Методические указания по токсиколого-гигиенической оценке синтетических материалов (изделий), предназначенных для использования в судостроении

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ТОКСИКОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ (изделий), ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СУДОСТРОЕНИИ

Москва — 1981

«Методические указания» подготовлены Научно-исследовательским институтом гигиены водного транспорта (рук. лабор., к. м. н. Я. Г. Двоскин, ст. н. с., к. м. н. А. Б. Сысоев)

1.3.3.    использование стандартного рациона с зеленой подкормкой ростками овса, принятого в ряде учреждений АМН СССР, либо согласно нормам, регламентированных приказом Министра здравоохранения СССР i 755 от П/П-195Э г.

1.4.4.    Обязательно применение кормушек и закрытых поилок, т.к. это устраняет загрязнение корма и питья и позволяет учитывать потребление воды животными в течение суток.

1.5. Требования к устройству и эксплуатации камер.

Воспроизведение условий эксперимента.

1.5.1.    Особенности постановки эксперимента требуют дифференцированного подхода и к выбору конструкций затравочных камер. Рациональное использование камер оригинальной конструкции, специально приспособленных для постоянного пребывания в них животных. К таким затравочным камерам предъявляются следующие требования:

1.5.1.1.    камера должна быть сделана из материала, который бы не вступал в реакцию с летучими веществами, выделяющимися из полимерных материалов, а также, практически, не адсорбировал их. В качестве таких материалов, как правило, могут быть использованы нержавеющая сталь и стекло. Камеры не должны бвть окрашены изнутри, т.к. большинство красок и лаков вступают в реакцию со многими органическими растворителями (бензол, толуол, ацетон и др.), а также потому, что окрашенная поверхность легко адсорбирует летучие вещества. Кормушки и поилки изготовляются из того же материала, что и камеры; поилки могут быть изготовлены из стекла;

1.5.1.2.    работа может производиться как в герметичных, так и в негерметичных камерах в зависимости от условий опыта, герметичность затравочной камеры должна быть достаточно полной;

1.5.3.3.    конструкция камеры должна обеспечивать быструю

уборку, смену корма, воды за счет устройства поддона и боковых люков;

1.5.3.4.    в камере необходимо предусмотреть регулировку и регистрацию температуры, влажности воздуха и барометрического давления (последнее желательно осуществлять автоматически), а по возможности содержание кислорода и углекислоты.

1.5.4.    При проведении токсикологических исследований создаются условия "насыщенности" емкости затравочных камер синтетическим материалом, аналогичные условиям эксплуатации.

1.5.5.    В затравочной камере в соответствии с задачей исследования должны быть обеспечены условия для создания необходимого воздухообмена. Это позволит моделировать в различных сериях эксперимента условия вентилируемых помещений. Постановка эксперимента в условиях вентилируемой вмкости требует, чтобы создаваемый в каждой камере воздухообмен был не ниже допустимых гигиеническими нормами для судов. Содержание кислорода должно быть не менее 19$, двуокиси углерода - не более 0,1$.

1.5.6.    Сроки выдержки образцов синтетических материалов от момента изготовления до начала исследования должны соответствовав графику поступления материалов при постройке судов. Перед исследованием поверхность образцав следует тщательно очистить от пыли, влаги и случайных примесей.

1.5.7.    При проведении эксперимента с моделированием условий исследуемый материал должен помещаться либо в затравочную камеру и размещаться с животными, либо в камеру-генератор с последующей подачей газовоздувной смеси в камеры с животными. Аналогично следует поступать при изучении не отдельных материалов, а комплексов. При размещении отдельных материалов или комплексов в камерах с животными, необходимо предусмотреть их

размещение, исключающее контакт с жизотными и их экскрементами.

1.5.8. Отбор проб воздуха из затравочной камеры для химических анализов производится для определения основных компонентов исследуемой смеси не менее одного pasa в неделю с соблюдением общих правил. При наличии соответствующих методик, допускается суммарное количественное определение ряда веществ. Результаты заносятся в регистрационный журнал учета концентраций.

