ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МЕТОДЫ

определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Часть VI (том И)

МОСКВА 1974 г.

583

КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИМАЗИНА И АТРАЗИНА В ЯБЛОКАХ, ЯГОДАХ ВИНОГРАДА И ПОЧВЕ.

Краткая характеристика препаратов

Атразин - 2-хлор-4-этиламико-6-йзопропил-амвяо-сиш триа-зия и симазин - 2-хлор-4,6-бис/этилашно/-сиш-триазш в чистом виде представляют собой твердые вещества. Они мало раотворимы в воде, но достаточно хорошо растворимы в метаноле, ацетона, хлороформе, метилеюслориде

584

Принцип методов

Определение симазина и атраэина в яблоках и ягодах винограда основано на экстракции препаратов на растительных объектов ацетоном, перераспределении в метиленхлорид, очистке

асаадением коэкстрактивных веществ разбавленной соляной кислотой и реэкстракции триазинов четцреххлористым углеродом.

Для качественного анализа используется тонкослойная хро-вв

матограция окиси крешия. Минимально определяемое количество -I икс препарата в пробе.

Количественный анализ основан на спектро-фотометрическом определении продуктов гидролиза триазинов в УФ области спектра. Чувствительность метода 3-5 мкг в пробе. Метод проверен на различных типах почв.

Реактив» и раствори Ацетон, ч, или технический, перегнанный чад Хлористый метилен, перегнанный.

Метанол, перегнанный.

Четыреххлористый углерод, перегнанный Хлороформ, очищенный коид.серной толстой.

Диэтиловый эфир, очищенный I и. серной кисли гой Соляная кислота, ОД н раствор Серная кислота, 5Q# тствор Окись кремния для люминофоров.

Ст«ндарТ1Шс растворы симазина я атрааикч в ацетоне, 100 мкг/ми Хлорирующий раствор, Смесь равных объемов 1,Ъ% -до раствора КМпО^ и 12&"Ой соляной кислоты. Готовить под тягой!

Л.П.Дронк /ВНИИ биологических (четодов защиты растений, г.Кишинев/.

585

Проявляющий реактив: 0,1 г о-голидина растворяют в 0,1 ил укоуоной кислоты, 0,4 г йодистого калия растворяют в дис-тилированной воде. Раствори сливают вместе и разбавляют водой до 100 мл.

Приборы и посуда

Гомогенизатор,

Спектрофотометр,

Колбы круглодонные 0,1,    0,3,    0,5 л.

Колба Бунзена.

Ворожа Бюхнера,

Насос Комовского.

Воронки делительные 0,1,    0,5    л

Воронки химические, 6 а 10 см.

Пластинки стеклянные размером 8x16.

Приготовление пластинок На стеклянные пластинки наносят тщательно перемешанную смесь I г окиси кремния, 0,1 г гипса и 4-4,5 мл дистиллированной воды. Выдерживают их 30-40 мин на воздухе и активирую*

30 мин при теадературе 75~80°0,

Ход анализа Экстракция препарата из анализируемой пробы Яблоки и ягоды винограда. 100 г измельченных яблок или ягод винограда с заданным количеством гербицида гомогенизируют со 150 мл ацетона до полного разрушения растительных тканей /5-10 мин/. Фильтруют на воронке Бюхнера и промывают осадок на

Фильтре двумя порциями ацетона по 50 мл. Объединенный фильтрат отгоняют при температуре 40°    ,

и уменьшенном давлении /водоструйный насос/ до полного удаления растворителя. Оставшуюся жидкую массу /80-100 мл/ количественно переносят в делительную

воронку, ополаскивая колбу метиленхлоридом. В воронку добав-метиленхлорида

ляют 150-200 мл    и    встряхивают    в    течение    грех    минут.

586

При этом большая часть коэкстрактивных веществ остается в водной фазе* Триазшш переходят в метиленхлорид* После разделения слоев метилензслорид сливают, отгоняют до Небольшого объема /3-5 мл/* который досуха удаляют током воздуха. Остаток растворяют в 10 мл метанола и осаждают воска 100 мл ОД и соляной кислоты.

