Утвержден 31,07.1973 № 1112—73
Определение гексахлорбутадиена в вине, соке и воде газожидкостной хроматографией
Гексахлорбутадиен (ГХБД) представляет собой жидкость с температурой кипения 215 °С и относительной плотностью при 20 °С 1,6820. ГХБД плохо растворяется в воде, хорошо растворяется в органических растворителях, устойчив к кислотам и щелочам.
Принцип метода. Метод1 основан на извлечении препарата из пробы вина, сока, воды отгонкой с водяным паром и последующей экстракции я-гексаном. Идентификация и количественная оценка проводится на хроматографе с детектором по захвату электронов.
Реактивы и растворы
Гексан х. ч. перегнанный.
Натрий сернокислый безводный х. ч.
Серная кислота х. ч.
Хлористый натрий х. ч.
Стандартный раствор ГХБД в гексане (0,1 и 0,001 мкг/мл).
Приборы и посуда
Установка для отгонки и экстракции (рис. 4).
Химические стаканы на 50 и 500 мл (по одному).
Колбы мерные на 100 мл (четыре).
Колба на 50 мл с притертой пробкой.
Мерный цилиндр на 50 мл.
Пипетки на 1 и 10 мл (по одной).
Электроплитки с закрытой спиралью.
Микрошприцы на 10 мкл.
Хроматограф с детектором по захвату электронов (с 3Н, 63Ni или 239Ри источником ионизации). Газ-носитель при работе с 3Н детектором -гелий х. ч., при работе с 239Ри или 63Ni детекторами - азот особой чистоты.
Экстракция. Экстрагирование ГХБД из пробы проводится в установке (рис. 4). В колбу помещают 50 мл пробы вина, сока или воды. В делительную воронку предварительно наливают 10 мл гексана. Нижнюю часть воронки погружают в стакан с холодной водой. Колбу с про-
бой нагревают на плитке с закрытой спиралью до кипения и отгон (20 мл) собирают в делительную воронку под слой гексана. Затем аллонж отсоединяют от холодильника, приподнимают над уровнем жидкости и ополаскивают 2 мл гексана. Делительную воронку закрывают пробкой и встряхивают 5 мин. Дают слоям разделиться, нижний слой сливают в химический стакан на 50 мл, а верхний - в колбу (или другой сосуд) с притертой пробкой на 50 мл.
Содержимое стакана (водная или водно-спиртовая фаза) переносят обратно в ту же делительную воронку, стакан ополаскивают 3 мл гексана, который также переносят в делительную воронку. Экстрагирование проводят встряхиванием в течение 3 мин. После разделения слоев нижний слой сливают в тот же химический стакан, а верхний - в сосуд, содержащий первый гексановый экстракт. Экстракцию повторяют. Объединенные гексановые экстракты сливают в делительную воронку и дважды промывают дистиллированной водой (по 20 мл). Гексановый экстракт количественно переносят в мерный цилиндр на 50 мл, используя для слоласкивания воронки 3 мл гексана. Измеряют объем экстракта и для обезвоживания к нему добавляют 1 г сернокислого натрия.
|
|
Рис. 4. Установка для отгона и экстракции:
I - колба для отгона; 2 - переход от колбы к холодильнику с заглушённым верхним отводом; 3 - холодильник; 4 - аллонж с оттянутым концом;
5 - делительная воронка с отметкой 30 мл. Для нагревания колбы используют электроплитку с закрытой спиралью. Кроме того, на плитку кладут асбестовую сетку. Все шлифы в установке стандартные. |
Идентификация и количественная оценка. При газожидкостном хроматографическом определении ГХБД применяют стеклянную колонку (допускается использование колонки из нержавеющей стали) длиной 1500—2000 мм с внутренним диаметром 4 мм, заполненную хромосор-бом W (80—100 меш) или подобным носителем, на который нанесен
5
диметилсилоксановый полимер SE-30 (или подобная стационарная фаза) в количестве 5 %.
Температура колоночного термостата 120 °С, детектора 140° при работе с тритиевым источником и 200 °С при работе с плутониевым или никелевым источником. Температура испарителя 210 °С, скорость расхода газа-носителя 60 мл/мин.
Идентификацию пика ГХБД проводят путем сравнения времени удерживания стандарта ГХБД и изучаемого соединения. Для количественного определения проводят абсолютную калибровку детектора параллельно с анализом пробы. В колонку последовательно вводят трижды 1—10 мкл экстракта. Трижды вводят также стандарт ГХБД с расчетом, чтобы высота пика стандарта приближалась к высоте пика исследуемой пробы. Вычисляют среднее значение высот пиков стандарта и пробы. Содержание ГХБД рассчитывают по формуле.
CV
•Р9
X - содержание пестицида в пробе, мг/кг или мг/л;
С — количество пестицида, найденное по калибровочному графику, нг;
V - конечный объем раствора, из которого отбирают аликвоту для хроматографирования, мл;
Га - объем аликвоты, вводимый в хроматограф, мкл;
Р - масса или объем анализируемой пробы, г или мл.
Примечание. 1. При анализе бродящего вина или сусла требуются следующие дополнительные операции: а) для предотвращения вспенивания содержимого при отгонке в перегонную колбу добавляют 5 г хлористого натрия х. ч.; б) объединенный гексановый экстракт в делительной воронке промывают дважды по 5 мл концентрированной серной кислотой, а затем дистиллированной водой 2 раза по 20 мл для удаления следов серной кислоты.
2. При необходимости определения ГХБД в пробах с содержанием менее 0,1 мкг/л конечный объем экстракта упаривают на водяной бане с дефлегматором (плотная елочка, диаметр 15 мм, длина 200 мм). При упаривании дефлегматор должен все время быть смочен стекающей флегмой.
3. Методикой предусматривается использование детекторов с различными радиоактивными источниками. Для каждого детектора перед началом работы должен быть установлен диапазон линейности по стандартному раствору ГХБД. В границах установленного диапазона в дальнейшем проводятся количественные определения ГХБД в пробах.
1
Г. А. Пивоваров, Е. М. Алексеева, К. А. Гар (ВНИИСХЗР).
О. Н. Тимофеева, Г. Л. Шварцман (МолдНИИ пищевой промышленности).