1.5.9. В тех случаях, когда в лаборатории, где размещаются затравочные камеры, отмечается наличие в воздухе различных вредных примесей (окись углерода, аммиак и т.д.)_# что может привести к искажению результатов исследования, следует использовать соответствующие фильтры для предварительной очистки поступающего в камеру воздуха, а также соответствующие сорбенты для химического контроля его на содержание этих примесей.

2. МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ИЗМЕНЕНИЙ, ВОЗНИКАЮЩИХ В ОРГАНИЗМЕ ПОД ВЛИЯНИЕМ ВДЫХАНИЯ ЛЕТУЧИХ КОМПОНЕНТОВ ПОЛИМЕРНЫХ КОМПОЗИЦИЙ

2.1.    Общие рекомендации.

2.1.1.    Выбор соответствующих показателей и методов, а также объем планируемых исследований в каждом конкретном случае определяется особенностями токсического действия исследуемого комплекса летучих веществ и необходимостью применения общепринятых интегральных тестов и некоторых специфических показателей.

2.1.2.    Творчески определяя для каждого конкретного эксперимента тот или иной объем исследований, экспериментатор должен

тщательно проанализировать целесообразность и реальную возможность выбора соответствующих показателей*

2.1.3.    Следует отметить, что пои анализе токсического влияния комплекса летучих веществ нередко представляется целесообразным выявить раздражающее действие. У мелких лабораторных животных разрражасжее действие химических веществ может проявляться оимптомокомплекоом, характеризующимся частым почесыванием мордочки, слюнотечением, покраснением слизистой оболочки глаз, рта и носа, покраснением уюей, учащением дыхания. При комбинированном влиянии тех или иных веществ порог раздражающего действия может быть значительно снижен по сравнению о концентрацией, вызывающей подобный эффект при действии каждого из компонентов "летучего комплекса" в отдельности, что обуславливает необходимость применения специальных морфологических исследований.

2.1.4.    Наряду с приведенной выие примерной схемой, рекомендующей ориентировочно характер и число необходимых показателей, экспериментатором должна быть определена аналогичная схема, касающаяся сроков исследования этих показателей. Примерно такая схема может выглядеть следующим образом.

Определение соответствующих показателей должно быть начато за 2-3 недели до начала эксперимента. В зависимости от характера исследуемых показателей следует строго дифференцировать сроки определения каждого из них. После установления исходных величин исследуемых показателей должны быть намечены сроки определения соответствующих показателей в процессе последующих опытов.

2.1.5.    Учитывая фазовость характера изменений под воздействием изучаемых факторов, следует устанавливать сроки исследований дифференцированно с учетом степени лабильности регист-

рируемых сдвигов, а также возможностей, определяемых спецификой методики. При этом следует иметь в виду, что частота исследований функциональных проб должна быть неравномерной на протяжении всего срока проведения эксперимента; в первые недели исследования проводятся чаде, а затем реже.

2.1.6.    При выборе показателей и тестов, а также при побле-дующей оценке полученных сдвигов необходимо учитывать характер и диапазон "Физиологических колебаний" того или иного показателя. При этом не может быть однотипного подхода к оценке анализируемых сдвигов, так как в оиних случаях даже чрезвычайно широкие колебания исследуемого показателя укладываются в "физиологическую норму", а в других - даже весьма незначительные уже свидетельствуют о развитии палологичеокого процесса. При изучении факторов малой интенсивности получаемый статистически значимый полиморфизм данных следует трактовать как результат токсического воздействия.

2.1.7.    При воздействии (в условиях эксперимента) токсических веществ малой интенсивности в течение нескольких месяцев нередко представляется возможным обнаружить на фоне видимого благополучия ряд скрытых изменений. Часто имеются налицо функциональные нейрогуморальные, иммунобиологические сдвиги, которые могут возникать как результат воздействия токсических веществ на интерорецепторы, особенно тканевые, обладающие высокой чувствительностью к изменениям тканевого обмена. Отсюда важное значение приобретает исследование сдвигов со стрроны обманных процессов.

