МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРО -КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Справочное

издание

Под редакцией

доктора биологических наук М. А. КЛИСЕНКО

МОСКВА «КОЛОС» 1983

Отбор проб растительного материала на корню

Максимальная величина поля или партия дли отбора проб	Маге риал	Способ отбора проб*	Величпа средней npoSM или исходного обрами	Подготовка среднего обратив	Величина среднего об рези*, кт
100 га	Злаковые на корню	Зерновы Методы ОШ, 0,5 кг в	3 кг	Зерно отделить, измель-	0,25—0,50
100 га	Кукуруза	точке Семена кормовых культ Методом СС, не менее	пур на корню Початки из 18 рас-	чить, тщательно перемешать и выделить средний образец Зерно отделить, измель-	0,25-0,50
50 га	Боб кормовой	18 растений Методом ПД	тений 1000 бобов	чить и отвесить средний образец То же	0,5—1,0
50 га/30 т	Рапс, сурепица, горчица	Промышленные Метод СС. 0.5 кг в	культуры 3 кг	Семена вышелушить,	0,25
50 га/30 т	Мах масличный	точке Метод СС, 0,5 кг в	3 кг	измельчить, перемешать и отвесить средний образец То же	0,25
50 га/ЭО т	Подсолнечник	точке Метод СС, по 5 корей-	20—30 корзинок	> »	0,25
20 га/30 т	Лен	иок в точке Метод СС	1 кг коробочек	а »	0,25
20 га/30 т	Хмель	Метод ПД, взять нес-	0,30 кг шишек	Шишки измельчить, пе-	0,25
100 га		кольхо шишек		ре мешать и выделить средний образах

3 С- Максимальная М-ЛЯГЯИИ* ПОЛЯ иля партии дли отЛорв проб Материал Способ отбора проб среднее пробм ИДИ ПС ЙОДНОГО OCfMMla Подготовка среднего обрами Вслижая среднего оврага* ■ КГ 50 га/100 т Кормовая свекла, Метод ПД, не менее 15 Нс мсмсс 15 корней. измельчить, перемешать и выделить средний образец Корни вымыть, обсу- 0,5 50 га/100 т брюква Картофель целых растений Метод ПД, с 15 точек нс менее 3 кг Нс менее 3 кг шить, почетвертовать. От каждого взять Ч, часть, четвертинки измельчить, перемешать и отвесить средний образец Клубни вымыть, обсу- 0.5 взять окаю 50 гнезд выборочно шить, с каждого взять патовину или четверть, измельчить и отвесить средний образец Овощные культуры 2—5 га 0,5-0,25 Капустные овощные килтуры 20 га 1 Капуста белая, красная, 1 | Метод ПД, не менее 10 I 4 кг | С каждого кочана взять 1 0.5 савойская растений, не мсисс Ч, часть. Перед из 1 1 4 КГ 1 мельчением четвертинок! Овощные корнеплоды (морковь, петрушка, сельдерей. с толовая свекла, редис, редька и ДР.)

Крупные — 3 кг. мелкие — I кг, ранние —0,25—0,5 кг Метод ПД. корни, а для овощей, используемых в ранний период развития (петрушка, столовая свекла). целые растения

Отбросить несъедобные части растений, остатки материл.'л вымыть, обсушить, крупные овощи почетвертовать и отбросить */,. Пробу измельчить, перемешать и выделить средний образец

---

Me ком***»**» «.«■wi пол* ua imi.tvm дли	Материал	Способ отбор* гроб
отборе Проб
6-10 га	Капуста цветная	Метол Г1Д, нс пенсе 10
		растений, не менее 2 кг
6 га	Капуста кольраби	Метод ПД, не менее 10
		растений, не менее 0,5 кг
Б га	Капуста брюссельская	Метод ПД. учитывая
5 г а		головки, растущие на рваной высоте и равных частях растения, не менее 10 растений
	Лиственные овощи (са-	Метод ПД, не менее
	лат, шпинат, щавель)	10 растений
5 га	Укроп	Метод ПД, только
		листья

Величина средней пробы или исходного обрита*	ПОДГОТОИК* Среднего образца	Иглнчам среднего обрами. кг
	срезать и отбросить поверхность предыдущего среза, отбросить несъедобные листья, измельчить и выделять средний об-
2 КГ	Отбросить иесгедобныс части, остальное измельчить, перемешать и выделить средний образец	0,25
0.75 кг	Отбросить несъедобные части, остальное измельчить, перемешать и выделить средний образец Измельчить, перемешать, выделить с ре..-кнй образец	0.5
Не менее 1 кг		0,25
Салаг —0.5 кг Щавель —0.25 кг	Отбросить несъедобные части, растение вымыть, обчистить, измельчить и выделить средний образец	0.25
0.25 кг	Отбросить непригодные части, измельчить, перемешать и отвесить средний образец	0.25

Максимальна* агляхаа пол* или партии для отбора пров Материал Способ отбора проб Величина средне* пробы или исходного обраацг Оодгогопха среднего образца Пелизина с|*Аиаго образца. кг 5 га Молодой укроп, укроп для посодхи огурцов Метод ПД, целые растения 0,5 КГ Измельчить целые растения, перемешать и отвесить средний об-раэсц 0,25

