Министерство сельского хозяйства СССР Главное управление ветеринарии

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ДИАГНОСТИКЕ И ПРОФИЛАКТИКЕ ОТРАВЛЕНИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ КАРБАМАТНЫМИ ПЕСТИЦИДАМИ

Москва *Колос* 19ВЗ

УДК 636.03:615.9:616

Методические указания утверждены Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР (1977 г.)

Министерство сельского хозяйства СССР, 19S3

7.3, Симптоматическое лечение (промывание желудка и т.п.), как при других отравлениях,

8. МЕРОПРИЯТИЯ ПО ПРОФИЛАКТИКЕ ОТРАВЛЕНИЯ ЖИВОТНЫХ КАРБАМАТНЫМИ ПЕСТИШДАМИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЮ ЗАГРЯЗНЕНИЯ ИМИ ПРОДУКТОВ ЖИВОТНОВОДСТВА

8.1.    В совхозах и колхозах необходимо строго соблюдать инструкции, методические указания и правила хранения, транспортировки и применения пестицидов в сельскохозяйственном производстве.

Категорически запрещается скармливать протравленные семена сельскохозяйственным животным, сдавать такие семена на комбикормовые за воды и хлебоприемные пункты. ^п ротравленные семена хранят согласно правилам хранения пестицидов и используют только для посевных целей. В случае потери всхожести протравленные семена должны быть уничтожешы.

Не допускается хранение кормов в помещениях, где находятся протравленные семена и пестициды, а также использование тары и транспорта, загрязненных пестицидами, для перевозки кормов.

Склады пестицидов, места приготовления рабочих растворов, а также обработанные пестицидами участки должны быть надежно ограждены от доступа животных.

Запрещается промывать опрыскивающую аппаратуру с пестицидами в водоемах, используемых для водопоя животных., разведения водоплавающей птицы и рыбы. Места для работы с пестицидами должны подб1фатьея таким образом, чтобы не было стока в указанные водоемы.

8.2.    Ветеринарные специалисты обязаны знать, какие пестициды применяются в хозяйствах, а также систематически осуществлять контроль за соблюдением правил хранения и использования кормов, полученных с обработанных пестицидами участков, чтобы не допустить скармливания животным фуража, загрязненного карбаматными пестицидами.

8.3.    Запрещается убирать на корм животным культуры, обработанные карбаматьыми пестицидами, ранее установленных сроков.

8.4.    Ветеринарные специалисты ветеринарных учреждена ^колхозов и совхозов обязаны систематически направлять в лаборатории пробы кормов для анализа на обнаружение остатков пестицидов. В случае выявления остатков карбаматов в кормах необходимо руководствоваться пунктом 4 настоящих методических указаний.

11

8.5.    Убой животных и реализация продуктов животноводства при возникновении отравления животных карбаматными пестицидами разрешается в сроки, указанные в пункте 3 методических указаний.

8.6.    Ветеринарные обработки животных и животноводческих помещений карбаматными пестицидами (севин, дикрезил, пропок-сур и др.) дотм\ы проводиться под непосредственным руководством ветеринарного врача хозяйства или ветеринарного учреждения в строгом соответствии с действующими наставлениями и инструкциями.

8.7.    Ветеринарные специалисты обязаны вести систематическую разъяснительную работу но профилактике отравлений пестицидами среди населения и работников животноводства.

Приложение 1

КЛИНИЧЕСКАЯ КАРТИНА И ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ЖИВОТНЫХ КАРБАМАТАМИ

Большинство карбаматных пестицидов относят к категории мдлотоксичных (ЛДдо 1000,0 мг/кг), а севин, карбатион, бе-такал, ТМТД, клан, эдитон, купрозан, пропоксур и дикрезил -среднетоксичные С/1Д50 200-1000,0 мг/кг). При остром отравлении севином, пропоксуром, дикрезилом уже через несколько минут у животных отмечается одышка, гиперсаливация, тремор вначале отдельных групп мышц, а затем и всего тела. Тремор сменяется приступами клонико-тонических судорог, появляются признаки отека легких (хрипы, синюшность слизистых оболочек). Смерть наступает через 1-3 ч от асфиксии. Сердце продолжает сокращаться 1,5-2 мин после остановки дыхания, Если асфиксия не достигает критического развития, то через 6-7 ч состояние животных начинает улучшаться, через 10-16 ч ьосстанав швается координация движений, через 2-3 суток наступает выздоровление.

Клиническая картина отравления животных тиокарбаматами характеризуется слюнотечением, потливостью, учащением дыхания, тремором, нарушением координации движений. Эти признаки появляются через 3-7 ч после введения препаратов. Смерть наступает через 2-10 суток.

Характерным отличием острого отравления дитиокарбаматами (ТМТД, карбатион, купрозан) является медленное развитие интоксикации, У животных наблюдается угнетение, малоподвижность, диарея, атаксия, гипотермия, резко ослабляется сердечная деятельность. Животные погибают в состоянии глубокой комы. При благоприятном течении выздоровление наступает на 7-10-й день. За этот период животные теряют в весе до 30%.

Хроническое отравление протекает ссимптомно, но имеет последствие - необратимое гонадотоксическое и эмбриотоксичео-

13

кое действие. Под влиянием ежедневного поступления малых доз севпна, пинеба, ТМТД, цирама, манеба и других карбаматов резко снижается оплодотворяющая способность самцов, подвижность и переживаемость сперматозоидов. У самок нарушается астральный цикл. Развивающиеся плоды погибают, снижается плодовитость самок, увеличивается количество мертворожденного при-шода, а потомство, родившееся живым, оказывается нежизнеспособным.

