Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств имидаклоприда в ягодах красной и черной смородины, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2286—07

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств имидаклоприда в ягодах красной и черной смородины, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2286-07

МУК 4.1.2286-07

грациями 0.1 и 1.0 мкг/см³ готовят из стандартного раствора с концентрацией 0.5 мг/см³ методом последовательного разбавления по объему изопропиловым спиртом.

2,5.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация имидаклоприда в растворе) в хроматограф вводят по 20 мм³ градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации имидаклоприда в градуировочном растворе (мкг/см³)

2.5.5. Подготовка патрона Диапак С-8 для очистки экстракта

Концентрирующий патрон Дипак С-8 промывают последовательно с помощью шприца 50 см³ ацетона и затем 50 см³ воды со скоростью 5 см³/мин. После чего он готов к работе.

2.5.6. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1 см помещают тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 30 см³ смеси гексан - этилацетат (50:50, по объему). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку последовательно промывают 30 см⁵ элюента №2 и 30 см³ элюента №1 со скоростью 1-2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

2.5.7. Проверка хроматографического поведения имидаклоприда на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу емкостью 10 см³ отбирают 0,1 см³ стандартного раствора имидаклоприда с концентрацией 10 мкг/см³. Отдувают растворитель током теплого воздуха (температура не выше 40°С), остаток растворяют в 5 см³ элюента №1 и наносят на колонку. Колбу обмывают еще 5 см³ элюента JNfel и также вносят на колонку. Промы-

10

МУК 4 Л .2286-07

вают колонку 120 см³ элюента №1, которые отбрасывают, затем 100 см³ элюента №2 со скоростью 1-2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 см³ каждая, упаривают, остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.3.) и анализируют на содержание имидаклоприда по п. 2.6.7.

Фракции, содержащие имидаклоприд, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют по п. 2.6.7. Рассчитывают содержание имидаклоприда в элюате, определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для этого объем элюента.

Примечание: параметры удерживания имидаклоприда и сопутствующих экстрактивных веществ могут меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

2.5.8. Проверка хроматографического поведения диквата на патроне

Диапак С-8

В мерную колбу емкостью 100 см³ отбирают 1,0 см³ стандартного раствора имидаклоприда с концентрацией 0,1 мг/см³, растворитель удаляют в токе азота и доводят объём до метки дистиллированной водой и наносят на приготовленный по п. 2.5.6. патрон. Как только уровень жидкости достигнет верхнего края патрона, его промывают 50 см³ дистиллированной воды, патрон подсушивают током азота со скоростью 150 см³/мин в течение 15 мин и затем смывают имидаклоприд 70 см³ ацетона. Отбирают фракции по 10 см³ каждая, упаривают, остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.3.) и анализируют на содержание имидаклоприда по п. 2.6.7. Суммируя результаты, рассчитывают содержание имидаклоприда в элюате, определяя полноту вымывания вещества из патрона и необходимый для очистки экстракта объем элюента.

2.5.9 Подготовка приборов и средств измерения

Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

П

МУК 4.1.2286-07

2.6. Проведение определения

2,6.1. Извлечение имидаклоприда из ягод чёрной и красной смородины

Образец предварительно гомогенизированных ягод чёрной смородины помещают в коническую колбу емкостью 250 см³ с притертой пробкой, добавляют 100 см³ 75%-го водного ацетона и экстрагируют в течение 15 мин на ультразвуковой бане. Суспензию фильтруют на стеклянной воронке через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу и экстракцию повторяют с 50 см³ 75%-ного водного ацетона. Объединенные экстракты испаряют до водного остатка (30-35 см³) на роторном испарителе при температуре не выше 40°С, доводят объём экстракта до 100 см³ дистиллированной водой.

Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.5 (ягоды красной смородины) или 2.6.4 (ягоды чёрной смородины).

