ГОСУДАРСТВЕННАЯ КСАШСЖ ПС ЖЯЯКВСКЙ БРЕДСТНАЙ шрьш

с Бшиггши.боэйза^» рашжй и comma геи ийх ссср

мвтодачэзкив указания по оар&ЕЛЕаж» ижркшибсгв пестйшодж

В ПРвЕУКГАХ- Ш1АМЯ;К0В4АХ к БШЗЛНКй СРЕДЕ

Часть У1П

Mociras - 19^Г;7 г.

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ по химически средствам борьбы с вредителями.,

БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

У Tit рХД(;110

Министерством здравоохранен СССР 1970 г.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ

ПО 0ПШКШ2Ю МИХРОКОЛИЧЕСТЗ ПЁС'ИШЙДОИ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,KOPUАХ 'И ВНЕШНЕЙ СРьДК

Часть УIII

Данные методики апробированы и ре коме ид овалы в качестве официальных группой экспертов при Гос комиссии по химическим средствам борьбы с вредителями.болезнями растений и сорняками при НСХ СССР

Москва - 1977 г

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ- КОЛИЧЕСТВ ПОДИЭШШН-ГЛИКОЛЕВОГО Э-ШРА 2,4^ТКХЛОРЖ10;{СйПСУСИОЙ дислоты / 2,-1-Д / В ВОДЕ И ЗЕРНЕ ПШЕНИЦЫ МЕТОДОМ ГА30-шкостнон ХРОМАТОГРАФИИ

Краткий характеристика препарата

o(.H_lcoo(CiH.₁o)_hN

се

Полистдоепгликолевий эфир 2,4-Д - маслообразная жидкость светлохелтого цвета с т.лл, 2Ю°С а т.ккп. выше 300°С. Давление насьаценнпх ларов при 20°С - 1,5*10"⁷ мм рт.ст. С водой смешивается в любых соотношениях; хорошо растворим в бензоле, толуоле, ксилоле, четыреххлористом углероде, ацетоне, спиртах, эфире, хлороформе.

Препарат полиэтиленгликолсвого эфира 2,4-Д выпускается в форме 100*,-ного эфира. Применяется в качестве гербицида про-тивдвудольнкх однолетних и многолетних сорняков в посевах зерновых культур, кукурузы и клубневых культур б виде водных коллоидных растворов с концентрацией 0,$-1,0 г/л.

Препарат среднетоксичен для теллокровнцх животных и человека. ЛД^ = 1500 мг/кг / по данным Башкирского мединститута /.

Принцип Метода *

Метод основан на экстракции яолиэтиленушколевого эфира 2.,4-Д из анализируемых проб органическими растворите;: т.ш, омылении экстракта спиртовой щелочью до 2,4-Д, экстракцией

2,4-Д из омыленной' пробы, метилировании 2,4-Д дпазометаном с последующим газохроматографическим определением метилового эфира 2,4-Д о оомошью электронно-захватного детектора. Количественное определение метилового эфира 2,4-Д проводится методом внутреннего стандарта. Минимально детектируемое коли-

* И.И.Пиленкова, А.Д.Фатьянова, 0.В.Петрова, А.И.Зорова,

В.Д.Чмйль,утвержден А) декабря,Ш529-76.

94

чество метилового эфира 2,4-Д о помощью электрошю-эсхватно-го детектора I пг / в пересчете на полиэтяленгликолевыи эфир 2,4-Д 2,6 нг /. Линейный динамический диапазон детектировя-пяя метилового эфира 2,4-Д с помощью электронно-захватного детектора не менее 50 нг.

Чувствительность определения полиэтнленгляколового эфира 2,4-Д составляет: в воде - О,ОСЬ мг/л / ДиР /; в зерне -0,03 мг/кг / Щ1³ /. Процент определения полиэтилпнгликоле-вого эфира 2,4-Д в проОах составляет 90£. Относительная сояб-ка определения, яалйденная в наделшостью 0,05, составляет

Рояктизы и растворы

Безводный оулъфят натрия, х.ч;

Н-гексан, х.ч., перегнанный ДиэтилоькЯ эфир, х.ч. перегнанный Хлороформ, х.ч.

Спирт этиловый, 95£—иь'Й Уксусная кислота, ледяная Соляная кислота, х.ч.

