Методические указания
Методические указания по определению рогора в почве методами газо-жидкостной и тонкослойной хроматографии

ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ

ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ПОЧВЕ (ПДК)

Москва, 1980 год

УТВЕРЖДАЮ

Зам, Главного Государственного санитарного врача СССР

В, Е КОВШИЛО 30 октября 1980 годе М 2264-80

ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ПОЧВЕ (ПДК)

		ПДК
сз	Наименование вещества	мг/кг почвы	Методы определения

1. Дилор 0,5 см. приложение № 1 2. Гептахлор 0,05 » 3. Цинеб 1.8 > 4, Пропанид 1,5 » 5. Тардона 1,4 * 6. Баивел Д 0,25 » 7. Мышьяк 2,0 » 8. Формальдегид 7,0 » 9. Баэудин 0,2 см. приложение № 2 10. Метафос 0,1 > П. Рогор 0,3 » 12. Фозалон 0,5 > 13. Фталофос 0.1 > 14. Прометрин 0,5 см. приложение № 3 15. Хлорофос 0,5 » 16. Карбофос 2,0 » 17. Хлора мп 0,05 » 18. Бейз(у)пирен 0,02 см. утвержденные ПДК № 1968-79 от 21.02 1979 г. 19. Свинец* 20,0 » г20. Хром*® 0,05 в #1. Ртуть 2,1 > 22, Кечьтан 1,0 » 23. ДДТ 1,0 Хроматография в тонком слое, вниигинтокс, (основной)**

3

Вазудин — Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Мельнер Ф. Р., Алдошина Т. В.), Всесоюзный научно-исследовательский институт химических средств защиты растений (Новикова К. Ф.).

Фозалон — Всесоюзный научно-исследовательский инсти-ут гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пла-■•ических масс (Моложанова Е. Г.), Всесоюзный научно-исследовательский институт химических средств защиты растений (Алдошина Т. В., Мельцер Ф. Р., Новикова К. Ф.)» институт экспериментальной метеорологии, г. Обнинск {Бабкина Э. И., Миронюк Г. В., Сиверина А. А., Днбцова А. В.), Всесоюзный институт защиты растений, Ленинград (Иванченко В. Р.).

Рогор — Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Гиренко Д. Б., А корен ко С. Л.).

Фталофос — Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пла-гических масс (Зорьева Т. Д.)*

Л64337 от I9/XI-1980 г._Зк. 1727_

Типография Министерства чдравоохраиения ССС

-ts		ПДК
е: £	Наименование вещества	уг/кг почвы	.Методы определения
*

24. Гексахлоран	1.0	Хроматография в тонком слое, ВНИИГИНТОКС, (основной)**
25. Гамма изомер гексахлорана	1.0	»
26. Полихлорпннен	0.5	»
27. Полиллоркамфен	0.5	»
28. Севин	0,05	»

* ПДК свинца 20 мг/кг почвы без учета среднего фона, равного 12 мг/кг (А. П. Виноградов, Геохимия редких и рассеянных химических элементов в почвах, М. 1950, стр. 220).

** Методы определения пестицидов в почве опубликованы в следующих источниках:

а)    Методическое письмо «Опредление содержания остаточных коли* честв ДДТ, его метаболита ДДЕ и других хлорорганических пестицидов н почве методом хроматографии на бумаге и а тонком слое» — Киев — 1968 г.

б)    Журнал «Химия в сельском хозяйстве», 1969 г., 43—45.

и) Методическое письмо по определению севина в почве, Киев—1968

Контроль за содержанием пестицидов в почве осуществляется в ве сенний, летний и осенний периоды. Отбор проб почвы проводится в па хотном слое <0—30 см).

Примечание: в настоящий документ включены ранее утверждении ПДК (№ 1134-73; № 1496-76; № 1968-79).

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РОГОРА В ПОЧВЕ МЕТОДАМИ ГАЗО-ЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГАФИИ

Настоящие методические указания распространяются на определение содержания ротора в почве при санитарном контроле.

1. Краткая характеристика препарата

Фосфамид, БИ-58, литрам, днметоат. 0₁0*днметн:ь5-(\'-мстилкарбамоилметил)-днтнофосфат.

