фруктов 500 г почвы 500 г

Овощи и фрукты иэмельчают ножом, тщательно перемешивают и отбирают количество, необходимое для анализа. Землю высушивают на воздухе сутки при комнатной температуре, затем растирают и анализируют навески, укапанные далее в прописи.

Экстракция препарата иэ проб

Вода, 100 мл пробы в колбе с притертой пробкой три раза экстрагируют по 15 мин на приборе для встряхивания эфиром, насыпепимм предварительно водой (100 мл эфира

встряхивают о IO-I5 ил воды, излишек воды сливают), порция-ми по 80 ил* Екотракты объединяют* Насыпают в экотракт около 10 г безводного сернокислого натрия и оставляют на 10-15 мин. Экстракт переносят в прибор для отгонки растворителей. Отгоняют эфир на водяной бане (температура бани 40°) до небольшого объема (около 0,2 ил) и хроматографируют.

Овощи, фрукты, почва* Из 50 г измельченной пробы (зеленый перец 25 г) препарат трижды экстрагируют эфиром порциями по 80 ил, встряхивая на аппарате для вотряхивания по 15 иин. Эфирные экстракты объединяют, оливая их черев слой безводного сернокислого натрия. Упаривают эфирные экотракты на водяной бане (температура бани 40°) до небольшого объема (около I мл). Остатку эфира дают испариться досуха при комнатной температуре.

Биологический материал (кровь, печень, почки, легкие, селезенка, мышечные ткани, жир, мозг, моча, кал)* Для анализа берут 1-2 г материала, тщательно измельчают ножницами, заливают 80 мл эфира и оставляют на I час, периодически встряхивая. Сливает эфир декантацией. Заливают пробу повторно 80 мл эфира и опять оставляют на I чао, периодически встряхивая. Объединяют эфирные экстракты, сушат безводным сернокислым натрием (8-5 г) и упаривают эфир как описано

ВЫ016.

Очистка акотрактов

К сухому оотатку прибавляют 2 мл 0,5 н соляной киоло-ты, тщательно сполаокивая стенки колбы и соскребая оо станок стеклянной палочкой. Сливают смывы в делительную воронку, фильтруя череэ небольшой олой ваты. Колбу еще трижды ополаскивают no I мл 0,5 н соляной кислотой и сливают в ту же делительную воронку. Приливают в делительную воронку 4 мл 0,5 н раствора едкого натра и перемешивают, а затем по каплям продолжают приливать 0,5 я едкий натр до нейтральной реакции (но лакмусовой бумажке). После этого в воронку прибавляют W мл хлороформа, предваритилыю няонмнн

- по

лого водоИ (100 мл хлороформа встряхивают о 20 мл води, остаток води отделают) и встряхивают 1-2 иин. Хлороформея-ний экстракт сливают иа воронки в колбу черва слой безводного сернокислого натрия. Экстракцию повторяют вше трижды по 10 мл, сливая хлороформ черва слой безводного сернокислого натрия. Если объединенный хлороформвними ькитракт мутный, то зго дополнительно сушат безводным сернокислым натрием. Хлороформ отгоняют па водяиой бане (температура бани 40°) под вакуумом до небольшого объема (0,4-0,5 мл). Остатку дают испариться досуха при комнатной температуре до 0,1-0,2 мл и наносят на хроиатограмму.

Хроматографирование

На хроматографическую пластинку ни расстоянии L,b см от нижнего края при помощи капиллярной шшетки наносят на середину пластинки исследуемую пробу в одну точку так, что бы диаметр пятна не превышал I см. Колбочку о экстрактом три раза омывают небольшими порциями эфира (но 0,2 ил), который затем тоже наносят в центр первого пятна, Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартные растворы, содержащие 2,5, 10 или 20 миг препарата. Стандарты наносят микропипеткой или шприцом. Пластинку с нанесенными растворами помотают в камеру для хроматографирования, в которую за 80 минут до разгонки налита смесь растворителей: ацетои-гвкоан-аммиак 15:5:8 по объему.