Луковичные растения

10 га	Лук. чеснок. лух-порсЛ	Метод ПД, в полной зрелости	Лук, лук-порей — 1 кг, чеснок — 0.5 кг	Отбросить несъедобные части, растения измельчить, перемешать и отвесить средний образец. Для лука и лука порея с каждой штуки взять половину
5 г*	Лук-резанец, лук-батуи, лук-порей в ранней стадии развития	Метод ПД. целые растения	Лук, лук-порей — 0.5—I кг, .тук-резанец, лук-батуи— 0,25 кг	То же
5 га	Бобовые овощи (фасоль, горох, боб)	То же	0,5—1 кг бобов	Семена выделить, измельчить и выделить средний образец
50 га	Фасоль «зеленый боб»	> »	0.5 кг	Целые бобы измельчить, перемешать и выделить средний образец
20 г*/30 т	Помнзоры, перси	» 1	Мелкие овощи — 0,5—2 кг, крупные овощи — 2 кг	Овощи вымыть, измельчить и выделить средний образец

ic 3

Максимы) ьи* а велкам* пола ■да партии для отбора проб Материал Способ отбора проб Велктмма средней пробы НАМ исходного Обрами Подготовка среднего обрами Велвчииа среднего обрети» 20 га/500 т Огурец и бахчевые То же 10 овощей, из крупных бахчевых взять вырезки — масса пробы 0,5 — 3 кг Овощи вымыть, измельчить II выделить средний образец. Из крупных бахчевых взять вырезки 0.5 5 га Спаржа > > 0.5 кг Растения вымыть, измельчить и выделить средний образец После удаления листовых пластинок растения вымыть, высушить н выделить средний образец 0.25-0.5 5 га Ревень .Метод ПД. выборочно листья ГриЛы 2 кг (без листовых пластинок) 0.5 Шампиньоны и другие грибы Метод К. руководствуясь правилами сбора грибов Фрукты Не менее 0,5 кг Грибы измельчить, перемешать н отвесить средний образец 0.5 200 га/500 т Семечковые фрукты Ло 30 деревьев — выборочно, свыше 30 деревьев —метод ПД, в зависимости от площади, с 20—30 деревьев. Фрукты следует снимать с разных сторон дерева, с разной высоты и глубины кроны До 30 деревьев — 5 кг. до 1 га — 7 кг, 1—10 га — 10 кг. 10—30 га-12 кг. свыше 30 га — 15 кг Фрукты почетвертовать, от каждого плода взять >/« часть, четвертинки измельчить, перемешать и отвесить средний образец 0.5

П иймяпми

Максимальна* делании* полп или па|гтии ДЛЯ отбора проб Матерям Способ отборе про;, Волями** среди»* пробы или ягодного образца Подготовка среднего образца Ислянйиа среднего образца. кг ДО 200 га/200 т Косточковые фрукты (персики, абрикос ы. сливы) До 30 деревьев — выборочно, свыше 30 деревьев—метод ПД с 15—20 деревьев До 30 деревьев 4 кг. до 1 га —6 кг, свыше 1 га —8 кг Плоды поделить пополам, от каждого взять половину без косточки, измельчить, перемешать и выделить средний образец 0.5 До 200 га/100 т Вишни, черешни, сливы То же До 30 деревьев — 1.5    кг, до 1 га — 2 кг, свыше 1 га— 2.5    кг Косточки удалить, плоды измельчить, перемешать и отвесить средний образец 0.5 Орехи (грецкие, лещина) > » До30 растений 1 кг. свыше 30— 1,5 кг Из орехов вынуть ядра, измельчить их, пере-мешать и отвесить средний образец 0.25-0.5 10 га Ягоды (смородина, крыжоекнх*) До 30 кустов пробу взять с каждого куста с разной его стороны и глубины. свыше 30 кустов-метод СС с 25— 35 кустов До 30 кустов — не менее 1 кг*, свыше 30 кустов — не менее 1,5 кг Из тщательно перемешанного исходного образца взять половину, измельчить се. перемешать и отвесить средний образец 0.5 До 200 га Виноград Метод СС. боковые части кистей 1,5 кг Взять отделенные от основания боковые части кистей, тщательно перемешать исходный образец и взять половину. измельчить ее. перемешать и отвесить средний образец 0.5 До 1 га Мягкие фрукты (клубника. земляника, малина) Метод ПД До 500 м1—1,5 кг, 500 м*—0,25 га-2,5 кг, свыше 0,25 га—2,5 кг Тщательно перемешать исходный Образец, взять патовину, измельчить се, перемешать и отвесить средний образец 0,5

• Дл« ыж' инкхо С крупным! плодами проб* должна Cut», не менее 1,5 кг.