В результате хронического действия карбаматов изменяется иммунобиологическая реактивность организма (снижается сопротивляемость к возбудителям болезней). Некоторые карбаматы (цирам) являются бластомогенами.

При п сто логоанатомическом вскрытии трупов животных, павших от отравления различными карбаматами, обнаруживается в основном сходная картина более или менее выраженных гемодинамических расстройств, различные виды дистрофии, очаги некроза и некробиоза в печени, почках, мышце сердца, головном и спинном мозге. При отравлении совином гистохимическим методом отмечается резкое снижение количества гликогена в печешь

При отравлении ТМ7Д животные* как правило, истощены,

Приложение 2

МЕТОД ЭКСПРЕССНОГО ОБНАРУЖЕНИЯ СЕВИНА В ТКАНЯХ ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Принцип метода. Экспрессный метод обнаружения севши* оо~ юван на извлечении его из тканей жшютиьхк ацетоном, омыло ши едким натром до 1-нафтола и сонета]ши последнего с па-радпазобензосульфокнслотой с образованием розово-крас-ниго окрашивания.

Чувствительность метода 1 мг севина в 1 кг исследуемой

' ’канн.

Реактивы, растворы и посуда.

Ацетон (по^ТОСТ 2603-63).

Сульфашщовая кислота (по ГОСТ' 5821-69).

Натрий углекислый (по ГОСТ 83-03), 5%-ный раствор.

Натрий азотнокислый (по ГОСТ 4197-06).

Соляная кислота (по ГОСТ 3118-67), 20%-ный раствор.

Этиловый спирт (гю ТУ ИРЕ А 20-66).

Натрий гидроокись (по ГОСТ 4328-66), 5%-ный раствор,

Фильтровальная бумага.

Стеклянный пульверизатор.

Б ашш с притертыми крышка n ш.

I 4

Приготовление парадиазобензосульфокислоты. 4 г сульфшшло-во й' Кислоты ^,-1)астворяют ъ*~ ТГО 5Т^ноГо р а от вор а углекислого натрия и прибавляют 2 г нитрита натрия. Раствор охлаждают льдом и в него медленно (по каплям) вливают 20 мл 20%-ной соляной кислоты, охлажденной льдом. Выпавший осадок отмывают э- иловым спиртом и сушат фильтровальной бумагой.

Для работы готовят 0,5%-ный раствор парадиазобензосуать-фокислоты в 5%-ном растворе едкого натра. Раствор пригоден в течение суток.

Определение. 10 г ткани тщательно измельчают и заливают 20Пмл ацетона в стеклянном сосуде с притертой пробкой. После тщательного перемешивания раствор оставляют стоять на 1-2 ч при температуре плюс 4°С. Затем содержимое фильтруют, фильтрат упаривают воздухом до объема 0,5-1 мл.

На полоску фильтровальной бумаги наносят 0,05-0,1 мл концентрированного экстракта так, чтобы диаметр пя^гх л не превышал 1 см.

Полоску бумаги подсушивают на воздухе, а затем обрабатывают с помощью пульверизатора 0,5%-ным раствором парадиазо-бензосульфокислоты в 5%-ном растворе едкого натра. При наличии в органе или ткани животного севина пятно окрашивается в розовато-красный цвет.

Приложение 3

КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕВИНА И 1-НАФТОЛА В ТКАНЯХ ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

И МОЧЕ

Г1 ринцщт ^метода.

а)    Метод определения севина основан на экстрагировании севина и его метаболита 1-нафтола из патологического материала (органы животных, содержимое желудка и т.д.) бензолом или хлороформом, упаривании последнего воздухом, переводом сухого остатка в этиловый спирт, в котором севин, парализованный щелочью до 1-нафтола, соединяется с даазобензосульфокислотой с образованием изокраски красного цвета. Интенсивность окраски в пределах 0,2-20 мкг в 1 мл колориметркруемой реакционной смеси подчиняется закону Лемберта-Бера,

б)    Метод определения севина в моче основан на очистке ее с помощью уксуснокислого свинца и последующей экстракции препарата из фильтрата к-гексаном.

Определение севина и продукта его метаболизма 1-нафтола производится в спиртовой среде путем реакции соединения его с диа зотированкым диметилнл -фени лендиамином.

15

Чувствительность метода ОД 5-0,20 мг/л или 3 мкг севина i\ анализируемой пробе.

Реактивы и оборудование^

Пензой (по" ГОСТ~5955-68).

Хлороформ (по ГОСТ 3160-51).

Супьфпннловая кислота (по ГОСТ 5821 -69).

Соляная кислота (по ГОСТ 3118-67), 20%-ный раствор.

Натрий углекислый (по ГОСТ 83-6 3), 5%-ный раствор.

Натрий гидроокись (по ГОСТ 4328-66), 10%-ный раствор.

Этиловый спирт (по ТУ ИРЕ А 20-66).

н-Гексан (по МРТУ 6-09-2937-66),

Свинец уксуснокислый средний 3-водный (по ГОСТ 1027-«37),    20%-ный раствор на дистиллированной воде или 20%-ный

раствор основного уксуснокислого свинца (по МРТУ 6-09-6388-69) на 10%-ной уксусной кислоте.

Кислота уксусная (по ГОСТ 61-69).

Натрий сернокислый безводный (по ГОСТ 4166-66).

Глицерин (по ГОСТ 6259-52), 10%-ный раствор на этиловом спирте.