2.1.8.    В эксперименте могут быть применены различные функциональные нагрузки: длительная мышечная работа, вращение в

центрифуге, гипоксия, пребывание в неблагоприятных условиях внешней среды, воздействие некоторых фармакологических агентов и др. Если при функциональной нагрузке в организме животного возникает патологическое состояние, значит достигнутое при токсиче ском воздействии "равновесие", обусловленное напряжением компенсаторных защитных механизмов, находится на грани "повреждения". Если же при функциональной нагрузке реакции организма не отличаются от таковых у контрольных животных ела от сдвигов, наблюдавшихся у животных до нагрузки, до следует полагать, что регистрируемые сдвиги находится в пределах физиологических норм защиты.

2.2. Рекомендуемые схемы исследований влияния газовыделе-ний из полимерных материалов на организм: *

Схема £ I - Изучение общего состояния организма (см. Приложение 2). Используются общепринятые методы определения. Для изучения корма, динамики веса и энергоемкости I г привеса тела необходимо содержание животных на синтетических кормах с учетом их веса. Рецептура синтетических кормов, разработанная Институтом питания АМН СССР, представлена в приложении £ I.

Схема £ 2 - Изучение функционального состояния центральной нервной системы (ЦНС) (см. Приложение £ 3).

Схема предусматривает изучение корковых, подкорковых и обменных процессов.

При выборе методик дяя решения вопроса о наличии токсического действия газовыделений из полимерных материалов следует учитывать системный подход и наибольшую информативность показателя при решении конкретной задачи.

Для изучения энергетического обмена - ферментный состав цикла трикарбоновых кислот, биосинтез аскорбиновой кислоты в гомогенатах мозга.

Схема £ 3 - Изучение неспецифической реактивности организма. Схема включает, в основном, оценку влияния токсических газовыделений на гипофиз-адреналовую систему, фагоцитарную активность нейтрофилов крови, активность лизоцима, фракционный состав белков крови и др. (см. Приложение * 4).

Схема Е 4    - Изучение функционального состояния печени

(см. Приложение * 5). Рекомендуется исследовать белковый, липидный, углеводный и энергетический виды обмена, специфическую ферментативную активность, биосинтез аскорбиновой кислоты.

Схема £ 5 - Изучение функционального состояния сердца (см. Приложение £ б). Определяющими могут быть показатели ЭКГ не менее 100 кардиоциклсв, артериальное давление, специфическая ферментативная активность, энергетический и липидный обманы.

Схема Jfe 6    - Изучение функционального состояния почек (см.

Приложение £ 7). Схема предусматривает определение показателей выделительной функции, фильтрационной способности, биосинтеза аскорбиновой кислоты.

Схема )fe 7    - Изучение функциональной способности кровет

ворной системы (см. Приложение 8). Предусматривается определение форменных элементов крови, лейкоцитограмма, биосинтез аскорбиновой кислоты в селезенке.

Схема ft 8 - Изучение гонадотоксического действия Сем. Приложение Ь 9). Включает функциональное состояние сперматозоидов, морфологические показатели, белковый и энергетический обмены, окислительно-восстановительные процессы.

Сясма £ 9 - Изучение аллергенной активности производится в тех случаях, когда к этому есть прямые показания (см. Прило-

м

пение £ 10). Предусматривается использование одного из методов определения аллергенности р моделированных условиях вне организма и коньюнктивальной пробы на морских свинках*

Схема t 10 - Морфологическое и гистохимическое исследование внутренних органов (см. Приложение II), Помимо основных предложенных схем по показаниям должны проводиться исследования отдаленных последствий: мутагенное действие, тератогенное действие и изучение генеративной функции.

Рекомендуемые схемы исследований на являются строго обязательными во всех случаях. Выбор тестов должен производиться в зависимости от цели исследования, а также возможности лаборатории.

Литературные источники по рекомендуемым методам исследований представлены в указателе литературы.

3. СОЧЕТАННОЕ ДЕЙСТВИЕ КОМПЛЕКСА ЛЕТУЧИХ ВЕЩЕСТВ И ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ (методика эксперимента)

3.1. Общие положения.