Приложение 2

Отбор проб мяса и внутренних органов убойных животных и проб рыбы

Материал Способ отбора Величии средней пробы или исходного образца Проба Величина среднего обрами, кг Рогатый скот и свиньи Выборочно от 3 животных при партии 100 голов, от 5 животных при партии 100—200 голов, от 7 животных при партии 200—500 голов, от 10 животных при партии боке 500 голов. Берут пробы жира, мышц, внутренних органов От каждой туши по 0,2—0.5 кг Каждый исходный образец составляет исходную пробу 0.2—0.5 Овцы То же От каждой туши по 0.1—0,2 кг То же 0.2—0,5 Домашние птицы > » От каждой тушкн по 50 г » » 0 .1-0,3 Дичь > 1 С оленей 200 г, с кабанов и косуль 100 г. с зайцев 20 г. с ьерна-тых 5 г > » 0.1 -0,3

Материл	Способ отбора	Величина средней пробы иди исходного обрами	Проба		Велнчипа среднего обрезай, кг
Яйца	В хозяйстве в ареале отбора проб берется по 10 и 20 яиц с определенных пунктов скупа. На птицефабриках — по 5 яиц из каждой пар-ТИМ	20 ЯИЦ	Каждый исходный образец составляет средний образец		20 яиц
Молоко	Со сливного пункта 500 ил. От коров а определенном хозяйстве по 100 мл молока	500 мл	То же		0.5
Рыба	При массе рыбы менее 0.1 кг берут пробу от нескольких рыб массой 0.5 кг. перемешивают и отбирают среднюю пробу. При массе рыбой	0.5 кг	Среднюю пробу п мают за средни раэец	рини-Й об-	0.5
	0,1—1 кг отбирают целые зкземп-ляры. При массе 1—2 кг берут одну продольную часть лолормны рыбы. При массе свыше 2 кг вырезают образец со средней части рыбы 100-200 г
Икра	От одной партии берут три образца по 100 г с каждой бочки (ящика)	0.1 кг	То же		0.1

Отбор проб материалов со складов, баз, хранилищ, транспортных средств

Максимальная величии* для отбор* проб Материал Способ о георя проб Величиях средней пробы яла исходного обрдеца Подготояка среднего образца Величина среднего образца, кг 100 Т Зерно, жмыхи и Зерно, ж В каждом сегменте поверх- пыхи, шрот 10 кг Зерно измельчить, тщатель- 1.0 100 Т шрот ИЗ ПЛОСКИХ хранилищ Зерно, жмыхи и иостн около 100 м* брать пробу методом К с трех слоев С каждого транспортного 10 кг но перемешать и выделить средний образец То же 1.0 100 Т шрот из средств транспорта Зерно, жмыхи н средства отдельно брать пробу методом К с трех слоев, с четырехосных вагонов — методом К X 2. с барок — КхЗ Из стольких отверстий, 10 кг I 0 1.0 100 т шрот из закромов, трюмов судов и цистерн Зерно, жмыхи и сколько имеется в данной таре, с трех слоев или методом ПР во иремя перегрузки Методом ПР с разных мест 7 кг > > 0.5—1.0 100 1 шрот в мешках Зерно, жмыхи и отдельных мешков Методом ПР из струи в рав- 7 кг 1 » 0.5—1.0 100 т шрот во время перегрузки Силос, свекломич- ных интервалах Метод ПР при удалении 2 л Перемешать и выделить 0,25 ный жом, пульпа, отвары верхнего слоя на глубине 30 см средний образец

Mukhumm аглнчик* дли отбор* ПС«>	Матетлал	Способ отбора про’	Величии* средней пробы или ИСХОДНОГО обр*ТЦ*	Подготовка среднего образца	Величина среднего образца, кг
		Материал в кусках (картофель, свекла и л		»- д.)
100 т	В хранилищах	Метод ПР, с верхнего, среднего и нижнего слоев	7 кг	Материал иочетвертоватъ, взять 1/4 часть, перемешать, измельчить и выделить средний образец	0.5—1.0
Одно средство транспорта	В средствах транспорта	Метод ПР. с верхнего, среднего и нижнего слоев Соломоподоб	3 кг ный материал	То же	0.5—1,0
До 100 т	Непрессован ни А	Метод ПР, на расстоянии 50 см от верха и низа из 20 мест	2 кг	Измел.чить, перемешать и выделить средний образец	0,1—0,2
Др 100 т	Прессованный	Метод ПР. из тхжов посте снятия с них проволоки Брать горстью с трех разных мест, стараясь не ломать растений	2 кг	То же	0,1-0,2
	Фрукты и овощи свежие	Метод ОШ, из различных упаковок, ящиков и т. д. из разных слоев	Из упаковок	Как в приложении 1, овощные культуры и фрукты	0,5—0,25
	Яблоки, груши, ПСрСЯКИ, айва	То же	10 кг (не менее 100 шт.)	Как в приложении 1, семечковые фрукты	0.5
	Абрикосы, сливы	» 1	4 кг (не менее 100 шт.)	Как в приложении 1, вишни. черешни, сливы	0,5-0,25
	Черешня, вишня, виноград, земляника	» »	4 кг	Как в приложении 1, вишни, черешни, сливы, виноград	0,5-0,25

ПРЕДИСЛОВИЕ

Повышение благосостояния народа всегда находится в центре внимания КПСС. Об этом свидетельствует разработанная в соответствии с решением XXVI съезда партии и одобренная майским (1982 г.) Пленумом ЦК КПСС Продовольственная программа СССР на период до 1990 года. Одной из важнейших задач этой программы является развитие материально-технической базы агропромышленного комплекса, что предусматривает, в частности, расширение производства высокоэффективных средств защиты растений и увеличение их поставки сельскому хозяйству. Более широкое применение химических средств защиты растений позволит получать большую урожайность сельскохозяйственных культур, улучшит качество выращиваемой продукции и условия ее хранения.