2.6,2. Извлечение имидаклоприда из семян рапса

Навеску размолотых на лабораторной мельнице семян рапса массой 20 г помещают в коническую колбу ёмкостью 250 см³, приливают 100 см³ ацетонитрила и экстрагируют в течение 15 мин на ультразвуковой бане. Суспензию фильтруют на стеклянной воронке через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу и экстракцию повторяют с 50 см³ ацетонитрила. Объединенные экстракты выпаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40°С. Сухой остаток растворяют в 100 см³ дистиллированной воды, выдерживая его в течение 15 мин на ультразвуковой ванне. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.5.

2.63. Извлечение имидаклоприда из масла рапса

Образец масла массой 20 г растворяют в 100 см³ гексана, насыщенного ацетонитрилом, помещают раствор в делительную воронку объёмом 250 см³ и переэкстрагируют имидаклоприд трижды ацетонитрилом, порциями по 50 см³, встряхивая смесь каждый раз в течение 2-3 минут и собирая нижний ацетонитрильный слой. Объединенный экстракт промывают дважды гексаном порциями по 20 см³, встряхивая смесь каждый раз в течение 2-3 минут. Верхний гексановый слой от-

12

МУК 4.1.2286-07

брасывают. Ацетонитрильный экстракт выпаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40°С. Сухой остаток растворяют в 100 см³ дистиллированной воды, выдерживая его в течение 15 мин на ультразвуковой ванне. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.5.

2.6.4. Очистка экстрактов на патронах Диапак С-8

Полученный по п. 2.6.1. раствор количественно переносят в подготовленный по п. 2.5.5. патрон Диапак С-8. Колбу обмывают ещё 5 см³ дистиллированной воды и также переносят на патрон (Не допускать пересыхания патрона!). Патрон промывают 50 см³ дистиллированной воды. Патрон подсушивают в токе азота со скоростью 150 см³/мин в течение 15 мин. Имидаклоприд смывают 50 см³ ацетона. Элюат собирают, выпаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40°С. Сухой остаток растворяют в 100 см³ дистиллированной воды, выдерживая его в течение 15 мин на ультразвуковой ванне. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.5.

2.6.5. Очистка экстрактов

Полученные по п.п. 2.6.1. - 2.6.4. водные экстракты промывают в делительной воронке объёмом 250 см³ трижды гексаном порциями по 30 см³ (верхний органический слой отбрасывают), встряхивая делительную воронку каждый раз в течение 1-2 минут. Водную фазу экстрагируют трижды хлористым метиленом порциями по 30 см³, встряхивая делительную воронку каждый раз в течение 2-3 мин и собирая нижний органический слой.* Объединённый экстракт промывают в делительной воронке дважды 0,02М раствором NaOH порциями по 30 см³, пропускают через слой безводного сульфата натрия (2 г), осушитель промывают 10—15 см³ хлористого метилена. После этого экстракт выпаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40°С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту

2.6.6.**

Внимание! Отделение водного слоя следует производить только после полного расслоения жидкостей в делительной воронке.

* В случае образования сравнительно стойких эмульсий для сокращения времени расслоения можно добавить в делительную воронку:

13

МУК 4.1.2286-07

на стадии промывки экстрактов гексаном ~ небольшое количество (до 5 см³) этилового спирта, а на стадии лереэкстракции — насыщенный раствор хлорида натрия (15-20 см³).

** В случаях, когда очистка экстрактов контрольных проб дает удовлетворительные результаты дополнительную очистку на колонке с силикагелем можно исключить.

2.6.6. Очистка на колонке с силикагелем

Сухой остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по п.2.6.5, экстрактов,, количественно переносят двумя порциями смеси гексан - этилацетат (50:50, по объему) по 5 см³ в кондиционированную хроматографическую колонку (п.2.5.5,). Промывают колонку 120 см³ элюента JVbl. Элюат отбрасывают. Имидаклоприд элюируют 70 см³ элюента №2> собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 250 см³. Раствор выпаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре не выше 40°С. Сухой остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ и 20 мм³ раствора вводят в жидкостный хроматограф.

2.6.7.    Условия хроматографирования

Жидкостный хроматограф "Альянс" фирмы Waters с УФ детектором (Waters 2487) или другой с аналогичными характеристиками.