К алия гидроокись (по ГОСТ 4203-65),

Натрий азотнокислый (по ГОСТ 4197-66),

/Ыметил-п-фешшендиамин! сернокислый (по ТУ 7911-910-63),    0,05%-ный    раствор    в    1    н.    соляной    кислоте,    раствор со

храняется в холодильнике 2-3 дня при 0-5°С.

Фотоэлектроколориметр (ФЭК-М или ФЭК-56 и т.п.),

Выпаривателькые чашки.

Химическая посуда £ разная).

Приготовление диазотированной сульфаниловой кислоты. Навео-ку 4 г сульфаниловой кислоты растворяют в 60 мл 5%-ного раствора углекислого натрия и прибавляют 2 г нитрита натрия. Затем смесь охлаждают на льду и в раствор медленно (по каплям) вливают 20 мл 20%-ной соляной кислоты, охлажденной льдом. Выпавший осадок отфильтровывают, отмывают на фильтра 50-100 мл этилового спирта и высушивают при комнатной температуре на фильтровальной бумаге до воздушно-сухого со-с гояния.

Перед постановкой реакции готовится 0,5%-ный раствор дие-з абензосулы)/Окислоты в 10%-ном растворе едкого натра, Реак-Т; m пригоден в течение одного дня.

Ход определения;.

а) Определение севина в тканях животных.

Навеску ткани 10 г измельчают, помещают в банку с притертой пробкой, заливают 10 мл бензола или хлороформа, перемен

шивают стеклянной палочкой и ставят в холодильник (4°С) для экстракции не менее чем на 12 ч. После этого бензол или хлороформ сливают в фарфоровые чашки и в исследуемый материал снова добавляют 10 мл бензола или хлороформа и экстракцию по* вторяют в течение 3-4 ч. Затем экстракты объединяют и испаряют досуха воздухом.

Сухой остаток растворяют в 2-3 мл этилового спирта и сливают в пробирку, после этого фарфоровую чашку дополнительно ополаскивают несколько раз небольшими порциями спирта с таким расчетом, чтобы общее количество спирта для растворения остатка составляло 10 мл,

К спиртовому раствору исследуемог-о материала добавляют 0,05 мл 0,5%~ной диазобензосульфокнслоты в 10%-ном растворе едкого натра. Пробирку встряхивают, содержимое фильтруют через бумажный фильтр и оставляют в штативе. Через 30 мин пробы колориметрируют на фотозлектроколориметре в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 5 мм при длине волны 490 нм (зеленый светофильтр). В качестве контрольной жидкости используют этиловый спирт.

Расчет суммарного количества севина и 1-нафтола проводится по калибровочному графику. Строят его следующим образом; готовят стандартные растворы севина в этиловом спирте с концентрацией ОД-20 мкг/мл объемом по 10 мл каждый. В стандартные растворы добавляют 0,05 мл 0,5%-ной диазобензосуль-фокиелоты в 10%-ном растворе едкого натра и через 30 мин колориметрируют в кюветах с расстоянием рабочих граней 5 мм при длине воллсы 490 нм.

Для кощ'гюпя используют этиловый спирт. На каждую концентрацию делают не менее трех измерений. Значения оптической плотности откладывают на оси X, концентрации на оси У Поскольку для определения севина и 1-нафтола всегда берется 10 г ткани, а для колориметрии 10 мл спиртового экстракта, значения мкг/м п ао графику соответствуют значениям миллиграмм севина и нафтола на 1 кг ткани. Это исключает дополнительные пересчеты*

б) Определение севина в моче.

Кислую мочу разводят 0,25 н, уксусной кислотой в соотношении 1;1. Щелочную мочу разводят 0,5 н. уксусной кислотой (1?1 или 1:2) до кислой реакции. Для очистки от балластных вешеств к разведенной моче прибавляют раствор уксуснокислого свинца из расчета 1 мл 20%-ного раствора на каждые 10 мл разведенной мочи. После этого мочу фильтруют через бумажный фильтр. 2,2 мл фильтрата при этом будут соответствовать 1 мл нерааведенной мочи, взятой для исследований.    ^    у

Фильтрат в количестве j эквивалентном 10 или 20 мл неразведанной мочи, переносят в делительную воронку емкостью 100-250 мл и трижды экстрагируют н-гексаном, используя каждый раз 20-30 мл экстрагента. Экстракты объединяют и осушают путем добавления 1-2 г безводного сернокислого натрия. После этого н-гексановый экстракт сливают в выпаривательную чашку, а оставшийся осадок дважды промывают н-гексаном, который сливают в ту же чашку.

Выпаривание экстрагента (н-гексана) производят теплым воздухом. Когда в чашке остается 5-10 мл экстракта, добавляют 0,2 мл 10%-ного раствора глицерина в этиловом спирте.Остав-щийся н-гексан осторожно выпаривают, продувая над чашкой слабую струю теплого воздуха. После выпаривания н-гексана в чашку добавляют 3 мл 60%-ного этилового спирта и перекосят раствор в колориметрическую пробирку. Чашку второй раз промывают 2 мл 60%-ного этилового спирта и сливают его в ту же колориметртескую пробирку. К раствору в колориметрических пробирках (смыв 5 мл 60%-ного этилового спирта) добавляют по 1 мл раствора едкого калия и охлаждают пробы до 0--5°С. К охлажденному раствору в каждую пробирку добавляют 1 мл диазореактива*

Диазореактив готовится перед употреблением путем смешивания предварительно охлажденных до 0-5°С растворов - 0,05%-ного раствора диметил-п-фенилендиамина сернокислого в 1н. соляной кислоте и 2%-ного раствора нитрита натрия (Ю;1), Через 3-5 мин после добавления диазореактива в каждую пробирку добавляют еще 5,0 мл 60%-ного этилового спирта и пробы помещают в холодильник на 30-60 мин при 0-5°С. Коло-риметрирование проводят, используя в качестве контроля 60%~ иый этиловый спирт, едкий калий и диаэореактив в тех же соотношениях и в той же последовательности, что и в опытных пробах (но без севина) при синем светофию .ре, в кюветах с рабочей длиной 20 мм. Окраска устойчива в течение 6-8 ч (специфическая окраска - малиновая).