Однако если неумело использовать химические средства защиты растений, то остатки пестицидов могут попасть в продукты питания, корма и объекты окружающей среды. Поэтому правильному применению пестицидов в нашей стране, как и вообще охране окружающей среды, уделяется особенно большое внимание. Научно обоснованной программой охраны природы в СССР явились постановления ЦК КПСС и Совета Министров СССР «Об усилении охраны природы и улучшении использования природных ресурсов» (1972 г.) и «О дополнительных мерах по усилению охраны природы и улучшению использования природных ресурсов» (1978 г.), которые директивно обязывают вести контроль за остатками пестицидов в продуктах питания, воде, почве и воздухе. Для предотвращения загрязнения окружающей среды пестицидами введено строгое регламентирование их применения, совершенствуются технология получения и применения пестицидов и препаративные формы их. Одно из обязательных требований, которое позволяет включать пестициды в список препаратов, разрешенных к применению, является разработка методов определения их остатков в продуктах питания, воде, почве и воздухе.

В предлагаемой книге представлены методические указания по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, разработанные спе-циалистами-аналитиками различных министерств и ведомств. В разработке данных указаний принимали участие: Т. Г. Аббасов, В. Д. Агарков, С. Л. Акоронко, Т. В. Алдошина, И. А. Антонова, Ж. А. Арутюнян, Г. У. Аслалян, Э. И. Бабкина, Ю. С. Баранов, Г. А. Бегунов, А. Б. Белова, С. Г. Билуши, Н. П. Бирюков, Ц. И. Бобовникова, 3. Н. Богомолова, М. Ф. Болоховец, К. А. Большакова, Г. С. Борисов, А. М. Ботвиньева, Л. И. Бублик, Г. Т. Брюшнина, Н. В. Букина, А. Л. Бурштейн, А. С. Василенко, Л. В. Васильковская, Р. Д. Васягина, Л. В. Воронин, И. В. Воинова, К. А. Гар, С. Г. Геворкян, В. М. Гезиков, Г. Н. Георгиева, Д. Б. Гиренко, И. Н. Гладенко, Н. И. Глембицкий, В. Е. Горбунова, Р. С. Горенштейн, В. А. Давтян, Э. Б. Данилова, Е. Г. Даурова, В. Ф. Демченко, А. В. Дибцева, Т. А. Евстегнеева, В. В. Егоров, В. В. Ермаков, А. В. Жарков, В. Н. Жуленко, А. Ф. Заболотный, И. Ш. Заманская, А. И. Затула, И. 3. Зисерман. 3. Златьев, А. И. Зорсва, Т. И. Зубко, Л.Н. Ка-вецкая, И. Н. Карпова, У. С. Кашимов, В. И. Кириченко, Н. И. Киселева, М. А. Клисенко, Е. С. Ковалева, А. Ф. Конюхов, В. В. Королев, Ф. И. Копытова, Е. И. Косачева, И. А. Кочеровская, В. И. Кофанов, И. Ш. Кофман, А. Н. Крылова, О. С. Кухтина, В. В. Лещев, Л. И. Лещинская, С. А. Ликунова, А. М. Макеева, О. А. Малинин, И. Н. Матвиенко, И. Л. Меерзон, Ф. Р. Мель-цер, Л. Д. Микадзе, Г. В. Миронюк, Н. А. Мовсетян, В. В. Молочников,

Макснка.тыыи •гличииа для отбора проб Материал Способ отбора проб Величина средакА проб*. или ИСХОДНОГО об рома Модгогоака среднего образца Величака среднего образца, кг Крыжовник, ело- .Метод ОШ, из различных 3 кг Как в приложении 1, ягоды 0,5-0,25 родина. малина упаковок, ящиков и т. д. из разных слоев Садовая земляника То же 2 кг Как в приложении 1, мкг- 0,5-0,25 и другие лесные кие фрукты ягоды Огурцы, капуста » > 3 кг Как в приложении 1, поми- 0.5 кольраби, кор- доры. перец, огурец к неплоды, перец. бахчевые редис, помидоры Капуста белокочан* 1 • 10 кочанов Как я приложении 1. ка- 0,5 на я, к рас коко- лустные и лиственные чанная, цветная, овощи салат Молодая кухуруза > > 10 початков Как в приложении 1, хуку- ММЙ 0,25-0,5 Овощи в пучках 1 > 10 пучков г/** Как в приложении 1, овощ- ные культуры Бахчевые > » 5 штук — Другие овощи > . » 1 кг Как в приложении 1, овощ- 0,25-0,5 ные культуры