Раствор фильтруют в делительную воронку*

Осадок на фильтре дважды промывают 60 мл подогретой до 40-50°С ОД н соляной кислотой* Для окончательной очистки солянокислый раст-

растворитель

вор встряхивают с 30 мл четыреххлористого утлерода^сли-вают и отбрасывают. Солянокислый раствор фильтруют через бумажный фильтр в другую делительную воронку, добавляют аммиак до pH 8~Ю /универсальный индикатор/ и реэкстраги-руют триаэины двукратным встряхиванием в течение 2-3-х минут с 50 мл четыреххлористого углерода. Растворитель сливают, пропуская через слой б/в сульфата натрия и концентрируют до объема 0,5-1,0 мл для ТСХ или 10-16 мл для спектрофотометрического определения*

Почва. 100 г воздушно-сухой и просеянной череэ сито почвы экстрагируют ацетоном* Экстракцию проводят следуюдом образом: пробу почвы дважды встряхивают в течение часа на механическом встряхивателе с 200 мл растворителя и фильтруют в кругло-донную колбу через бумажный фильтр. Экстракцию продолжают путем настаиванья, оставляя пробы через ночь со 100 мл свежего растворителя*

Объединенный экстракт /500 мл/ отгоняют под уменьшенным давлением /водоструйный пасоо/ при температуре не выше 40°С до объема 1-2 т, после чего в колбу приливают 20-30 мл 0*1 Я раствора соляпей кислоты. Раствор фильтруют через

587

плотный бумажный фильтр в делительную воронку, дважды ополаскивая колбу и промывая фильтр 10-15 шк раствора соляной кислоты. Солянокислый раствор в делительной воронке подщелачивают аммиаком до рй 8-10 /универсальный индикатор/ и реэкстрагируют атразии или спмазкн двукратным встряхиванием с 80 мл перегнанного хлороформа в течение двух минут, После раздело;, я слоев хлороформ сливают в круглодонную колбу, пропуская его через слой б/в сульфата натрия, отгоняют растворитель /40°С/ до объема 0,5-0,1 для тонкослойной хроматографии или 8-10 мл ;ля спектрофотомотричес-кого определения.

Хроматографирование Наносят пробу и стандартные растворы препаратов па пластинку и хроматографируют в подвижном растворителе хло-роформ-диэтиловый эфир 2:1. Далее пластинку оставляют на воздухе до полного улетучивания паров подвижного растворителя и помещают в эксикатор над хлорирующим раствором на I0-J5 мин* Хлорирование необходимо выполнять под тягой.

Пластилку слегка проветривают, помещая в горизонтальном положении на одну-две минуты и обрабатывают проявляющим реагентом. При атом на светлом фойе проявляются компактные сшше пятна симазииа^ 0,40+0,05, или атразина 0,60fcO,G5,

Открываемый минимум составляет I мкг в пробе.

Спектрофотометрическое определение Раствор триазииа в четыреххлористом углероде гидролизуют двумя мл БО^-ой серной кислоты в течение 2-2,5 час, встряхивая периодически. По окончании гидролиза добавляют 8 мл дистиллированной воды, переносят содержимое в делительную воронку и слой органического растворителя

ЗОЦ

отбрасывают. Водный раствор встряхивают с 20 мя очищенного хлороформа, который также отбрасывают, а гидролизах в другой делительной воронке встряхивают о 20 мл серного эфира. Спектрофотометрируют раотвор в кюветах с толщиной слоя I см при 225, 240, 255 нм. По формуле

я⁸⁴⁰ - т(¥.

находят оптическую плотность исследуемого раствора. Для каждой обработанной пробы необходимо вводить поправку на величину аЮ контрольной пробы. При анализе яблок или ягод винограда значение оптической плотности контрольной пробы изменяется от -0,009 до +0,007. Количественное содержание триазинов находят по предварительно построенному калибровочному графику* Для этого определенное количество препарата /0,0;    0,05;    0,1,....1,0 мл/ вносят в кол

бу, удаляю* растворитель, добавляют 2 мя 50{{ серной кислоты и далее анализируют, так как описано выше. Прямолинейная зависимость сохраняется в пределах от 0 до 100 мкг.

Расчет анализа производят по формуле:

X =     ^-

Р

где: А- количество препарата , найденное по калибровочному графику, мкг.

Р - навеска исследуемого объекта, г.