Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

30 страниц

872.00 ₽

Купить ПНД Ф 14.1:2:4.251-08 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Методика предназначена для идентификации и выполнения измерений массовых концентраций 17 высокотоксичных 2,3,7,8-замещенных полихлорированных дибензо-п-диоксинов (ПХДД) и дибензофуранов (ПХДФ) в пробах питьевой воды, поверхностных природных и очищенных сточных вод методом хромато-масс-спектрометрии и расчета на их основе суммарного содержания токсичных полихлорированных дибензо-п-диоксинов и дибензофуранов в пересчете на 2,3,7,8-тетрахлордибензо-п-диоксин с помощью установленных диоксиновых эквивалентов токсичности, в лабораториях, имеющих соответствующее оборудование и доказавших свою компетентность в проведении этих анализов.

 Скачать PDF

Оглавление

1 Назначение и область применения

2 Требования к показателям точности измерений

3 Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, материалам, реактивам

     3.1 Средства измерений

     3.2 Вспомогательные устройства

     3.3 Реактивы и материалы

4 Метод измерений

5 Требования безопасности, охраны окружающей среды

6 Требования к квалификации операторов

7 Требования к условиям измерений

8 Отбор, хранение и транспортировка проб

9 Подготовка к выполнению измерений

     9.1 Подготовка растворителей и сорбентов

     9.2 Приготовление рабочих растворов

     9.3 Подготовка проб

     9.4 Экстракция

     9.5. Очистка экстрактов и подготовка к анализу

     9.6 Подготовка прибора

     9.7 Установление градуировочной характеристики

10 Порядок выполнения измерений

11 Обработка результатов измерений

12 Оформление результатов измерений

13 Оценка приемлемости результатов измерений. получаемых в условиях воспроизводства

14 Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лабораториях

Приложение 1 (справочное). Термины н определения

Приложение 2 (справочное). Условные обозначения и сокращения

Приложение 3 (обязательное). Перечень ПХДД ПХДВ и их изотопно-меченых аналогов, коэффициенты токсичности, масса пробы, предел определения, состав стандартов, массы регистрируемых ионов, соотношения интенсивности молекулярных ионов

Приложение 4 (рекомендуемое). Форма представления результатов анализа

 
Дата введения01.01.2019
Добавлен в базу01.10.2014
Актуализация01.01.2019

Этот документ находится в:

Организации:

17.06.2014УтвержденФГУ Федеральный центр анализа и оценки техногенного воздействия
РазработанГУ Научно-производственное объединение Тайфун , Федеральная служба по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды
РазработанФГУП Российский научно-исследовательский центр чрезвычайных ситуаций ФМБА России
РазработанИнститут проблем эволюции и экологии им. А.Н. Северцова РАН
Нормативные ссылки:
Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19
Стр. 20
стр. 20
Стр. 21
стр. 21
Стр. 22
стр. 22
Стр. 23
стр. 23
Стр. 24
стр. 24
Стр. 25
стр. 25
Стр. 26
стр. 26
Стр. 27
стр. 27
Стр. 28
стр. 28
Стр. 29
стр. 29
Стр. 30
стр. 30

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ЭКОЛОГИЧЕСКОМУ,
ТЕХНОЛОГИЧЕСКОМУ И АТОМНОМУ НАДЗОРУ

УТВЕРЖДАЮ

Директор ФГУ «Федеральный

центр анализа и оценки

техногенного воздействия»

___________________ К.А. Сапрыкин

«22» __декабря__ 2008 г.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВОД

МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
СУММАРНОГО СОДЕРЖАНИЯ ПОЛИХЛОРИРОВАННЫХ
ДИБЕНЗО-П-ДИОКСИНОВ И ДИБЕНЗОФУРАНОВ В
ПЕРЕСЧЕТЕ НА 2,3,7,8-ТЕТРАХЛОРДИБЕНЗО-П-ДИОКСИН
В ПРОБАХ ПИТЬЕВЫХ, ПОВЕРХНОСТНЫХ ПРИРОДНЫХ
И ОЧИЩЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД
МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ

ПНД Ф 14.1:2:4.251-08

Методика допущена для целей государственного
экологического контроля

Методика рассмотрена и одобрена ФГУ «Федеральный центр анализа и оценки техногенного воздействия» (ФГУ «ФЦАО»).

Заместитель директора ФГУ «ФЦАО»

М.Ю. Гавриков

Разработчики:

Институт проблем эволюции и экологии им. А.Н. Северцова РАН

Адрес: 117071. г. Москва, В-71, Ленинский пр., д. 33

Телефон: (499) 135 13 80

ФГУП «Российский научно-исследовательский центр чрезвычайных ситуаций» ФМБА России

Адрес: 123182, г. Москва, ул. Щукинская, д. 40

Телефон: (499) 7204324

ГУ «Научно-производственное объединение «Тайфун», Федеральная служба по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды

Адрес: 243020. г. Обнинск, ул. Победы, д. 4

Телефон: (48439) 4 39 20

1. Назначение и область применения

Методика предназначена для идентификации и выполнения измерений массовых концентраций (далее концентраций) 17 высокотоксичных 2,3,7,8-замещенных полихлорированных дибензо-п-диоксинов (ПХДД) и дибензофуранов (ПХДФ): 2,3,7,8-ТетраХДД; 1,2,3,7,8-ПентаХДД; 1,2,3,4,7,8-ГексаХДД; 1,2,3,6,7,8-ГексаХДД; 1,2,3,7,8-ГексаХДД; 1,2,3,4,6,7,8-ГептаХДД; ОктаХДД; 2,3,7,8-ТетраХДФ; 1,2,3,7,8-ПентаХДФ; 2,3,4,7,8-ПентаХДФ; 1,2,3,4,7,8-ГексаХДФ; 1,2,3,6,7,8-ГексаХДФ; 2,3,4,6,7,8-ГексаХДФ; 1,2,3,7,8,9-ГексаХДФ; 1,2,3,4,6,7,8-ГептаХДФ; 1,2,3,4,7,8,9-ГептаХДФ; ОктаХДФ в пробах питьевой воды, поверхностных природных и очищенных сточных вод методом хромато-масс-спектрометрии и расчета на их основе суммарного содержания токсичных полихлорированных дибензо-п-диоксинов и дибензофуранов в пересчете на 2,3,7,8-тетрахлордибензо-п-диоксин с помощью установленных диоксиновых эквивалентов токсичности, в лабораториях, имеющих соответствующее оборудование и доказавших свою компетентность в проведении этих анализов.

Диапазон определяемых массовых концентраций конгенеров ПХДД и ПХДФ в пересчете на 2,3,7,8-ТетраХДД составляет 0,5 - 1000 пг/дм3 при объеме анализируемой пробы воды 1 - 20 дм3. Предельно допустимая концентрация 2,3,7,8-ТетраХДД в воде составляет 1 пг/дм3.

Влияние возможных мешающих соединений устраняется в процессе подготовки пробы к анализу.

2. Значения характеристики погрешности методики

2.1. Норма погрешности измерений согласно ГОСТ 27384-2002 равна ± 80 %.

2.2. Методика выполнения измерений при соблюдении всех регламентированных ею условий проведения измерений обеспечивает получение результатов измерений суммарного содержания полихлорированных дибензо-п-диоксинов и дибензофуранов в пересчете на 2,3,7,8-тетрахлордибензо-п-диоксин (с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в таблице 1.

Таблица 1 - Диапазон измерений, значения показателей точности, правильности, воспроизводимости

Диапазон измерений,

пг/дм3

Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), σR, %

Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности при вероятности Р = 0,95), ± δс, %

Показатель точности (границы относительной погрешности при вероятности Р = 0,95), ± δ, %

от 0,5 до 5 вкл.

34

42

80

от 5 до 1000 вкл.

23

32

56

2.3. Значения показателя точности методики используют при:

- оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;

- оценке деятельности лабораторий по части качества проведения испытаний;

- оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики выполнения измерений в конкретной лаборатории.