Овощи и фрукты сушеные

ООО упако	Овощи и фрукты	Метод ПР, с трех слоев	1-3 кг	Кусочки или брикеты из
вок	в виде кусочков			мельчить, перемешать и выделить средний обра
				зец
	Овощи и фрукты		0.6 кг	То же
	ь виде порошка и сушеной зелени

Л. П. Моргунова, Г. К. Морина, Ю. Ф. Моряков, В. И. Мочалов, В. И. Мурзой А. А. Непоклонов, И. П. Нестерова, К. Ф. Новикова, Л. В. Новикова, Н. И. Пав лова, Ф. И. Патрашку, К. Н. Пашкевич, С. Д. Павлов, Т. М. Петрова Н. В. Перетолчин, Р. Д. Петухов, М. С. Петросян, А. Л. Перцовский, И. И. Пи лснкова, М. В. Письменная, Т. В. Пластинина, Л. Р. Полищук, В. Н. Полякова Н. Г. Попова, Н. Я. Пестовский, Л. С. Прииутина, IO. А. Присмотров Н. В. Птицина, У. Ф. Пулатов, Г. Г1. Пушкина, Б. А. Рехтер, Л. Д. Рузанкова И. И. Ряженов, П. А. Самгин, Э. О. Сахкалян, В. А. Силаев, М. А. Стемпков ская, Л. С. Самосват, Л. А. Смирнова, А. А. Сиверина, Л. К. Слепова Ж. С. Степанян, Н. Г. Стеланченко, В. В. Стеценко, Г. А. Таланов, С. М. Ти хомиров, Г. А. Трондина, Г. П. Угрюмова, А. Д. Фатьянова, Ь. Ф. Филимонов М. М. Филимонова, Л. А. Хилик, Л. И. Хлюпнна, В. Д. Чмиль, Д. И. Чканни ков, Л. Д. Чудакова, Э. П. Чурпий, Н. И. Шадрин, А. М. Шмигидина А. И. Шумкова, 3. Ф. Юркова.

Методические указания апробированы группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Министерства сельского хозяйства СССР, одобрены лабораторным советом при Министерстве здравоохранения СССР и утверждены заместителем Главного государственного санитарного врача СССР в качестве официальных.

Методические указания предназначены для контроля за содержанием остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктах, кормах, объектах окружающей среды агрохимическими, ветеринарными, контрольно-токсикологическими лабораториями Министерства сельского хозяйства СССР, санитарно-эпидемиологическими станциями и научно-исследовательскими институтами Министерства здравоохранения СССР, лабораториями Госкомгидромета СССР, а также лабораториями научно-исследовательских институтов других министерств и ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Утверждаю Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А. И. Зайченко 19.10.1979 Л« 2086—79

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ

ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ В РАСТИТЕЛЬНЫХ ПРОДУКТАХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ СУБСТРАТАХ ЭНЗИМНО-ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ *

Краткая характеристика препаратов приведена ранее в таблице 17 и при описании других методических указаний. ДОК исследуемых пестицидов в пищевых продуктах указаны в таблице 24.

Методика определения фосфорорганических пестицидов энзимно-хроматографическим методом. Основные положения. Метод позволяет определить угнетающие холинэстеразу фосфороргани-ческие пестициды, производные фосфорной, тиофосфорной и дитиофосфорной кислот.

Применение хроматографии в тонком слое, а также использование различ-

• Методические указания разработаны М. В. Письменной (ВНИИГИН-

ТОКС).

24. ДСК фосфорорганических пестицидов 8 пищевых продуктах

Пестицид Исследуемый продукт ДОК, мг/кг Абат Сахарная свекла, овощи, цитрусовые, 0.3 хлопковое масло Антио Яблоки, груши, слива, цитрусовые, ви- 0,2 ноград, капуста и другие овощи Байтекс Зерно 0,15 ДДВФ Мука, крупа, молоко, мясо Не допускается Дибром Картофель 0,2 Корал Молоко, молочные продукты, яйца Не допускается Мясо, мясопродукты 0,2 Карбофос Овощи, фрукты и другие растительные 1.0 продукты Метафос Все пищевые продукты Не допускается Метилнитрофос Семечковые, косточковые, цитрусовые 0.1 Фосфамид Фрукты, цитрусовые, картофель, овощи, 1,0 зерновые Фозалон Семечковые, цитрусовые, косточковые, 0,2 виноград, зерновые, картофель Фталофос Сахарная свекла 0,25 Картофель Не допускается Цианокс Виноград, яблоки 0,1 Цидиал Семечковые, виноград, цитрусовые 0,1 Циодрин Молоко, молочные продукты Не /опускается Мясо 0,005 Хлорофос Зелень, фрукты, капуста 0,1 Другие овощи 0,2 Мясо, молоко, молочные продукты Не допускается

ных способов активации соединений дают возможность избирательно анализировать фосфорорганические пестициды и токсические продукты их превращений, исключив в ряде случаев очистку экстрактов и используя для анализа малые аликвоты, что позволяет проводить хроматографическое определение каждой пробы в нескольких повторностях. Метод отличается применением буферного раствора для приготовления проявляющих реактивов с целью замены дефицитных сорбентов отечественным силикагелем марки КСК.