Натрий едкий, х.ч., 0,5i« и 5и водные растворы ф-осфорп о -моли бдо новая кислота, х.ч., 40^-ныГ: водные раствор Зкстракционный раствор: растворяют факсанал буферного раствора для рИ-кетрпи с pH = 6,85 / калий фосфорнокислый одло-замо'дошшП и натрий фосфорнокислый дву замеленный / б 1000 мл воды.

Хрсматон ь-aw-bmcs , о, 16 - 0,20 мм, с Ъ% метилоиликояа SK - 30

Азот особой чистоты, МГТУ 6-02-375-66

Стандартный раствор полиэтиленгликолевого эфира 2,4-Д в этаноле / растворяет 0,01 г провараia в 10 мл этанола / Стандартный раствор 2,4,5-трдхлорфенокскуксусиой кислоты / 2*4,5-Т /: растворяют 0,0150 г. в 10 мл этанола Зфи.рячй раствор диаэокзтана

РУ

Получение диазометана

Получение диазометана осуществляют из нитрозометилмоче-

вшш.

Дли получения, натрозоыетялзгоч^аияы со взвешенную литровую круглодонную колбу помешают 200 г 24^-ного водного ^створа метил<*:/.ияз / метиламин используется либо ь виде водного раствора, либо в виде хлоргидргта / и добавляют яри охлсздв-нии lob мл копией три роса иной соляной кислоты до кислой реакции / индипытор метдлрот /. Затем приливают такое голичзство воды, чтобм изо содержимого колбы достиг 500 г и прибавляют 300 г мочевины. Затем содержимое колбы ocToposaio кипятят с обратным холодильником 2 часа 45 минут и онссгичио 15 машут. Раствор в колбе охлаждают до комнатной температуры, растворяют в кем 110 г 95^-пого азотистокислого натрия и охлаждают до 0°С. Б 3-х литровом стакане готовят смесь 60О г льда и 100 г концентрированной серкой кислоты, охлаждая содержимое стакана смесью льда и соли. Б этот стакан при перемешивании приливают содержимое колбы / холодный раствор метилмочевины и нитрита натрия / с такой скоростью, чтобы температура не поднималась пьде 0°С. Получение китрозометилмочевины проходит по следующим реакциям

ОИ,М*.,Т HCt 1    CH.-I'li-OC-NH^-t    ВН.С1

^    <-    •-    2    2    4

ch ,-Kii-co-M!~ ♦ hko. —— он .-iK.se)-co-кн., -r K.,o

!>    *■    ‘    p    d    r.

Нитрозометилмочевина всплывает на поверхность в Биде мелких кристаллов, которые немедленно отфильтровывают на воронке Бюлнера и хорошо отсасывают под вакуумом. Ззтем кристаллы на фильтре размешивают до образования пасты с^50 кл холодной дистиллированной воды, отсасыьают и сушат в вакуумвксикаторз. Выход нитрозометилмочевлыи'66^ - 72£ / 105 - 115 г / от тео-‘ ретического.

Полученную таким образом нитрозометилыочеэияу можно хранить'в холодильнике длительное время. При температуре вше 20°С ее не следует хранить более I чаоа. При температуре 30°С нятроэометилмочевина может разложиться без взрыва, но. с выделением газообразных продуктов.

Получение диазоыетьаа из нцтровоыетилмочеьины проходит по следующей реакции

СИ *N (NO) -CO-NK;, « КОИ —CH₀N₀ ♦ KCNO + 2ll_o0

у    *•    ft    c    c

Б круглодондую колбу на ICO i/л помещают 3 ил 50£~аого водного растворе едкого к.чли и 10 ил дзэтидозого эфира. Смесь охлалдсют до 5°С, нсслэ чего пол взбалтывании прибавляют I г одтрозометиллючеокны. Колбу присоединяют к холодильнику,

НИЖНИЙ конец которого СНибжеН СЛОНЖСМ С ОТВОДОМ» ЛрОХОДЛЩИЬ! через резиновую пробку а погруженным в слой эфира на дне приемника. Приемник о хл* дна ют смесью льда и соли.

Реакционную колбу помещают на ледяную бани» нагретую до 50°С. Эфирный раствор а колбе доводят до кипения* Время от Брзмени оодесядмое колбы перемешивают. Отгонку прекращают после получения первых капель беецпеткого дистиллята.