Количественное определение препарата в пробах производится по калибровочному графику, выведенному с внесением стандартных количеств севина в мочу и последующего анализа ее i го описанной методике. Предварительно готовится стандартный {>аствор севина с содержанием 100 мкг препарата в 1 мл спирта. Из стандартного раствора в пробы мочи (10-20 мл) вносят соответственно 2, 3, 5, 10, 20 и 30 мкг севина. Пробы £ на лизируются по описанной выше схеме. Реакцию ставят 3 раса. Стандартный раствор препарата для этих целей готовят

18

каждый раэ отдельно* Полученные данные обобщают и по средним величинам строят калибровочный график. Перерасчет содержания севина в мг на 1 л мочи проводят по формуле

С

где X - содержание препарата в 1 л мочи, мг; А - содержанке препарата в пробе, мкг; С - количество мочи, взятой для анализа, мл*

Приложение 4 ОПРЕДЕЛЕНИЕ СЕВИНА В МОЛОКЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С ДЕТЕКТОРОМ ПО ЗАХВАТУ ЭЛЕКТРОНОВ

Принщгп метода , Метод основан на определении севина в молоке путем гидролиза очищенного от примесей экстракта с последующим бромировошгем 1-нафтола и газохроматографического определения с детектором по захвату электронов. Чувствительность метода - 0,02 мг/кг, Процент определения — 75-95.

Реактивы и р<атворы.

н-гексан (по МРТУ 6-09-2937-06), х.ч_м перегнанный.

Ацетон (по ГОСТ 2603-63), х.ч., перегнанный.

Хлороформ (по ГОСТ 3160-51), х.ч., перегнанный.

Бензол (по ГОСТ' 5955-68), х.ч,, перегнанный,

Диметилформамид (но ТУ-71-11-69), насыщенный водой (3;

:1).

Натрий сернокислый (по ГОСТ 4166-66), ч.д.а,, безводный.

Натрий хлористый (по ГОСТ⁴ 4233-66), х.ч,, насыщенный раствор.

Калия оксалат (по ГОСТ 5868-68), х.ч., 5%-ный водный раствор.

Кислота уксусная (по ГОСТ 61-69), х.ч., ледяная.

Серная кислота (по ГОСТ 4204-66), х.ч.

Й од кристаллический (по ГОСТ 4159-64),

Бром жидкий (по ГОСТ 4 1.09-64), 5%-ный раствор в уксусной кислоте, насыщенный кристаллами йода.

Стандартные растворы с содержанием севина по 25 мкг/мл и 5 мкг/мл в ацетоне.

Приборы и посуда.

Микрошлрнц на 5ДО мкл.

Стекловата.

Колбы мерные иа 1 <Ю мд.

19

Колбы круглодонные со шлифом емкостью 100 и 250*300 мл. Цилиндры мерные на 100 и 50 мл.

Воронки делительные на 350-400 мл.

Воронки химические.

Пробирки термостойкие.

Держатель для пробирок.

Пипетки на 1,2,5 мл.

Баня масляная с контактзшм термометром на 100°С,

Ротшаганный испаритель,

Хроматографическая колонка длиной 1,5 м, диаметром 3мм, Газожидкостной хроматограф с детектором по захвату {Электронов,

Ход определения,

25 мл молока помещают в делительную воронку на 250*-300 мл, приливают 5 мл оксалата калия и 5 мл насыщенного раствора натрия хлористого, перемешивают, приливают 100 дох ацетона, энергично встряхивают в течение 1 -2 мин, затем добавляют 100 мл хлороформа и вновь встряхнвазот 2-3 кош. Оставляют воронку в покое до полного разделения фаз {5 шв)₉ л г жни й слой раствора сливают в кругло донную колбу на 250 VJ& t выпаривают досуха на ротационном испарителе при температур ое водяной бани 45~50°С. К сухому остатку приглашают 5 мл диметилформамкда, насыщенного водой (3:1}, охлаждают под струей холодной воды и фильтруют через слой, состоящий цв 5* 7 г безводного сульфата натри;’ в делительную воронку на 250*300 мл. Промывают колбу и сульфат натрия 15 мл того же диметилформамида порциями по 5 мл, приливают 60 мл дистиллированной воды, 5 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 75 мл бензола. Встряхивают 1-3 мин. Нижний слой от-г еляют, а верхний бензольный слой дважды промывают дисткл-/ированной водой по 50 мл. Затем бенз*' ;^ную фракцию высушивают, фильтруя через безводный сульфат натрия в круглодонную колбу со шлифом на 100 мл. Делительную воронку и сульфат натрия промывают 20 мл бензола порциями по 10 мл. Бензол выпаривают на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку приливают 2 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 10 капель концентрированной серной кислоты и оставляют на 5 мин. Затем приливают 0,2 мл уксусной кислоты, насыщенной кристаллами йода и содержащей 5% жидкого брома (по объему), В колбу с содержимым присоединяют обратный холодильник и нагревают 10 мин при 120*130°С, промывают холодильник 5 мл дистиллированной воды, охлаждают содержимое колбы и вносят 2 мл гексана. Встряхивают 1 мин, сливают содержимое

2С

1. ХАРАКТЕРИСТИКА ОСНОВНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Препараты группы производных карбаминовой кислоты широко применяются в сельском хозяйстве з качестве инсектицидов, фунгицидов, гербицидов, нематоцидов и бактерицидов* Они сравнительно малотоксичны для теплокровных животных и перспективны для борьбы с насекомыми и клещами, которые приобретают устойчивость к хлор- и фосфорорганическим соединениям.