Принцип метода. Метод основан на извлечении фосфорорганического пестицида из исследуемой пробы органическим растворителем, очистке, если необходимо, охлажденным ацетоном и определении методом хроматографии в тонком слое с энзимным проявлением без активации или после активации препарата на пластинке. Фосфорные (ДДВФ, дибром и др.) и тнолфосфорнокислые эфиры (рицид, циодрин, фснитрооксон и др.) определяют без активации, а тион-фосфорнокислые эфиры (метафос, метилнитрофос, пиразофос, цианокс, фоксим и др ), дитиофосфаты (карбофос, фталофос, фозалон, рогор и др.) и эфиры фосфо-новой кислоты (хлорофос) необходимо предварительно активировать. Препараты, угнетающие холинэстеразу, проявляются в виде белых пятен на голубом фоне. Нижний предел определения фосфорорганических пестицидов 0,0001—0,001 мкг. Количественное определение производят путем сравнения размера пятен проб и стандарта.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,1—50 мкг пестицидов в анализируемой пробе. Нижний предел обнаружения 0,0001—0,001 мкг, в зависимости от исследуемого пестицида (табл. 25).

25. Пределы обнаружения фосфорорганических пестицидов до активации и после активации, иг

			После активации
Пестицид	До акти-нации	парами брома	раствором брома	ультрафио летовым облучением	раствором аммиака
Фталофос	Н.О. *	1	0,1	0,1
Р=0 фталофос	0,1	0.1	0,1	0.3
Цндиал	Н.о.	5	1	5
Фенкаптон	Н.о.	10	5	5—10
Фозалон	Н.о.	1	5	5—10
Метафос	Н.о.	1	0,2	5
Метили и трофос	Н.о.	3	0,2	5
Фенитрооксон	1,0	—	—	—
Карбофос	Н.о.	50	0,5	10
Байтекс	Н.о.	100	100	Н.о.
Валексон	Н.о.	10	1—5	Н.о.
Абат	Н.о.	5—10	5	10—20
Цианокс	Н.о.	1	1	5
Рицид	0,1	0,1	0,1	—
Циодрин	0,1		—	—
Афуган	Н.о.	1	0,3	2
Хлорофос	1000	1000	1000	Н.о.	10
ДДВФ	10	Н.о.	10	Н.о.	10
Рогор	Н.о.	500	500	10
Антио	Н.о.	500	500	10
Дибром	10	Н.о.	Н.о.	Н.о.	!0
Корал • Н.о. — ве обнаруживается.	Н.о.	10	10	10

Размах варьирования степени определения 77—113%. Среднее значение степени определения стандартных количеств пестицидов 92%. Стандартное отклонение 12,7%. Относительное стандартное отклонение 0,14. Доверительный интервал среднего при а=0,95 и п=5—92±12,7%. Метод специфичен для соединений, угнетающих холинэстеразу.

Реактивы и растворы. Ацетон х. ч. Метилен хлористый х. ч. Натрий сернокислый безводный, ч. д. а. Гексан х. ч. Этиловый спирт-ректификат. Бром. Натрий серноватнстокислый, 2,5%-ный водный раствор. Силикагель марки КСК, дробленый и просеянный через сито 100 меш. Кальций сернокислый (CaS0₄X Х2Н₂0) ч. д. а., просушенный в сушильном шкафу при температуре 160°С в течение 6 ч. Индоксилацетат ч.д. а. Калий железосинеродистый, 1,5%-ный водный раствор. Калий железистосинеродистый, 2%-ный водный раствор. Буферный раствор pH 8,69: смесь ортофосфорной (2,1 мл), уксусной (2,3 мл) и борной (2,47 г) кислот доводят дистиллированной водой до 1 л. Для получения буфера с pH 8,69 к 100 мл указанной смеси прибавляют 65 мл 0,2 н. раствора едкого натра, который готовят растворением 0,8 г NaOH в дистиллированной воде в мерной колбе на 100 мл.

Ферментный препарат получают из печени крупного рогатого скота (свежую, однократно замороженную и сохраняемую в дальнейшем в холодильнике печень можно использовать в течение 6 месяцев). Для приготовления ферментного раствора 1 г печени растирают в ступке с 9 мл буферного раствора, фильтруют через вату. К 1 мл полученной сыворотки прибавляют 4 мл буферного раствора и используют этот раствор для опрыскивания пластинок. Применяют свежеприготовленный раствор.

Основной стандартный раствор (А) исследуемого фосфорорганического пестицида 100 мкг/мл (10 мг пестицида в 100 мл ацетона). Рабочие стандартные растворы готовят разбавлением основного раствора «А». Раствор «Б»: 0,5 мл раствора «А» доводят в мерной колбе до 100 мл ацетоном (содержание пестицида составляет 0,5 мкг/мл). Раствор «В»: 5 мл раствора «Б» доводят в мерной колбе до 25 мл (содержание препарата 0,1 мкг/мл).