В чистом виде — белое низкоплавпое кристаллическое вещество, умеренно растворимое в воде (2,5%), с камфарным

41

запахом. Давление паров—110“⁴ мм рт. ст. при 25°. Легко гидролизуется водными щелочами, относительно устойчив в слабо-кислой среде, хорошо растворим во многих органических растворителях.

Молекулярная масса 229,2.

Выпускается в формах 40%-ного к.э., гранулированного пре парата (1,6% рогора на суперфосфате).

Применяется как системный акарицид и инсектицид.

Высокотоксичное вещество. ЛД™ для различных лабораторных животных 100—230 мг/кг. ДОК для цитрусовых и во фруктах— 1,5 мг/кг.

2. Методика определения рогора в почве методами газо-жидкостной хроматографии и хроматографии в тонком слое

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы почвы хлороформом или водой (в зависимости от вида почвы) и последующем определении методами ТСХ и ГХ.

2.2. Метрологическая характеристика метода.

Предел определения для ТСХ —0,1 мг/кг, для ГХ — 0,05 мг/кг.

Процент определения — 75—80%.

2.2.1.    Реактивы и растворы.

Хлороформ, мед.

Ацетон, х.ч.

11-Гексаи, х.ч.

Силикагель марки КСК, предварительно очищенный от примесей.

Для этого силикагель промывают разбавленной 1:1 соляной кислотой, кислоту сливают, силикагель промывают водой, кипятят в течение 2—3 часов с разбавленной I : I азотной кислотой на песочной бане в кругл одой пой колбе с обратным холодильником. Обработанный таким образом силикагель промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушат в сушильном шкафу при температуре 130" С в течение 4—6 часов, периодически помешивая. Силикагель дробят и просеивают через сито 100 мель (0,1*17 мм). Хранят в склянке с притертой пробкой.

42

Натрий сульфат х.ч., прокаленный.

Крахмал растворимый, ч.д.а.

Бромфеноловын синий (индикатор (ТУ МГ УХЛ 271-59),

Азотнокислое серебро, х.ч.

Уксусная кислота 10%-ная.

Проявляющий реактив: 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводит до 100 мл 0,5% —1%-ным раствором азотнокислого серебра fe водном ацетоне (3 ч. ацетона, 1 ч. воды).

Носитель для колонки — хромотон — 80—100 меш., с нанесенной жидкой фазой Sli-ЗО в количестве 5%.

Стандартный раствор рогора в эфире и ацетоне с содержанием препарата 1, 5 и 10 мкг в I мл.

2.2.2. Приборы и посуда.

ПластинКН АЛИ хроматографирования (стеклянные пластинки размером 9X12 см тщательно промывают содой, хромовой смесью, дистиллированной водой и сушат в вертикальном положении. Перед нанесением сорбционной массы их протирают спиртом).

Станок для сушки пластинок.

Колбы конические емкостью 250—300 мл.

Делительные воронки па 250 мл.

Прибор для отгонки растворителя.

Насос водоструйный.

Баня водяная.

Камера для хроматографирования.

11ульверизатор стеклянный.

Прибор для встряхивания.

Эксикатор.

Пипетки для нанесения проб.

Шприц медицинский или микропипетки для нанесения стандартного раствора.

Хроматограф с термоиопным детектором.

Баллон с азотом, содержащий СЬ не более 0,03%.

Баллон с водородом.

Баллон с воздухом.

Колонка стеклянная диаметром 3 мм, длиной 1 — 1,5 м.

2.3. Подготовка к определению.

2.3.1. Приготовление хроматографических пластинок.

Для приготовления сорбционной массы берут 40 г силикагеля КСК, 1 г рас торимого крахмала и 125 мл дистиллированной воды. Крахмал заваривают в воде и в эту массу, при постоянном размешивании добавляют силикагель. Хорошо размешанную сорбционную массу наносят чанной ложкой (дне ложки на нлааинку), равномерно распределяя но ее

поверхности. Пластинки сушат в течение 10—12 часов при комнатной температуре, хранят в эксикаторах.

2.4.    Проведение определения.

2.4. !. Определение методом тонкослойной х|>оэдатогр ]фип.