Край пластинки должен быть погружен в растворитель не более, чем на 0,5 ом. После того как фронт растворителя поднимется на 10 ом пластинку вынимают ив камеры 9 оставляют на несколько минут на воздухе до иопарения растворителя. Ватем пластинку опрыскивают раствором броифенолового синего (проявляющим реактивом) и помещают в сушильный шкаф на 10 мин. при температуре 95-40°* Ватем пластинку опрыскивают 10)5 раствором уксусной кислоты и накрывают чистой стеклянной пластинкой * В присутствии оайфооа появляются синие пятна на *еят»н1 фоне* nj оайфооа 0,44.

Ill

Коли экотракты получаются недостаточно очищенные при ««•.пользовании описанной очистки, то для дополнительной очистки используется двумерная хроматография.

При ртом на хроматографическую пластинку на расстоянии

1.5    см от левого крап и 1,5 ом от нижнего края при помощи капиллярной пипетки наносит исследуемую пробу, С правой стороны пластинки,нн расстоянии 1,5 см от правого края и

1.5    см от нижнего края_;микропипеткой или шприцом наносят стандартный раствор препарата. Отделяют пробу от стандарта чертой. Черту проводят па расстоянии 6 ом от левого края пластинки. Пластинку с нанесенными растворами помещают в камеру для хроматографирования, в которую налита смесь растнорителей (эфир *• хлороформ 1:1) за ВО мин. до разгонки, Пластинку ставят левым краем в растворитель так, чтобы она была погружена в него не более, чем не 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимется до проведенной черты, плаотнпку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе о испарения растворителя. При указанной разгонке отгоняются коэкстрактивные вещества, а препарат остается на старте. Поело того как пластинка высохнет се хроматографируют в сиотоме ацетон : и-гексан : аммиак

15 : 5 : 8, повернув на 90° относительно первой разгонки.

Схема очистки сайфооа от коэкотрактивиых веществ о использованием двумерной хроматографии ("а” - первоначальное направление хроматографирования; ”б^и - направление вторичного хроматографирования).

Количественное определение производят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб и стандартных растворов.

-//г*

Величина 1Ц аависит от адсорбента, размера его чао* тид, количества и природы связующего материала, толщины слоя, природы подвижного растворителя, расстояния^ пройденного растворителем, температуры и времени насыщения кь меры. Поэтому следует производить определение о соблюдением постоянства перечисленных факторов.

Расчет результатов анализа производят по формуле:

X с — мг/кг, гдр В

X - содержание исследуемого препарата в анализируемой цро-бе в мг/кг;

А количество препарата, найденного путем визуального сравнении со стандартом, иг;

В • навеска исследуемой пробы, кг.

НУ

СОДЕРЖАНИЕ

Методические указания по разработке газо-хрома-тографичеоких методов анализа остаточных коли-чеотв пестицидов составлено Пивоваровым Г.А.

ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Определение хлорорганических ядохимикатов салдрина,    II

гексахлорана, гептахлора, ДДТ, ДДД,ДДЭ и д_г.) в воде, овощах, фруктах и биологических средах методом газовой хроматографии- авторы: Гиренко Д.Б., Клисенко М.А.

Определение ДДТ, ДДЭ.ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и    18

молочных продуктах методом газовой хроматографии авторы: Молочников В.В., Мочалов В.И., Моргунова А.П.

Колориметрический метод определения ДДТ в молоке и    23

молочных продуктах

авторы: Молочников В.В., Мочалов З.И.

Определение остаточных количеств гекоахлорбутадиена    27

в вине, соке и воде методом гаэо-кидкоотной хроматографии о использованием детектора по захвату электоронов авторы: Пивоваров Г.А*, Гар К.А., Алексеева Е»М«, Тимофеева 0,Н., Шварцман Г.А.

Спектрофотометрическое определение гекоахлорбутадиена    33

(ГХБД) в воздухе

авторы: Гулько А.Г., Драновокая Л.М.

Определение в растительных ыаолах ДДТ, Гамиа-1ХЦГ и    36

др. хлорорганических пестицидов авторы: Клиоенко М.А., Юркова З.Ф_М

Определение ДДТ,ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола    38

в хлопковых шротах, обогащонннх и иеобогагдинных липидами авторы: Белова А,Б., Новикова Л.В.

Определение ДДТ,ГПХ и у -ГХЦГ в почве, сахарной овекла и 47 картофеле методом тонкослойной хроматографии авторы: Косматый Е.С., Грицаенко Н*Н._в

1

Разработан М.А.Клисенко, М.В.Письменной, ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, палимвгных и пластических маоо

-/СУ-