Проявляющий реактив: 10 мг индоксилацетата растворяют в 6 мл этанола, прибавляют 10 мл дистиллированной воды, 2 мл раствора жслезосииероднстого калия и 2 мл железистосинеродистого калия и хорошо перемешивают. Раствор готовят непосредственно перед опрыскиванием. На пластинку расходуется 3— 4 мл смеси.

Приборы и посуда. Ротационный испаритель типа ИР-1М. Баня водяная. Термостат СШ-35. Ступка керамическая диаметром 7 см. Круглодонные и грушевидные колбы на шлифах емкостью 25, 50 и 100 мм. Мерные пробирки на шлифах емкостью 5—10 мл. Эксикаторы. Воронки фильтровальные на 5 см. Камера для хроматографирования. Камера для опрыскивания. Стеклянные пластинки размером 9X12 см. Пульверизаторы стеклянные. Компрессор или баллон с азотом или со сжатым воздухом для равномерного мелкодисперсного опрыскивания пластинок. Пипетки па 1, 5 и 10 мл. Мерные колбы на 25 и 100 мл. Мик-рошлриц на 100 мкл. Микропипстки до 0,1 мл.

Подготовка к определению заключается в приготовлении пластинок. Для приготовления 12 пластинок из силикагеля КСК берут 35 г силикагеля, 2 г сернокислого кальция, подготовленного, как описано выше, и 90 мл дистиллированной воды. Силикагель с сернокислым кальцием растирают в фарфоровой ступке, прибавляют воду и размешивают до образования однородной массы. 10 г суспензии наносят на пластинку и равномерно распределяют по поверхности. Сушат пластинки строго в горизонтальном положении в течение 18—20 ч при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.

Ход анализа. Экстракция из растительных продуктов (овощи, фрукты, зерно, трава). Навеску 25—50 г вносят в коническую колбу, заливают 50 мл ацетона, интенсивно взбалтывают и оставляют на 1 ч, периодически встряхивая. Затем сливают экстракт через вложенный в воронку бумажный фильтр, на который нанесен слой (2 см) безводного сернокислого натрия. Экстракцию повторяют еще раз в течение 30 мин. Экстракты объединяют, пробу промывают 10—15 мл ацетона и присоединяют смывы к экстракту. Растворитель упаривают до 2—3 мл на ротационном испарителе под вакуумом при температуре водяной бани 40—45°С. Переносят остаток в мерную пробирку с притертой пробкой, ополаскивают ацетоном колбу для отгонки и доводят объем экстракта в пробирке до 5 мл.

Экстракция из биологических субстратов (кровь, печень, почки, легкие, селезенка, мышечные ткани, жир, мозг, кал, моча). Для анализа берут 1—2 г материала, тщательно измельчают, помещают в колбу с притертой пробкой, заливают 30 мл ацетона (из крови и мочи экстрагируют диэтиловым эфиром) и оставляют на 1 ч, периодически встряхивая. Сливают растворитель, заливают пробу повторно и оставляют на 30 мни. Экстракты объединяют, сушат безводным сернокислым натрием (3—5 г) и упаривают растворитель, как описано выше.

Экстракция из молока, кефира. Навеску пробы 25 мл вносят в коническую колбу емкостью 250 мл, прибавляют 75 мл ацетона, энергично встряхивают 5 мин и помещают в морозильную камеру холодильника на I ч, периодически встряхивая. Экстракт фильтруют через бумажный складчатый фильтр (синяя лента) в делительную воронку (на 250—500 мл), пробу дважды промывают по 20 мл холодным 80%-ным водным ацетоном. К полученному экстракту приливают 50 мл дистиллированной воды, перемешивают и экстрагируют препараты дважды по 40 мл хлористым метиленом, встряхивая по 2— 3 мин. Объединяют органическую фазу, сушат прибавлением 10—15 г безводного сульфата натрия, отгоняют хлористый метилен на ротационном испарителе (при температуре бани 30—35°С) до объема 0,5—1 мл, досуха упаривают на воздухе при комнатной температуре и затем проводят очистку, как описано далее.

Экстракция из творога, мяса. Навеску 25 г творога, мяса из-

мельчают, прибавляют 60 мл ацетона, экстрагируют 20 мин, периодически встряхивая. Экстракт фильтруют через складчатый бумажный фильтр (синяя лента) с безводным сульфатом натрия в делительную воронку. Экстракцию повторяют с 30 мл ацетона. К объединенному экстракту приливают 150 мл дистиллированной воды, перемешивают и препараты экстрагируют дважды по 50 мл хлористым метиленом, встряхивая по 2—3 мин. Объединяют органическую фазу и далее поступают, как описано выше для определения пестицидов в молоке.

Очистка экстрактов. Если после отгонки растворителя до 2—3 мл экстракт мутный, растворитель отгоняют под вакуумом при комнатной температуре досуха. Сухой остаток смывают охлажденным при 0°С ацетоном, смывы фильтруют через бумажный фильтр в мерную пробирку. Общин объем растворителя 5 мл. Ацетоновый экстракт выдерживают 10—15 мин при комнатной температуре, затем доводят объем в пробирке точно до 5 мл. Закрывают притертой пробкой и хорошо перемешивают.