Hit в коем случае не следует отгонять весь эфир I

Приборы и посуда

Газовый хроматограф с электронно-захватным детектором /Цнет-5, Цвет-106 и д_д. /.

Делг.'.ельные воронки на 1500, ЬСО и 250 мл

Колба мерная, I л

Колба Бунзена, 0,в л

Воронка Бюхнера, цнлметр 15 си

Прибор Кудерни-Даниша или ротационный испаритель

Аппарат для встряхивания

Колбы конические с up’.шлакованной пробкой на 500 и 250 мл Байя водяная Холодильник Либиха Электроплитка

Вакуумный водоструйный насос

Вакуумный масляный насос

Грушевидные и круглодонные колбы на 100 мл

Пробирки, 5 мл

Стаканы химические, 50 мл

Мельница лабораторная / кофемолка /

Ход айализа

Пробу воды / 250 - 1000 мл / пометают б делительную во-

9*

ронку, прибавляют I ил соляной кислоты V экстрнгяру&т трпмл порциями диэтялового эфира / 'ICO, ЬО л SO кя /. Объединенные эфирные экстракты cyci8? безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют яа гютационном испарителе или в приборе Кудер-иа-Данияа до объема 3-Ь мл. Последние порты растворителя удаляют с током в о идо* ха / для этой дели можно использовать резиновую грущу /. СухоЛ остаток растворяет в 40 их этанола, переносят в коническую колбу на 300 мл, прибавляют S у водный раствор едкого натра до слабощелочной реакции / универсальная индикаторная бумага /, нркооедпЕ.чтт к колбе обратный холодильник и помещают на 3-2,5 на кипящую водяную баня для гидролиза бензолового эфира 2,4-Д до 2,4-д. После окончания гидролиза смывают обратный холодильник этанолом, дэвг.я смыву стечь в колбу, прибавляют 50 мл хлороформа и перекосят содержимое колбы в делительную всронку на 500 .мл. Экстрагируют

2,4-Д сначала 2С г/л 5 N водного раствора едкого натра и 50 мл воды, а затем дважды 5 мл 5 N водного раствора едкого натра и 50 мл воды. Прод о дм тельное ть каждой экстракция 3 мин. Органический растворитель отбрасывают, а объединенный водный экстракт трижды промывают хлороформом m 30 мл, отбрасывая хлороформ. Затем водный экстракт подкисляют 20 мл концентрированной соляной кислоты и экстрагируют 2,4-Д диэтиловым эфиром дважды по 50 мл. Эфирный экстракт сушат безводным сульфатом натрия и удаляют растворитель на ротационном испарителе. Последние порции растворителя удаляют током воздуха. К сухому остатку в круглодоиноЗ колбе на 100 мл прибавляют 5 мкг 2,4,5-Т / в влде раствора в диэтиловом эфире / и приливают эфирный раствор диазометана / при этом взбалтывая содержимое колбы / до прекращения обесцвечивания раствора в колбе. Затем удаляют растворитель досуха, остаток раствог. пот в I мл н-гск-сана и аликвоту хроматографируют при следующих условиях /хроматограф Цоет-106 /i стеклянная спиральная колонки / длина I м; внутренний диаметр 3 мм /, заполненная хроматоиом N , 0,16 - 0,20 мм, промытым кислотой и еяланизировашшм ШС с 5£ SE-30, скорость газа-носителя / азот особой чистоты / через колонку 50 мл/мин, скорость азота особой чистоты через детектор постоянно* скорости рекомбинации 150 мл/мин, температура термосtvтл колоне] 1?0°С, температура термостата детектора 220°С, температур.. испарителя 220^сС, зи:вла электро-

—т?

метра 2С*Ю”^Х а, скорость диаграммной ленты потенциометра 240 ш/чао, Порядок дохода из колонки хроматографируемых веществ : л-гекезл / рас твори тс ль /, метиловый эфир 2 _Э4-Д« метиловый эфир 2,4,о-Т. Зро.йи удерживания цетилового эфира

2,4-Д I мин. 4Ь сок. Хроматографирование одной пробы поводят дважды. Измеряют па хрел-лограммах вьи-отг. ликов метиловых эфиров 2,4-д а 2,4,5-Т, вычисляют среднее значение отношения этих гисот и по калиЗроосчмсну графику находят содержание 2,4-Д и упаренном экстракте. Для построения калиброьоч-ного графика г, круглсдсшше колбы на 100 мл помещают 5,10, 15,20 ккг 2,-4-Д и виде раствора в да этиловом э}ире и в каждую колбу помещают I kui стандартного раствора 2,4,S-T с содержанием 5 мкг/ыл / а дйэтнловом эфире / а далее поступает так, как это описано выше. На хроматограммах измеряют высоты пиков метиловых эфиров 2,1-Д и 2,4,Ь-Т и строят график зависимости отношения этих высот от отношения количеств 2,4-Д и 2,4,Ь-Т в единице объема раствора.