В настоящее время в сельскохозяйственном производстве страны применяют 24 карбаматных препарата: бетанал, гексатиурам, гептатиурам, карбатиок, карбин, купрозан, купрощш, милътокс-специаль, поликарбацин, полимарщш, севин, тигам, тиллан, три-аллат, ТМТД, фентиурам, фентиурам-молибдат, хлор-ИФК, щодеб, дарам, эдитон, эптам, ялан. Для борьбы с эктопаразитами животных в ветеринарной практике применяют дикре^ил (производный карбаминовой кислоты).

Производные карбаминовой кислоты различаются по физикохимическим свойствам, стойкости во внешней среде, механизму и характеру действия на организм животных.

Большинство пестицидов этой группы обладают малой и средней токсичностью и слабо выраженной кумуляцией* Однако имеются высокотоксичные соединения и препараты с резко выраженными кумулятивными свойствами.

Для пестицидов' (производных карбаминовой кислоты) характерно поражение нервной и кроветворной систем, эндокринных органов животных. Некоторые из них оказывают аллергенное, бластомогенное, мутагенное и эмбриотоксическое действие.

По химическому строению карбаматные соединения подразделяются на 4 группы; ариловые эфиры алкилкарбаминовых кислот, алкиловые эфиры арилкарбаминовых кислот, эфиры тиокар-баминовых кислот и производные дитиокарбаминовых кислот.

1Д» К ариловым эфирам алкилкарбаминовых кислот относятся: севин, пропоксур, дикрезил. Сюда же относятся такие перспективные препараты зарубежных фи как; асулам, банол, мо~

3

в пробирку и 1 мл верхнего слоя переносят в пробирку о притертой пробкой. Выпаривают гексан до тех пор, пока весь йод не будет устранен (достаточно 1 -2 вып ариваний). Остаток растворяют в 2 мл гексана и 5,0 мкг этого раствора вводят в хроматограф.

Условия хроматографирования. ^Хроматограф Л ХМ-8 МД ^/П^/Г, снабженный детектором по захвату электронов. Истопник радиоактивности -N ^ , скорость протяжки ленты - 0,6 см/мин. Над ряжение питания ДзО - 5 В. Рабочая шкала электрометра цена одного деления 3,5 •10“-*-■*■. Длина стеклянной колонки 1,5 м, внутренний диаметр 3 мм, колонка заполнена хромосорбом (100-120 меш), показатель крупности частиц, промытым кислотой, силанизированным и содержащим 5% ПМФС-4. Перед работой колонка продувается при « 230°С в течение 5-7 ч при скорости газа (азота) 40 мл/мин. Температура колонки -210°С, испарителя - 2 50°С, детектора - 240°С. Скорость го-занпосителя - 80 мл/мин. Время удерживания производного севи-на составляло 6,5 мин.

Количественное определение севина (С) проводят методом соотношения со стандартами по высоте пиков и вычисляют по формуле

где Нм - высота пиков анализируемых проб, мм; Н ст - высота пика стандарта, мм; V - объем гексанового раствора, из которого отбирали аликвоту для ввода в хроматограф (2 мл); Уд- объем аликвоты (5 мкл); А - навеска анализируемого молока, мл; С ст- концентрация стандартного раствора, кг.

Линейность детектирования соблюдается в пределах 0,6 нг -5 нг» Нижний предел определения для молока 0,6 нг севина в 5 мкл.

Приложение 5

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИКРЕЗИЛА В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Приицип метода. Метод основан на экстракции пестицида из исследуемых проб, хроматографическом разделении в тонком слое окиси алюминия, гидролизе щелочью до крезолов и соединении их с диазот кро водным пара-ннтроанилииом. При появлении хроматограмм дикрезил и его метаболиты обнаруживаются в виде

21

эурол, иектрон, пнролан и др. Асулам является гербицидом, остальные препараты - активные инсектициды.

Препараты этой группы обладают антихолинэстераэной активностью, поражают эндокринные железы животных, нарушают окно-лителыю«-восотановптея1И1ые процессы, обмен нуклеиновых кислот, Севину (карбарил, карподин, арилат, севинокс, трикарнам) -1-нафтил-N -мотилкарбамат - белое кристаллическое вещество, растворимость в воде менее 0,1%, растворяется в большинство органических растворителей. Устойчив к действию света и повышенной температуре. Относится к стойким препаратам, сохраняется в почве до одного года.

Выпускают в форме смачивающихся порошков, дустов, гразгул (50 и 85%). Применяется как ипсектоакарицнд против вредителей сельскохозяйственных культур, садов и леса. Рекомендован для обработки крупного рогатого скота против иксодовых клещей. Л актирующих и беременных лш потных обрабатывать запрещается.