Хроматография в тонком слое. Чтобы уменьшить краевой эффект, с хроматографической пластинки снимают с краев слой сорбента по 2— 3 мм вдоль направления движения подвижной фазы (со стороны 12 см). Затем вдоль этой же стороны пластинку разделяют полосами на четыре равные части. На первую и третью полосы на расстоянии 1,5 см от нижнего края наносят по 10 мкл стандартных растворов «Б» и ¹В», т. е. 0,001 и 0,005 мкг действующего начала ¹, на вторую и четвертую соответственно по 2 и 10 мкл пробы. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую налита соответствующая смесь растворителей (табл. 26) за 30 мин до

26. Величина Rf некоторых фосфорорганических пестицидов на силикагеле КСК

Пестицид RfX 100 в хлороформе и других подвижных фазах фаза KfxlOO фаза /?/Х100 Фталофос Хлороформ 47 Четыреххлористый углерод 24 Р = О фталофос » 12 1о же — Цидеал » 81 » > 40 Фен кап тон » 98 » » 50 Фозалон » 77 > > 39 Метафос » 79 Гексан:ацетон (4:1) 40 Метилнитрофос » 91 То же 43 Фенитрооксон » 72 » » 24 Карбофос » 46 ) » — Байтекс » 80 Гексан:ацетон (9:1) 37 Валексон » 85 То же 43 Абат » 70 > » 25 Цианокс » 74 Гексан:ацетон (2:2) 45 Рицид » 30 — — Циодрин » 78 Гексан:ацетон (2:2) 47 Афуган » 40 — — Хлорофос » 0 Гексан:ацетон (1:1) 34 ДДВФ » 21 То же 56 Рогор » 0 Бензол:ацетон (3:2) 55 Антио » 0 То же 85 Дибром » 63 Бензол :диоксан (9:1) 53 ДДВФ » 21 То же 45 Корал > 90 > » 68

хроматографирования. Когда фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры и дают растворителю испариться. Затем проводят ингибирование. Если необходима активация, пестициды на пластинке перед ингибированием активируют.

Активация слабых ингибиторов холинэстеразы. Чтобы увеличить предел обнаружения, слабые ингибиторы холинэстеразы (см. табл. 25) активируют путем перевода их в Р=0 форму. Для активации используют следующие факторы.

1.    Для эфиров тиофосфорной и дитиофосфорной кислот: а) окисление парами брома; б) окисление водным бромом (раствор); в) окисление под действием ультрафиолетового света.

2.    Для эфиров фосфоновой кислоты типа хлорофоса — активацию аммиаком.

Окисление в парах брома. После хроматографирования и удаления растворителя с пластинки ее помещают на 1 мин в эксикатор, насыщенный парами брома. Когда с пластинки удален избыток брома (через 60 мин), проводят ингибирование. Предел обнаружения для ряда пестицидов с применением указанного и других способов активации приведен ранее (см. табл. 25).

Окисление водным раствором брома. После хроматографирования и удаления растворителя с пластинки ее опрыскивают насыщенным водным раствором брома до слабого увлажнения слоя. После 15 мин экспозиции при комнатной температуре избыточный бром удаляется легким опрыскиванием пластинки 2,5%-ным раствором тиосульфата натрия. Далее проводится ингибирование.

Окисление под действием ультрафиолетового света. После хроматографирования и испарения растворителя с пластинки ее в течение 15—20 мин облучают ультрафиолетовым светом (лампа ПРК-4) на расстоянии 20 см от источника света. Далее проводят ингибирование.

Активация аммиаком (для эфиров фосфоновой кислоты типа хлорофоса). Пластинки после хроматографирования и удаления растворителя опрыскивают разбавленным раствором аммиака (1 часть аммиака+ 4 части воды) до слабого увлажнения слоя. Экспозиция 15 мин при комнатной температуре. Далее проводят ингибирование.

Проведение ингибирования. После активации и высушивания при комнатной температуре пластинки опрыскивают свежеприготовленным ферментным раствором и инкубируют в течение 40—60 мин в насыщенном водными парами термостате при температуре 38°С. (Для увлажнения в термостате ставят чашку Петри с водой.)

Проявление пластинок. После инкубации пластинки опрыскивают проявляющим раствором и помещают в термостат при 38°С. Пестициды проявляются в течение 10—30 мин в виде белых пятен на голубом фоне.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения площади пятна пробы с наиболее близкой к ней по величине площадью стандарта.

Прямо пропорциональная зависимость площади пятна от концентрации соблюдается для большинства пестицидов в пределах от 0,0001 до 0,1 мкг. Содержание препарата в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

AS_tV 1000

^х- w '

где Л —содержание препарата в стандарте, мкг; S| — площадь пятна стандарта, мм²; S₂ — площадь пятна пробы, мм²; V, — объем экстракта, нанесенного на пластинку, мкл; V — общий объем экстракта, мл; Р — масса пробы, взятой для анализа, г.

1

Если пределы обнаружения пестицидов больше 1 нг (см. табл. 25), стандартные растворы «Б» и «В» наносят либо в больших объемах (0,1 мл), либо готовят их с большим содержанием пестицидов.