Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

25 страниц

300.00 ₽

Купить МУ 2492-81 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Методические указания предназначены. для научно-исследовательских институтов гигиенического профиля, гигиенических кафедр медицинских ВУЗов, отделов н лабораторий по охране окружающей среды различных министерств и ведомств. Они могут быть использованы работниками санитарно-эпидемической службы при оценке возможного влияния загрязнений водоемов на здоровье населения. Методические указания определяют область применения в использования методов оценки гонадотоксического действия химических веществ для целей повышения надежности исследований по обоснованию ПДК в воде водных объектов этих веществ.

 Скачать PDF

Оглавление

Введение

1. Общие требования к проведению исследований по оценке гонадотоксического действии химических веществ

     1.1. Принципы изучения гонадотоксического действия химических веществ

     1.2. Выбор адекватной модели для изучения гонадотоксического действия химических веществ

II. Этапность исследований и выбор методов оценки гонадотоксического действия химических веществ

     2.1. Этапы изучения гонадотоксического действия химических веществ

     2.2. Методы оценки гонадотоксического действия химических веществ

     2.2.1. Методы изучения функционального состояния сперматозоидов (Обязательные)

     2.2.2. Методы изучения функционального состояния яичников (Обязательные)

     2.2.3. Методы морфологического (макроскопического) изучения семенников и яичников (Обязательные)

     2.2.4. Морфометрические методы оценки гонад (Дополнительные)

     2.2.5. Биохимические методы оценки семенников (Дополнительные)

     2.2.6. Специальные методы оценки гонад

III. Оценка и форма представления результатов исследований

     3.1. Оценка результатов исследований

     3.2. Форма представления результатов исследований

IV. Приложение

     4.1. Изучение состояния репродуктивной функции у людей

     4.2. Некоторые показатели нормы у лабораторных животных

Литература

 
Дата введения01.02.2020
Добавлен в базу21.05.2015
Актуализация01.02.2020

Этот документ находится в:

Организации:

05.11.1981УтвержденНачальник Главного санитарно-эпидемиологического Управления Минздрава СССР2492-81
РазработанМосковский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
РазработанИнститут гигиены труда и профессиональных заболеваний АМН СССР
РазработанМосковский медицинский институт им. И.М. Сеченова
РазработанИнститут общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР
Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19
Стр. 20
стр. 20
Стр. 21
стр. 21
Стр. 22
стр. 22
Стр. 23
стр. 23
Стр. 24
стр. 24
Стр. 25
стр. 25

ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗУЧЕНИЮ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОМ НОРМИРОВАНИИ В ВОДЕ ВОДОЕМОВ.

Москва, 1981 г.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР

ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ

«УТВЕРЖДАЮ» Начальник Главного санитарно-эпидемиологического управления Минздрава СССР

В. Е. Ковшило 5 ноября 1981 г.

№ 2492-81

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗУЧЕНИЮ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОМ НОРМИРОВАНИИ В ВОДЕ ВОДОЕМОВ.

Москва


1981 г.


Методические указания предназначены для научно-исследовательских институтов гигиенического профиля, гигиенических кафедр медицинских ВУЗов, отделов и лабораторий по охране окружающей среды различных министерств и ведомств. Они могут быть использованы работниками санитарно-эпидемической службы при оценке возможного влияния загрязнений водоемов на здоровье населения.

Методические указания определяют область применения и использования методов оценки гопадогоксического действия химических веществ для целей повышения надежности исследований по обоснованию ПДК в воде водных объектов этих веществ.