3. Термины и определения

В настоящем документе приняты следующие термины и определения:

3.1 Полихлорированные дибензо-п-диоксины/дибензофураны (ПХДД/Ф) - все конгенеры дибено-п-диоксинов и дибензофуранов с содержанием в молекуле от 1 до 8 атомов хлора.

3.2 Конгенер ПХДД/Ф - любой из индивидуальных дибензо-п-диоксинов и дибензофуранов с содержанием хлора от 1 до 8 атомов в молекуле.

3.3 ТХДД - любой изомер тетрахлордибензо-п-диоксина,

ПеХДД - любой изомер пентахлордибензо-п-диоксина,

ГкХДД - любой изомер гексахлордибензо-п-диоксина,

ГпХДД - любой изомер гептахлордибензо-п-диоксина,

ОХДД - октахлордибензо-п-диоксин,

ТХДФ - любой изомер тетрахлордибензофурана,

ПеХДФ - любой изомер пентахлордибензофурана,

ГкХДФ - любой изомер гексахлордибензофурана,

ГпХДФ - любой изомер гептахлордибензофурана,

ОХДФ - октахлордибензофуран.

Порядок замещения для конкретного конгенера указывается цифровым индексом согласно правилам IUPAC, например, 1,2,3,4,5- пентахлордибензо-п-диоксин.

3.4 Стандарт-имитатор (SIS) - смесь конгенеров ПХДД/ПХДФ, изотопно-меченных углеродом 13С12, вводимая в пробу на стадии обработки для контроля полноты извлечения и количественных расчетов.

3.5 Инструментальный внутренний стандарт (RIS) - изотопно-меченные углеродом 13С12 конгенеры ПХДД/Ф, не входящие в состав SIS, вводимые в подготовленный к анализу экстракт для контроля эффективности экстракции конгенеров, входящих в состав SIS, проверки стабильности работы масс-спектрометра и оперативного контроля эффективности хроматографического разделения изомеров.

3.6 Ионная масс-хроматограмма - масс-хроматограмма, полученная компьютерной обработкой результатов анализа и показывающая величину сигнала, создаваемого ионами с заданной массой, характеристическими для конгенеров ПХДД/ПХДФ с определенной степенью хлорирования.

3.7 Диоксиновый эквивалент токсичности (ДЭ) каждого конгенера ПХДД/ПХДФ определяется в соответствии с классификацией в ГН 2.1.6.014-94, аналогичной международной классификации (I-TEF), и выражается в относительных единицах по отношению к токсичности конгенера 2,3,7,8-тетрахлордибензо-п-диоксина, принимаемой за 1. (Приложение 1).

3.8 Суммарная токсичность пробы (суммарная концентрация в ДЭ, Приложение 1) представляет собой сумму произведений концентраций каждого конгенера на соответствующий эквивалент токсичности. Именно эта величина нормируется в гигиенических нормативах.

4. Сущность методики

Методика основана на экстракции ПХДД/ПХДФ из пробы воды органическим растворителем, в которую предварительно внесен изотопно-меченый стандарт-имитатор ПХДД/ПХДФ (SIS), очистке экстракта от сопутствующих соединений, мешающих определению ПХДД/ПХДФ, внесении инструментального изотопно-меченого внутреннего стандарта (RIS), концентрировании экстракта и последующем его анализе с помощью сочетания высокоэффективной капиллярной газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС).

Идентификацию конгенеров ПХДД/ПХДФ осуществляют по хроматографическим временам удерживания, наличию характеристических ионов в масс-спектрах хроматографически выделенного конгенера и соотношению интенсивностей (площадей) пиков, отвечающих характеристическим ионам идентифицируемых компонентов и стандартов-имитаторов, на регистрируемых ионных масс-хроматограммах.

Концентрации конгенеров ПХДД/ПХДФ определяют по площадям соответствующих хроматографических пиков на ионных масс-хроматограммах по методу изотопного разбавления и внутреннего стандарта.

5. Средства измерений

5.1. Хромато-масс-спектрометрическая система, включающая:

- газовый хроматограф, (Trace GC, Agilent Technology 6890 или другой с характеристиками, не уступающими указанным хроматографам), позволяющий работать с капиллярными колонками, инжектором split-splitless или on-column, соединенный с масс-спектрометром высокого или низкого разрешения, позволяющим регистрировать отдельные ионы с заданными массами в диапазоне 50 - 600 а.е.м. при ионизации пробы в режиме электронного удара или химической ионизации с детектированием отрицательно заряженных ионов, оснащенный компьютерной системой обработки данных (ThermoFinnigan 95XL или DFS, Waters AutoSpec, Agilent Technology HP 5975, JMS-700, Varian-320MS, ITMS-240MS, ITQ 900GC/MS, TSQ Quantum или другие с характеристиками, не уступающими указанным приборам). Чувствительность системы ГХ-МС должна обеспечивать регистрацию не менее 0,5 пг 2,3,7,8 ТХДД при отношении сигнал/шум равном 5.

- капиллярные хроматографические колонки длиной 25 - 60 м, внутренним диаметром 0,15 - 0,32 мм с неполярной или слабополярной неподвижной фазой типа DB-5ms, SGE ВРХ5, Ultra-2 и др. и полярной неподвижной фазой SP 2331, СР Sil 88, DB-DIOXIN, (допускается использование и других колонок с неподвижными фазами, обеспечивающими разделение 2,3,7,8-замещенных и других изомеров ПХДД и ПХДФ).

5.2. Микрошприцы хроматографические, на 10 мм3, ценой деления 0,1 мм3, например Hamilton #700.

5.3. Термометр технический ртутный прямой с диапазоном измеряемой температуры от 0 до 100 °С и ценой деления 1 °С, ТУ 25-2022.0006.90.

5.4. Термометр технический ртутный прямой с диапазоном измеряемой температуры от 0 до 500 °С и ценой деления 2 °С, ТУ 25-2022.0006.90.

5.5. Автоматические дозаторы на объем 100 - 1000 мм3, точность ± 0,8 %, например Eppendorf #3111.000.165.

5.6. Автоматические дозаторы на объем 10 - 100 мм3, точность ± 0,6 %, например Eppendorf #3111.000.149.

5.7. Цилиндры мерные исполнения 3 вместимостью 25, 50, 100, 1000 см3, ГОСТ 1770-74.

5.8. Колбы мерные наливные 2-25-2, 2-50-2, ГОСТ 1770-74.

5.9. Пипетки 1-2-1, 2-2-5, ГОСТ 29227-91.

5.10. Весы лабораторные специального или высокого класса точности с ценой деления не более 0,1 мг, наибольшим пределом взвешивания не более 210 г, ГОСТ 24104-2001.

6. Вспомогательные устройства и лабораторная посуда

6.1. Ротационный испаритель типа ИР-1 М2 по ТУ 25-1173 102-84.

6.2. Сушильный шкаф типа 2В-151 по МРТУ 42-1411-61 или аналогичный.

6.3. Плитка электрическая с закрытой спиралью мощностью 800 Вт типа ЭПШ-1-0,8/200 по ГОСТу 14919-83.

6.4. Устройство для встряхивания жидкостей любого типа.

6.5. Концентратор Кудерна-Даниша с испарительной колбой вместимостью 50 см3, концентрирующей пробиркой вместимостью 10 см3 и трехшариковой колонкой Снайдера фирмы Supelco или аналогичный.

6.6. Эксикатор 2-250 ГОСТ 25336-82.

6.7. Колонка стеклянная длиной 500 мм и внутренним диаметром 25 мм.

6.8. Колонка стеклянная длиной 200 мм и внутренним диаметром 14 мм.

6.9. Колонка стеклянная длиной 150 мм и внутренним диаметром 10 мм.

6.10. Флаконы для образцов с коническим дном и герметичной пробкой типа Wheaton Mini-Vials вместимостью 1, 3, 5 и 10 см3.

