Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств диметоморфа в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2211—07

Издание официальное

Москва * 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты нрав потребителей

и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств диметоморфа в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2211-07

Рабочие градуировочные растворы диметоморфа готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.

7.4.2.    Раствор № 1 диметоморфа для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора диметоморфа с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1), разбавляют ацетоном до метки. Раствор хранится в холодильнике в темноте в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения диметоморфа из исследуемых образцов методом «внесено-найдено».

7.4.3.    Рабочие растворы N2 2-5 для градуировки (концентрация 0.25 -2.5 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 2.5, 5.0, 10.0 и 25.0 см³ раствора №1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки смесью гексан-ацетон (8:2, по объему), приготовленной по п, 7.3., тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 - 5 с концентрацией диметоморфа 0.25, 0.5, 1.0 и 2.5 мкг/см³, соответственно. Растворы хранятся в холодильнике (в темноте) в течение 10-ти дней.

7.5, Установление градуировочных характеристик

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость суммы площадей хроматографических пиков (Е)- и (2)-изомеров (мВ*сек) от концентрации диметоморфа в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№2-5.

В испаритель хроматографа вводят 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.4. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

7.6. Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстракта

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 30 см, внутренним диаметром 13-15 мм уплотняют тампоном из стекловаты, выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г флорисила (предварительно дезактивированного 4% по массе деионизованной воды) в

МУК 4.1.2211-07

20 см³ гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонка готова к работе.

7.7. Проверка хроматографического поведения диметоморфа на колонке

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора № 1 для градуировки с концентрацией диметоморфа 10 мкг/см³ (п. 7.4.2.), растворитель упаривают досуха. Остаток растворяют в 5 см³ смеси гексан-ацетон (8:2, по объему) и наносят на колонку, подготовленную по п. 7.6. Колбу обмывают 3 см³ этой же смеси, которые также наносят на колонку. Промывают колонку 160 см³ смеси гексан-ацетон (8:2, по объему), первые 50 см³элюата отбрасывают.

Далее элюат отбирают фракционно (по 10 см³), упаривают, остатки растворяют в 2 см³ смеси генсан-ацетон (8:2, по объему), анализируют по п. 9.4.

Фракции, содержащие диметоморф, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.

ПРИМЕЧАНИЕ: Проверку хроматографического поведения вещества следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

8. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами 25896-83 «Виноград свежий столовый, ТУ», 28472-90 «Виноград свежий ручной уборки для консервирования. Требования при заготовках и поставках», 26313-84 «Продукты переработки плодов и овощей», «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (№2051-79 от 21.08.79).

Отобранные пробы ягод винограда и виноградного сока хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 10-ти дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18°С.

11

9. Выполнение определения 9.L Экстракция

9.7.7, Виноград (ягоды)

Образец измельченных ягод винограда массой 25 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³, вносят 100 см³ ацетона, гомогенизируют в течение 3-х минут, затем помещают на встряхиватель на 30 мин. Экстракт фильтруют через складчатый бумажный фильтр, декантируя в мерный цилиндр вместимостью 250 см³ с пришлифованной пробкой. Экстракцию пробы повторяют новой порцией ацетона объемом 80 см³, встряхивая 20 мин. Экстракт также фильтруют в мерный цилиндр, промывая остаток на фильтре 20 см³ ацетона.

Доводят общий объем раствора в цилиндре до 250 см³ ацетоном, перемешивают. Аликвоту раствора объемом 100 см³ (соответствующую 10 г анализируемого образца) переносят в колбу для упаривания вместимостью 250 см³, добавляют 20 см³ деионизованной воды, концентрируют на ротационном вакуумном испарителе (при температура 35-40°С) до водного остатка (около 25 см³) и подвергают очистке по п. 9.2.

9.7.2. Виноградный сок

К образцу виноградного сока массой 25 г в конической колбе (с пришлифованной пробкой) вместимостью 250 см³ добавляют 100 см³ ацетона, интенсивно встряхивают в течение 5 мин, помещают в холодильник (4°С) на 1 час. Экстракт фильтруют через складчатый бумажный фильтр в мерный цилиндр вместимостью 250 см³, промывая остаток на фильтре 20 см³ ацетона.