Экстракция. Для анализа берут 50 г воздушно-сухой поч

вы, растертой в ступке. Препарат из почвы экстрагируют хлороформом трижды по 50 мл, каждый раз встряхивая колбу по 10 минут на аппарате для встряхивания к давая пробе немного отстояться. Экстракт сливают через безводный сульфат натрия в колбочку для отгонки растворителя. В случае анализа почв черноземных районов (почвы с высоким содержанием гумуса) препарат экстрагируют дистиллированной водой трижды по 50—70 мл, каждый раз встряхивая колбу по 10 мин на аппарате для встряхивания и давая пробе отстояться. Водные экстракты осторожно сливают в делительную воронку и добавляют 30—50 мл хлороформа. Экстракцию препарата из воды хлороформом повторяют трижды по 30—50 мл, встряхивая в делительной воронке по 5—7 мин. Хлороформные экстракты сливают через сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя. Отгонку ведут под вакуумом 10—15 мм рт. ст. при температуре бани не более Ь40°С. Растворитель отгоняют до небольшого объема (0,1 — 0,2 мл).

2.4.2. Хроматографирование. Подготовленные экстракты количественно наносят при помощи капиллярной пипетки иа хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна нс превышал 1 см. Центр пятня должен быть па расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбочку с экстрактом 2—3 раза смывают небольшими порциями эфира, который также наносят в центр первого пятна. Справа и сло^а от пробы на расстоянии 2 см от нее наносят стандартные растворы (шприцом или микропипеткой), содержащие 5, 10 и 20 мкг препарата.

Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую предварительно залит г смесь растворителей гексан-ацетон в соотношении 1,5:1. Край пластинки нс должен быть погружен в раствор более, чем и 0.5 см. После того, как фронт подвижного растворителя под нимстси иа 10 см, пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. Пластинку обрабатывают проявляющим рсактнпо? . После высушивания пластинки иа воздухе, ее обрабатывают 5—10%-ной уксусной кислотой. Зоны локализации прспара та обнаруживаются в виде синих пятен на желтом фойе. Величина Ш ротора 0,6—0,65, Р~0 аналога 0,20—0,25.

41

2.5.    Обработка результатов анализа. Количественное определение производят путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы. Площадь пятен измеряют планиметром или с помощью промасленной миллиметровой бумаги.

Расчет, Содержание рогора в анализируемой пробе в мг/кг рассчитывают по формуле:

^х= -4т*^где

X — содержание пестицида в анализируемой пробе, мг/кг;

А — содержание препарата в стандартном растворе; t — площадь пятна стандартного раствора, в мм²; г — площадь пятна пробы, в мм²;

В — масса анализируемой пробы, в г.

2.6.    Определение методом газо-жидкостной хроматографии.

Экстракт хлороформа упаривается до объема 0,2—0,3 мл, на роторном испарителе, а затем досуха на воздухе. Перед хроматографированием остаток растворяется в 1—2 мл аце тона и аликвотная часть (3—5 мкл) хроматографируется.

2.6.1. Условия хроматографирования. Хроматограф с термоионным детектором (вет-106, Цвет-5), Шкала 2,5* 10—¹⁰ А.

Скорость протяжки бумаги — 360 мм/час.

Колонка стеклянная, длиной I м, диаметр 3 мм.

Носитель — хромотон с 5% SE-30.

Температура колонки 180° С; испарителя 210° С.

Скорость азота — 20—22 мл/мин.

водорода— 14—17 мл/мин;

воздуха — 400 мл/мин.

Вводимый объем — 3,5 мкл.

Линейный диапазон детектирования— 1—10 нг.

При указанных выше условиях время элюирования рогора — 1,8 мин, Р=0 аналога — 1,1 мин.

Содержание рогора в анализируемой пробе рассчитывают по общепринятым-формулам.

Приложение М 3

ПРОМЕТРИН — метод основан на реакции образования окрашенных комплексов взаимодействии серосодержащих веществ с бромфеиоЛФйЫм синим в присутствии азотнокислого серебра. Метод заключается в том, что прометрин извлекают «а исследуемой пробы органическим растворителем, зксч^амг ючищают и затем хроматографируют в тонком слое окиОА Мюминия. Чувствительность метода для воды 0,05 мг/л, для почвы и растительных продуктов — ОД мг/кг. Авторы метода: Дроздова А. О., Закордонец В. А. Метод опубликован в журнале «Химия в сельском хозяйстве» № 6, 1969 г.