Растительный материал.

Навеску зерна пшеницы / 20 г /, измельченного в муку на лабораторной мельнице, помешают в коническую колбу с цратер-той пробкой / о£ьем колбы ЬОО мл / а встряхивают на аппарате для встряхивании в течение часа со смесью растворителей, состоящей из 50 мл диотилового эфира, 50 мл хлороформа и I мл ледяной уксусной кислоты. Твердые частицы отфильтровывают на воронке Ьюхяера под зекуум эм, колбу споласкивают небольшим количеством смеси ^растворителей хлороформ-диэтилоьый эфир / 1:1 /. Фильтрат сушат безводным сульфатом натрия и удаляют растворитель па ротационном испарителе до объема 3-5 мл. Последние порции растворителей удаляют током воздуха.

Сухой остаток растворяют в 40 мл этанола, переносят в коническую колбу на 300 мл, прибавляют 5 н водный рзотвор едкого язтра до слабощелочной реакции / универсальная индикаторная бумага /, присоединяют к колбе обратный холодильник и помещают на 2 *- 2,5 часа на кипящую водяную бгшю для гидролиза поли этиленгликолевого эфира 2,4-Д до 2,4-Д, После окончания гидролиза смывают обращай холодильник этанолоцом, давая смуву стечь в колбу, прибавляют 50 мл хлороформа я переносят содержимое колбы в делительную воронку на 500 мл.

99

Экстрагируют 2,4-Д сначала 20 r/л 5 N водного рос творя едкого натре а 50 мл соды, а затем дважды 5 ил SN йодного раствора едкого натра и 50 г/д воды. Продолжительп ость каждой экстракций 3 кинут». Органический растворитель отбрасывает, а объединенный водный экстракт трияды проколют хлороформом по 30 мл, отбрасывал 'хлорсфср'/. Затек водный экстракт подкисляют 20 мл концентрированной кислоты и экстрагируют 2,4-д дк-этилор!-.¹;»' эфиром дважды но 50 мл. Водную Фазу отбрасывают, а эфирный экстракт переносят d делительную воронку на 250 ьис и экстрагируют 2,4-д тремя порциями 0,5 п водного детвора едкого натре / 50, 25 и 25 мл /. Обьединенный щелочной экстракт промывают трема порци/а/л хлороформа по 10 г/л, отбрасывая этот хлороформ, подкисляют 10 ил концентрированной соляной кислоты, приливают 5 од 4Од-него водного раствора фосфорно-молибденовой кислоты и извлекают 2,4-Д тремя порциями хлороформа по 10 гал. Из объединенного хло-форменного экстракта извлекают 2,4-Д трема порциями экстракционного раствора по 25 мл. Объединенный экстракт промывают тремя порциями хлороформа по 10 мл, подкисляют 2 мл концентрированной соляной кислоты и извлекают 2,4-Д тремя порция-/, дяэтилового эфира /25, 10 и 10 мл /. Объединенный эфирный экстракт супат безводным сульфатом натрия и удаляют растворитель на оотацион-ном испарителе. Последние порции растворителя удаляют током воздуха. К сухому остатку в круглодонной колбе на 100 мл прибавляют 5 мкг 2,4,5-Т / в виде раствора в даэтиловом эфире /, прпливсют эфирный растрор дпгзомотана я далее поступают так, как это описано при определении в воде.

Гасчет результатов анализа .

Для определения содержания 2,4-Д в пробе используют следу ющую формулу

Р_пг- количество якесенисй 2,4,5-Т, кг; g - количество анализируемой пробы, л или кг;

И * высота пика метилового эфира 2,4-Д, им;

Н_ст- высота лика метилового эфира 2,4,5-Т, км*

Для пересчет.?, содержания в прббе поэтиленгллжолевого эфира 2.4-Д необходимо получерные результат умножить па 2,7280.

Уо/