6.11. Флаконы для образцов с герметичной пробкой вместимостью 1, 3, 5 ,10 и 30 см3.

6.12. Резервуар стеклянный Мишель-Миллер с тефлоновыми пробками длиной 450 см и внутренним диаметром 25 мм, Aldrich Chemical Company Z 17, 951-5.

6.13. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336-82:

воронки лабораторные В-36-50, В-100-150;

дефлегматор 250-14/23-29/32-ТС;

колбы конические вместимостью Кн-1-100-14/23 ТС, Кн-1-250-24/29 ТС;

колбы круглодонные К-1-500-29/32 ТС, К-1-1000-29/32 ТС, К-1-2000-29/32 ТС;

колбы грушевидные К-1-50-14/23, К-1-100-14/23, К-1-250-29/32;

насос водоструйный; стаканы В-1-50 ТС, В-1-100 ТС;

холодильник ХПТ-1-300-14/23 ХС;

Трубка стеклянная длиной 15 см, внешним диаметром 7 мм, внутренним диаметром 3,5 мм.

6.14. Трубки полиэтиленовые внешним диаметром 2 мм.

6.15. Трубки из силиконовой резины.

6.16. Резистор ПЭВ-15 8200 Ом, ТУ - ОЖО467546.

6.17. Баллон с сжатым воздухом.

6.18. Редуктор кислородный.

Допускается использование вспомогательных устройств и лабораторной посуды других марок, обеспечивающих проведение анализа с заданной погрешностью.

7. Реактивы и материалы

7.1. Ацетон ос.ч., ТУ-6-09-3513-86.

7.2. Толуол, х.ч., ТУ 6-09-4305-76.

7.3. Метанол, х.ч., ГОСТ 6995-77.

7.4. н-Гексан х.ч., ТУ 6-09-3375-73.

7.5. Метиленхлорид х.ч., ТУ 6-09-06-856-71.

7.6. Спирт этиловый ГОСТ 18300-87.

7.7. н-Тридекан ч., ТУ 6-09-3732-74.

7.8. Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77.

7.9. Натрий сернокислый безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

7.10. Натрий хлористый х.ч., ГОСТ 4233-77, водный раствор с массовой долей 5 %.

7.11. Кальций хлористый безводный ч., ТУ 6-09-4711-81.

7.12. Цезий гидроксид 1-водный, х.ч., ТУ 6-09-04-88-82.

7.13. Калия гидроокись х.ч., ГОСТ 24363-80, водный раствор с массовой долей 20%.

7.14. Алюминий оксид для хроматографии, 100-200 mech, Bio-Rad, кат. № 132-1340.

7.15. Гелий марки В, ТУ 51-940-80.

7.16. Азот ос.ч., ГОСТ 9293-74.

7.17. Целит 545, Alltech.

7.18. Силикагель Kieseigel 60, 70 - 230 мкм (E.Merk).

7.19. Уголь активированный марки Anderson AX-21 или ФАС-МД (Институт физической химии РАН, Лаборатория синтеза и исследования сорбентов).

7.20. Вата медицинская гигроскопическая, ГОСТ 5556-81.

7.21. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.

7.22. н-Декан.

Допускается использование реактивов и материалов других марок, номинальные и метрологические характеристики которых не хуже вышеприведенных, после их проверки путем проведения всей процедуры анализа с применением этих реагентов для холостого опыта и проанализированных ранее проб с добавлением известного количества определяемых компонентов и оценки полученных результатов с учетом характеристик погрешности.

8. Стандартные растворы 1

_______________

1 Примечание 1: В настоящее время синтетические аналоги ПХДД/ПХДФ, меченные изотопом углерода 13С12, выпускаются компаниями Cambridge Isotope Laboratory (CIL), США, Wellington Laboratories (Канада). Для анализа могут быть использованы также аттестованные стандарты других производителей, метрологические характеристики которых не уступают вышеприведенным. (В методике приводится оптимальный, по мнению разработчиков, вариант).

8.1. Стандартный раствор изотопно-меченого стандарта-имитатора - SIS, (код по каталогу CIL # EDF4053), с погрешностью содержания каждого компонента не хуже ± 10 % состава (таблица 2).

Таблица 2 - Состав стандарта-имитатора EDF-4053

Конгенер ПХДД/ПХДФ

Концентрация, мкг/см3

2,3,7,8-ТХДД (13C12 99 %)

1,0

1,2,3,7,8-ПеХДД (13C12 99 %)

1,0

1,2,3,6,7,8-ГхХДД (13C12 99 %)

1,0

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД (13C12 99 %)

1,0

ОХДД (13C12 99 %)

2,0

2,3,7,8-ТХДФ (13C12 99 %)

1,0

1,2,3,7,8-ПеХДФ (13C12 99 %)

1,0

1,2,3,6,7,8-ГхХДФ (13C12 99 %)

1,0

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ (13C12 99 %)

1,0

8.2. Стандартный раствор изотопно-меченого инструментального внутреннего стандарта - RIS, (код по каталогу CIL # EDF4055), с погрешностью содержания каждого компонента не хуже ± 10 % состава:

1,2,3,4-ТХДД(13С12 99 %)                                                                  0,5 мкг/см3

1,2,3,7,8,9-ГхХДД (13С12 99 %)                                                         0,5 мкг/см3

8.3. Стандартный раствор 17 токсичных конгенеров ПХДД/ПХДФ, производства Cambridge Isotope Laboratory (номер по каталогу CIL # EDF-7999-10х), с погрешностью содержания каждого компонента не хуже ± 10 % состава (таблица 3):

Таблица 3 -Состав стандартного раствора EDF-7999-10х

Конгенер ПХДД

Концентрация, нг/см3

Конгенер ПХДФ

Концентрация, нг/см3

2,3,7,8-ТХДД

400

2,3,7,8-ТХДФ

400

1,2,3,7,8-ПеХДД

2000

1,2,3,7,8-ПеХДФ

2000

1,2,3,4,7,8-ГкХДД

2000

2,3,4,7,8-ПеХДФ

2000

1,2,3,6,7,8-ГкХДД

2000

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ

2000

1,2,3,7,8,9-ГкХДД

2000

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

2000

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД

2000

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

2000

ОХДД

4000

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

2000

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

2000

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ

2000

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ

2000

ОХДФ

4000

9. Требования безопасности

Всего существуют 75 различных ПХДД и 135 ПХДФ, отличающихся количеством и местом присоединения атомов хлора. Наиболее токсичны 17 изомеров ПХДД и ПХДФ, замещенные атомами хлора в 2,3,7,8-положениях. Самым токсичным является 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксин (2,3,7,8-ТХДД), который представляет собой кристаллическое вещество с температурой плавления 305 - 307 °С, растворимостью в воде 2∙10-8 %, химически инертное, термостойкое, не разлагаемое кислотами и щелочами. 2,3,7,8-ТХДД высокотоксичен даже в малых концентрациях. Токсичность других ПХДД и ПХДФ выражается в эквивалентах токсичности (диоксиновых эквивалентах, ДЭ) - долях от токсичности 2,3,7,8-ТХДД, принятой за единицу (см. Приложение).

Требования безопасности устанавливают в соответствии с общими требованиями техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76 и со специальными инструкциями по работе с диоксином (например, «Инструкция по технике безопасности по работе с 2,3,7,8-ТХДД», утверждена 3 ГУ при МЗ СССР от 02.12.1986 г.).

Помещения лаборатории должны соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

Помещения, в которых проводятся подготовка проб, должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией. Исходные стандартные образцы для приготовления градуировочных растворов и аттестованных смесей должны храниться в запираемом металлическом шкафу.

Все операции по приготовлению аттестованных смесей и градуировочных растворов, содержащих ТХДД и его меченые аналоги, добавление стандартов к образцу, подготовку образца к анализу, следует проводить под тягой в вытяжном шкафу.

