Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

9 страниц

191.00 ₽

Купить МУ 6129-91 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Метод основан на извлечении ХОП и их метаболитов из различных субстратов, очистке и концентрировании экстрактов, последующей идентификации отдельных групп ХОП с помощью адсорбционной ВЭЖХ при спектрофотометрическом детектировании.

  Скачать PDF

Оглавление

1. Краткая характеристика препаратов

2. Методика групповой идентификации ХОП и их метаболитов

2.1. Основные положения

2.2. Реактивы и растворы

2.3. Приборы и посуда

2.4. Отбор, хранение и подготовка проб

2.5. Подготовка к анализу

2.6. Проведение анализа

3. Требования безопасности

Показать даты введения Admin

Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9

Утверждено Министерством Здравоохранения СССР

"29 " июля    1991г.

» 6129-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГРУППОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ И ИХ МЕТАБОЛИТОВ В ВИОМАТЕРИАЛЕ,ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ МЕТОДОМ АДСОРБЦИОННОЙ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

1.    Краткая характеристика препаратов

Краткие характеристики действующих веществ хлорорганических пести-• _

цидов(4,4-ДДГ и его производные,альдрин,ГПХ,ГПХЭ.даконил,дилор,кельтан, ПХП)и их метаболитов (полихлорфенолы и полихлорбензолы) приведены в кшг-гах:"Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней средо",М..Колос,1977,368 с.;Клисенко М.А..Александрова Л.Г."Определение остаточных количеств пестицидов".Киев,Здоровье.1983,

248 с;"Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде",ч.1.,М.,1987, 276 с.

2. Meтодика групповой идентификации ХОП и их метаболитов

2.1.Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении ХОП и их метаболитов из различных субстратов, очистке и концентрировании экстрактов, последующей идентификз-ции отдельных групп ХОП с помощью адсорбционной ЮКХ при спектрофото-мотрическом детектировании.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Параметры анализа хлорорганических пестицидов и их метаболитов

Разработчики:М.А.Клисенко,Е.И.Давидюк,В.Ф.Демченко,ВНИИГИНТОКС,г.Киев

9

методом адсорбционной ВЭЖХ представлены в таблице.

2.1.3.Избирательность метода

Метод групповой идентификации ХОП и их метаболитов избирателен в присутствиии азот-.фосфорорганических пестицидов и других органических примесей.

2.2.Реактивы и растворы

Ацетон, осч., ТУ 6-09-3513-86

н-Гексаы, ч.# ТУ 6-09-3375-78

Натрия сульфат безводный, ч., ГОСТ 4166-76

Серная кислота, чда, ГОСТ 4204-77

Фильтры "синяя лента"

Стандартный раствор многокомпонентной смеси ХОП и их метаболитов в н-гексане с концентрацией индивидуальных компонентов по 100 мкг/мл

10

Таблица

Параметры ВЭЖХ анализа ллорорганичесюп соединенна и их метаболитов


Идентифицируемое соединение


Т


v уд.

мкл

цг-


Хромато-графиче-ские зоны, мкл

Г 3 ~


А. макс., нм


т


ХБ

1,4-ДХБ

1.2.3- ТХБ

1.2.4- ТХБ

1.3.5- ТХБ

1.2.4.5- ТеХБ

1.2.3.4.5.6- ПХБ 2,4*-ДЦТ 4.4*-ДЯГ 2,4*-ДДЭ

4,4*-ДДЭ 2,4* -ДДД 4,4*-ДЦД

2- ХФ

3- ХФ

4- ХФ

2.3- ДХФ

2.4- ДХФ

2.6- ДХФ

3.4- ДХФ

3.5- ДХФ

2.3.4- ТХФ

2.3.5- ТХФ

2.3.6- ТХФ

2.4.5- ТХФ

2.4.6- ТХФ 3,4.5-ТХФ

2.3.4.6- ТеХФ

2.3.5.6- ТеХФ

2.3.4.5.6- ПХФ Альдрин

Гексахлорпараксилол

Гептахлор

Гептахлорэпоксид

Лакоиил

Дилор

Кельт а н

Полихлорпинен


160

175

180

170

170

180

165

236

240

245

190

260


255

375

230

475

350

370


305

230

275

350

275

280


290

280

290

370

250

530

270

270

295

300

180


275

180

275


*/ Предел обнаружения для ДЦТ и его произвол и полихлорбензолов 0,05-0,5, для других ХОД- $


160-180


190-260


230-530


180-300


220

220,280

240.270.290

230.270.290

230.280

220.250.290

230.250.290 240

240

260

250

230

230

220.280

220.290 260 220,280

230.290 220,280

230.290 230,280

230.290

220.290

220.290

220.300

220.300

230.290

230.300

230.290

230.300 280 280 280 280 270 290 280 280


а также полихлорфенолов ~2,0 мкг в пробе.