Рабочая длина волны 268 нм.

Предколонка Waters Symmetry 018 для защиты аналитической колонки.

Колонка Symmetty С-18 (250 х 4.6) мм, 5 мкм (Waters, USA).

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 20:80. Скорость потока 1 см³/мин. Время удерживания имидаклоприда 11,9±0.2 мин.

Объем вводимой пробы 20 мм³.

Линейный диапазон детектирования 0.1 -2.0 мкг/см³,

2.6.8.    Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание имидаклоприда в образцах ягод красной и чёр-

14

МУК 4.1.2286-07

ной смородины, семенах и масле рапса (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

S2 C- V

где S_r площадь пика имидаклоприда в стандартном растворе,

мм²;

S₂- площадь пика имидаклоприда в анализируемой пробе, мм²;

V - объём пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см³;

Р - навеска анализируемого образца, г;

С - концентрация стандартного раствора имидаклоприда, мкг/см³. Содержание остаточных количеств имидаклоприда в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений. Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор имидаклоприда 2 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

3. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости{1):

2- |Х,-Х₂| -100

----------------<_г (1)

(X, + Х₂)

где Хь Х₂ - результаты параллельных определений, мг/кг; г - значение предела повторяемости (г = 2.8а_г).

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

4. Оформление результатов Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) мг/кг при вероятности Р=0.95,

15

МУК 4.1 .2286-07

где X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А= 8*Х/100,

8 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения» (например: менее 0.005 мг/кг*, где *-0.005 мг/кг - предел обнаружения)

5. Контроль качества результатов измерений.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

5.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

5.2.    Плановый внутри лабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки Са должна удовлетворять условию:

Са “ А _л,х + А„л »

где ± А д_тх А_л>х ) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

Д_л =±0.84 Д

16

где А - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

А —6*Х /100,

8 — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле;

К_к = У-Х-С₀₎

где X', X, С_а - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.4) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле;

К=^А\_Х+А\_Х

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

|К_к|<К,    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

5.3, Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости;

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R);

2-1 Х| - Х₂| • 100

----------------------<R,

(Х, + Х₂)

17

МУК 4.1*2286-07

где Хь Х₂ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.

6. Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1005-88).

При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12Л.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1,004-91.

7. Требования к квалификации оператора

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п.5.

8. Разработчики

Долженко BJHL, Цибульская И.А., Юзихин О.С.

(Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург).

18

МУК 4.1.2286-07

Температура плавления 144°С.

Давление паров 4 хЮ'⁷ мРа (20°С), 9 х10~⁷ мРа (25°С).

Коэффициент распределения в системе октанол-вода K_ow lgP^O.57 (21 °С).

Растворимость (г/л) при 20°С: в воде - 0.61; дихлорметане - 55; изопропиловом спирте - 1.2; толуоле -0.68; н-гексане < 0.1.

Стабилен к гидролизу при pH 5-11-

Острая пероральная токсичность LD₅₀ для крыс - 450 мг/кг. Острая дермальная токсичность LD₅₀ (24 часа) для крыс - более 5000 мг/кг. Не ирритант для глаз и кожи (кролики). Острая ингаляционная токсичность LCso (4 часа) для крыс - более 5323 мг/м^{1 2}, 69 мг/м² воздуха (аэрозоль). LC₅o (96 часов) для рыб - 211 (237) мг/дм².

Имидаклоприд практически не токсичен для птиц, пчёл, дождевых червей, водорослей.

Мутагенной и тератогенной активности в стандартных тестах не обнаружено.

Область применения. Имидаклоприд - системный инсектицид нервно-паралитического действия группы неоникотиноидов. Эффективно уничтожает листовую тлю, белокрылку, минёров, трипсов, колорадского жука, долгоносиков на хлопчатнике, рисе, картофеле, кукурузе, сахарной свекле, овощных культурах, цитрусовых, косточковых и семечковых плодовых в течение вегетационного периода. Может использоваться для обработки, как почвы, так и надземных органов растений.