3.1Л. При учете особенности обитаемости судов, необходимо иметь в виду, что гг»и применении синтетических материалов в судостроении экмпаж может подвергаться комбинированному воздействию выделяемых из пластмасс летучих фракций химических веществ в сочетании с физическими факторами (повышенная температура, шум, вибрация и др.).

При постановке токсикологического эксперимента необходимо учитывать особенности совместного действия летучих веществ и физических факторов судовой среды. Зги исследования проводятся в том случае, если возможность воздействия факторов обусловлена (в каждом конкретном случае) предполагаемыми условиями эксплуатации материала.

В судовых условиях возможность вредного воздействия синтетических материалов чаще всего сопровождается влиянием физических факторов малой интенсивности, характерных для условий обитания. Основным проявлением действия факторов малой интенсивности являются неспецифические реакции организма, поэтому в качестве показателей сочетанного действия, как правило, следует использовать интегральные тесты на системном, органном, клеточном и субклеточном уровнях.

В случаях изучения влияния полимерных материалов на организм в сочетании с физическими факторами значительной интенсивности, характерных для условий производственных помещений (шум и температура воздуха в машинном отделении, производственные химические загрязнения воздушной среды и др.) необходимо учитывать специфические действия каждого из изучаемых факторов.

3.2. Методика проведения эксперимента.

3.2.1.    При постановке экспериментальных исследований необходимо иоходить из того, что для каждого опыта должно быть взято не менее 4-х групп животных при условии изучения сочетанного действия полимерных материалов с одним из физических факторов.

3.2.2.    Перзая группа экспериментальных животных подвергается затравке газовыделениями из исследуемого образца полимерного материала в камере, где одновременно создаются либо повышенная температура воздуха, либо шум или другие изучаемые факторы той же интенсивности, которые наиболее адекватно моделируют судовые условия.

3.2.3.    При установлении длительности эксперимента следует исходить из предпосылок, аналогичных тем, которые были приняты для основных исследований. В отдельных случаях конкретные обстоятельства условий эксплуатации диктуют необходимость устанав-

ливать в эксперименте прерывистое действие физических факторов в течение 4-12 часов.

3.2.4.    Вторая группа животных помещается в камеру и подвергается влиянию только моделируемых физических факторов.

Третья группа экспериментальных животных подвергается изолированному воздействию полимерных материалов.

Четвертая группа экспериментальных животных является "универсальным контролем". Животные этой группы пребывают в обычных температурных условиях на протяжении всего опыта и не подвергаются никаким дополнительным воздействиям.

При изучении температурного фактора в тепловых камерах следует тщате*ьно соблюдать необходимый температурный режим.

Даже временный выход из строя регулятора нагрева теплоносителя приводит к кратковременному подъему температуры на 5-6°С, и вследствие этого животные могут погибнуть. Для регистрации подобных случаев целесообразно в камере, помимо обычных термометров, устанавливать максимальный термометр, показания которого могут помочь отдифференцировать случайную гибель животных.

3.2.5.    Общее требование при постановке перечисленных выше и подобных им исследований заключается в том, что все перечисленные исследования у животных должны проводиться в возможно короткий срок с тем, чтобы время пребывания животных вне камеры было минимальным.

4. ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ В СУДОВЫХ УСЛОВИЯХ (методика эксперимента)

4.1,    Методика организации и постановки эксперимента.

4.1.1.    Оценка токсического действия полимерных материалов

УТВЕРЮАС

ЗАМЕСТИТЕЛЬ ГЛАВНОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО САНИТАРНОГО ВРАЧА СССР

1981 г

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ТОКСИКОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ (изделий), ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СУДОСТРОЕНИИ

Настояние "Методические указания" предназначены для санитарных врачей санитарно-эпидемиологических станций и для исследователей, работавших в гигиенических институтах и научно-исследовательских лабораториях, и изучавших оинтетические материалы и изделия из них судостроительного назначения.

в судовых условиях является одним из важнейших разделов гигиенического исследования* Лабораторные эксперименты не могут в полной мере моделировать натурные, так как не учитывают таких факторов, как постоянно меняющийся климат и микроклимат, волнение моря, смена биоритмов при изменении часовых поясов, сочетанное действие многих физических и химических факторов и т.д. В процессе эксплуатации полимерных материалов может меняться уровень миграции из них токсичных компонентов, что также нельзя учесть в лабораторном эксперименте.