Доводят общий объем раствора в цилиндре до 250 см³ ацетоном, перемешивают. Аликвоту раствора объемом 100 см³ (соответствующую 10 г анализируемого образца) переносят в колбу для упаривания вместимостью 250 см³, добавляют 20 см³ деионизованной воды, концентрируют на ротационном вакуумном испарителе (при температура 35-40°С) до водного остатка (около 25 см³) и подвергают очистке по п. 9.2.

МУК 4.1.2211-07

Я2. Очистка экстракта перераспределением е системе несмешивающихся растворителей

Водный остаток, полученный по п. 9.1.1. или 9.1,2, переносят в делительную воронку вместимостью 150 см³. Колбу ополаскивают 30 см³ ацетонитрила, который также переносят в делительную воронку. Вносят в воронку 30 см³ гексана, 10 см³ 5%-ного водного раствора хлористого натрия, интенсивно встряхивают в течение 5-ти мин. После полного разделения фаз верхний органический слой отделяют и отбрасывают, Водную фракцию возвращают в делительную воронку и операцию промывки встряхиванием ее в течение 5-ти мин с гексаном порциями по 30 см³ повторяют еще дважды. Верхние гексановые слои отбрасывают. Нижнюю водную фазу вновь возвращают в делительную воронку, вносят 30 см³ дихлорметана, интенсивно встряхивают 5 мин. После разделения фаз, нижний органический слой отделяют, фильтруя через безводный сульфат натрия (20 г), помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 150 см³. Операцию экстракции повторяют новой порцией дихлорметана объемом 30 см³, встряхивая в течение 5 мин. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха и подвергают дополнительной очистке на колонке по п. 9.3.

9,3, Очистка экстракта на колонке с флорсилом

Остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.2, растворяют в 5 см³ смеси гексан-ацетон (8:2, по объему), растовор наносят на колонку, подготовленную но л. 7.6. Колбу обмывают дважды этой же смесью порциями по 3 см³, которые также наносят на колонку. Промывают колонку со скоростью 1-2 капли в сек 160 см³ смеси гексан-ацетон (8:2, по объему), первые 50 см³ элюата отбрасывают.

Последующие ПО см³ элюата собирают в круглодонную колбу вместимостью 250 см³. Раствор упаривают досуха при температуре не выше 35°С, остаток в колбе растворяют в 2 см³ смеси гексан-ацетон (8:2, по объему), анализируют содержание диметоморфа по п. 9.4.

9,4, Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Газовый хроматограф «Кристалл-2000М», снабженный детектором электронного захвата ионов

13

Колонка капиллярная ZB-5, длиной 15 м, внутренним диаметром 0,53 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм Температура детектора; 320°С испарителя; 300°С Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 100°С, выдержка 1 мин, нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 280°С, выдержка - 5 минут, нагрев колонки со скоростью 50 градусов в минуту до температуры 300°С, выдержка - 4 минут.

Скорость газа 1 (азот): 30 см/сек, давление 11,399 кПа, поток 4,0547 см7мин.

Газ 2: деление потока 1 : 2,017; сброс 8,179 см³/мин Хроматографируемый объем: 1 мм³ Ориентировочное время выхода диметоморфа:

(2)-изомер - 11 мин. 56 сек.

(Е)-изомер - 12 мин. 23 сек.

Линейный диапазон детектирования 0,25-2,5 нг Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор диметоморфа с концентрацией 2,5 мкг/см³, разбавляют смесью гексан-ацетон (8:2, по объему), не более чем в 50 раз.

10. Обработка результатов анализа

Содержание диметоморфа в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

C*V*K

X^е-------- —    ,    где

ш

С - концентрация диметоморфа, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной суммы площадей хроматографических пиков (Е)- и (Z)-H30Mep0B, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

ш - масса анализируемого образца, г.

К=2,5 (с учетом объема экстракта, взятого для анализа).

МУК 4,1.2211-07

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

2-\Х_х-Х_г[т^

№ +*i) *^r

где Х[, Х₂- результаты параллельных определений, мг/кг;

г- значение предела повторяемости (таблица 1), при этом

г — 2.8ст_г.