Пробы, подготовленные к анализу, и растворы стандартных образцов, градуировочных и контрольных растворов, аттестованных смесей следует держать в ампулах, закрытых завинчивающейся или запрессованной крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем.

Меры по оказанию первой помощи при попадании диоксина и его растворов на кожу, в глаза и желудок проводят в соответствии с «Временной инструкцией по лечению отравлений диоксином», утвержденной заместителем Министра здравоохранения СССР от 10 сентября 1986 г.

10. Требования к квалификации оператора

Подготовку проб может производить специалист с образованием не ниже среднего, прошедший соответствующую подготовку и имеющий навыки работы в химической лаборатории. Анализ может проводить специалист с образованием не ниже среднего, имеющий навыки работы на газовом хроматографе и масс-спектрометре. Все работающие должны быть проинструктированы о работе с веществами 1 - 2 класса опасности, органическими растворителями, правилах работы в химической лаборатории и работы с электроустановками.

11. Отбор, хранение и транспортировка проб

Отбор проб воды производят согласно «Методике отбора проб воды для определения полихлорированных дибензо-п-диоксинов», утвержденной Госстандартом РФ 11.12.92 г. Пробы отбирают в количестве от 1 до 20 дм3 в стеклянные бутыли темного стекла (или защищенные от света) с притертой пробкой или с пробкой, снабженной тефлоновой прокладкой. Объем пробы, необходимый для анализа, зависит от реальной чувствительности хромато-масс-спектрометра. Если чувствительность равна 0,1 пг, то при инжектировании 0,2 частей экстракта для достижения чувствительности детектирования 0,1 пг/дм3 необходим объем пробы 5 дм3. Если чувствительность равна 0,4 пг, то при инжектировании 0,2 частей экстракта для достижения чувствительности детектирования 0,1 пг/дм3 необходим объем пробы 20 дм3.

Пробы могут храниться при температуре 4 °С в защищенном от света месте в течение 2-х месяцев. Консервации пробы не требуется. Если указанные условия обеспечить нельзя, то пробу необходимо законсервировать добавлением 0,5 - 1 см3 бензола или 0,2 - 0,5 г азида натрия в зависимости от объема пробы.

Пробы могут транспортироваться при комнатной температуре без доступа солнечного света.

12. Подготовка к проведению анализа

12.1. Подготовка растворителей и сорбентов.

12.1.1. Подготовка растворителей. Органические растворители перегоняют в стеклянной посуде.

К 4 дм3 гексана добавляют 150 г силикагеля, импрегнированного серной кислотой (способ приготовления см. п. 12.1.3.) и встряхивают в течение 6 - 8 часов. Растворитель декантируют и перегоняют с дефлегматором «елочкой» длиной 50 см, отбрасывая предгон (~5 %) и кубовый остаток (~5 %).

Растворители с маркой «pesticide grade» (для анализа пестицидов) могут использоваться без дополнительной очистки.

12.1.2. Активирование силикагеля и оксида алюминия.

Силикагель активируют в сушильном шкафу при 130 - 140 °С в течение 17 ч.

Оксид алюминия активируют при 400 - 450 °С в течение 17 ч в стеклянных ампулах по 4 г в каждой, после чего ампулы запаивают, не допуская их охлаждения ниже 200 °С.

12.1.3. Силикагель, импрегнированный серной кислотой. Смесь 150 г активированного силикагеля и 100 г концентрированной серной кислоты помещают в колбу с притертой пробкой и перемешивают на встряхивателе или качалке до отсутствия комков (не менее 30 мин.).

12.1.4. Силикагель, импрегнированный щелочами

12.1.4.1. Силикагель, импрегнированный гидроксидом цезия.

Готовят метанольный раствор гидроксидом цезия, для чего 150 г гидроксида цезия растворяют в 50 см3 метанола.

К 250 г активированного силикагеля приливают раствор гидроксида цезия в метаноле и перемешивают до отсутствия комков, добавляют еще 250 см3 метанола и кипятят в течение 1,5 ч., фильтруют под вакуумом, промывают 500 см3 метанола и 500 см3 хлористого метилена, сушат в эксикаторе в вакууме. Возможна замена гидроксида цезия на гидроксид калия.

12.1.4.2. Силикагель, импрегнированный гидроксидом калия.

Готовят раствор гидроксида калия в метаноле, для чего 150 г гидроксида калия растворяют в 500 см3 метанола.

К 500 г силикагеля приливают 500 см3 раствора гидроксида калия в метаноле и перемешивают до отсутствия комков. Смесь выдерживают ночь в закрытой посуде, отфильтровывают и сушат током воздуха (воздух для сушки пропускают через трубку, заполненную гидроксидом натрия для удаления CO2). Импрегнированный силикагель активируют в сушильном шкафу при 130 - 140 °С в течение 17 часов.

12.1.5. Натрий сернокислый прокаливают при температуре 300 - 400 °С в течение 17 ч.

При подготовке и использовании каждой новой партии реактивов и материалов али замене одного из них проводят проверку путем выполнения всей процедуры анализа для холостого опыта я контрольной аттестованной смеси, оценивая результаты с учетом характеристик погрешности.

Допускается использование других растворителей и сорбентов, обеспечивающих проведение анализа с заданной погрешностью.

12.2. Приготовление градуировочных растворов, растворов изотопно-меченых стандартов-имитаторов, а также инструментального внутреннего стандарта.

Градуировочные растворы, представляющие собой смеси индивидуальных нативных и изотопно-меченых ПХДД/ПХДФ используют для проверки времен удерживания определяемых ПХДД/ПХДФ, линейности диапазона детектирования и расчета коэффициентов чувствительности анализируемых конгенеров.

В качестве базового раствора нативных конгенеров ПХДД/ПХДФ используется смесь индивидуальных ПХДД/ПХДФ в нонане EDF-7999-10х производства компании Cambridge Isotope Laboratories, Inc., США.

В качестве базового раствора стандарта-имитатора используют стандартный раствор смеси изотопно-меченных углеродом 13C12 конгенеров ПХДД/ПХДФ в нонане, EDF-4053, производства компании Cambridge Isotope Laboratories, Inc., США (п. 8.1)).

12.2.1. Приготовление градуировочных растворов.

а) Раствор CS1.

Используя регулируемые автоматические дозаторы Eppendorf на объемы 100 - 1000 мм3 и 10 - 100 мм3 последовательно вносят в виалу емкостью 4 см3 3830 мм3 н-декана, 10 мм3 базового раствора EDF-7999-10х и 160 мм3 раствора EDF-4053.

б) Раствор CS2.

Используя регулируемые автоматические дозаторы Eppendorf на объемы 100 - 1000 мм3 и 10 - 100 мм3 последовательно вносят в виалу емкостью 4 см3 1870 мм3 н-декана, 50 мм3 базового раствора EDF-7999-10х и 80 мм3 раствора EDF-4053.

в) Раствор CS3.

Используя регулируемые автоматические дозаторы Eppendorf на объемы 100 - 1000 мм3 и 10 - 100 мм3 последовательно вносят в виалу емкостью 2 см3 910 мм3 н-декана, 50 мм3 базового раствора EDF-7999-10х и 40 мм3 раствора EDF-4053.

г) Раствор CS4.

Используя регулируемые автоматические дозаторы Eppendorf на объемы 100 - 1000 мм3 и 10 - 100 мм3 последовательно вносят в виалу емкостью 2 см3 860 мм3 н-декана. 100 мм3 базового раствора EDF-7999-10х и 40 мм3 раствора EDF-4053.

д) Раствор CS5.

Используя регулируемые автоматические дозаторы Eppendorf на объемы 100 - 1000 мм3 и 10 - 100 мм3 последовательно вносят в виалу емкостью 2 см3 760 мм3 н-декана, 200 мм3 базового раствора EDF-7999-10х и 40 мм3 раствора EDF-4053.