Вместе с тем, постановка эксперимента на жив^лтных в судовых условиях имеет ряд специфических особенностей и достаточно сложна как в организационном, так и в методическом отношении.

4.1.2.    Перед началом эксперимента на судне должны быть проведены фоновые исследования по основным из выбранных методов изучения влияния полимерных материалов. По полученным результатам животные распределяются на отдельные экспериментальные группы. Количество животных в группе должно быть достаточным для того, чтобы каждое исследование проводилось не менее, чем на 12-15 особях.

4.1.3.    До помещения животных на судно, они подвергаются карантинизации (не менее двух недель) и переводу на специализированные корма. После прохождения карантина не более, чем за три дня до отхода судна, необходимо получить сертификат от ветеринарной службы об отсутствии заболеваний и возможности нахождения животных на борту судна.

4.1.4.    До начала эксперимента следует ознакомиться с проектом судна, произвести предварительный выбор экспериментальных помещений, выяснить использованные при строительстве полимерные

ВВЕДЕНИЕ

Методические указания по токсикологической оценке летучих веществ, выделяющихся из синтетических материалов, предназначенных для использования в судостроении, были впервые разработаны токсиколого-гигиенической лабораторией ЦНИИТС и кафедрой гигиены труда Киевского медицинского института им, акад. А,А, Богомольца. В качестве Временных методических указаний они были утверждены Заместителем главного санитарного врача СССР в 1969 году. С этого периода в течение 10 лет они являлись единственным методическим пособием для всех исследователей, работавших в области токсикологической оценки полимерных материалов судостроительного назначения.

Развитие исследований в области производства синтетических материалов и внедрение их в практику привели к появлению значительного количества новых материалов, а насыщенность ими судовых помещений постоянно возрастает, что привело к необходимости изучения комплексов основных материалов. За этот же период значительно возрос уровень гигиенической науки, определивший необходимость изучения комбинированного действия на организм летучих токсичных компонентов полимерных композиций. Учитывая специфические особенности судовой среды, где на человека одновременно воздействует ряд неблагоприятных факторов, появилась необходимость изучения сочетанного действия газовы-делений из полимерных материалов и физических факторов, а также проведения исследований на судах с вычленением роли токсического фактора и его действия на организм на фоне многофакторной системы, определяющей условия плавания. Все эти новые положения не были отражены в Методических указаниях, утвержденных в 1969 году.

Необходимость проведения токсикологических исследований в указанных целях приобретает все большее значение. Опыт гигиенической оценки синтетических материалов, накопленность ведущими гигиенистами страны, работающими в этой области (Н.А. Боков, К.И. Станкевич, В.М. Стяжкин, К.А. Раппопорт), а также в лаборатории НИИГВТ показал, что санитарно-химические исследования не могут служить достаточным основанием для положительной оценки материалов. Поэтому они могут использоваться только на предварительных этапах. Положительные результаты санитар-

но-химической оценки должны служить основанием для проведения токсикологических исследований, которые являются обязательными, если речь идет о комплексах материалов.

Результаты изучения полимерных материалов как в лабораторных, так и натурных экспериментах, позволили выявить наиболее ранимые системы организма, а также определить информативные тесты при исследовании токсического в особенности комбинированного и сочетанного действия, что чаще всего имеет место в условиях судна.

Действие на организм факторов малой интенсивности не обладает специфичностью, поэтому в качестве методов исследования следует применять интегральные показатели. Вместе с тем исследования должны проводиться на субклеточном, клеточном, орнан-ном, системном и организменном уровнях. В этой связи в настоящих Методических указаниях приводятся схемы основных видов исследований. Даны рекомендации о принципах постановки эксперимента, установления критериев вредности, оценки полученных результатов.

Эти рекомендации не должны ограничивать творческой инициативы исследователя. В то же время единая, в основном, схема планирования и проведения эксперимента, унификация мотодов исследования позволит получать в различных лабораториях сопоставимые результаты, что будет способствовать более правильной и объективной оценке полимерных материалов.