Методические указания разработаны под руководством д. м. н., профессора Г. Н. Красовского коллективом авторов: д. м. н. проф. Г. Н. Красовским, к. м. н. 3. И. Жолдаковой, к. м-. и. С. П. Варшавской, (Ин-т общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР); к. м. и. А. А- Королевым, д. м. и. В. Т. Мазаевым, к. м. н. Т. Г. Шлепниной (I Московский медицинский ии-т им. И. М. Сеченова); к. м.н. Р. А. Рязановой (Московский научно-исследовательский ин-т гигиены им. Ф. Ф. Эрнсмана); к. м. и. В. Н. Фоменко, к. м. н. В. И. Глущенко (Ин-т гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР) с использованием материалов следующих авторов:    к. м. н. М. М. Авхимснко, к. м. и. В. И. Антоновой,

к. м. н. Е. Г. Берлинер, д. м н. Т. И. Бонашевской, к. м. н. А. И. Борисова, м. н. с. А. В. Вотякова, к. б. н. Т. Г. Ламеи-товой, к. м. и. В. Г. Надеенко, м. и. с. Л. Н. Тишовой, ст. лаб. Л. Б. Троенкиной, д. м. н. Б. М. Штабского, д. м. н., проф. П. В. Штанникова.

Методические указания подготовлены для публикации инспектором — врачом ГСЭУ М3 СССР Б. М. Кудрявцевой.

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время в СССР разработана научно обоснованная система методических приемов установления ПДК, в которой изучению отдаленных последствий действия химических веществ уделяется особое внимание. Экспериментальное изучение отдаленных последствий воздействия на организм химических веществ стало необходимым элементом их токсиколого-гигиенической оценки.

Поражения половых желез могут приводить к нарушению оплодотворяющей способности, способности к зачатию, к изменениям нормального внутриутробного развития плода н развития последующего поколения, а также к появлению мутаций как в соматических, так и в зародышевых клетках, что и является критерием безусловного вредного действия хйми-ческих веществ па теплокровный организм.

В литературе в настоящее время имеется достаточно данных, свидетельствующих о возможности вредного влияния химических веществ на гонады (И. В. Саноцкий, В. Н. Фоменко; Г. Н. Красовский с савт.; Е. М. Чиркова и др.). Это может быть следствием как общетоксического действия химических веществ, так и проявлением специфического гоиа-дотоксического эффекта. Поэтому для выявления потенциальной и реальной опасности гоиадотоксического действия химических веществ при их гигиеническом нормировании требуется проведение соответствующих исследований.

Однако при выполнении этих исследований нередко возникают трудности методического характера (выбор тест-объ-екта, доз, продолжительности эксперимента, количественная оценка возникающих изменений и т. д.), успешному преодолению которых и призваны способствовать «Методические указания».

Подготовка настоящих указаний была обусловлена также специфическими особенностями гигиенического нормирования в области гигиены воды. Поэтому, несмотря на то, что за последние годы вышел ряд документов по данной проблеме

3

(«Методические указания по гигиенической оценке новых пестицидов, Киев, 1969»; «Методы экспериментального исследования по установлению порогов действия промышленных ядов на генеративную функцию с целью гигиенического нормирования» № 1744-77, М., 1978), требовалось создание самостоятельного документа, поскольку принцип этапности, используемый при гигиеническом изучении нормируемых веществ (по органолептическому, общесанитарному и токсикологическому признакам вредности), позволяет в ряде случаев существенно сократить или вообще отказаться от проведения длительных токсикологических исследований, в том числе и изучения гопадотоксического действия.

В соответствии с этим же принципом предусмотрено деление рекомендуемых методов на обязательные, дополнительные и специальные. Кроме того, специально выделен раздел изучения влияния химического фактора воды на состояние репродуктивной функции у людей.

Настоящие методические указания, составленные на основе накопленного опыта последних лет, должны способствовать внедрению в практику гигиенического нормирования химических веществ в воде водных объектов современных методов выявления гонадотоксического эффекта изучаемых соединений и унификации схемы исследований, что обеспечит получение сравнимых результатов.

I. ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ К ПРОВЕДЕНИЮ ИССЛЕДОВАНИИ ПО ОЦЕНКЕ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ.

Мри экспериментальном обосновании ПДК химических веществ в воде водных объектов наряду с изучением общетоксического действия обязательным элементом исследований является оценка гонадотоксического действия веществ. Исследования по оценке общетоксического действия химических веществ осуществляются в соответствии с «Методическими указаниями по разработке и научному обоснованию ПДК вредных веществ в воде водоемов» (М., 1976).