ХЛОРОФОС — метод определения хлорофоса в почве основан на извлечении препарата из исследуемой среды хлороформом или водой, в зависимости от типа почвы, и последующем определении методом тонкослойной хроматографии с обработкой пластинок раствором йода и проявляющим реактивом (смесь 2% водного раствора резорцина и 10% раствора карбоната натрия в соотношении 2:3). Чувствительность определения 0,03 мг/кг (3 мкг в пробе). Метод избирателен в присутствии других фосфорорганических пестицидов. Автор — Моложанова Е. Г. Методика опубликована в трудах II Всесоюзного совещания по исследованию остатков пестицидов и профилактике загрязнения ими продуктов питания, кормов и внешней серды (г. Таллин, 1971 г., стр. 177—178).

КАРБОФОС — метод основан на извлечении карбофоса из исследуемой пробы органическим растворителем и последующем хроматографировании в тонком слое силикагеля. Пятна карбофоса обнаруживаются после опрыскивания пластинок смесью растворов азотнокислого серебра и бромфеио-лоиого синего в ацетоне с последующим обесцвечиванием фона уксусной кислотой. Чувствительность определения 2 мкг в пробе.

Авторы метода: Клисенко М. А. и Письменная М. В. Метод опубликован в книге Клисенко М, А. и др. «Химический анализ микроколичеств ядохимикатов», М., 1972 г., стр. 84— 87.

ХЛОРАМП — метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы ацетоном с добавлением 1 — 1,5 мл 0,1 И 11С1 и последующем хроматографировании в тонком слое на силикагеле. Препарат обнаруживается после оирыскивл пня пластинок раствором аммиаката серебра в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением. Чувствительность метода 0,16 мг хлорамна в 1 кг почвы.

ИДК химических веществ в почве разработаны:

Бенз(а)пирен — Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР (Перелыгин В. М., Тон-копий Н. И., Перцовская А. Ф., Кашкарова Г. П., Шестопалова Г. Е., Филимонова Е. В., Новикова Е. Э., Аргэ С. /.), Онкологический научный центр АМН СССР (Ильницк*’^ А. П. Шабад Л. М., Соленова Л. Г., Мищенко В. С.), Киева ни научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзсева (Янышева II. Я-, Киреева И. С., Павлова Н. А.).

Свинец — Институт общей и коммунальной гигиены им. А. И. Сысина АМН СССР (Перелыгин В. М., Григорьева Т. И., Перцовская А. Ф„ Динерман А. А., Кашкарова Г. П., Павлов В. Н., Доскина Т. В., Филимонова Е. В., Новикова Е. Э.), Ростовский медицинский институт (Золотов П. А., Пруденко О. В., Ружникова Т. Н., Колесникова Т. В.).

Хром — Институт общей и коммунальной гигиены им, А. Н. Сысина АМН СССР (Перелыгин В. М„ Дииерман

A. А., Перцовская А. Ф., Павлов В. II., Рождественская Н. А. Филимонова Е. В., Донерьян Л. Г., Агрэ С. А., Новикова Е. Э.).

Дилор, цинеб, гептахлор, пропанид, гордона, кельта и — Киевский медицинский институт им. акад. А. А. Богомольца (Гончарук Е. И., Прокопович А. С_м Гесц В. И., Шостак Л.И., Мелепевская А. В., Малашевский В. В., Спасов А. С.).

Банвел-Д, прометрин, карбофос, хлорамн, ртуть—Киевский научно-исследовательский институт обшей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзсева (На и штейн С. Я., Чегринец Г. Я-. Воронова Г. Ф., Юровская Е. М., Гордиенко Н. И., Никуда Р. Г., Безбородко М. Д., Лейбопнч Д. М.).

Мышьяк — Киевский научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А. II. Марщева (Най-штейн С. Я., Вашкулат И. Г.), Государственный институт гигиены, Будапешт, ВИР (Хорват Аманда).

Хлорофос — Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных н плз стнческих масс. (Спыну Е. И., Моложаиова Е. Г.), Киевский научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзсева (Пайштсйн С. Я., Жулписка**

B.    А., Юровская Е. М.).

Мстафос, рогор, фталофос — Всесоюзный иаучно-исследо ватсльский институт гигиены и токсикологии пестицидов, • ' лимерных и пластических масс (Клпсеико М. А., Васям.:

Р. Д., Шмнчидина А. М., Акоронко С. А., Гиренко Д. Б),