Настоящие Методические указания составлены с учетом опыта, накопленного в течение последных лет исследователями в нашей стране и за рубежом. Они предназначены для сотрудников токсикологических лабораторий, выполняющих экспериментальные работы по оценке синтетических материалов судостроительного назначения в лабораторных и натурных условиях.

Разделы I., 2. и 5. составлены на основе Временных методических указаний 1969 г., при этом они были откорректированы, дополнены и изменены с учетом новейших данных. Разделы 3. и 4. составлены заново и вносятся в Методические указания впервые.

I. ПОСТАНОВКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИИ

1.1.    Основные требования к постановке эксперимента.

1.1.1.    Проведению токсикологических экспериментов должны предшествовать одорометрические и санитарно-химические исследования.

1.1.2.    Для проведения токсикологических исследований необходимы следующие данные:

1.1.2.1.    паспортные характеристики полимерного материала или изделий из него, химический состав (рецептура) материала;

1.1.2.2.    перечень исходных продуктов, использованных для синтеза полимерных материалов;

1.1.2.3.    сведения о предполагаемых областях применения материала и изделий из него (о типе судов, назначении конструкций или изделий и т.д.), сведения об условиях эксплуатации полимерного материала: насыщенности материалом судовых помещений и кратности обмена воздуха в них, температуре материала и воздушной среды с учетом возможных колебаний их максимальных величин, относительной влажности воздуха, о наличии сочетанного действия факторов судовой среды ;

1.1.2.^. результаты санитарно-химических исследований материала и изделий из него, а также сведения о продуктах разложения или горения их;

1Л.2.5. сведения о физических и химических свойствах полимерного материала, являющегося источником выделения в воздух летучих веществ;

1.1.2.6.    сведения о длительности пребывания людей в условиях возможного воздействия летучих веществ, выделяющихся из полимеоымх материалов;

1.1.2.7.    данные литературы о токсикологических свойствах исследуемых летучих веществ, поступающих в воздух в низких кон-

центрациях

I.1.3. Систематизация и анализ указанных выше сведений позволяют до начала токсикологических исследований обосновать и конкретизировать следующие условия постановки эксперимента:

1.1.3.1.    заданные величины насыщенности емкости, в которую помещается исследуемый материал (отношение объема, веса или площади материала к I м³ влздуха);

1.1.3.2.    предполагаемый уровень концентраций (порядок величин) летучих веществ при экспериментальной затравке животных;

1.1.3.3.    сроки проведения эксперимента и общая продолжительность затравки, длительность ежедневной экспозиции;

1.1.3.4.    выбор экспериментальных животных (вид, количество, возраст);

1.1.3.5.    выбор наиболее чувствительных методик и тестов, позволяющих наиболее полно выявить возможное токсическое воздействие исследуемого комплекса летучих веществ на организм теплокровных животных;

1.1.3.6.    использование специальных затравочных камер и стендов, в которых могут быть воспроизведены возможно точно факторы, моделирующие реальную обстановку применения полимерного материала (температура воздуха, относительная влажность и т.д.).

1.2. Сроки проведения эксперимента.

1.2.1.    В связи с необходимостью моделирования в эксперименте условий, близких к реальным условиям эксплуатации на судах, необходимо предварительно произвести некоторые сопоставления, в процессе которых следует регламентировать продолжительность ежедневной затравки животных.

1.2.2.    Продолжительность ежедневной затравки эксперимен-

ч

тальных животных следует устанавливать, исходя из времени предполагаемого ежедневного пребывания человека в условиях возможного контакта с исследуемыми веществами (4, 6, 12, 18 ч. или круглосуточно). В дальнейшем, при расчете общей экспозиции затравки животных, следует исходить из соблюдения условия пропорциональности соотношения средней продолжительности жизни человека и срока предполагаемого прерывания его в условиях практического использования полимерных материалов, и, соответственно, средней продолжительности жизни данного вида животных и рассчитанной длительности эксперимента. Так, например, в гражданском морском флоте, где работа продолжается в среднем 20-25 лет, из которых около 30-40% времени человек непосредственно находится на судах и, следовательно, может подвергаться воздействию летучих токсических веществ, выделяющихся из полимерных материалов в течение 7-10 лет (это составляет по времени I0-I4J средней продолжительности его жизни), длительность круглосуточной затравки в опыте должна быть установлена для белых мылей примерно 2,5-3, а для белых крыс - 3-3,5 мео. Очевидно, что расчеты общей продолжительности эксперимента, в зависимости от вида животного, проведенные исходя из указанного выше принципа, являются весьма ориентировочными.