1.1. Принципы изучения гонадотоксического действия химических веществ.

При изучении гонадотоксического действия химических веществ при их гигиеническом нормировании необходимо руководствоваться следующими принципами:

4

—    возможность моделирования гонадотоксического эффекта на лабораторных животных;

—- зависимость в проявлении гонадотоксического эффекта от дозы и времени воздействия вещества;

—    гюроговость гонадотоксического действия химических веществ;

—    этаппость исследований при сочетании функциональных, биохимических и морфометрических методов оценки го-иадотоксического действия химических веществ;

—    приоритетность выбора методов оценки гонадотоксического действия химических веществ на основе следующей классификации: обязательные, дополнительные и специальные для углубленных исследований.

Допустимо в качестве критерия вредности - гонадотоксического действия химических веществ использовать косвенные показатели морфо-функциопальиого состояния гонад.

1.2. Выбор адекватной модели для изучения гонадотоксического действия химических веществ.

Несмотря на известную ограниченность данных относительно правомерности межвидовых экстраполяций, вопрос о возможности и допустимости переноса результатов экспериментальных исследований на животных но оценке гонадотоксического действия химических веществ на человека следует считать решенным положительно. Основанием для такого вывода является:

—    сходный механизм действия химических веществ на гонады животных и человека;

—    однотипный характер функциональных, биохимических и морфометрических изменений в гонадах животных и человека.

В качестве адекватной модели могут быть использованы спонтанно овулирующие животные, такие как мыШи (SHK. гибридные мыши) и крысы (Wislan, беспородные).

N. ЭТЛПНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ И ВЫБОР МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ГОНАДОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ.

Поскольку в комплексе исследований по гигиеническому нормированию раздел изучения гонадотоксического действия химических веществ требует значительной затраты сил и средств, необходимо определить в каких случаях и в каком объеме следует проводить такие исследования.

5

Эти исследования необходимы:

—    для химических веществ, способных в повышенных количествах накапливаться в ткани половых желез;

—    для групп соединений, среди которых неоднократно обнаруживались вещества, оказывающие влияние на функцию гонад (тяжелые металлы, органические окиси и перекиси, галлоидопроизводные, фталаты, нитро-аминосоединения, органические растворители и т. д.);

—    для мутагенов или близких к ним по химическому строению соединений;

—    для новых или малоизученных классов химических соединений.

2.1. Этапы изучения гонадотоксического действия химических веществ.

При проведении исследований следует помнить, что в большинстве случаев гонадотоксическое действие химических веществ есть одна из форм проявления из общетоксического действия. И лишь небольшое число соединений избирательно влияет на функцию гонад. Поэтому изучение гонадотоксического действия рекомендуется проводить в три этапа, из которых первый является обязательным, а два других — дополняющими и уточняющими (таблица 1).

Если при проведении обязательных исследовании с веществом в условиях подострого опыта (1 этап) с использованием рекомендованных методов оценки (таблица 2) не обнаружено влияние изучаемого вещества на гонады в дозах более чем на порядок превышающих дозу по общстокснчсскому эффекту, этот раздел исследования из дальнейших экспериментов исключается.

Если в подостром эксперименте действие на гонады выявлено па уровне порога общетоксического дейс'ьвия или в пределах одного порядка выше, осуществляется переход ко 2-му этапу.

Если МИД, установленная в хроническом опыте по гонадотоксическому действию, на порядок или более превышает МИД, установленную по общетокснческому действию, дополнительных исследований по оценке гонад не проводят.

О

Таблица I


Схема этапности исследований гонадотоксического действия химических веществ при гигиеническом нормировании.

Назначение эксперимента


Характер эксперимента


Методы оценки гонад


Этапы исследования

I -

обязательный

Подострый опыт, 1—1.5* мес.

Функциональные, морфометрические.

Определение степени выраженности обшегоксического и гоиадо-токсичсского эффекта на основе соотношения пороговых доз подострого эксперимента.

II —

дополняющий

Хронический опит, 5—6 мес.

Функциональные, морфометрические. биохимические.