Токсичность с о вин а для сельскохозяйственных животных колеблется в широких пределах. Наиболее чувствительны к нему хюшади, -ПДзо около 50 мг/кг. ЛД50 для крупного рогатого окота составляет около 150 мг/кг, овец 225, свиней 500, краешков 800, кур около 2000 мг/кг, Спедифической особенностью токсического действия севина является выраженное вли-шшо на регенеративную функцию.

Дикрезил. Технический препарат, содержащий 84% креэилкар-баматов {смесь 53% мета», 25 пара- и 6% ортоизомеров), вьь пускается в виде 7-40%-ных концентратов эмульсии, смачивающихся порошков, дуста. Обладает выраженными инсектицидными и акартшдными свойствами. По данным некоторых авторов эффективен против шссодовых клещей. Среднетоксичен..

Проттоксур (бай гон, б ай ер 39007, блаттенихс, унден)- 2 изо-пропоксифенил ~ М - метилкарбамат, Эффективен против мух, комаров и других насекомых, а также против клещей, в том чио-по чесоточных. Выпускается в форме 50%-ного смачивающегося порошка, 20%-ного концентрата эмульсии*, а также в виде дус-то I ^. Сред] г стоке л ■ч ен,

1,2. К группе алкиловых эфиров арилкарбаминовыхкислот от-исн ят: бета нал, ИФК, карбид, хлор*-ИФК_# а также препараты зарубежных фирм - ацилат И алипур, Все они активные гербициды. Механизм токсического Действия этих препаратов определяется образованием метгемоглибииа, развитием анемии, изменением ju икопоэза, угнетением активности холинэстераз,

МФК (агермин, карбагран, профам) - изопропил- N -фенилкар-

бамат. Растворимость в воде до 100 мг/л. Растворяется в спирте, ацетоне, бензоле. Умеренно стоек - в помпе сохраняется до двух месяцев. Выпускается в виде смачивающегося порошка или концентрата эмульсии. Применяется d качестве корневого гербицида в посевах моркови, свеклы, лука, хлопчатника и других культур. Малотоксцчен. Остатки ИФК в кормах нс допускаются.

Хлор-МФК имеет сходную с ИФК характеристику, однако более токсичен.

Карбин (барбан, хлоринат, карин) - 4-хлорбутшг-2-ил- N , М -хлррфен и л карбамат. Растворимость в воде 110 мг/л, растворяется в органических растворителях. На растениях разлагается в течение 1 -1,5 мес. Выпускается в виде 12%-ного конце} гг рота эмульсии. Применяется в качестве гербицида для борьбы с овсюгом в посевах зерновых культур. Среднетоксичен. ЛД^у для белых *мышей, крыс, кроликов 600-820 мг/кг.

1.3. К эфирам тиокарбамшювой кислоты относят; триаллят, тиллан, эптам и ялан. Эти гербицида легко проникают в растения. Механизм токсического действия тиокарбаматов полностью не изучен. Эксперименты показывают, что в токсккодштмикс определяющее значение имеют; угнетение в организме окисли-тельно-восстановительных процессов, нарушение обмена нуклен-новых кислот, поражение желез внутренней секреции.

Три ал лат (диптал, авадекс БВ) ~ S -2,3,3-трихлордллил- N ,

N —ди- (изопропил) тиок арба мат. Кристаллическое вещество светло-бурого цвета с неприятным запахом. Растворимость в воде 4 мг/л, растворяется ворганических растворителях. Умеренно устойчив - в почве разрушается в течение 4-10 мес. Выпус-хается в виде концентрата эмульсии и гранул. Применяется в качестве гербицида против овсюга в посевах пшеницы, ячменя, льна, свеклы, гороха. Токсичность для разных видов животных различная: менее чувствительны к нему куры (ЛДп$0'2384 мг/кг), более чувствите ль ны кроли ки (Л Д 5 q В О О мг /кг) и овцы {Л Д 3 q q 600 мг/кг). Обладает слабо выраженным эмбрнотоксическим действием, кумулятивные свойства выражены слабо (Кк 10).

Эптам - (ЭПТК, эптам-6-E, эптам 5-Г) S —этил- N., N -ди (-н-пропил) тиокарбамат. Прозрачная жидкость с но.приятным зо-пахом, плохо растворяется в веде, смешивается с органическими растворителями. Умеренно стойкое вещество - в почве сохраняется около 3 мес. Выпускается в форме концентрата омулд*-сии и в виде гранул. Применяется в качестве    пред всходового

гербицида в посевах люцерны, фасоли, свеклы, моркови, капусты, картофеля, льна и друтих культур. Относится к препаратам

средней токсичности со ззшчителышми колебаниями вид о бой чувствительности. Обладает с Лобовы раженным эмбриотокснческим aciW станем.

1 А. П^юизподшьте дитнокпрбачгиновой кислоты представляют большую группу пестицидов, которые применяют в качестве фунгицидов» Сюда относят: карбатиоп, лирам, цинеб, ТМТД, поли-карой шш, а также комбинированные препараты, содержащие ди~ тио карбаматы (купроцин-1, купрозан, мильтокс-спещншь, гекса-тиурам, гемтатиурам, тагам, полимарцин, фентиурам, феитиурам-молнбдат). По токсичности для разных видов животных производные Д1' т пока рб а м шю во и кислоты могут быть отнесены к различным группам гигиенической классификации. Многие из них в организме животных подвергаются деструкции с образованием боной токсичных продуктов (сероуглерод, сероводород, диметила-мин, метил гиозоцианат и др.). У препаратов (ТМТД, ццрам) в ззтчительиой мере выражены куктулятивкые свойства. Они обладают эмбрио- и го и ад ото к с нч ески мл t, те рато генными, бластомо-гезшыми и мутагенными свойствами. Наиболее выражены эти свойства у манеба (применение в СССР запрещено), цирама и ТМТД (npUMcnojnte строго регламентируется), При длительном поступлении в организм животных дитиокарбаматы могут выделяться с молоком, накапливаться в органах.