1.2.3.    При выявлении явно выраженных изменений со стороны исследуемых показателей у подавляющего большинства животных эксперимент может быть прекращен раньше намеченного срока.

1.3.    Выбор подопытных животных.

I.3.I. Учитывая необходимость постановки одновременно нескольких серий опытов, а также целесообразность проведения эксперимента на разных видах животных, рекомендуется использовать преимущественно мелких лабораторных животных (белые мыши, кры-

сы) либо, когда в этом имеется необходимость, также кроликов и кошек. Это позволяет провести исследования на достаточном количестве животных; использовав либо одну из универсальных (крупных) затравочных камер, либо несколько сравнительно небольших камер, объемом не менее 200 л*

1.3.2.    В эксперименте необходимо использовать прежде всего молодых половозрелых животных, так как они по сравнении со взрослыми более чувствительны к токсическим агентам. На растущих животных удобно также регистрировать изменения прироста их веса.

1.3.3.    Целесообразно, как правило, в длительном эксперименте использовать животных одного пола, если это не обусловлено специальными целями исследований. В каждом конкретном случае предпочтение следует отдавать тому виду животных, который по своей чувствительности к действию конкретных химических веществ и соединений, наиболее приближался бы к человеку. При этом важно учитывать то обстоятельство, чтобы видовые особенности тех или иных звеньев обмена веществ, в которые активно могут вмевиваться компоненты подлежащей исследованию газовоздушной смеси, не отличались значительно от соответствующих участков обмена веществ человека.

1.3.4.    Для определения необходимого количества животных в опыте имеет значение вариабельность исходных величин исследуемых показателей. Поэтому при выборе количества животных в зависимости от их вида необходимо использовать существующие методы статистического расчета, на основе которых должно определяться чишло животных, обладающее достаточной репрезентативностью, но не менее 12-15.

1.4.    Содержание и уход за подопытными животными.

1.4Л• До начала опыта необходимо произвести дополнитель-

но тщательный осмотр всех животных, выделить и изолировать тех из них, у которых предполагается наличие заболеваний. Животные выдерживаются в карантине в течение двух недель до начала опыта. Для эксперимента отбираются здоровые животные с чистой гладкой блестящей шерстью, подвижные, с хорошим апетитом. Крысы должны размещаться в помещениях при температуре в пределах +16-18°С, мыши - при температуре +18-22°С (Елизарова О.Н.,1971).

1.4.2. Клетки (табл. I.4.2.I.), в которых содержатся подопытные и контрольные животные, должны быть одинаковой величины, сделаны из одного и того же материала (лучше решетчатые из нержавеющей стали), неокрашенные изнутри, легко очищаемые (с выдвижным поддоном) и дезинфицируемые. Дезинфекция химическими веществами не допускается.

Таблица 1.4.2.1.

Рекомендуемые размеры стандартных клеток и количество животных, размещенных в одной клетке (по К.А. Ковальскому) (в см)

Вид животных : длина : ширина : высота : количество животных :    :    ;    :    в    олной    клетке

Крысы, морские свинки	70	50	30	8-10 5-6
Мыши	70	50	25	15-20
Кролики	70	50	74	I

1.4.3. Кормление животных может производиться в нескольких вариантах:

1.4.3.1.    использование рациона синтетического корма, разработанного Институтом питания АМН СССР, рекомендуется как оптимальный (приложение Ъ I);

1.4.3.2.    использование комбинированных и стандартизированных кормов в виде брикетов, составленных по определенным пропм-сян для каждого вида животных;