Концентрации градуировочных растворов (нг/см3) приведены в таблице 4.

Приготовленные градуировочные растворы могут храниться в герметически закрытых виалах при температуре не выше -10 °С без доступа солнечного света не долее 6 месяцев, в стеклянных запаянных ампулах не более 2 лет.

Таблица 4. - Концентрации градуировочных растворов (нг/см3)

Конгенер ПХДД/ПХДФ

CS1

CS2

CS3

CS4

CS5

2,3,7,8-ТХДД

1

10

20

40

80

1,2,3,7,8-ПеХДД

5

50

100

200

400

1,2,3,4,7,8-ГкХДД

5

50

100

200

400

1,2,3,6,7,8-ГкХДД

5

50

100

200

400

1,2,3,7,8,9-ГкХДД

5

50

100

200

400

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД

5

50

100

200

400

ОХДД

10

100

200

400

800

2,3,7,8-ТХДФ

5

50

100

200

400

1,2,3,7,8-ПеХДФ

5

50

100

200

400

2,3,4,7,8-ПеХДФ

5

50

100

200

400

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ

5

50

100

200

400

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

5

50

100

200

400

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

5

50

100

200

400

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

S

50

100

200

400

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

5

50

100

200

400

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ

5

50

100

200

400

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ

5

50

100

200

400

ОХДФ

10

100

200

400

800

2,3,7,8-ТХДД (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

1,,2,3,7,8-ПеХДД (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

1,2,3,6,7,8-ГхХДД (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

1,2,3,4,б,7,8-ГпХДД (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

ОХДД (13С12 99 %)

80

80

80

80

80

2,3,7,8-ТХДФ (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

1,2,3,7,8-ПеХДФ (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

1,2,3,6,7,8-ГхХДФ (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

2,3,4,6,7,8-ГпХДФ (13С12 99 %)

40

40

40

40

40

12.2.2. Приготовление рабочего раствора изотопно-меченого стандарта-имитатора.

Для приготовления рабочего раствора изотопно-меченого стандарта-имитатора SIS-1 в мерную колбу емкостью 50 см3 вносят автоматическим регулируемым дозатором Eppendorf 1000 мм3 стандартного раствора EDF 4053 (п. 8.1)) и доводят объем раствора до метки н-деканом. Обозначают полученный рабочий раствор как SIS-1. Концентрации конгенеров имитаторов в рабочем растворе (нг/см3) приведены в таблице 5.

Таблица 5. - Концентрации конгенеров имитаторов в рабочем растворе (нг/см3)

Конгенер ПХДД/ПХДФ

SIS

SIS-1

2,3,7,8-ТХДД (13С12 99 %)

1000

20

1,2,3,7,8-ПеХДД (13С12 99 %)

1000

20

1,2,3,6,7,8-ГхХДД (13С12 99 %)

1000

20

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД (13С12 99 %)

1000

20

ОХДД (13С12 99 %)

2000

40

2,3,7,8-ТХДФ (13С12 99 %)

1000

20

1,2,3,7,8-ПеХДФ (13С12 99 %)

1000

20

1,2,3,6,7,8-ГхХДФ (13С12 99 %)

1000

20

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ (13С12 99 %)

1000

20

Приготовленный раствор перемешивают на ультразвуковой бане 10 мин, расфасовывают в стеклянные ампулы по 1 см3. Ампулы запаивают и хранят до использования без доступа солнечного света не более 2 лет.

12.2.3. Приготовление рабочего раствора инструментального внутреннего стандарта.

Для приготовления рабочего раствора изотопно-меченого инструментального внутреннего стандарта в мерную колбу емкостью 10 см3 вносят автоматическим регулируемым дозатором Eppendorf 1000 мм3 стандартного раствора EDF4055 (п. 8.2) и доводят объем раствора до метки н-тридеканом. Обозначают полученный рабочий раствор внутреннего стандарта как RIS-1. Концентрации конгенеров в рабочем растворе внутреннего стандарта RIS-1 (нг/см3) приведены в таблице 6.

Таблица 6. - Концентрации конгенеров в рабочем растворе RIS-1 (нг/см3)

Конгенер ПХДД/ПХДФ

RIS

RIS-1

1,2,3,4-ТХДД (13С12 99 %)

500

50

2,3,7,8,9-ГхХДД (13С12 99 %)

500

50

Приготовленный раствор перемешивают на ультразвуковой бане 10 мин, расфасовывают в стеклянные ампулы по 1 см3. Ампулы запаивают и хранят до использования без доступа солнечного света не более 2 лет.

13. Подготовка проб к анализу

13.1. Экстракция. Если в пробах визуально не наблюдается механических примесей, они экстрагируются непосредственно без предварительной фильтрации. В пробу воды объемом 1 дм3 с помощью дозатора, пипетки или микрошприца вводят 0,05 см3 рабочего раствора стандарта-имитатора (по п. 11.2.2) с концентрацией 5000 пг/см3 и встряхивают для уравновешивания в течение часа, после чего экстрагируют два раза порциями по 50 - 400 см3 смеси гексан-метиленхлорид (50:50 по объему). Продолжительность каждой экстракции не менее 10 мин. Органические экстракты объединяют и очищают далее на угольной колонке.

Примечание. Экстракцию проб воды объемом до 10 дм3 можно проводить на устройстве для встряхивания или с помощью мешалки. Пробы большего объема можно экстрагировать по частям, добавив раствор внутренних стандартов в каждую из частей, или экстрагировать в большой бутыли, расположив ее между вращающимися валками, или перемешивая пробу с помощью мешалки.

13.2. Выделение ПХДД/ПХДФ из экстракта на колонке с активированным углем.

13.2.1. Подготовка угольной колонки. На стеклянной трубке длиной 150 мм, внешним диаметром 7 мм и внутренним диаметром 3,5 мм делают перетяжку на расстоянии 30 мм от края. С противоположной от перетяжки стороны вводят тампон из кварцевой ваты длиной 10 мм. В колонку помещают 200 мг смеси активированного угля ФАС-МД с целитом (1:10) и уплотняют колонку постукиванием. Вводят аналогичный тампон из кварцевой ваты, окончательно уплотняя сорбент. Вторую перетяжку делают на расстоянии 10 мм от второго тампона. Концы трубки оплавляют. К изготовленной угольной колонке присоединяют резервуар Мишель-Миллер посредством полиэтиленовой трубки, уплотненной силиконовым шлангом.

13.2.2. Выделение ПХДД/ПХДФ. Экстракт переносят в резервуар, создают в резервуаре давление азота не более 2 атм., устанавливая скорость пропускания раствора через колонку 2 мл/мин. После пропускания всего раствора давление в резервуаре сбрасывают, помещают в резервуар 20 мл смеси ацетона и гексана (50:50 объем.) и промывают ею колонку, пропуская ее с такой же скоростью. Элюат отбрасывают, колонку отсоединяют от резервуара, присоединяют к нему другим концом, и помещают в разъемную лабораторную печь, нагретую до 110 °С. В резервуар помещают 5 мл толуола и устанавливают давление, достаточное для пропускания толуола со скоростью 2 мл/мин. Элюат собирают для дальнейшей очистки.

13.2.3. Очистка экстракта на «многослойной» колонке с модифицированным силикагелем.

13.2.3.1. Подготовка колонки. В стеклянную колонку длиной 150 мм и внутренним диаметром 14 мм помещают подложку из стеклянной ваты, на которую помещают 1 см3 нейтрального силикагеля, 1 см3 силикагеля, импрегнированного гидроксидом цезия (калия), 1 см3 сульфата натрия, 1 см3 силикагеля, импрегнированного серной кислотой, 1 см3 сульфата натрия, 1 см3 силикагеля, импрегнированного серной кислотой, 1 см3 сульфата натрия и 1 см3 силикагеля, импрегнированного гидроксидом цезия (калия) и 1 см3 нейтрального силикагеля.