11


2.3-Приборы и посуда

Хроматограф микроколоночный жидкостный типа "Кйилихром"

Колонка стандартная металлическая ( 50 х 2 мм) с сорбентом "Силасорб-600",5 мкм, Cbemapol (ЧССР)

Весы аналитические типа ВЛКТ-50.Г0СТ 24104-80 Испаритель ротационный типа ИР-1 М2,ТУ 25-1173-84 Линейка металлическая,ГОСТ 25706-83 Воронки конические,ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные со шлифом на 100 мл, ГОСТ 25336-82

Колбы плоскодонные с пришлифованной пробкой на 100 мл,ГОСТ 25336-82

Пипетки мерные на 1 мл, ГОСТ 1770-74

Пробирки мерные на 10 мл, ГОСТ 1770-74

Цилиндры мерные на 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74

2.4.Отбор, хранение и подготовка проб

Отбор, хранение и подготовка проб к анализу проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции пищевых продуктов и окружающей среды для определения пестицидов", утвержденных Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за » 2051-79.

2.5.Подготовка к анализу 2.5.1.Приготовление элюента

Элюирующую смесь - н-гексан-ацетон в объемном соотношении 6:1 готовят в день проведения анализа проб: цилиндром вместимостью на 100 мл отмеряют 90 мл н-гексана, который выливают в плоскодонную колбу с пришлифованной пробкой,туда же приливают 15 мл ацетона,колбу закрывают пробкой и ее содержимое перемешивают при легком взбалтывании, затем элюи-рующую смесь фильтруют через складчатый фильтр с прокаленным сульфатом, натрия в сосуд для элюента.

12

2.5.2.Подготовка хроматографической систем* к проведению анализа Подготовку прибора к хроматографическому анализу начинают с промывки насоса и заполнения его свежеприготовленным элюентом, затем приступают к промывке хроматографической системы прибора и заполнению кюветы сравнения используемым элюентом.После установления равномерного нулевого сигнала детектора и снижения шумов до минимума проводят анализ групповой идентификации ХОП и их метаболитов.

2.6.Проведение анализа

2.6•1•Подготовка пробы к проведению анализа методом ВЭХХ Пробы биоматериала (органы.ткани теплокровных или человека; биологические жидкости:кровь,моча,желчь,грудное молоко).пищевых продуктов или объектов окружающей среды, массой (или объемом), указанной в известных методиках определения ХОП и (или) их метаболитов ,экстрагируют органическим растворителем,согласно описанию хода проведения анализа.Для удаления из гексанового экстракта пробы сопутствующих органических примесей природного происхождения,а также азот-.фосфорорганических пестицидов и продуктов их превращения, влияющих на анализ смеси хлорорганических соединений, проводится предварительная их переэкстракция в концентрированную серную кислоту, затем гексановый экстракт высушивают сульфатом натрия и упаривают на ротационном испарителе при 60°С до небольшого объема,который переносят в мерную пробирку и упаривают досуха в токе азота особой чистоты. Сухой остаток пробы растворяют в 0,2 мл влюента (смесь н-гексана с ацетоном (6:1)и проводят хромвтографическое разделение и идентификацию отдельных групп ХОП и их метаболитов.

13

2.6.2.    Хроматографическое разделение и идентификация отдельных групп ХОП и их метаболитов

Разделение и групповая идентификация ХОП и их метаболитов осуществляется при следующих условиях хроматографирования:

неподвижная фаза -"Силасорб-600",5 мкм,подвижная фаза - гексан-ацетон в объемном соотношении 6:1; скорость элюирующего потока 200 мкл/мин; детектор переменно-волновой спектрофотометр с проточной ячейкой 1,6 мкл; под диапазон чувствительности Э,2А; время измерения выходного сигнала 0,6 с;скорость протяжки диаграммной ленты 720 мм/ч; длина волны ( А. ) поглощения светового потока(нмОпределяется идентифицируемой группой соединений.

Близкие обьемы удерживания (V уд.)представителей отдельных групп хлорорганических соединений и подбор соответствующей длины волны позволяют разграничить зоны хроматографирования, характерные для разных групп,что обеспечивает их идентификацию в сложной пестицидной смеси пробы при сопоставлении с зонами хроматографирования стандартной смеси соответствующих групп соединений.