Гигиенические нормативы для имидаклоприда в России: для ягод чёрной и красной смородины, семян и масла рапса гигиенические нормативы в России не установлены.

МУК 4,1.2286-07

Методика основана на определении имидаклоприда методом ВЭЖХ с использованием УФ детектора после его извлечения из образцов водно-ацетоновой смесью или органическим растворителем с последующей очисткой перераспределением между двумя несмешивающимися жидкими фазами, на колонке с силикагелем и на патронах Диапак С-8.

2.7.2. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р^0.95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций

Таблгща I

Метрологические параметры

Объект анализа Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5,% Стандартное отклонение повторяемости, 0Г>% Предел повторяемости, г, % Предел воспроизводимости, R, % Красная смородина (ягоды) 0 01-0 1 50 5.1 13.3 222 Черная смородина (ягоды) 0 01-0 1 50 5.2 14.6 22.6 Семена рапса 0 01-0 1 50 55 15.4 23 9 Масло рапса 0 01-0 1 50 56 15 7 24 3

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п-20) приведены в таблице 2.

5

МУК 4Л .2286-07

Таблица 2

Объект анализа Предел обнару жения, мг/кг Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение 3,% Доверительный интервал среднего результата, % Красная смородина 0 01 0 01-Ю 1 80 8 62 54 Черная смородина 001 ооГ-oi 813 62 54 Семена рапса 001 0 01-01 80 5 64 56 Масло рапса 001 0 01-0 1 80 5 6 6 60

2.1.3. Избирательность метода

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографического анализа.

2.2. Реактивы и материалы

Азот газообразный высокой чистоты, ТУ 6-16-40-14-88 Ацетон, осч, ТУ 6-09-3513-86.

Ацетонитрил для ВЭЖХ, ^ИВ-230НМ" или х.ч., ТУ 6-09-3534-87. Бумажные фильтры "красная лента", ТУ 6.091678-86.

Вода бидистиллированная, деионизированная, ГОСТ 6709-79. Дихлорметан, х.ч., ТУ 6-09-3716-80.

Имидаклоприд, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,9% (Sigma-Aldrich).

Калий углекислый, х.ч., ГОСТ 4221-76.

Калия перманганат, ГОСТ 20490-75.

Кальция хлорид, х.ч., ГОСТ 4161-77.

Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77.

Натрий двууглекислый, ГОСТ 83-79.

Натрий сернокислый безводный, ч,, ГОСТ 4166-76, свежепрокаленный

Натрия гидроксид, хч., ГОСТ 4328-77 н-Гексан, х ч, ТУ 2631-003-05807999-98, свежеперегианный. Подвижная фаза для ВЭЖХ смесь ацетонитрил - вода (20:80, по объему)

6

МУК 4Л.2286-07

Силикагель для колоночной хроматографии 60 (0.040-0.063 mm) (Merck, Германия).

Стекловата.

Фосфора пентоксид, ч., МРТУ 6-09-5759-69.

Элюент №1 для колоночной хроматографии: смесь гексан — этил-ацетат (50:50, по объему).

Элюент №2 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этил-ацетат (10:90, по объему).

Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а., ГОСТ 22300-76.

2.3. Приборы и посуда

Жидкостный хроматограф "Альянс" фирмы "Waters" с УФ детектором (Waters 2487) с дегазатором и автоматическим пробоотборником или аналогичный.

Колонка Symmetry С-18, (250x4.6) мм, 5 мкм (Waters).

Предколонка Waters Symmetry С-18.

Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-2001 или аналогичные.

Гомогенизатор, МРТУ 42-1505-63.

Установка ультразвуковая «Серьга», ТУ 3.836.008.

Мельница ножевая РМ-120 и лабораторная зерновая ЛМЗ, ТУ 1-01-0593-79.

Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналогичный.

Бидистиллятор.

pH-метр универсальный ЭВ-74, ГОСТ 22261-76.

Насос водоструйный, МРТУ 42 861-64.

Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС, ГОСТ 25336-82Е.

Колбы круглодонные на шлифах КШ10 и K11I250 29-32 ТС, ГОСТ 25336-82Е.