Установление порогов общелексического и гонадотоксического действия.

III -

■ уточняющий

Специальный эксперимент не менее 6 мес.

Наряду с физиологическими, морфометрическими используются специальные методы.

Уточнение порогов обшетоксичс-ского и гонадотоксического действия.

• Примечание. Однако есть обоснованное мнение о необходимости проведения исследований после полного цикла сперматогенеза (2—2.5 мес. для крыс; 1—1,5 мес. для мышей).

В случае совпадения этих эффектов по уровню МНД необходимо провести специальные исследования с использованием методов (IIi этап) и доз, на 1—2 порядка ниже МНД, установленной в хроническом опыте по общетоксическому действию.

Животные, на которых ставят опыты по изучению гонадотоксического действия, должны содержаться па полноценной диете, поскольку проявления авитаминоза (особенно авитаминоза Е) могут привести к искажению результатов эксперимента. Использование проросшего овса, выращенного гидропонным методом, не рекомендуется из-за возможности грибковых заболеваний.

Все функциональные и морфометрические исследования гонад должны проводиться не менее чем на б животных (желательно 8—10) из каждой опытной ft контрольной группы. Забой животных должен осуществляться последовательно, по одному животному из каждой группы.

2.2. Методы оценки гонадотоксического действия химических веществ.

В зависимости от этана изучения влияния химических веществ па гонады следует применять различные методы исследования: функциональные, морфометрические, биохимические, специальные.

Рекомендуемые методы оценки гонад приведены в таблице 2.

Таблица 2

Методы оценки гонад.

Семенники

Яичники

1

2

Обязательные методы

Функиональнме

Функциональные


1. Изучение астрального цикла (цитологическая картина влагалищных мазков).


1.    Подвижность сперматозоидов, мин.

2.    Количество сперматозоидов, млн.

3.    Осмотическая резистентность (% р-ра NaCI).

А. Кислотная резистентность, pH.

5.    Дегенеративные формы, %.

6.    Проба с метиленовой синей.

Морфометрические

1.    Масса семенников, гр.

2.    Коэффициент массы.


Морфометрические

1.    Масса яичников, гр.

2.    Коэффициент массы.


Дополнительные методы

Функциональные

1. Оплодотворяющая способность.


Функциональные

1.    Определение активности гонадотропных гормонов в крови или гипофизе.

2.    Способность к зачатию.

Морфометрические

1.    Примордиальные фолликулы и фолликулы с одним слоем гранулезных клеток.

2.    Фолликулы с двумя и более слоями гранулезных клеток.

3.    Атретическис тела.

4.    Жслтыс тела.


Морфометрические1

I. Индекс сперматогенеза.


2.    Канальцы со спущенным эпителием. %1♦.

3.    Канальцы с 12-ой стадиен мейоза. %-

4.    Нормальные сперматогонии (в абсолютных цифрах)2.

Биохимические

1.    Определение активности {5-галакто-зндазы в тканях гонад н в суспензии сперматозоидов, полученной из эпидидимиса.

2.    Определение суммы нуклеиновых кислот в гомогенатах семенников.

3.    Гистохимические реакции на РНК, ДНК и липиды.

4.    Содержание гиалуронндазы в сперматозоидах.


Биохимические

I. Гистохимические реакции на РНК. ДНК и липиды.


Специальные методы

1.    Определение количества релн-зииг-фактора гипоталямуса

(самки).

2.    Гистохимическое изучение специфических (стероидные дегид-разы и гпдрооксилазы) и неспецифических (щелочная и кислая фосфатазы, АТФ-аза) ферментов.


1.    Определение количества рслизннг-фактора гипоталамуса (самцы).

2.    Люминесцентный анализ сперматозоидов.


3.    Мнкрофлуорометрнческос определение нуклеиновых кислот в сперматозоидах.

4.    Метод Джексона (последовательного спаривания).


Исследование состояния потомства 1-го поколения животных.

1

В большинстве случаев в эксперименте оказываются более чувствительными, чем функциональные показатели.

2

Наиболее чувствительные (Е. М. Чиркова, 1970).

9