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде;

(X ± А) мг/кг при вероятности Р= 0.95,

где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А = 5 *Х/ 100,

где 5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде; «содержание диметоморфа в пробе менее 0>05мг/кг»*

* - 0,05 мг/кг - предел обнаружения.

15

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецинзионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки С_А должна удовлетворять условию:

где ± д_лУ(±Д_л?) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/кг, при этом:

Д_л =±0,84 А, где А- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А = 5 *Х/ 100,

где 8- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном определяемых концентраций, таблица 1), %.

Контрольный параметр процедуры К_к рассчитывают по формуле: К

где JCу X,С_д среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

МУК 4.1 2211-07

14. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Ларькина М.В., Рогачева С.К. (ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им, Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора); Иванов Г.Е. (Роспотребнадзор),

18

ББК 51.21 0 60

О 60 Определение остаточных количеств диметоморфа в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Рос потребнадзора, 2009. - 18 с.

L Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эри* смана (авторы Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Ларькина МВ., Рогачева С.К.)

2.    Рекомендованы к утверждению комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1

от 29.03.2007 ).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 25 мая 2007 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Псч.    л,    1,25

Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш,, 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009

МУК 4.1*2211-07

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

25 мая 2007 г.

Дата введения: 15 августа 2007 г.

Определение остаточных количеств диметоморфа в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газ ожид кости о й хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2211-07

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации диметоморфа в ягодах винограда и виноградном соке в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг,

Диметоморф - действующее вещество препарата АКРОБАТ МЦ, ВДГ (600 + 90 г/всг), д.в. манкоцеб + диметоморф, фирма производитель «БАСФ»

(£,22-4-[3-(4-(хлорфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)акрилоил]морфолин

(IUPAC)

СН30 ОСН3    CHjO    ОСНз

QiHaCINO* Мол. масса 387,9 Смесь (Е)- и (2)-изомеров в соотношении 1:1. ¹

Бесцветное кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления 127-148°С; (Е)-изомер 135,7-137,5°С, (2)-изомер 169,2-170,2°С. Давление паров при 25°С: (Е)-изомер 9,7* 10^ мПа, (Z)-изомер 1,0*10"¹ мПа. Растворимость в органических растворителях при 20“23°С (г/дм¹): ацетон - 88 (Е), 15 (Z); циклогексанон - 27 (Z); дихлорметан - 315 (Z); диметилформамид - 272 (Е), 40 (Z); гексан -0,04 (Е), 0,02 (Z); метанол, толуол - 7 (Z). Растворимость в органических растворителях смеси (Е)- и (2)-изомеров (г/дм¹): гексан - 0,11; метанол - 39; этилацетат - 48,3; толуол - 49,5; ацетон - 100, дихлорметан - 461. Растворимость в воде при 20°С (мг/дм¹):    19    (pH    5),

18 (pH 7), 16 (pH 9). Коэффициент распределения н-октанол - вода (20°С) K_ow logP = 2,63 (Е)-нзомер; 2,73 (2)-изомер. Гидролитически и термически стабилен при нормальных условиях, Устойчив более 5 лет в темноте. (Е)- и (2)-изомеры на солнечном свету подвержены взаимопревращению.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD 50) для крыс - 3500-4300 мг/кг, мышей 3700-5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD 50) для крыс > 5000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (ЬК₅₀) для крыс > 4,2 мг/дм¹ (4 часа).

Область применения препарата

Диметоморф - системный фунгицид для борьбы с заболеваниями, вызываемыми оомицетами, особенно с возбудителями милдью винограда и фитофтороза картофеля и томатов.

ВМДУ диметоморфа в винограде 0,1 мг/кг.

L Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р=0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

4

МУК 4.1.2211-07

Метрологические параметры

Таблица 1

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±6, % Р=0,95 Стандартное отклонение повторяемости, аг, % Предел повторяемости, г, % Предел воспроизводимости, R, % Виноград (ягоды) от 0,05 до ОД вкл. 50 5,8 16 19 более ОД до 0,5 25 5,5 15 18 Виноград-кый сок от 0,05 до ОД вкл. 50 6Д 17 20 более 0,1 до 0,5 25 6,0 17 20

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п — 20) приведены в таблице 2. Таблица 2

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р — 0,95, п - 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций мг/кг Среднее значение определения % Стандартное отклонение, S,% Доверительный интервал среднего результата, +, % Виноград (яго- ; ды) 0,05 0,05-0,5 92,4 4,7 5,8 Виноградный сок 0,05 0,05-0,5 92 Д 4,9 6Д

2. Метод измерения

Методика основана на определении вещества с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором электронного захвата ионов после экстракции из анализируемых пробы ягод винограда и виноградного сока - ацетоном, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и на колонке с флорисилом.

5

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки. Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме пробы: 0,25 нг.

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии 2-го действующего вещества - манкоцеба, его метаболита этилентиомоче-вины (ЭТМ), а также компонентов препаративной формы.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

J.i. Средства измерений

Газовый хроматограф «КристалЛ-2000М», снабженный Номер Госрееесгоа детектором электронного захвата ионов с переделом детектирования по линдану 5x10'14 г/с, предназначенный для работы с капиллярной колонкой 14516-95 Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104 Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г ГОСТ 7328 Колбы мерные вместимостью 2-100-2,2-500-2, 2-1000-2 ГОСТ 1770 Меры массы ГОСТ 7328 Микрошприц МШ-10 или Hamilton 701 вместимостью 10 мм3 (США) ГОСТ 20292 Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см3 ГОСТ 29227 Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой вместимостью 10 см3 ГОСТ 1770 Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100,250, 500 и 1000 см3 ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

J.Z Реактивы

Диметоморф с содержанием действующего вещества 97,6% (БАСФ, Германия)

Ацетон, чда

Ацетонитрил для хроматографии, хч

Вода б ид истилл и р о в а н н ая, деионизованная или перегнан*

ная надКМпС>4

н-Гексан, хч

Метилен хлористый (дихлррметан), хч

МУК 4.1.2211-07

Натрий сернокислый* безводный, хч    ГОСТ    4166

Натрий хлористый* хч    ГОСТ    4233

Флорисил, для колоночной хроматографии (60-100 меш) фирмы «SERVA»

3,3' Вспомогательные устройства, материалы

Аквади стиллятор

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс Бумажные фильтры "красная лента", обеззоленные Воронки делительные вместимостью 150 см³ Воронки конусные диаметром 30-37 и 60-70 мм Гомогенизатор Груша резиновая

Колбы плоскодонные вместимостью 100, 150 и 250 см³ Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100 и 250 см³

Колонка хроматографическая стеклянная длиной 30 см, внутренним диаметром 13-15 мм

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50

Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария

Стаканы химические, вместимостью 100 и 400 см³

Стекловата

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Хроматографическая колонка капиллярная ZB-5, длиной

15 м, внутренним диаметром 0*53 мм, толщина пленки

сорбента 0*5 мкм

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12Л .019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по

7

МУК 4.1.2211-07

ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельнодопустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5, Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору;

7, Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов, раствора внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с флорисилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонке.

7.7. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетон

Ацетон перегоняют над небольшими количеством КМпО* и прокаленным карбонатом калия.

8

МУК 4.1.2211-07

7.L2. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентокси-дом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7,1.3. н-Гексан

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.L4. Метилен хлористый

Растворитель промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.2.    Приготовление 5%-ногораствора хлористого натрия

В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 25 г хлористого натрия, растворяют в 300-350 см³ дистиллированной воды, доводя водой до метки, тщательно перемешивают.

7.3.    Приготовление смеси гексан-ацетон (3:2, по объему)

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 800 см³ гексана и 200 см³ ацетона, тщательно перемешивают.

7.4.    Приготовление градуировочных растворов и раствора

внесения

7.4.    L Исходный раствор диметоморфа для градуировки (концентрация 100 мкг/см²). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г диметоморфа, растворяют в 50-70 см³ ацетона, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике (4-6°С) в темноте в течение месяца.

9

1