Тстраметилтиурамдисульфкд (ТМТД) (тиурам, арозан, тирам, терзан, тотратион АД Кристаллическое вещество белого или кремового цвета, не растворяется в воде, но хорошо растворимо в органических растворителях. Устойчив к действию окислителей и высоких температур. Во внешней среде сохраняется около одного года. Выпускается в виде 50-80%-ных смачивающихся порошков, а также в комбинациях с другими препаратами. Применяется как протравитель семян зерновых, зернобобовых, технических, овощзсых культу, лекарственных и цветочных растозшй. Среднетоксичен для большинства видов животных. illipjQ для кроликов 210-250 мг/хг, овец 228* свиней около 500 мг/кг. При однократном скармливании животным Я-4 кг козщоза’рировшшых кормов, приготовленных из протравленного зерна, ТМТД выделяется с молоком коров до 15 дней* В органах. и тканях свиной и овец он обнаруживается    в течение

15-20 дпч й после однократного скармливания протравлешюго зерна. Обладает выраженной гоиадотролностью и эмбриотоксич-ноетью, При скармливании свиньям в период беременности комбикорма, содержащего 1 /20 часть протравленного зерна, отход молодняка достигает 80%. У кур резко снижается яйценоскость до ■ юллого прекращения яйцекладки. У самцов сельскохозяйственных животных обнаружены явления иекро- и тератоснермии. Молодняк от родителей, подучавших ТМТД в малых дозах., от-

стает в росте и развитии. Длительное храпение в холодильнике мяса, содержащего остатки ТМТД и кулинарная обработка продуктов не устраняют ТМТД.

Цинеб (аспор, дитан, нопознр, парзет, цкмккс) -этиле]ь1,2--бис-диткокарбамат шшка. Белые или слегка желтоватые кристаллы с неприятным запахом. D воде не растворяется. Плохо растворяется в органических растворителях. Под действием тепла и влаги быстро разрушается. Длительное хранение в плохо проветриваемом помещезп-ш может привести к взрыву. Выпускается в форме смачивающегося порошка. Применяется в качестве фунгицида для обработок овощных, зерновых, технических, бахчевых к плодовых культур, виноградников и табака. Малотоксичен. Овцы переносят препарат при введении его внутрь до 5000 мг/кг, а лабораторные животные до 16000 мг/кг. Опасность шшеба для животных состоит в избирательном смбрнотok-сич еском действии, которое проявляется у свиней массовым мертворожденном приплода, а у кур - отставанием молодняка в росте и развитии,

2. ПУТИ ПОСТУПЛЕНИЯ КАРБАМАТНЫХ ПЕСТИЦИДОВ В ОРГАНИЗМ И УСЛОВИЯ, ПРИВОДЯЩИЕ К ОТРАВЛЕНИЮ

СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ животных

Ядовитые вещества, как правило, попадают в организм животных с кормом и водой. Реже oim проникают через органы дыхания и кожный покров.

Основная причина, приводящая к отравлению животных - неправильное и бесконтрольное применение пестицидов, с нарушением существующих инструкций и наставлений.

Животные отравляются карбаматами при следующих обстоятельствах: неправильное хранение и перевозка пестицидов (яды или протравленное зерно хранят водном складе с кормами, для перевозки пестицидов и кормов используют одни и те же транспортные средства, животные имеют свободный доступ к складам пестицидов или местам приготовления растворов и заправки опрыскивающей аппаратуры);

отсутствие своевременной информации животноводов о предстоящих химических обработках сельскохозяйственных угодий;

скармливание животным протравленного ТМТД посевного зерна, зеленой массы, полученной на обработанных карбаматами участках или выпас на них животных, несоблюдение установлен-ных "сроков ожидания" пастьбы после обработки препаратами,

7

отсутствие контроля загрязненности кормов пестицидами, несоб-.поденно установленных ДОК пестицидов в кормах;

промывание опрыскивающей аппаратуры производится в водоемах., предназначенных для поения животных, разведения рыб и водоплавающей птицы, использование тары из-под пестицидов для перевозки хранения воды, отсутствие контроля за качеством воды, несоблюденно установленных ГШК пестицидов в воде;

нарушение состштстьуюших инструкций и наставлений при обработках животных карбаматными пестицидами.

3, НАКОПЛЕНИИ КАРБАМАТОВ В ТКАНЯХ И СРОКИ 1МЙВЕДЕННЯ ИХ ИЗ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ

ЛД. Большинство карбаматных пестицидов относятся к ела-i о кумулятивным соединениям и быстро выводятся из организма. Исключение составляют ТМТД, пирам и изопрогшлфенилкарбамат (МФК), обладающие выраженными кумулятивными свойствами.

11 ри остром отравлении животных сеиином его остатки пол-i остио выводятся из организма кроликов через 4 суток, овец t крупного рогатого скота в течение 15_л свиней через 30 суток . Убивать на мясо после острого отравления разрешается \ роликов через 10 суток, овец и крупный рогатый скот - 20, t виной - 35 суток.

Выведение севшим с молоком после острого отравления продолжается не Солее 7 суток.

При обработках кожных покровов коров сеышом и дикрези-j ом в концентрациях 0,8-1% его остатки выделяются с молодом в течение 2-3 суток. Поэтому обработка этими препара-'Iами лактирующих коров запрещена.