13.2.3.2. Очистка экстракта. Толуольный экстракт разбавляют 45 мл гексана, перемешивают и вносят в колонку с модифицированным силикагелем. Смывают остатки со стенок колбы двумя порциями по 5 см3 гексана и также переносят в колонку. После прохождения раствора колонку промывают 50 см3 гексана, вытесняя растворитель током азота. Элюаты объединяют и далее очищают на колонке с оксидом алюминия.

13.3. Очистка на колонке с оксидом алюминия.

13.3.1. Подготовка колонки с оксидом алюминия. В стеклянную колонку длиной 150 мм и внутренним диаметром 10 мм помещают подложку из волокнистого кварцевого материала и 4 г оксида алюминия, а сверху - 2 см3 сернокислого натрия.

13.3.2. Очистка экстракта. Экстракт пропускают через колонку с оксидом алюминия. Колонку промывают последовательно 30 см3 гексана, 40 см3 смеси гексана и метиленхлорида (95:5 объем) и элюируют 50 см3 смеси гексана и метиленхлорида (50:50 объем). Элюат упаривают до объема около 2 см3 в колбе с дефлегматором. Последовательно, по частям (~0,5 см3) элюат переносят во флакон Mini-Vial с коническим дном вместимостью 1 см3, добавляют 0,01 см3 рабочего раствора инструментального внутреннего стандарта RIS-1 (по п. 12.2.3) и упаривают в токе азота до полного испарения растворителя (кроме тридекана).

Подготовленные для анализа пробы могут храниться до 40 суток при температуре не выше 4 °С.

13.4. Если в пробах визуально не наблюдается механических примесей, они экстрагируются непосредственно без предварительной фильтрации (п. 12.1).

Водные пробы, в которых содержание суспендированных частиц превышает 1 %, фильтруют или центрифугируют, фильтрат экстрагируют по п. 12.1, твердые частицы экстрагируют отдельно в аппарате Сокслета или проточном экстракторе, экстракты объединяют. Раствор внутренних стандартов добавляют к каждой из частей.

14. Проведение анализа

14.1. Подготовка аппаратуры.

Хромато-масс-спектрометрическую систему готовят к работе в соответствии с инструкцией по эксплуатации для проведения анализа в режиме селективного детектирования характеристических ионов аналитов и изотопно-меченых стандартов.

Устанавливают программу анализа для хроматографического разделения конгенеров ПХДД/ПХДФ с использованием неполярной колонки типа DB-5MS.

Примерный вид программы приведен ниже:

а) хроматографическая программа

Режим инжектора                                             без деления потока (splitless)

Задержка продувки инжектора                       1 мин

Время сброса растворителя                             5 мин

Тип колонки                                                      DB-5MS

Длина колонки                                                 30 м

Диаметр колонки                                              0,25 мм

Толщина плёнки неподвижной фазы             0,25 µ

Программирование температуры:

Начальная температура колонки                    160 °С

Начальное время задержки                              1 мин

Скорость нагрева колонки                              10 °С/мин до 220 °С, 3 °С/мин до 300 °С

Температура инжектора                                   290 °С

Скорость потока гелия через колонку           1 см3/мин

б) режим масс-спектрометра

Температура интерфейса                                 290 °С

Температура ионного источника                    250 °С

Селективное сканирование                             массы ионов в табл. 7.

Энергия ионизирующих электронов             50 - 70 эВ

Инжектируемый объём                                    1 мм3

Устанавливают программу работы масс-спектрометра для селективного детектирования характеристических ионов аналитов с массами, указанными в таблице 7.

Таблица 7. - Массы регистрируемых ионов и соотношение площадей их пиков на масс-хроматограммах

Соединение

M1

М2

Соотношение площадей пиков

ТХДД

319,897

321,894

0,77

ТХДФ

303,902

305,899

0,77

ПеХДД

355,855

357,852

1,32

ПеХДФ

339,860

341,857

1,32

ГкХДД

389,816

391,813

1,24

ГкХДФ

373,821

375,818

1,24

ГпХДД

423,777

425,774

1,05

ГпХДФ

407,782

409,779

1,05

ОХДД

557,738

559,735

0,89

ОХДФ

441,743

443,740

0,89

13С12 - ТХДД

331,937

333,934

0,77

13С12 - ТХДФ

315,942

317,939

0,77

13С12 - ПеХДД

367,895

369,892

1,32

13С12 - ПеХДФ

351,900

353,897

1,32

13С12 - ГкХДД

401,856

403,853

1,24

13С12 - ГкХДФ

383,864

385,861

1,24

13С12 - ГпХДД

435,817

437,814

1,05

13С12 - ГпХДФ

417,825

419,822

1,05

13С12 - ОХДД

469,778

471,775

0,89

ПРИМЕЧАНИЯ

1. При использовании масс-спектрометра низкого разрешения регистрируются ионы с соответствующими номинальными массами, напр. вместо 319, 897 - 320 и т.д.

2. Для обеспечения большей достоверности результатов регистрировать три иона молекулярного кластера каждого аналита, - (М)+, (М+2)+, (М+4)+, например, ионы м/z 320, 322, 324 а.е.м. для ТХДД.

3. При использовании других изотопно-меченых стандартов в таблицу масс регистрируемых ионов включают массы их молекулярных ионов.

14.2. Проверяют функционирование ГХ-МС системы, вводя в инжектор хроматографа растворитель, Определяют общую чувствительность прибора, фон, наличие эффектов «памяти» и артефактов. Для проверки чувствительности анализируют градуировочный раствор CS1 (п. 12.2.1.) так, как описано п. 14.4. Оценивают чувствительность прибора по соотношению величины сигнала к шуму пика 2,3,7,8-ТХДД, которое должно быть не ниже 5:1.

14.3. Определяют времена удерживания 2,3,7,8-замещенных ПХДД/ПХДФ и внутренних стандартов, анализируя несколько раз градуировочный раствор CS4 (п. 12.2.1.), и измеряя в каждом опыте времена удерживания конгенеров ПХДД/ПХДФ. По результатам измерений рассчитывают средние значения времен удерживания и доверительные интервалы. Времена удерживания зависят от типа колонки и условий работы.

Относительные времена удерживания некоторых 2,3,7,8-замещенных ПХДД/ПХДФ на двух разных неподвижных фазах (полярной и неполярной) приведены в таблице 8.

Таблица 8 - Относительные времена удерживания некоторых 2,3,7,8-замещенных ПХДД/ПХДФ

№ п/п

Соединение

Неподвижная фаза

Неполярная DB-5MS

Полярная SP-2331

1

1,2,3,4-ТХДД

0,99

1,02

2

2,3,7,8-ТХДД

1,00

1,00

3

1,2,3,7,8-ПеХДД

1,23

1,40

4

1,2,3,4,7,8-ГкХДД

1,46

2,08

5

1,2,3,6,7,8-ГкХДД

1,47

1,94

6

1,2,3,7,8,9-ГкХДД

1,50

2,15

7

1,2,3.4,6,7,8-ГпХДД

1,76

2,98

8

ОХДД

2,17

4,50

9

2,3,7,8-ТХДФ

0,96

0,96

10

1,2,3,7,8-ПеХДФ

1,18

1,31

11

2,3,4,7,8-ПеХДФ

1,22

1,35

12

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ

1,39

2,01

13

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

1,39

2,03

14

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

1,43

2,07

15

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ

1,48

2,09

16

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ

1,61

2,83

17

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ

1,74

2,96

18

ОХДФ

2,12

4,45

14.4. Получение градуировочной зависимости для определяемых компонентов.