Воронки лабораторные В-75-110, ГОСТ 25 336-82,

Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

Цилиндры мерные вместимостью 50, 100, 500 и 1000 см³, ГОСТ 1770-74.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 и 1000 см³ , ГОСТ 1770-74Е.

7

МУК 4.1.2286-07

Пипетки мерные вместимостью 1,2, 5,10 см³, ГОСТ 29169-91.

Колонки стеклянные (25x1) см.

Патроны Диалак С-8

2,4. Отбор и хранение проб

Отбор проб ягод смородины производится в соответствии с ГОСТ 6829-89. «Смородина черная свежая. Требования при заготовке, поставках и реализации». Пробы ягод смородины хранят до анализа в морозильной камере при температуре не выше -18°С в,течение 6 месяцев. Отбор проб семян рапса производится в соответствии с ГОСТ 10852-86. «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб». Семена хранят при комнатной температуре в полотняных мешочках, перед анализом доводят до стандартной влажности и измельчают. Масло рапса хранят в холодильнике при температуре 0-4°С в герметично закрытой стеклянной таре в течение 6 месяцев.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 см³ растворителя упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40°С до объема 1 см³ и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.

2,5.2 Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку (Symmetry С-18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (1 см³/мин) до стабилизации нулевой линии в течение 1-2 часов.

2.5.3. Приготовление растворов

Для получения 75%-го водного ацетона в Колбе емкостью 1 дм³ смешивают 750 см³ ацетона и 250 см³ дистиллированной воды, используя мерные цилиндры.

МУК 4.1.2286-07

Для приготовления 0,05М раствора К₂С0₃ 6,9г карбоната калия помещают в мерную колбу ёмкостью 1000 см³, растворяют при перемешивании в 600 см³ дистиллированной воды и доводят объём раствора до метки.

Для приготовления 1М раствора NaOH 40г едкого натра помещают в мерную колбу ёмкостью 1000 см³, растворяют при перемешивании в 600 см³ дистиллированной воды и доводят объём раствора до метки.

Для приготовления 0,02М раствора NaOH 20 см³ 1М раствора едкого натра помещают в мерную колбу ёмкостью 1000 cm^j и доводят объём раствора до метки дистиллированной водой.

Гексан насыщают ацетонитрилом, встряхивая 500 см³ гексана со 100 см³ ацетонитрила в делительной воронке объёмом 1000 см³ и отделяя после расслаивания жидкостей верхний гексановый слой.

Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с водой в соотношении 20:80 по объему, используя мерные цилиндры.

Для приготовления элюента №1 в колбе на 1000 см³ смешивают 500 см³ н-гексана и 500 см³ этилацетата. Для приготовления элюента №2 в колбе на 1000 см³ смешивают 100 см³ н-гексана и 900 см³ этилацетата.

Приготовление стандартного и градуировочных растворов

Берут точную навеску имидаклоприда (50 мг), переносят в мерную колбу на 100 см³, растворяют навеску в ацетонитриле и доводят до метки. (Стандартный раствор с концентрацией 0.5 мг/ см³). Градуировочные растворы с концентрациями 0.1, 0.2, 0.5, 1.0 и 2.0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы - смесь ацетонитрил: вода (20:80, по объему).

Стандартный раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0-4°С в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение суток.

При изучении полноты извлечения имидаклоприда из ягод чёрной и красной смородины используют ацетонитрильные растворы вещества. Растворы внесения с концентрациями 0.1 и ГО мкг/см³ готовят из стандартного раствора с концентрацией 0.5 мг/см³ методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом. При изучении полноты извлечения имидаклоприда из семян и масла рапса используют растворы вещества в изопропиловом спирте. Растворы внесения с концен-

9

1

Методика определения имидаклоприда в ягодах красной и чёрной смородины, семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2Л. Основные положения

2. /. L Область применения и принцип метода

2

Настоящий документ устанавливает методику определения остаточных количеств имидаклоприда в ягодах смородины, семенах и масле рапса в диапазоне концентраций 0.01-0.1 мг/кг.