При остром отравлении животных ТМТД (в том числе при скармливании протравленного зерна), его обнаруживают в организме кроликов в течение 15 суток, у кур до 18, овец и крупного рогатого скота до 20 (выделение с молоком до 15 суток), свиней до 30 суток. Убивать шшотиых на мясо после отравлений разрешается (со дня обнаружения с и кш томе в интоксикации)? зеро ликов - через 20 суток, кур - 25 (такие же сроки начала реализации яиц) , овец и крупный рогатый скот -ПО, свиней - 40 суток. Молоко от коров, перенесших отрав-лен, е ТМТД, разрешается употреблять 6 пищу через 30 суток с моменти интоксикации.

Ппноб выделяется из организма животных в течение 10-20 t уток. Поэтому убой животных разрешается проводить через 25 с >л о к.

3.2. Другие пестициды - производные карбаминовой кислоты

выводятся из организма в течение 7-8 суток и убивать вотных на мясо разрешается через 10-12 суток.

3.3. Максимальные количества карбаматных пестицидов накапливаются в печени, почках, легких, кишечнике, мозге, гениталиях, эндокринных железах, которые при убое животных, перенесших отравления карбаматами, бракуются.

4.    ДОПУСТИМЫЕ ОСТАТОЧНЫЕ КОЛИЧЕСТВА (ДОК) КАРБАМАТОВ В КОРМАХ И ПРОДУКТАХ ЖИВОТНОВОДСТВА

4.1.    Молоко, мясо и другие продукты животноводства, содер-жащие остатки карбаматных пестицидов, для питания не используются.

4.2.    Лабораторное определение карбаматных пестицидов проводят по официальным методам (приложения 2-8).

При определении остатков карбаматных пестицидов, не упомянутых в приложениях 2-8, используют методы, изложенные в книге ^Методы определения микрокояичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды" (М./Чхолос? 1977).

4.3.    Для обеспечения получения продуктов животноводства, свободных от остатков пестицидов, необходимо соблюдать регламенты применения пестицидов в растениеводстве.

Не допускаются остатки в кормах следующих препаратов: ТМТД, гексатиурама, гептатяурама, тигама, фштиурама, фонти-урам-молибдата, цинеба, лирам а. Кроме того, в кормах для племенных, лактирующих животных и яйценоской птицы не допускаются остатки хлор-ИФК и севина.

В кормах для откормочных животных допускают содержа-ше остатков севина не более 1,0 мг/кг.

Корма, содержащие допустимые остаточные количества карбаматных пестицидов, следует заменять для продуктивных животных каждые 2-3 недели на корма, не содержащие остатков пестицидов. Для откормочных животных окарм/швание кормов, содержащих ДОК карбаматов, необходимо прекращать не позднее чем за 30 суток до убоя.

5,    ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ЭКСПЕРТИЗА МЯСА

ЖИВОТНЫХ, ВЫНУЖДЕННО УБИТЫХ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ

КАРБАМАТАМИ

5.1,    При обнаружении в мышечной ткани и паренхиматозных органах остатков карбаматных пестицидов туша вместе с внутренними органами подлежит техзшческой утилизации.

5.2.    Мясо животных, вынужденно убитых при отравлении кар-

баматами, если в нем не обнаружены остатки пестицидов, используют согласно пунктам G8, 1.16, 120, предусмотренным в "Правилах ветеринарного осмотра убойных животных и ветери-нлрно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов", утвержденных ГУВ МСХ СССР (1960 г.)

6. ДИАГНОСТИКА ОТРАВЛЕНИЯ ЖИВОТНЫХ КАРБАМАТАМИ

6.1,    Диагноз при отравлении животных карбаматными пестицидами ставится с учетом анамнестических данных, клинической картины, патологоанатомических изменений (приложение 1), характера течения заболевания и результатов химико-токсикологического анализа кормов, воды и патологического материала с обязательным исключением инфекционных болезней.

6.2,    При подозрении на отравление животных необходимо сроч

но направить в ветеринарную лабораторию патологический материал, пробы кормов и воды с сопроводительные документами согласно пунктам 99, 100, 102, 103, 105, 125-139,    141

"Правил взятия патологического материала, крови, кормов и пересылки их для лабораторных исследований", утвержденных ГУВ МСХ СССР (197 J г,).

6.3.    Лабораторное определение карбаматных пестицидов в кор-Mfix и патологическом материале проводят методами, приведенными в приложениях 2-8.

6.4.    При диагностике хронических отравлений особое внимание обращают на воспроизводительную функцию животных (больное количество яловых самок, мертворожденное потомство, уродства, рождение нежизнеспособного молодняка, в птицеводстве -яйца без скорлупы, прекращение яйцекладки, ухудшение инкубационных качеств яиц).

7. ЛЕЧЕНИЕ ОТРАВЛЕНИЙ

7.1. Специфическое лечение животных при отравлении карба-латиыми пестицидами не разработано.

При отравлении севином животным подкожно вводят сульфат «пропила в дозах; лошадям 0,02-0,08 г, крупному рогатому ско-■у и,01-0,00, овцам и свиньям 0,005-0,05 г на голову в сочетании с подкожным введением бензогексоиия в дозе 1-!> мг/кг.

При отравлении ТМТД внутринешю вводят аскорбиновую кислоту в дозах; лошадям и крупному рогатому скоту 0,5-1,5 г, мешчм животным 0,02-0,1 г на голову; подкожно вводят ни-

1 'ИДОКСИИ ( ВИТаМИН Но) - 1 мг/кг.

О)