Для получения градуировочной зависимости последовательно анализируют градуировочные растворы CS1 - CS5 содержащие изопно-меченые стандарты и нативные вещества в широком интервале концентраций (таблица 4) инжектируя по 1 мм3 каждого раствора. Регистрируют масс-хроматограммы для ионов с массами, указанными в таблице 7. С помощью системы обработки данных для каждого градуировочного раствора определяют относительный коэффициент чувствительности RRFi каждого индивидуального конгенера ПХДД/ПХДФ относительно соответствующего изотопно-меченого конгенера стандарта-имитатора, который рассчитывают по формуле:

(RRF)i = (Sni)msi/(Ssi)mni,                                                  (1)

где: Sni - площадь пика i-го конгенера ПХДД/ПХДФ, полученная для соответствующего градуировочного раствора;

Ssi - площадь пика соответствующего изотопно-меченого конгенера в градуировочном растворе;

mni - масса i-го конгенера ПХДД/ПХДФ в градуировочном растворе, нг;

msi - масса соответствующего изотопно-меченого конгенера в градуировочном растворе, нг.

При наличии линейности градуировочной зависимости различие величины относительного коэффициента чувствительности RRF не должно превышать ± 20 % для всех градуировочных растворов.

Рассчитывают средние значения относительных коэффициентов чувствительности для каждого индивидуального конгенера ПХДД/ПХДФ для всех градуировочных растворов.

Примечание. Зависимость считается линейной, если коэффициент вариации значения функции RRF в каждой точке не превышает 20 %.

14.5. Получение масс-хроматограмм анализируемой пробы.

Отбирают микрошприцем 0,001 см3 анализируемого раствора и вводят в инжектор газового хроматографа в режиме splitless или on-column. Регистрируют ионные масс-хроматограммы для ионов, соответствующих определяемым ПХДД/ПХДФ и используемым стандартам-имитаторам (SIS) и внутренним стандартам (RIS) (таблица 7).

14.5.1. Условия проведения анализа.

В связи с тем, что в настоящее время не существует капиллярных колонок, способных разделить все изомеры, в ряде случаев анализ проводят в два этапа. Сначала, применяют неполярную колонку типа DB-5MS. Если обнаруживают: 1,2,3,7,8,9-ГкХДД; 2,3,7,8-ТХДФ; 2,3,4,7,8-ПеХДФ; 1,2,3,4,7,8-ГкХДФ, то ту же пробу анализируют на полярной колонке, например, SP2331, для определения именно этих изомеров.

15. Вычисление результатов измерений

По окончании анализа с помощью системы обработки данных фиксируют на масс-хроматограммах пики в области времен удерживания, соответствующих выходу 2,3,7,8-замещенных ПХДД/ПХДФ, стандарта-имитатора и инструментального внутреннего стандарта.

15.1. Идентификация определяемых компонентов

Наличие в пробе или контрольном образце индивидуального конгенера ПХДД/ПХДФ считают установленным при соблюдении следующих условий:

а) на всех реконструированных масс-хроматограммах, построенных по массам характеристических ионов для данного конгенера, присутствуют пики, имеющие соотношение интенсивности сигнал/шум больше или равное 3, при этом времена удерживания, определяемые по разным характеристическим пикам данного конгенера совпадают,

б) хроматографическое время удерживания конгенера, определяемое по положению максимума пика характеристичекого иона не отличается более чем ± 1 с. от времени удерживания, определенного для данного конгенера при анализе градуировочного раствора.

в) соотношение интенсивностей характеристических ионов на вершине пиков не отличается более, чем на 15 % от значений, приведенных в таблице 7.

Если хроматографические пики в области времен удерживания конгенеров ПХДД/ПХДФ имеются, но отношение площадей характеристических пиков отличается более, чем на 15 % от значений, приведенных в таблице 7, то говорить о положительной идентификации ПХДД или ПХДФ в данной пробе нельзя, и требуется дополнительный анализ с использованием хроматографической колонки с полярной неподвижной фазой или же повторный анализ после дополнительной очистки на колонке с активированным углем и на колонке с окисью алюминия.

15.2. Вычисление концентраций определяемых компонентов.

Массовую концентрацию Сi, пг/дм3, конгенеров ПХДД/ПХДФ в экстракте анализируемой пробы рассчитывают на основании площадей хроматографических пиков, соответствующих каждому определяемому конгенеру по следующей формуле:

Ci = (Sni)mi/(Si)(RRF)iM,                                               (2)

где: Sni - площадь пика i-го конгенера ПХДД/ПХДФ на реконструированной хроматограмме;

Si - площадь пика соответствующего изотопно-меченого стандарта-имитатора ПХДД/ПХДФ;

М - масса образца, взятого для анализа, дм3;

mi - количество введенного i-го изотопно-меченого стандарта-имитатора, нг;

(RRF)i - относительный коэффициент чувствительности i-го конгенера ПХДД/ПХДФ, рассчитанный по формуле (1);

Коэффициент извлечения s-го конгенера изотопно-меченого стандарта-имитатора Es определяется по формуле:

Еs = (Ss)mr/(Sr)ms(RRFsr),                                            (3)

где: Ss - площадь пика s-го конгенера изотопно-меченого стандарта-имитатора на реконструированной хроматограмме анализируемого образца;

Sr - площадь пика r-го конгенера изотопно-меченого инструментального внутреннего стандарта на реконструированной хроматограмме анализируемого образца;

ms - количество введенного в анализируемый образец изотопно-меченого стандарта-имитатора, пг;

mr - количество введенного в анализируемый образец изотопно-меченого внутреннего стандарта, пг;

(RRF)sr - относительный коэффициент чувствительности s-ro конгенера изотопно-меченого стандарта-имитатора определяется из градуировочного раствора по формуле:

RRFsr = (Sss)mrs/(Srs)mss,                                                (4)

где: Sss - площадь пика s-го конгенера изотопно-меченого стандарта-имитатора на реконструированной хроматограмме градуировочного раствора;

Srs - площадь пика r-го конгенера изотопно-меченого инструментального внутреннего стандарта на реконструированной хроматограмме градуировочного раствора;

mrs - массовая доля изотопно-меченого инструментального внутреннего стандарта в градуировочном растворе, пг;

mss - массовая доля изотопно-меченого стандарта-имитатора в градуировочном растворе, пг;

Определение площадей Sn, Si, Ss, Sr, Sss, Srs проводят по масс-хроматограммам либо для одного из двух ионов M1 или М2, указанных в таблице 7, либо для двух ионов с усреднением результатов, либо по сумме площадей соответствующих пиков на обеих масс-хроматограммах.

16. Оформление результатов измерений

Результат анализа, выраженный в диоксиновых эквивалентах (ДЭ), получают путем умножения значений концентраций определяемых компонентов на соответствующие коэффициенты токсичности, приведенные в Приложении 1.

Результат измерения X суммарного содержания полихлорированных дибензо-п-диоксинов и дибензофуранов, выраженного через диоксиновые эквиваленты токсичности, представляют в виде:

X ±  Δ, пг/дмг3,

где: Х - массовая концентрация суммы определяемых компонентов в пробе;

Δ - граница интервала, в котором абсолютная погрешность измерений находится с доверительной вероятностью Р = 0,95.

Характеристику погрешности Δ вычисляют как:

Δ = 0,01δХ,

где δ - значения показателя точности методики.

Результаты анализа вносят в Протокол испытаний, оформленный, в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025-2006, по форме таблицы Приложения 1.

Допустимо представлять результат в виде:

X ± Δл, Р = 0,95, при условии Δл < Δ,

где: Δл - значение характеристики погрешности результатов измерений, установленное при реализации методики в конкретной лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений.

Примечание. Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения: Δл = 0,84Δ, с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.

Результат измерений оканчивается тем же десятичным разрядом, что и погрешность. Результаты измерений оформляют записью в журнале. Результаты измерений удостоверяются лицом, проводившим измерение, а при необходимости - руководителем организации.

17. Оценка приемлемости результатов, получаемых в условиях воспроизводимости

Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости. При выполнении этого условия приемлемы оба результата измерений и в качестве окончательного может быть использовано их общее среднее значение. Значения предела воспроизводимости приведены в таблице 9.