2.6.3. Примеры идентификации отдельных групп ХОП в многокомпонентной смеси неизвестного состава пробы.

Пример 1. Из 0,2 мл сконцентрированного раствора пробы в элюенте 20 мкл вводят в хроматографическую колонку и проводят анализ при 280 нм в ранее описанном режиме.

При этой длине волны, близкой к А макс, некоторых из исследуемых соединений можно идентифицировать:

1/группу хлорбензолов ( V уд. 160-180 мкл );

2/группу хлорфенолов ( V уд. 230-530 мкл );

14

З/группу соединений .представителей различных классов ХОП-альдрин, ГХПК.ГПХ,ГТТХЭ и некоторых других (V уд.180-300 мкл).

Идентификация 4,4*-ДДТ и его производных достигается повторным хроматографированием при А 230 нм.Объемы удерживания соединений этой группы находятся в пределах 235-260 мкл,а V уд. 4,4'-ДДЭ -190 мкл.При данных условиях идентификации группы 4,4’-ДДТ и его производных не мешают присутствующие в пробе Х0П других классов(альдрин и другие), а также детектируемые на этой длине волны представители группы хлор-бензолов (3-ХФ,3.4-ДХФ,2,3.5.6-ТеХФ)с близкими объемами удерживания (230,250 мкл).Окончательную идентификацию спорных хроматографических сигналов осуществляют подбором необходимой длины волны и снятием развернутых спектров соединений(таблица 1).

Пример 2.Аликвотная часть конечного раствора исследуемой пробы в елюенте вводится в хроматограф и проводится групповое разделение смеси Х0П неизвестного состава при 230 нм. В атих условиях регистрируемые выходные сигналы позволяют идентифицировать следующие группы соединений:хлорбензолу(V уд.160-180 мкл);4,4’-ДДТ и его производные(V уд.235-260;7 уд.4.4’-ДДЭ 190 мкл).Однако идентификация последних может быть затруднена наличием в пробах хлорфенолов (3-,3*4- и 2,3.5,6-хлорфенолы имеют близкие с компонентами группы ДДТ объемы удерживания).Поэтому окончательную идентификацию осуществляют после повторного хроматографирования пробы при А. 220 нм,близкой к А макс.«указанных хлорфенольных соединений.Надежность идентификации может быть повышена снятием развернутого спектра поглощения при остановке процесса хроматографирования на соответствующем выходном сигнале с дискретностью 10 или 2 нм.

15

Пример 3. Аликвотную часть конечного раствора пробы в алюенте хроматографируют в описанном выше режиме при А, =280 нм.В атом случае возможна идентификация трех групп соединений: хлорбензолы, хлорфенолы и ХОП различных классов ( альдрин и др. )эа исключением ДДТ и его производных. Наложение хроматографической зоны ряда хлорфенольных соединений ( объем удерживания от 275 до 305 мкл ) и представителей хлорорганических пестицидов других классов не позволяют провести правильную идентификацию этих соединений, поэтому анализ повторяют при А. 310 нм.В этих условиях ДДТ и его производные и основная часть хлорфенолов ( за исключением 2,4.6-ТХФ, 2,3.4,6-ТеХФ и 2,3.4,5,6-ПХФ) не регистрируется.Объемы удерживания двух последних соединений не совпадают с хроматографической зоной ХОП ( 370 и 530 мкл ),что устраняет их влияние на идентификацию.Помехи 2,4.6-ТХФ можно устранить переключением спектрофотометра на 260 нм,при повторном анализе пробы, когда выходной сигнал этого соединения не регистрируется,или записав развернутый спектр 2,4.6-ТХФ, имеющий две А. макс. 220 и 300 нм.

При проведении число операций по хроматографическому разделению и идентификации может быть ограничено в соответствии с задачами проводимых исследований.

2.6.4.Обработка результатов анвлиза

Качественный состав идентифицируемых групп ХОП и их метаболитов определяется путем сопоставления их хроматографических зон в смеси неизвестного состава пробы и многокомпонентной стандартной смеси одентифицируемых групп соединений. После установления группового состава смеси хлорорганических пестицидов в анализируемой пробе.

исходя из наличия отдельных групп, выбирают наиболее аффективный метод ( ТСХ, ГЖХ, ВЭЖХ ) для дальнейшего количественного измерения индивидуальных компонентов отдельных групп и их метаболитов.

3.Требования безопасности Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, концентрированными кислотами.

17