При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов измерений согласно разделу 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

Таблица 9 - Диапазон измерений, значения предела воспроизводимости при доверительной вероятности Р = 0,95

Диапазон измерений, пг/дм3

Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %

от 0,5 до 5 вкл.

95

св. 5 до 1000 вкл.

64

18. Контроль качества результатов анализа

Контроль качества измерений обеспечивают выполнением следующих условий:

- Анализ проб проводят сериями. Каждая серия включает до 11 полевых образцов, один из которых анализируют дважды (дубликат), образец сертифицированного материала с заданным содержанием ПХДД/ПХДФ и процедурный холостой образец.

- Оперативный контроль точности и правильности измерений обеспечивается анализом изотопно-меченых стандартов - имитаторов, аналогов определяемых веществ, вводимых в каждый образец на стадии пробоподготовки.

Допускаемые критерии качества анализа:

Содержание индивидуальных конгенеров ПХДД/ПХДФ в процедурном холостом образце меньше 1 пг.

- Определяемое содержание конгенеров ПХДД/ПХДФ в сертифицированном материале должно соответствовать сертификату материала для 90 % определяемых соединений.

- Отклонение результатов при анализе дубликатов - не более ± 25 % от среднего значения плюс величина предела обнаружения метода для 90 % определяемых соединений (оперативный контроль воспроизводимости).

- Значения величины извлечения конгенеров Еs, рассчитанные по формуле (3), находятся в диапазоне 50 - 110 %.

- Чувствительность прибора определяют один раз в день (или каждый раз после настройки прибора) путем анализа стандартного градуировочного раствора ПХДД/ПХДФ. Приемлемый критерий качества - соотношение сигнал-шум больше 5:1 при инжекции 1 пг 2,3,7,8-ТХДД.

- Хроматографическое разрешение подтверждают анализом градуировочного раствора, проводимым до и после анализа аналитической серии. Приемлемое значение - разделение пиков 1,2,3,4,7,8-ГкХДФ 1,2,3,6,7,8-ГкХДФ соответствует условию:

2h/(H1 + H2) < 0,7,                                                          (5)

где: H1 и Н2 - высоты пиков конгенеров,

h - высота долины между ними.

- Относительные хроматографнческие времена удерживания ПХДД/ПХДФ (по отношению к внутреннему стандарту) не должны отличаться от измеренных для стандартных образцов ПХДД/ПХДФ более, чем на 0,01 %, а в случае использования соответствующего изотопномеченого внутреннего стандарта - не более чем на 1 с или на 1 - 2 скана от времени удерживания внутреннего стандарта.

- Отношение площадей хроматографических пиков на парных масс-хроматограммах ионов M1 и М2, регистрируемых для каждого определяемого компонента и внутреннего стандарта должно быть в пределах ± 15 % от теоретического, приведенного в табл. 7.

- Масс-спектральное разрешение, определенное при настройке прибора; составляет для прибора низкого разрешения не хуже 0,8 а.е.м во всем диапазоне масс, для прибора высокого разрешения R ≥ 10000.

- Линейность градуировки определяют путем анализу 5-ти градуировочных растворов ПХДД/ПХДФ. Критерий качества - допустимое стандартное отклонение рассчитанного относительного коэффициента чувствительности (RRF)i должно быть меньше 20 %.

- Стабильность работы прибора подтверждается до и после анализа серии образцов путем анализа градуировочного раствора ПХДД/ПХДФ CS2. Критерий качества - различия значений величины относительного коэффициента чувствительности (RRF)i, рассчитанные до и после анализа серии образцов, не должны превышать ± 15 %.

- Проверку чистоты прибора на содержание анализируемых компонентов проводят после каждого анализа градуировочного стандартного раствора путем инжекции декана. Приемлемый критерий - величина вносимой ошибки за счет фона прибора не должна превышать 1 % от среднего значения определяемых концентраций.

При невыполнении любого из перечисленных условий принимаются меры по выявлению причин и повторяется анализ партии проб.

19. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- контроль исполнителем процедуры выполнения измерений (на основе оценки погрешности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры);

- контроль стабильности результатов измерений (на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности, погрешности).

Алгоритм контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок.

Контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля Кд.

Результат контрольной процедуры Кк рассчитывают по формуле:

Кк = |Х' - Х - С|,

где: X' - результат контрольного измерения массовой концентрации определяемых компонентов в пробе с известной добавкой определяемых компонентов;

X - результат контрольного измерения массовой концентрации определяемых компонентов в рабочей пробе;

С - величина добавки.

Норматив контроля Кд рассчитывают по формуле

где: ΔлХ', ΔлХ - значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики, соответствующие массовой концентрации определяемых компонентов в пробе с добавкой и в рабочей пробе, соответственно;

ΔлХ = 0,01δлХХ (Х - массовая концентрация определяемых компонентов в пробе);

ΔлХ' = 0,01δлХX' (X' - массовая концентрация определяемых компонентов в пробе с добавкой).

Значения δлХлХ') установлены в лаборатории.

Качество контрольной процедуры признают удовлетворительным, при выполнении условия:

Кк ≤ Кд,                                                                     (1)

При невыполнении условия (1) эксперимент повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам.

Периодичность контроля исполнителем процедуры выполнения измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории. Контроль качества результатов измерений обязательно проводить при смене партий реактивов и материалов, при замене или ремонте средств измерений.

Приложение
(Обязательное)

Форма представления результатов анализа.

Наименование организации, проведший анализ. Номер аттестата аккредитации.

ПРОТОКОЛ № _______ от «__» ___________
количественного химического анализа
полихлорированных дибензо-п-диоксинов и дибензофуранов

Краткое описание пробы (шифр; наименование и характеристика пробы и условий пробоотбора).

Методика КХА (краткое описание с указанием отклонений от регламентированной процедуры).

Определяемый компонент

Диоксиновый эквивалент,

ДЭ

РЕЗУЛЬТАТ АНАЛИЗА

Концентрация, пг/дм3

Концентрация в ДЭ, пг/дм3

2,3,7,8-ТХДД

1

1,2,3,7,8-ПеХДД

0,5

1,2,3,4,7,8-ГкХДД

0,1

1,2,3,6,7,8-ГкХДД

0,1

1,2,3,7,8,9-ГкХДД

0,1

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД

0,01

ОХДД

0,001

2,3,7,8-ТХДФ

0,1

1,2,3,7,8-ПеХДФ

0,05

2,3,4,7,8-ПеХДФ

0,5

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ

0,1

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

0,1

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

0,1

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ

0,1

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ

0,01

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ

0,01

ОХДФ

0,001

Другие ТХДД

Другие ТХДФ

Другие ПеХДД

Другие ПеХДФ

Другие ГкХДД

Другие ГкХДФ

Другой ГпХДД

Другие ГпХДФ

Предел обнаружения по 13С12-2,3,7,8-ТХДД, пг/дм3

Суммарная концентрация в ДЭ, пг/дм3

Относительная погрешность определения, 80 %

Подпись ответственного исполнителя

Примечание: допустимо представление дополнительной информации по характеристикам проб, пробоотбору и результатам анализов.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Назначение и область применения. 1

2. Значения характеристики погрешности методики. 2

3. Термины и определения. 2

4. Сущность методики. 3

5. Средства измерений. 3

6. Вспомогательные устройства и лабораторная посуда. 4

7. Реактивы и материалы.. 5

8. Стандартные растворы1 5

9. Требования безопасности. 7

10. Требования к квалификации оператора. 7

11. Отбор, хранение и транспортировка проб. 7

12. Подготовка к проведению анализа. 8

13. Подготовка проб к анализу. 11

14. Проведение анализа. 12

15. Вычисление результатов измерений. 14

16. Оформление результатов измерений. 16

17. Оценка приемлемости результатов, получаемых в условиях воспроизводимости. 16

18. Контроль качества результатов анализа. 17

19. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории. 18

Приложение. 19